猪流感的诊断技术研究进展
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猪流感病毒血凝素研究进展谢金文;沈旭;沈志强【摘要】@@ 猪流行性感冒,简称猪流感(Swine influenza, SI),是猪的一种急性、高度接触性呼吸道传染病.自美国1918年首次报道本病以来,欧、美、亚、非、澳等世界各大洲均有本病的发生和流行.SI能引起猪的高发病率(几乎100%)和低死亡率(病死率≤1%).此病的发生可使患病猪生产性能下降,推迟上市;还可引起呼吸道细菌和病毒继发或混合感染,使疫情更为严重,造成猪只死亡.其病原为猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV),属于正黏病毒科A型流感病毒属,病毒粒子呈多形态,不过多数呈球形,直径约80-120nm.个别丝状体可长达数微米,常见于刚分离到的病毒颗粒,鸡胚或细胞内反复传代繁殖后变为球形.病毒有囊膜,由双层类脂膜、糖蛋白突起和基脂蛋白组成.囊膜表面有许多放射状排列的突起,即纤突和刺突.病毒颗粒内为核衣壳,呈螺旋状对称,直径为10nm.两端具有环状结构,存在于病毒的囊膜内.【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2010(026)001【总页数】3页(P88-90)【作者】谢金文;沈旭;沈志强【作者单位】山东省滨州畜牧兽医研究院,预防兽医学与动物生物技术重点实验室,滨州,256600;山东绿都生物科技有限公司;山东绿都生物科技有限公司;山东省滨州畜牧兽医研究院,预防兽医学与动物生物技术重点实验室,滨州,256600;山东绿都生物科技有限公司【正文语种】中文【中图分类】R373.1Email:*******************猪流行性感冒,简称猪流感(Swine influenza,SI),是猪的一种急性、高度接触性呼吸道传染病。
自美国1918年首次报道本病以来,欧、美、亚、非、澳等世界各大洲均有本病的发生和流行。
SI能引起猪的高发病率(几乎100%)和低死亡率(病死率≤1%)。
此病的发生可使患病猪生产性能下降,推迟上市;还可引起呼吸道细菌和病毒继发或混合感染,使疫情更为严重,造成猪只死亡。
猪流行性感冒症状及诊断方法猪流感即猪流行性感冒,是由猪流感病毒(siv)引起的猪的一种急性、热性、高度接触性传染病。
临床以突发、咳嗽、呼吸困难、高热、衰竭、迅速康复或死亡为特征。
下面我们了解一下猪流行性感冒症状及诊断方法。
猪流行性感冒流行特点猪是siv的天然宿主,不同品种和年龄的猪均可感染,发病率高达100%,致死率较低(1%),但仔猪死亡率较高。
此外,人和火鸡等禽类也可感染siv,而禽和人的流感病毒也可以感染猪。
近年来,越来越多的证据表明,来源于人和禽的流感病毒在猪体内进行病毒基因交换和重排后,形成新的病毒粒子,进而感染人。
此外,猪还是人流感病毒的中间宿主,人早期的流感病毒可储存于猪体内,并在一定时期后再次感染人。
猪流行性感冒的临床症状该病潜伏期短,为几小时到数天,传播迅速,在一周左右全群猪几乎同时感染发病。
病猪体温升高到40-41℃,高者可达42℃。
病猪食欲减退或废绝,精神沉郁,肌肉、关节疼痛,常卧地不起,不愿走动,强迫其行走时往往跛行,捕捉时发出尖叫声。
病猪呼吸急促,呈腹式呼吸,伴有阵发性、痉挛性咳嗽。
眼、鼻流出黏液性或脓性分泌物,眼结膜充血发红,便秘,尿黄。
猪流行性感冒的实验室诊断(1)除常规的临床症状及病理变化诊断外,确诊须进行病毒的分离或采用其他手段证明病原的存在,也可以用血清学方法诊断。
(2)对活体病例,一般从喉气管或鼻咽拭子经无菌处理后分离病毒;对死亡病例,肺脏和脑组织是首选病料。
诊断还可采用血凝(ha)和血凝抑制试验(hi),神经氨酸酶抑制试验(ni),中和试验,琼脂凝胶扩散试验,免疫荧光法,酶联免疫吸附试验(elisa),免疫过氧化酶单层细胞试验以及聚合酶链式反应(pcr)、实时荧光定量pcr技术等。
该病主要病变在呼吸器官。
鼻孔、气管和支气管黏膜充血、肿胀,表面有大量泡沫样黏液,有时黏液带血。
小支气管和细支气管内充满泡沫样渗出液;肺尖叶、心叶和中间叶病变部位由红至紫、塌陷、萎缩、坚实,病健组织界限明显;肺门淋巴结、支气管淋巴结、颈淋巴结水肿,切面外翻、多汁;胸腔内有黏液性、纤维素性渗出物。
猪传染病实验室诊断技术及注意事项徐林海/内蒙古乌兰察布市动物疫病预防控制中心 012000 高顺平/内蒙古乌兰察布市兽药监察所 012000传染病是困扰养猪业最大的问题之一,控制传染病发生的前提是准确的诊断。
近年来,随着分子生物学和组织病理学的发展,病原体的检测技术得到很大的改进,再加上对动物本身、环境条件与传染病发生之间关系的深入研究,目前,猪传染病诊断的整体思路可以参考图1来进行。
图1 疾病诊断的整体思路1 诊断方法1.1 初步诊断 初步诊断是通过流行病学调查、临床症状观察和病理解剖来初步对疾病做出疑似判定,是诊断疾病的第一步,是基础。
这个阶段,兽医诊断的经验是主要的,但往往会出现诊断偏差。
1.2 实验室诊断 在初步诊断的基础上,进一步的确诊需要用实验室诊断方法。
目前常用的实验室诊断方法包括血清学诊断、病原学诊断、组织病理学诊断、变态反应诊断等。
1.2.1 血清学诊断试验 血清学诊断试验是通过免疫学方法诊断传染病最常用的、最重要的方法之一,由于抗原抗体结合反应的高度特异性,血清学方法在临床诊断上已被广泛应用,可用已知抗体检测抗原,也可用已知抗原检测抗体。
通过检测发病前后双份血清特异性抗体水平的变化来评估会更有意义,但是存在评估标准不一、血清收集时间较长等弊端。
此外通过测定血清中的特异性抗体水平可以确定疾病发展动态,对于掌握猪场内疾病的发展趋势是非常有意义的。
目前,也有不少成熟的血清学诊断技术被应用于临床诊断。
1.2.2 病原学诊断 常规的病原学诊断方法包括细菌涂片镜检、病原分离培养,病原鉴定等,这几种方法的共同点是通过各种手段去检测到病原,这对于疾病确诊来说是有决定性意义的。
1.2.2 .1细菌涂片镜检 选择含有特征病变的组织、器官或血液、组织液进行涂片、染色、镜检,对一些有特殊形态的病原微生物如炭疽杆菌、巴氏杆菌可以迅速诊断,但对大多数传染病来说仅能提供诊断的初步依据。
1.2.2 .2病原分离培养 通过选择适宜的培养基或培养技术将细菌、真菌、支原体、螺旋体从病料中分离鉴定出来,即4 小结就当前国内形势来看,非洲猪瘟在我国的暴发或许对加快养殖业集中速度起到助推器的作用,小型及散养户在生猪养殖生存将变得更加举步维艰,另加上国家环保、绿色等政策的影响,对其更是雪上加霜。
猪流行性感冒的流行病学、临床症状猪流行性感冒的诊断及其防控-养猪技术正值冬春气候多变时节,猪流行性感染又有增多趋势。
此病爆发突然,传播迅速,常见地方性流行。
此病发病率高,但死亡率低。
是由流感病毒诱发的急性、高度接触性及传染性的呼吸器官疾病。
下面一起来具体了解一下:猪流行性感冒的流行病学、临床症状猪流行性感冒的诊断及其防控。
1、流行病学病原特性。
猪流感病毒是一种单股负链RNA病毒,病毒颗粒呈球状,直径在80~120 nm,具有囊膜,且上面存在大量的突起糖蛋白,即神经氨酸酶NA、M2蛋白以及血凝素HA蛋白。
核衣壳呈对称的螺旋状,位于病毒颗粒里面,直径在10 nm 左右,其中HIN1、HIN2和H3N2血清型猪流感病毒还会导致人发病。
该病毒具有较弱抗热性,一般在56℃温度下处理30 min就可被灭活,且对重金属、卤素化合物、氧化剂以及甲醛、氯仿、乙醚、乙醇等有机溶剂比较敏感。
发病特点。
任何品种、性别,日龄的猪对该病都具有易感性。
病猪和带毒猪是该病的主要传染源。
该病呈季节性流行,即在春秋、寒冷季节容易发生,尤其是气候突变非常容易发生,且通常呈地方性流行或者大流行。
只要在猪群中发现有猪感染,就会快速导致整个群体被传染。
带毒猪的鼻液、支气管、气管、肺淋巴等处都含有病毒,并通过呼吸道分泌物排到体外,导致用具、饲草、饮水等被污染,从而直接或者间接导致其他猪发生感染,引起广泛发病。
另外,猪也可通过呼吸道感染病毒,并附着在呼吸道黏膜上皮细胞大量增殖,促使该处细胞发生变性、坏死,最终发生脱落、水肿、充血、坏死等。
2、临床症状病猪主要表现出有清涕从鼻孔流出,初期有大量鼻涕流出,仔细观察会存在点滴状流出,中后期逐渐减少或者停止流涕。
体温多变,初期升高达到39~41.2℃,个别伴有咳嗽,排出少量的清透尿液,中后期体温恢复正常或者略微升高,有时还会下降到37℃以下。
虚寒怕冷,相互拥堆,往往钻人草垫,精神沉郁,往往卧地,拒绝站立,停止采食、饮水。
猪流感病毒在自然感染猪中定植区域的研究郑 杰 赵 朴 译 卢中华 校 (河南农业大学牧医工程学院 郑州 450002) 猪流感病毒感染是全世界养猪国家常遇到的一种呼吸道疾病。
感染猪通常表现为突发呼吸道疾病、高热、食欲减退、体重减轻、嗜眠、眼和鼻有分泌物、咳嗽、呼吸困难;高发病率和低死亡率(病死率<5%)最普遍。
组织学检查可发现支气管和细支气管上皮退化、坏死。
支气管、细支气管、肺泡腔内充满了含有脱落细胞、嗜中性细胞、单核细胞的渗出物。
猪流感病毒属于正粘病毒科流感病毒属成员,基因组为八个片段的单链副股RNA分子。
已从猪中分离到两个亚型的A型流感病毒:H1N1(经典代表株H1N1和禽H1N1)和H3N2(代表株为人H3N2)。
RNA片段5编码主要的结构蛋白与RNA的片段型特异性抗原组成核蛋白。
核蛋白是典型的抗原,用于区分A、B、C型流感病毒。
A型SIV核蛋白基因的核苷酸序列与其它流感病毒显著不同(同源率为60%),但在不同A型流感病毒株之间表现为高度保守(同源率可达90%)。
因此,以核蛋白基因转录的互补DNA(cDNA)可特异性地用于A型SIV的检测。
病毒的分离是诊断猪流感病毒(SIV)感染的经典方法。
然而,病毒的培养既费时又昂贵。
从可能被病毒污染的样品中分离病毒时要小心处理,防止在分离过程中传染给人。
人感染SIV,一部分是致死性的,这在美国、欧洲已有报道。
由于SIV的流行特点,人们已经采用基于单抗、多抗介导的免疫组化不同检测方法检测用甲醛固定,石蜡包埋组织中的抗原。
检测猪流感病毒的另一种方法是原位杂交,原位杂交是用于评价组织和细胞中基因表达水平的RNA的有力助手,它的主要优点是能够确定样品混合物中的哪些组织和细胞表达目的RNA,病毒RNA的cDNA探针原位杂交技术已经成功地用于病毒核苷酸的检测。
本研究的一个目的就是利用地高辛标记的,互补SIV核蛋白的基因保守区的582bp的单股cDNA探针检测用甲醛固定,石蜡包埋的组织中SIV的核酸。
矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。
如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。
㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。
(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。
如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。
对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。
二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。
2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。
㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。
2、矿产品价格稳定性及变化趋势。
三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。
2、矿区矿产资源概况。
3、该设计与矿区总体开发的关系。
㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。
2、矿床开采技术条件及水文地质条件。