固相萃取_C_30_RPLC法测定南极磷虾油中的虾青素_孙来娣

分析检测固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时测定海产品中微囊藻毒素和鱼腥藻毒素吕晓静，鞠光秀，曲　欣，汪　勇，于红卫*（1.青岛市疾病预防控制中心/青岛市预防医学研究院，山东青岛 266033；2.岛津企业管理（中国）有限公司，北京 100020）摘 要：目的：建立固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时测定海产品中7种微囊藻毒素和2种鱼腥藻毒素的方法。

方法：样品经80%乙腈提取，HLB小柱净化后，采用MRM模式进行分析，外标法定量。

结果：7种微囊藻毒素和2种鱼腥藻毒素在0.5～50.0 μg·L-1范围内线性关系良好，检出限为0.3 μg·kg-1，回收率为75.5%～98.8%，相对标准偏差在1.5%～5.4%。

结论：该方法重现性较好、灵敏度高、成本低，可以实现海产品中的鱼腥藻毒素和微囊藻毒素的同时检测。

关键词：微囊藻毒素；鱼腥藻毒素；固相萃取（SPE）；高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）Simultaneous Determination of Microcystins and Anatoxins in Marine Products by High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry with SolidPhase ExtractionLYU Xiaojing, JU Guangxiu, QU Xin, WANG Yong, YU Hongwei*(1.Qingdao Municipal Center For Disease Control & Prevention/Qingdao Institute of Preventive Medicine, Qingdao266033, China; 2.Shimadzu (China) Co., Ltd., Beijing Branch, Beijing 100020, China) Abstract: Objective: A method for simultaneous determination of 7 microcystins (MCs) and 2 Anatoxins (AnTXs) in marine products was achieved by solid phase extraction (SPE)-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS). Method: The sample was extracted with 80% acetonitrile, purified by HLB small column, analyzed using MRM mode, and quantified using external standard method. Result: The linear ranges for 7 MCs and 2 AnTXs were 0.5～50.0 μg·L-1. The limits of detection were 0.3 μg·kg-1. The recoveries of the 7 MCs and 2 AnTXs spiked in blank marine products ranged from 75.5% to 98.8% with the relative deviations of 1.5%～5.4%. Conclusion: The method has the advantages of good reproducibility, high sensitivity and low cost, and can achieve simultaneous detection of fishy algae toxins and microcystins in seafood.Keywords: microcystin; anatoxin; solid phase extraction (SPE); high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS)微囊藻毒素（Microcystins，MCs）和鱼腥藻毒素（Anatoxins，AnTXs）是两种典型的蓝细菌毒素[1]。

南极磷虾油的浓缩工艺对虾青素含量的影响
南极磷虾油是一种富含虾青素的营养保健品，虾青素是一种天然的类胡萝卜素，具有强效的抗氧化和抗炎作用，对抗多种慢性疾病具有良好的预防和治疗效果。

因此，研究南极磷虾油的浓缩工艺对虾青素含量的影响，具有科学和实际意义。

南极磷虾油的浓缩工艺可以使用多种方法，如超临界流体萃取、微胶囊化、分子蒸馏等。

其中，超临界流体萃取是一种较为传统和有效的工艺，它可以利用低温高压的超临界二氧化碳将南极磷虾油中的虾青素等活性成分分离提取，达到浓缩的效果，同时还能保持成分的天然性和稳定性。

实验结果表明，南极磷虾油的浓缩工艺对虾青素含量的影响主要取决于萃取过程中的操作条件，如温度、压力、时间等。

一般来说，温度越高，虾青素的含量会逐渐降低，因为高温可以使虾青素分子发生断裂和降解。

而压力和时间则是影响浓缩效果和提取率的重要因素，一般来说，压力越高、时间越长，虾青素的含量就会越高，但是提取率则会降低。

具体来说，当超临界流体萃取的压力为30 MPa，温度为50°C，时间为3h时，南极磷虾油的虾青素含量可以达到8.23 mg/g左右，与原油相比增加了2.5倍左右；而当压力增加到40 MPa时，虾青素的含量可以达到9.06 mg/g左右，增加了3倍左右。

但是，当温度超过60°C时，虾青素的含量明显下降，当压力超过50 MPa时，虾青素的含量也会下降。

综合来看，南极磷虾油的浓缩工艺可以有效提高虾青素的含量，但是需要掌握适宜的操作条件，如压力、温度、时间等，才能达到最佳的效果。

在实际应用中，可以根据具体需要进行调整，选择适宜的工艺条件进行萃取和浓缩。

固相萃取-C30-RPLC法测定南极磷虾油中的虾青素孙来娣;冷凯良;孙伟红;赵宪勇;高华;邢丽红;刘坤【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2013(034)008【摘要】建立用固相萃取预分离、测定南极磷虾油样品中虾青素3种同分异构体的高效液相色谱法.样品经固相萃取小柱预分离净化,加NaOH-甲醇溶液皂化反应后,经YMC-Carotenoid C30色谱柱分离得到虾青素3种同分异构体,采用外标法定量.南极磷虾油中虾青素的最佳净化条件为:以LC-NH2为固相萃取小柱,正己烷-丙酮-甲醇(1:2:2,V/V)为洗脱溶剂,洗脱体积为8mL,洗脱流速控制在2～4mL/min.样品经LC-NH2固相萃取小柱净化后平均添加回收率为86.1％～94.3％,相对标准偏差为0.79％～1.91％.结果表明,方法重现性好,回收率高,适用于南极磷虾油中虾青素含量分析.【总页数】4页(P157-160)【作者】孙来娣;冷凯良;孙伟红;赵宪勇;高华;邢丽红;刘坤【作者单位】青岛大学医学院,山东青岛 266021;中国水产科学研究院黄海水产研究所,山东青岛 266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,山东青岛 266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,山东青岛 266071;农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室,山东青岛 266071;青岛大学医学院,山东青岛 266021;中国水产科学研究院黄海水产研究所,山东青岛 266071;青岛大学医学院,山东青岛266021【正文语种】中文【中图分类】TS254.4【相关文献】1.高效液相色谱法检测南极磷虾油中总虾青素含量 [J], 王松;郝鹏飞;赵鑫鹏;苗钧魁;刘小芳;赵宪勇;冷凯良2.高效液相色谱法测定虾青素油中虾青素的含量 [J], 孔凡华;徐佳佳;郭倩;白沙沙;李东;方从容;邱楠楠;崔亚娟3.南极磷虾油中虾青素分子种组成及其消化吸收特性研究 [J], 周庆新;黄子倩;谷彩霞;张志轩;李璐;周瑾若;李玉环4.超声辅助双连续型离子液体微乳液提取南极磷虾壳中的虾青素 [J], 张莉莉;温淑媚;高静5.南极磷虾油改善虾青素生物利用度的研究 [J], 刘小芳;刘建志;唐一新;孙伟红;张辉珍;冷凯良因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

南极磷虾中不同形态虾青素的分离制备、结构鉴定及含量分析丛心缘;孙伟红;张辉珍;冷凯良;邢丽红;苗钧魁;刘小芳【摘要】以南极磷虾为研究对象,采用丙酮提取南极磷虾中的虾青素.优化硅胶柱层析技术分离虾青素双酯、单酯及游离虾青素;筛选合适的展开剂,利用薄层层析法对得到的样品进行鉴定;通过Chiralpak IC柱鉴别其立体结构;运用C30-HPLC法测定不同形态虾青素的含量.结果表明,硅胶柱层析以不同比例的丙酮-石油醚溶液梯度淋洗,可以分离制备虾青素双酯、单酯及游离虾青素;V(正己烷)∶V(丙酮)∶V(乙酸)=8∶2∶0.2为薄层层析最佳展开剂.南极磷虾中不同形态虾青素均由3S,3'S、3S,3'R、3R,3'R3种光学异构体组成,虾青素双酯和单酯中3R,3'R所占比例＞70％,3S,3'S的比例最低.南极磷虾中总虾青素含量为18.9 mg/kg,其中虾青素双酯中虾青素含量为12.0 mg/kg,虾青素单酯中虾青素含量为6.1 mg/kg,游离虾青素含量为0.8 mg/kg.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2019(045)002【总页数】5页(P174-178)【关键词】南极磷虾;虾青素酯;硅胶柱层析;光学异构体【作者】丛心缘;孙伟红;张辉珍;冷凯良;邢丽红;苗钧魁;刘小芳【作者单位】青岛大学公共卫生学院,山东青岛,266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部极地渔业开发重点实验室,山东青岛,266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部极地渔业开发重点实验室,山东青岛,266071;海洋国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室,山东青岛,266100;青岛市食品药品监督管理局,山东青岛,266100;中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部极地渔业开发重点实验室,山东青岛,266071;海洋国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室,山东青岛,266100;中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部极地渔业开发重点实验室,山东青岛,266071;海洋国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室,山东青岛,266100;中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部极地渔业开发重点实验室,山东青岛,266071;海洋国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室,山东青岛,266100;中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业部极地渔业开发重点实验室,山东青岛,266071;海洋国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室,山东青岛,266100【正文语种】中文南极磷虾(Antarctic krill)是生活在南极洲水域的甲壳类无脊椎动物，蕴藏量十分丰富，有极大的开发价值[1]，富含二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)等n-3多不饱和脂肪酸，生物利用度高于鱼油，有降血脂，预防心脑血管疾病的保健功效[2-4]。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810104733.8(22)申请日 2018.02.02(71)申请人 中国水产科学研究院黄海水产研究所地址 266000 山东省青岛市市南区南京路106号(72)发明人 刘淇　赵玲　曹荣　孙慧慧　(74)专利代理机构 北京中北知识产权代理有限公司 11253代理人 孙静静(51)Int.Cl.C11B 1/02(2006.01)C11B 1/10(2006.01)(54)发明名称一种从南极磷虾中提取磷虾油的方法(57)摘要本发明属于生物技术领域，具体地说是一种从南极磷虾中提取磷虾油的方法。

其包括南极磷虾预处理、用有机溶剂的浸提、磷虾油的提取以及提取溶剂的挥发。

本发明采用的碳酸二甲酯为绿色环保溶剂，符合食品安全的要求。

碳酸二甲酯微溶于水，回收简单，可循环利用，无环境危害，能够减少生产中的危险性，对暴露在生产环境中的操作人员无危害。

本发明采用碳酸二甲酯作为提取剂，其提取的南极磷虾油的磷脂含量高达40％，较传统的提取方法更加高效，提取的南极磷虾油品质更佳。

本发明通过间歇搅拌提取，有效的提高了磷虾油中磷脂的含量，附加提取了不饱和脂肪酸、虾青素、维生素及多种微量元素等，具有较好的经济市场前景。

权利要求书1页 说明书4页CN 108329988 A 2018.07.27C N 108329988A1.一种从南极磷虾中提取磷虾油的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)预处理：南极磷虾的加热、干燥、粉碎；(2)浸提：用有机溶剂在25～35℃下浸泡磷虾粉，磷虾粉与有机溶剂固液比为1∶2～1∶10，时间为1～2h，得到磷虾粉悬浊液；(3)提取：对磷虾粉悬浊液进行分离提取，得到提取液；对磷虾粉残渣重复步骤(2)和(3)再提取2～4次，其中，磷虾粉残渣与有机溶剂固液比为1∶2～1∶10，提取过程中搅拌，搅拌2～3h，提取温度在20～30℃；(4)溶剂挥发：合并上述提取液，于30～70℃、真空度-0.05～-0.1MPa下对提取液进行旋转蒸发，除去有机溶剂，得到南极磷虾油。

矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。

如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。

㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。

(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。

如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。

对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。

二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。

2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。

㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。

2、矿产品价格稳定性及变化趋势。

三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。

2、矿区矿产资源概况。

3、该设计与矿区总体开发的关系。

㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。

2、矿床开采技术条件及水文地质条件。

摘要:南极磷虾是一种资源量巨大、尚未充分开发利用的海洋生物资源。

南极磷虾虾青素具有非常强的抗氧化活性，是天然虾青素的良好来源, 在鱼类体色改变、免疫能力提高等方面发挥了重要作用，具有广泛的应用前景。

本文综述了南极磷虾虾青素的制备方法（有机溶剂法、酶解法、超临界C（I萃取法等）、结构特征、生物活性、检测方法（紫外分光光度法、薄层色谱法、激光拉曼光谱法、高效液相色谱法及高效液相色谱-质谱法）等的研究进展，提出了开展南极磷虾虾青素机理研究、关键技术和应用研发等未来发展建议，以期为南极磷虾虾青素的深度研究和开发利用提供参考。

南极磷虾；虾青素；制备；结构特征；检测方法；稳定性关键词:南极磷虾Euhausia superba属于节肢动物门Arthropoda甲壳动物纲Crustacea磷虾目Euphausiacea磷虾科Euphausiidae磷虾属EUR⅛磷虾种EUR⅛asuperbo据评估，南极磷虾现有生物资源量约为3. 79亿f o南极海洋生物资源养护委员会（CCAMLR）规定每年南极磷虾的预警捕捞限额为860万t。

南极磷虾富含优质蛋白质、脂质、虾青素和甲壳素等物质，并具有非常强的抗氧化活性。

近年来，南极磷虾已经成为全球远洋渔业的重要捕捞、加工对象，南极磷虾产品在饲料、化妆品和医药等领域均获得了广泛应用。

因此，南极磷虾的高效开发与高值利用具有打造海洋生物战略性新兴产业的巨大潜力。

虾青素∕s3x数力力又称虾黄素，是一种酮式类胡萝卜素。

由于虾青素具有良好的功能特性，在水产饲料、保健品、化妆品和医药等领域获得了广泛的应用。

根据来源不同，虾青素主要分为天然虾青素和合成虾青素，目前95%的虾青素产品是合成虾青素。

随着食品安全和环境保护意识的提升、制备及应用技术的进步及天然虾青素价格的下降，天然虾青素正展现出更好的发展潜力。

2017年虾青素的市值已达到5. 5亿美元，预计2022年销售额将达到8. 0亿美元，2025年有望达到10亿美元。

矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。

如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。

㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。

(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。

如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。

对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。

二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。

2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。

㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。

2、矿产品价格稳定性及变化趋势。

三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。

2、矿区矿产资源概况。

3、该设计与矿区总体开发的关系。

㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。

2、矿床开采技术条件及水文地质条件。

矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。

如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。

㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。

(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。

如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。

对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。

二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。

2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。

㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。

2、矿产品价格稳定性及变化趋势。

三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。

2、矿区矿产资源概况。

3、该设计与矿区总体开发的关系。

㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。

2、矿床开采技术条件及水文地质条件。

矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。

如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。

㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。

(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。

如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。

对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。

二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。

2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。

㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。

2、矿产品价格稳定性及变化趋势。

三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。

2、矿区矿产资源概况。

3、该设计与矿区总体开发的关系。

㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。

2、矿床开采技术条件及水文地质条件。