不同浓度四氯化碳诱导小鼠肝纤维化模型的比较

腹腔注射低浓度四氯化碳建立小鼠肝纤维化模型李少华;邱玲;程歆琦;李霁;杜顺达;毛一雷【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2014(034)012【总页数】2页(P1694-1695)【作者】李少华;邱玲;程歆琦;李霁;杜顺达;毛一雷【作者单位】中山大学肿瘤防治中心肝胆科华南肿瘤学国家重点实验室肿瘤医学协同创新中心,广东广州510060;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肝脏外科,北京100733;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院检验科,北京100733;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院检验科,北京100733;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院病理科,北京100733;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肝脏外科,北京100733;中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肝脏外科,北京100733【正文语种】中文【中图分类】R575.2在中国患肝炎病后，肝纤维化、硬化、肝癌高发[1]。

建立肝纤维化动物模型，有利于进行病理过程的研究。

四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl4)导致肝微粒体脂质过氧化，肝脂肪变性、进而纤维化。

常规采用高浓度CCl4建模型，对动物选择性强，同时因给药剂量高，动物死亡率高。

本实验采用低浓度CCl4、反复腹腔注射，希望建立一套简便可行的小鼠肝纤维化建模方法。

1 材料与方法1.1 材料：SPF级6～7周龄雌性昆明小鼠42只，体质量19～25 g[北京维通利华实验动物技术有限公司：SCXK(京)2001- 0011]。

10% CCl4油溶液(分析纯CCl4∶大豆油=1∶9)。

1.2 方法：小鼠分笼饲养于北京协和医学院动物中心，适应1周。

小鼠随机分成3组：对照组(n=10)：每48 h腹腔注射0.4 mL 0.9%氯化钠注射液；正常组(n=5)：正常饲养；肝纤维化组(n=27)：每48 h腹腔注射0.4 mL 10% CCl4油溶液。

第38卷第5期 2021年10月实验动物科学LABORATORY ANIMAL SCIENCEVol . 38 No . 5 October 2021Caveolin -1在肝纤维化中作用的研究张洁1杨子衡2王燕3孙泉1’2(1.首都医科大学实验动物部，北京丨〇〇〇69) (2.首都医科大学基础医学院实验动物学系，北京100069)(3.首都医科大学宣武医院神经内科，北京100053)摘要：目的通过10%四氯化碳（CC 14)橄榄油溶液，分別诱导野生型小鼠和小窝蛋白-1((：3^〇丨‘1)敲除小鼠建立 肝纤维化模型，比较分析敲除Caveolin -1对肝损伤和胶原沉积的影响，揭示其在肝纤维化中的作用：方法按剂量 1 pL /g ，腹腔注射野生型小鼠和Caveolin -丨敲除小鼠10% CC 14橄榄油溶液，2次/周注射后，1、3、7、14和28 d ，分 别处死5只小鼠，取血清和肝脏，通过苏木素-伊红（H E )染色、血清谷丙转氨酶（ALT )和谷草转氨酶（AST )水平检 测，分析肝脏损伤程度；利用天狼猩红染色、Real-time P C R 及Western blot 方法，观察肝脏胶原沉积及肝纤维化标志 物a 平滑肌肌动蛋闩（cx -SMA )、I 型胶原蛋白（collagen - I )和IE 型胶原蛋白（collagen -111 )mRNA 及蛋白表达水平， 分析肝纤维化程度结果勺野生型小鼠相比，造模后3 (1，敲除小鼠的血清A LT 和AST 含量显著升高（P <0. 01); 3、7和14 d ，敲除小鼠肝脏坏死面积显著增大（P <0. 01或P <0. 05) ;7、14及28 (丨时，敲除小鼠胶原染色面积明显增 多（P <0.01或P <0.05);肝星状细胞活化标志物a -SMA mRNA 水平在3(丨和14(1时显著升高（P <0.05)，c 〇Uagen-mi collagen-III mRNA 在 14 d 时显著上调（P <0. 01) ; 14 c l 时，敲除小鼠肝脏 a -SMA 、collagen -l 及 collagen -111 蛋白表达水平 均显著升高（P <().〇l 或P <〇.〇5)结论Caveolin -1抑制CC ^诱导的小鼠肝脏炎性损伤及纤维化:关键词：四氯化碳；肝纤维化；小窝蛋白-1 ;肝损伤中图分类号：R 575. 2文献标识码：A文章编号：1006-6丨79(2021)05-0008-07DOI ： 10. 3969/j . issn . 1006-6179. 2021.05. 003肝纤维化是机体对肝炎病毒、酒精、药物等致病 因素所致慢性肝脏损伤后的•种修复反应，是各种 慢性肝病发展为肝硬化的必经病理过程m 。

四氯化碳致小鼠急性肝损伤动物模型建立方法的研究周琼;刘芳萍;刘颖姝;赵玉林;李昌文;李睿;张秀英【期刊名称】《东北农业大学学报》【年(卷),期】2012(043)006【摘要】通过对染毒途径、剂量和时间的研究,建立四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤模型.采取腹腔注射和灌胃两种途径给予小鼠1％ CCl4,染毒后24h检测血清转氨酶含量,并观察肝脏病变.结果显示,灌胃组比腹腔注射组小鼠血清转氨酶变化个体差异小,肝脏病变明显,病灶分布均匀,且与实际中毒途径一致,故采用灌胃方法进行确定染毒剂量及时间试验.分别以0.125％、0.25％、0.35％、0.5％的CCl4给小鼠灌胃,染毒24h后检测血清转氨酶含量,确定最佳染毒剂量.以该浓度给小鼠灌胃,分别于染毒后2、6、12、16、20、24、28、32、48h检测小鼠血清转氨酶含量.结果表明,灌胃0.35％ CCl4,小鼠血清转氨酶升高与对照组相比差异极显著(P＜0.01),此浓度灌胃后,20h血清转氨酶含量显著升高(P＜0.01),24h达到最高值,与对照组相比差异极显著(P＜0.01).因此,以0.35％四氯化碳,按0.1mL·10g-1体重灌胃,染毒24h,可建立较理想的小鼠急性肝损伤模型.【总页数】5页(P77-81)【作者】周琼;刘芳萍;刘颖姝;赵玉林;李昌文;李睿;张秀英【作者单位】东北农业大学动物医学学院,哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,哈尔滨150030;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,哈尔滨150001;东北农业大学动物医学学院,哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,哈尔滨150030【正文语种】中文【中图分类】S854【相关文献】1.过墙风总黄酮对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用及机制研究 [J], 黄思茂;高雅;曹后康;葸博婷;王刚;马冬梅;张可锋2.紫堇灵对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用及机制的研究 [J], 冯培文;韩吉春;李德芳;王凤华;房雪;郑秋生3.金线风总黄酮对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用及机制研究 [J], 葸博婷;钟明利;曹后康;管玉满;陈毅飞;晋玲;张可锋4.滨蒿内酯对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用研究 [J], 彭静;陈曦5.四氯化碳致小鼠急性肝损伤模型造模要素及中医药防治的数据挖掘研究 [J], 胡凤娇[1];宋文杰[1];王张[1];梁源[1];刘光丽[1]因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

2009 年10 月第17 卷第5期中国实验动物学报A CTA LA BO RA TO RIU M AN IMALI S SCI EN TIA SI NI CAOctober ,2009V ol . 17 N o . 5 四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化模型中SD F21αΠCX C R4的表达及其意义王庆国,严福华,徐鹏举,周梅玲,李清海(复旦大学附属中山医院,上海200032)【摘要】目的检测四氯化碳(CCl4 ) 诱导的肝纤维化小鼠模型肝脏S DF21αΠC XC R4的表达,评价S D F21αΠC XC R4轴与肝纤维化的关系,为研究肝纤维化肝损伤发生及损伤修复机制研究提供基础。

方法选用6 周龄雌性纯系C57 小鼠,采用40 %的C Cl4Π橄榄油溶液腹腔注射,剂量为1 mLΠkg ,每周2次,共4周,制成肝纤维化模型,取肝纤维化及正常对照组小鼠肝脏标本,采用R T2PC R及克疫组化检测S DF21α的表达,采用R T2PCR 及Western 检测CXC R4受体的表达。

结果与对照组相比,S DF21α及CXCR4 在肝纤维化模型小鼠肝脏组织中的表达较对照组明显上调, 差异具有统计学意义(P < 0105) 。

结论肝纤维小鼠肝组织的S D F21αΠC XC R4受体表达上调,为研究肝纤维化肝损伤机制及干细胞移植治疗提供理论基础。

【关键词】肝纤维化; S DF21α; C XCR4【中图分类号】R2332 【文献标识码】A【文章编号】100524847 (2009) 0520384204Expression of Stromal Cell2Derived Factor 1α( S D F21α) and CXC Chemokine Receptor 4 (CXCR4) and Their Significance in CCl42Induced Liver Fibrosis in Mice WANG Qing2gu o , YAN Fu2hu a , XU Peng2ju , ZHOU Mei2ling , LI Qing2hai(Department of Radiology , Zhong shan Hospital of Fudan University , Shanghai 200032 , C hina)【Abstract】Objectiv e To detect the gene expression of S DF21αΠC X C R4 in the mou se liver with fib rosis induced by C C l4 , to evaluate the association between S DF21αΠC XC R4 axis and liver fibrosis , and to promote further researches. M ethods Liver fibrosis was induced in six w eek2old female C57 mice b y intraperitoneal injection of 40 % C C L4Πolive solution (1 mLΠkg , twice per week for 4 weeks) . The gene expression of S DF21αand C XCR4 were detected in livers with fibrosis and normal livers. The S DF2 1αwas detected by R T2PC R and immu nohistochemistry , and C XCR4 was detected by R T2PC R and Western2blotting. Results The expression of S DF21αa n d C XCR4 was significantly increased in liver with fibrosis compared to that in normal liver ( P < 0105) . Conclusion This study demonstrates the up2regulated expression of S DF21αΠC XC R4in mouse liver with fib rosis , therefore , serving the further studies on the damaging mechanism and stem cell treatment of liver fibrosis.【K ey words】Liver fibrosis ; S DF21α; C XCR4肝损伤过程中慢性损伤和缺血缺氧导致肝血窦内皮细胞受损[ 1 ] 。

四氯化碳致小鼠急性肝损伤模型建立与考察付双楠;高达;郭佳佳;苗明三;朱平生;宫嫚【期刊名称】《肝脏》【年(卷),期】2022(27)9【摘要】目的考察四氯化碳(CCL 4)致小鼠急性肝损伤稳定的动物模型,便于临床新药的研究与应用。

方法将KM小鼠随机分为空白组、模型组和联苯双酯组(5.625 mg/kg),通过腹腔注射0.1%CCL 4溶液复制小鼠急性肝损伤,检测造模后3 h、6 h、12 h和24 h的转氨酶水平、肝脏指数、肝组织病理变化进行模型稳定性研究。

结果模型组染毒后,ALT在3 h(45.21±13.17 IU/L)轻度升高(P<0.01)、12h(112.30±30.54 IU/L)和24 h(121.98±21.66 IU/L)升高明显(P<0.01);AST在3h(162.51±28.57 IU/L)、6 h(192.07±31.05 IU/L)、12 h(250.75±90.82 IU/L)、24 h(274.27±44.02 IU/L)均升高(均P<0.01),但在12 h和24 h升高显著;肝脏指数在3 h(6.72±1.90 g/100 g)、6 h(7.27±1.38 g/100 g)轻度升高(P<0.01),12h(12.41±1.18 g/100 g)及24 h(14.90±2.56 g/100 g)升高明显(P<0.01);肝脏病理变化在12 h及24 h可见明显的肝细胞肿胀、炎性细胞浸润,24 h损伤程度更显著。

结论腹腔注射0.1%CCL 4溶液制备小鼠急性肝损伤模型时,在12~24 h小时之间建模更适宜。

【总页数】5页(P1036-1040)【作者】付双楠;高达;郭佳佳;苗明三;朱平生;宫嫚【作者单位】解放军总医院第五医学中心中医肝病科;河南中医药大学【正文语种】中文【中图分类】R28【相关文献】1.四氯化碳致小鼠急性肝损伤动物模型建立方法的研究2.四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤模型的建立和优化3.高活性小牛血去蛋白提取物对四氯化碳致急性肝损伤模型小鼠的保护作用4.四氯化碳致小鼠急性肝损伤模型的研究5.四氯化碳致小鼠急性肝损伤模型造模要素及中医药防治的数据挖掘研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

·论著·25%四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤模型血清AST、ALT水平变化*杜斌1，2，蔡维维2，陈俊良2，侯豹2，邱丽颖2△（1.江南大学药学院，江苏无锡214122；2.江南大学无锡医学院，江苏无锡214122）【摘要】目的研究25%四氯化碳（CCl4）诱导急性肝损伤小鼠血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）的水平变化，为25%CCl4诱导小鼠急性肝损伤模型提供实验依据。

方法将56只癌症研究所的小鼠随机（根据小鼠体重由低至高排序，确保每组小鼠体重相对均一）分为正常组和给药3、6、12、24、48、72h组，每组8只。

给药组给予25%CCl4（橄榄油助溶）0.05mL/10g腹腔注射，正常组给予同体积橄榄油。

各组小鼠眼球内眦静脉丛取血，检测血清AST、ALT水平。

结果与正常组比较，给药3、6、12、24、48、72h组小鼠血清AST、ALT水平均明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）；给药48、72h组小鼠血清AST、ALT均维持在较高水平。

结论25%CCl4诱导小鼠急性肝损伤，检测48h或72h血清AST、ALT水平更有利于筛选具有保肝降酶作用的药物。

【关键词】四氯化碳；急性病；肝/损伤；天冬氨酸氨基转移酶类；丙氨酸转氨酶；小鼠DOI：10.3969/j.issn.1009⁃5519.2018.08.001文献标识码：A文章编号：1009⁃5519（2018）08⁃1121⁃02Change of serum AST and ALT levels in mouse acute liver injury induced by25%carbon tetrachloride*DU Bin1，2，CAI Weiwei2，CHEN Junliang2，HOU Bao2，QIU Liying2△（1.School of Pharmaceutical Science；2Wuxi Medical School，Jiangnan University，Wuxi，Jiangsu214122，China）【Abstract】Objective To study the change of serum AST and ALT levels in mouse acute liver injury induced by25% carbon tetrachloride（CCl4）to provide an experimental basis for the25%CCl4induced acute liver injury mouse model.MethodsFifty⁃six mice from the Institute of Cancer Research（ICR）were randomly divided into the normal group and medication for3，6，12，24，48，72h groups（sorting from low to high according to the mouse body mass for ensuring the relatively uniform bodymass in each group），8cases in each group.The medication groups were given25%CCl4（olive oil hydrotropy）0.05mL/10g by intraperitoneal injection.The normal group was given the same volume of olive oil.The blood samples were collected from theinner canthus vein plexus in the medication for3，6，12，24，48，72h groups，and the serum levels of AST and ALT were detected.Results Compared with the normal group，the serum AST and ALT in the3，6，12，24，48，72h medication groups were increased significantly，the difference was statistically significant（P<0.05）；and which in the48，72h medication groups main⁃tained at a higher level.Conclusion25%CCl4induces mouse acute liver injury，and detecting serum AST and ALT levels at48h or72h after administration is more beneficial to screen the drugs possessing the function of liver protection and enzyme reduction.【Keywords】Carbon tetrachloride；Acute disease；Liver/injuries；Aspartate aminotransferases；Alanine trans⁃aminase；Mice采用四氯化碳（CCl4）诱导急性肝损伤模型，实验后检测谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）中任意一项指标和肝脏组织病理学诊断结果为阳性，方可诊断为有效[1]。

#### 实验背景肝癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁人类健康。

近年来，随着生物技术和分子生物学的发展，小鼠肝癌模型已成为研究肝癌发生发展机制的重要工具。

本研究旨在建立一种高效、稳定的小鼠肝癌模型，并探讨其应用价值。

#### 实验材料1. 实验动物：SPF级昆明种小鼠，体重20-25g，雌雄各半。

2. 实验试剂：四氯化碳（CCl4）、橄榄油、肝细胞培养液、胎牛血清、聚凝胺（PFA）、H&E染色液、苏木素染色液、伊红染色液等。

3. 实验仪器：显微镜、离心机、电热恒温培养箱、组织切片机、染色机等。

#### 实验方法1. 小鼠分组：将小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。

2. 实验组：每天用橄榄油溶解CCl4，按照1:9的比例配制成CCl4溶液，以0.2ml/只的剂量给实验组小鼠腹腔注射，每周注射3次，连续12周。

3. 对照组：每天用橄榄油溶解CCl4，按照1:9的比例配制成CCl4溶液，以0.2ml/只的剂量给对照组小鼠腹腔注射，每周注射3次，连续12周。

4. 取材：在第12周结束时，对实验组和对照组小鼠进行安乐死，取出肝脏，用生理盐水冲洗，置于10%甲醛溶液中固定。

5. 组织学观察：将肝脏组织进行常规石蜡包埋、切片，进行H&E染色、苏木素-伊红（HE）染色和免疫组化染色。

6. 结果分析：观察肝脏组织的形态学变化、肿瘤生长情况、肿瘤细胞增殖和凋亡情况。

#### 实验结果1. 肝脏组织学观察：实验组小鼠肝脏组织出现明显的肝细胞损伤、变性、坏死和纤维化，部分小鼠出现明显的肝细胞癌变；对照组小鼠肝脏组织无明显异常。

2. 肿瘤生长情况：实验组小鼠肝脏肿瘤生长迅速，肿瘤直径明显大于对照组，且肿瘤数量多于对照组。

3. 肿瘤细胞增殖和凋亡情况：实验组小鼠肿瘤细胞增殖指数（PI）明显高于对照组，而肿瘤细胞凋亡指数（AI）则低于对照组。

#### 实验讨论1. 本实验采用CCl4诱导小鼠肝癌模型，结果表明该模型具有良好的肿瘤生长和癌变特点，可用于研究肝癌的发生发展机制。

CCl4诱导的小鼠肝脏纤维化模型肝纤维化是指肝脏内弥漫性细胞外基质（特别是胶原）过度沉积，不是一个独立的疾病，是许多慢性肝病共同的病理过程，几乎各种慢性肝病（化学毒性、感染性、遗传代谢性、自身免疫性，以及胆汁淤积性）都可以导致肝纤维化。

CCl4是诱导实验动物产生肝纤维化和肝硬化最广泛使用的化学性肝毒物。

在肝细胞内质网中，经肝微粒体内依赖于细胞色素P450 的具有混合功能的氧化酶激活后，CCl4产生了自由CCl3·及Cl，它们与肝细胞内大分子发生共价结合，可攻击膜不饱和脂质，引发活性氧自由基的产生和脂质过氧化，损伤肝细胞，从而导致狄氏间隙内原本静止的贮脂细胞活化，释放出Ⅳ型胶原酶，降解Ⅳ型胶原。

同时该细胞由合成分泌Ⅲ型胶原改为合成分泌I 型胶原，取代了Ⅳ型胶原，促使肝脏纤维化1.实验动物SPF级BablC小鼠，健康，雄性，体重为18g-20g2.实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组，每组15只动物。

3.实验周期6W4.主要试剂CCl4（上海国药集团）5.建模方法按5ml/kg 体重皮下注射体积分数为20% CCl4的油剂溶液（CCl4：橄榄油=1:4）, 每3天1次，连续6W。

对照组动物皮下注射等量等次的橄榄油溶剂。

正常饮食饲养，观察动物活动、精神状况和饮食量,实验前后称量小鼠体重。

完成持续给药6W后，称体重，戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠，摘眼球取血，室温静置2h后于4℃3000r离心10分钟提取血清，放入-80℃冰箱冻存。

同时取肝左叶组织1.5cm×1cm×0.2cm于10%中性福尔马林中固定，石蜡包埋；其余肝组织液氮冷冻-80℃保存。

6.模型评价1.大体观察：CCl4组小鼠随着给药时间延长活动逐渐减少, 精神萎糜,毛发蓬乱无光泽；大体标本显示，CCl4组肝脏与周围组织粘连明显，肝边缘圆顿，肝脏表面和切面呈弥漫的细小结节。

2.肝脏指数变化：取肝脏，称质量，计算肝脏指数=肝脏重/体重，CCl4组小鼠肝脏显著高于对照组小鼠。