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耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌的检测(一)

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凝固酶阴性葡萄球菌耐药机制的研究进展

凝固酶阴性葡萄球菌耐药机制的研究进展
病原菌 是人体体 表和腔 道的正 常 人 菌群 ， 一般很少 引起感染 ， 但是当机体免疫 功能低下 或进 入非
正常部位时 即成为感染性病原菌 ， 尤其对于住 院时间长 、 身体 虚弱 、 免疫力下降的患者 。且用药 时问长容易产生耐药 ， 给治 疗带来 困难 。故 近年 来此 类病 原菌越 来越 引起 临床 上 的重 视 。而且有学者认 为， 患者 问的多重耐 药凝 固酶 阴性葡 萄球
ｌ０ ２
临床肺科 杂 志
２１ ０ ２年 １月 第 ｌ ７卷第 １期
凝 固酶 阴性 葡 萄球 菌 耐药 机 制 的研 究进展
费明明 综述 刘宝 审校
凝固酶阴性葡萄球菌（Ｃ ａｕａｅｎｇｔ ｅｓ ｐｙ ｃｃｕ ， ｐｇｌｓ ｅａｉ ｔ ｈｌ ｏｃｓ ｖ ａ ｏ
Ｃ Ｓ 首 先 被 Ｐ ｓ ｕ 和 Ｏ ｓ ｎ 位 学 者 在 １８ Ｎ） ａｔ ｒ ｅ ｇｔ 两 ｏ ８０年 鉴 定 ， 因不
溶血葡萄球菌都被认为是新 的重要 的医院 内感 染病原体 ， 不 仅导致侵袭性感染 ， 而且 已经成 为 耐苯 唑西林 （ 耐药率 超过 ６ ％） ０ 和多重耐 药 的病 原体 … 。有 研究 表 明 ， 在耐 苯 唑西林 的凝 固酶 阴性葡 萄球 菌 中，５ ７ ％能 测 出含 有 ｍ ｃ 基 因 。 ｅＡ
（ Ｂ ２ ） 导致对 Ｂ 内酰胺类抗生素的耐药。 ＰＰａ， 一
（） ３ 酶的作用 Ｎ ｎｓＳ ｕｅ Ｆ等研究发现 ３ 株表皮葡萄球菌 中有 ２ １ ４株约 占 ７ ． ％都 产生 ｐ 内酰胺酶 ， ７４ 一 产生 的 一 内酰胺 酶 ， 助其分 借 子中的丝氨酸活性 位点 ，与 Ｂ 内酰胺环 结合 并打 开 ｐ 内酰 一 一 胺环 ，导致此类药物失 活。表皮葡萄球菌对 氨基糖苷类药物 耐药 主要是产生 了氨基糖苷类药物的钝化酶所致 ， 而且 氨基 糖苷类药物之 间有交叉耐药性 。 ２ 溶血葡萄球菌 ． 溶 血葡 萄球 菌 （ ｔｐｙｏｏｃｓｈｅ ｏ ｔ ｕ ，Ｈ） 足 一 Ｓａｈｌ ｃｕ ａｍ ｌｉ ｓ Ｓ 也 ｃ ｙｃ 种条件致病菌 ， 它常见于会阴及腹 股沟区的皮肤黏膜 ，・ ． Ｈ感 染 ， 以引起败血症 ， 膜炎及 泌尿系统感 染 ， 可 累及 先天 可 腹 电 性瓣膜性心 内膜炎。近年来 ， 已逐 渐成为 院内除表皮 葡萄 它 球菌之外的第二大导致感 染的凝 固酶 阴性葡萄球菌 。溶血葡

凝固酶阴性葡萄球菌

凝固酶阴性葡萄球菌
28
29
3
研究背景和意义
CoNS 作为皮肤黏膜定植菌，在越来越多的标本中被 分离出来，常常引起临床困惑。其是否能作为感染的 病原菌是临床关心的问题。
有鉴于此，实验室建立对CoNS污染菌和致病菌界定 的方法十分必要，是临床明确诊断和制定合理治疗方 案的重要前提 。
4
CoNS致病物质
研究背景和意义
在 CoNS 感染的发病过程中，细菌先黏附继而形成难以 清除的生物膜是其最为重要的致病机制 ；
11
4、实验设计及方法
材料和方法
标本采集 阴、阳性对照
菌种鉴定
PIA检测
PCR扩增
icaD基因 sodA基因 16SrDNA序列
生物膜形成实验
DNA测序、 生物信息学分析
确定特征片段
比较分析
临床验证
12
第三部分 结果和讨论
1、刚果红试验
4
13
图2.1： 部分样品刚果红试验结果
结果和讨论
表2.1: 114例CoNS的菌种组成及刚果红试验结果
2
研究背景和意义
近年来由于介入性诊疗操作、免疫抑制剂及广谱抗生素 的广泛使用，CoNS已成为院内感染的重要病原菌，而 且耐药菌株比金黄色葡萄球菌更为多见。 叶联华等报道人工瓣膜术后心内膜炎中，约有40%50%由凝固酶阴性葡萄球菌引起； 2009年中国CHINET细菌耐药监测结果MRCoNS检 出率平均为71.7%,大于MRSA的52.7%。
6
研究背景和意义
2、实验目的
获得CoNS特异的致病性分子标志物； 确立敏感、准确、快速的医院感染相关性
CoNS特异基因诊断方法； 能够准确鉴定致病性与非致病性CoNS。
7
研究背景和意义

临床常见的致病球菌

临床常见的致病球菌

临床意义
金黄色葡萄球菌
1.化脓性:局部组织、内脏器官或全身化脓性 感染。表现为疖、痈、甲沟炎、蜂窝组织 炎、伤口化脓，肺炎、脓胸、中耳炎、心 内膜炎、脑膜炎,败血症、脓毒血症等 2.外毒素:食物中毒,烫伤样皮肤综合症,毒性 休克综合征(TSST－1)
临床意义
凝固酶阴性葡萄球菌 •人工瓣膜性心内膜炎 •静脉导管感染 •腹膜透析性腹膜炎 •血管移植物感染 •人工关节感染
腐生葡萄球菌 •女性尿路感染
病原学检查要点
1. 标本采集 ：根据感染部位,可采集脓液、创 伤分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、 脑脊液、粪便、感染组织，导管等 血培养至少2套（4瓶），多部位静脉采血 2.直接检查：无菌体液离心涂片后，革兰染色 镜检，初步报告“找到革兰阳性球菌，呈 堆排列，疑为葡萄球菌” 。
阳性数 50
自动化仪器 金黄色葡萄球菌的检测
单瓶阳性 两瓶阳性
美国监测
45 40 35 30 25 20 15 10 5
4 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56 58 60 62 64 66 68 70 72 74 96 120
生物学特性
6
插管24小时后静脉导管上的生物膜
7
病原学检查要点
3.分离培养与鉴定： • 血液或无菌体液培养：
– 手工法: 24h，48h，3天，5天分别肉眼观察 – 自动化培养法：Bactec9000，Bact/alert等 标本：血平板，培养18-24小时
鉴定方法：常规法，如革兰染色、触酶试验、血浆凝 固酶试验、乳胶凝集试验等 • 手工编码鉴定系统： 如API Staph手工鉴定系统 • 全自动鉴定系统：Vitek、Phoenix，Walkway • 半自动鉴定系统： Crystal 、MicroScan，ATB

耐甲氧西林血浆凝固酶阴性葡萄球菌的检测

耐甲氧西林血浆凝固酶阴性葡萄球菌的检测

耐甲氧西林血浆凝固酶阴性葡萄球菌的检测
娄金丽;柴文戊
【期刊名称】《锦州医学院学报》
【年(卷),期】1997(018)006
【摘 要】从３０株血浆凝固酶阴性的葡萄球菌中分离１３株耐甲氧西林血浆凝固
醇阴性区区球菌。ＭＲ－ＣＮＳ占ＣＮＳ分离的４３．３％。３０株ＣＮＳ对万古
霉素全部敏感。Ｏｘａｃｉｌｌｉｎ的－ＣＮＳ占ＣＮＳ分离的４３．３％。

【总页数】3页(P11-13)
【作 者】娄金丽;柴文戊
【作者单位】微生物学教研室;微生物学教研室
【正文语种】中 文
【中图分类】R378.11
【相关文献】
1.头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的评价 [J], 杨庆忠;韩
立忠;万向农
2.PCR 检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药基因 [J], 黄峰;秦淑国;边其侠;许
元元
3.头孢西丁和拉氧头孢纸片扩散法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的方法比较
[J], 茆海丰;秦岭;杨晋;赵勇;营丽娟
4.4种检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌方法的评估 [J], 纪冰;马筱玲;蔡朝阳;李
华;鲁怀伟
5.聚合酶链式反应法和VITEK-2 compact仪器法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄
球菌的比较 [J], 黄靖宇;尹俊;李湖桂;方威;王君;林广玲

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与耐药机制有关药敏试验的规范化-陈东科

与耐药机制有关药敏试验的规范化-陈东科

1. 苯唑西林纸片筛选试验
方法：使用含1μg苯唑西林纸片（而不是甲氧西林 或萘夫西林）来检测葡萄球菌对甲氧西林的耐药性。 用直接菌落悬液法制备的接种物（0.5麦氏比浊浓度 菌液）接种MH琼脂平板， 待琼脂表面的水份干后， 贴苯唑西林纸片，于33℃-35℃孵育24h，测量抑菌 圈直径。
结果判断：按NCCLS/CLSI解释标准判断结果，金 黄色葡萄球菌和路邓葡萄球菌抑菌圈直径≤10mm为 耐药，≥13mm为敏感。除路邓葡萄球菌外的其它凝 固酶阴性葡萄球菌抑菌圈直径≤17mm为耐ห้องสมุดไป่ตู้， ≥18mm为敏感。
注意事项
（1）在透射光下仔细观察苯唑西林纸片周围抑菌
圈内有无细小菌落或轻微弥漫生长，如有说明耐药。
（2）试验温度超过35℃不能检测MRS。
（3）纸片扩散法结果如有疑问，必须进行mecA 基
因或PBP2a 测定、头孢西丁纸片试验、苯唑西林 MIC 试验或苯唑西林盐琼脂筛选试验，来确定是否
为MRS 菌株，选择其中一种试验结果进行报告。
检查有无细菌生长，任何生长都表示对苯唑西林耐
药（如图）。
注意事项：
为从凝固酶阴性葡萄球菌中检测出甲氧西林耐药 菌株，需要将琼脂平板孵育48小时。
3. 头孢西丁纸片法
方法： 应用标准的纸片扩散法试验条件接种MH琼脂
平板，使用含30μg头孢西丁纸片， 35℃孵育24h（如 耐药则在孵育18h后可报告结果）。使用反射光阅读
药性，头孢西丁纸片试验是首选方法（因为头孢西丁
较苯唑西林的敏感性高，如图）。
4. mecA 基因及PBP2a 测定
方法：可采用乳胶凝集或分子生物学等方法 进行检测（有成品试剂供应）。
结果判断：mecA 基因或PBP2a（mecA 基 因表达产物）检测阳性的葡萄球菌分离株，

葡萄球菌-“D试验”

葡萄球菌-“D试验”
葡萄球菌-“D试验”
诱导性克林霉素耐药（erm介导）
患者不会对克林霉素有反应-报 告克林霉素耐药
15 ～ 26 mm
阳性
2021/5/9
“D”
阴性
无克林霉素诱导（msrA介导）
真的克林霉素敏感-报告克林霉素敏感 1
葡萄球菌诱导性克林霉素耐药的MIC检测方法
4.0 µg/ml 红霉素 0.5 µg/ml 克林霉素
大多数医院相关MRSA是克林霉素耐药的； 大多数社区相关MRSA是克林霉素敏感的(msrA 基因型)； 克林霉素可以口服给药。
2021/5/9
3
结束语
若有不当之处，请指正，谢谢！
2021/5/9
Байду номын сангаас
No growth = 无诱导性克林霉素 耐药 生长=诱导性克林霉素耐药
2
对于红霉素耐药，克林霉素敏感的葡萄球菌， 需检测诱导性克林霉素耐药
注意
试验适用于金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌(苯唑西林敏感和 耐药株)；
对于CoNS，该试验不必常规开展因为克林霉素很少用于 治疗凝固酶阴性葡萄球菌；

凝固酶阴性葡萄球菌临床分离株的耐药性分析


球 菌的耐药谱与前几年相 比， 有很大 的改变 ， 应合理使用抗菌药物及采取其他有效措施控制凝固酶阴性葡萄球菌 的感染 。 【 关键词】 凝 固酶 阴性葡萄球 菌 耐药性 多药耐药 【 中国图书分类号】 Ｒ７ ． ９８１
Ｄｒ ｕｇ－ ｒ ｓｓａ ｅ ｏ ｏ ｇ￣ａ ｅ ｎ ｇ ｔｖ ａ ｙｏ ｏ ｃ ｓ ｉｏ ａ ｅ ｌ ｃ ｌｙ － ｅ ｉｔ ｎｃ ｆｅ ａ ｓ ｅ ａ ｉ ｅ Ｓｔｐｈ ｌｃ ｃ ｕ ｓ ｌｔ ｄ ｃｉ ａｌ ｎｉ
［０ 张秀明， １］ 李健 斋 ， 魏明竞 等 ． 现代临床 生化检验学 ． 北
京： 人民军医出版社 ，０ １１１２ ２０ ． ５ （０ ６ ９—１ ２ ０ —０ ３收稿 ， 责任编辑 岳建华）
［ ７］
Ｍｅ ｎ ｎａ￣ ￥Ｅ． ｕ ａ Ｙ ｔａ Ｎ ｗ ｉｌｇｃ ｒ ｅｓ ｕ ｅＣ． ｌ ｎ Ｆ Ⅱ ｅ １． ｅ ｂｏｏ ｉ ｍａｋ ｒ ｌ ａ
ｅ ｅ Ｇ ｇ ｎ ｕ ｅ Ｐ ｅｚＷ ｔａ Ｂ ｏ ｈ ｍｉｃ ｅ ｃ ｌｄａ － ５］
ｆｒａｕｅｃ ｒｎｒ ｒｅｙｄｓａｅ Ｊ—Ｍａ 一 ｖｓ ，０ ３ ２ ｏ ｃ ｔ ｏ ａｙ ａｔｒ ｅｓ ． ｏ ｉ １ ａｅ ２ ｏ ， ８
凝 固酶阴性葡萄 球菌临床分离株 的耐药性分析
王 向党 陈充抒
【 摘 要】 目的
（ 武警 总 医院 药剂科 ， 北京 １０３ ） ００９
研究凝 固酶阴性 葡萄球菌 的耐药趋势及变迁 ， 为治疗凝 固酶 阴性 葡萄球菌感染 提供 正确 的选药依 据。
方法 对 ２０ ～２０ ０３ ０５年我院临床分离 ２６株 的凝 固酶阴性 葡萄球菌 ， ２ 采用 Ｋｒｙ ａｅ 法进 行药敏试 验 ， ｉ —Ｂｕｒ ｂ 高盐 琼脂扩散法 对 苯唑西林耐药 的菌株做耐 甲氧西林葡萄球菌 （ Ｒ ） Ｍ Ｓ 测定 ， 按美国临床实验室标准化委 员会 （ Ｃ Ｌ ）９９年标准判 断结 果。结 Ｎ Ｃ Ｓ １９ 果 凝 固酶 阴性葡萄球菌 （ Ｎ ） Ｃ Ｓ 分别对青 霉素 、 霉素 、 唑青霉 素、 红 苯 环丙沙 星 、 奥格 门 丁、 林霉 素、 克 复方新 诺明 耐药率 ＞ ７ ％；对左氧氟沙星 、 ０ ， 头孢吡肟 、 头孢唑啉 的耐药率 ＜５ ％； ０ 未发现耐万古霉 素菌株 。结论 近 ２年临床分离凝 固酶 阴性葡 萄

苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌

公司） 。
年） 抗菌药物 敏感 性试验执行标准 ： 金黄色 葡萄球菌 ： 抑菌 圈
直径 ≤ １ ０ ｍｍ 为 耐 药 ， １ １ ～１ ２ ｍｍ 为 中 介 ， ≥１ ３ ｍｍ 为 敏 感 ；
凝 固酶阴性葡萄球菌 ： 抑菌圈 直径≤ １ ７ ｍｍ 为耐药 ， ≥１ ８ ｍｍ
为敏 感 。
朱 兆宇 池 勇 信 阳职业技术学 院 ， 河南省信 阳市 ４ ６ ４ ０ ０ ０ 摘要 目的 ： 评 价苯唑西林纸 片扩 散法检测耐 甲氧西林 葡萄 球菌 （ ＭＲ Ｓ ） 在 临床 的应 用价值 。方 法 ： 以Ｐ Ｃ Ｒ法检 测 葡萄 球菌的 ｍｅ ｃ Ａ基 因为标 准 ， 评价 苯唑西林纸片扩散法 对耐 甲氧西林 葡萄球菌 的检 出率 。结果 ： 苯唑西林 纸 片扩 散法 与 Ｐ Ｃ Ｒ法检测 ｍｅ ｃ Ａ基 因的符合率为 ９ １ ． ６ ７ 。结论 ： 苯 唑西林 纸片扩 散法 与 Ｐ Ｃ Ｒ检测 ｍｅ ｃ Ａ基 因的符合 率 较高 ， 简便 易行 ， 但检测 敏感性不高 ， 特异性较弱 ， 可作为一个筛选试 验 。 关键 词 苯唑西林 纸片扩散法 耐 甲氧西林 葡萄球菌 检测
２ 结 果
２ ． １ ｍｅ ｃ Ａ 基 因检 测 结 果
从 临 床分 离 的 ４ ８株 葡 萄 球 菌 属
１ ． １ ． ３ 培养 基 ： 水解 酪蛋 白 （ Ｍｕ ｅ ｌ ｌ ｅ ｒ － Ｈｉ ｎ ｔ ｏ ｒ ， Ｍ－ Ｈ） 琼脂 ， 购
自广 东 省 江 门 市 凯 林 贸 易 有 限公 司 。 １ ． １ ． ４ 试剂： ｍｅ ｃ Ａ基 因实 时荧光定 量 Ｐ Ｃ Ｒ 检 测 试 剂 盒 系 达 安 基 因 股 份 有 限 公 司 生 产 。Ｄ ＮＡ 提 取 液 ： ＴＲ Ｉ ｚ ｏ ｌ ， 氯仿 ， Ａ 液； 上游 引物 ： ５ ’ 一 Ａ ＧＡＴ ＡＡＡＣ ＡＡ ＧＡＡ Ｃ Ｃ Ｔ Ｃ Ｔ ＧＣ Ｔ （ ）３ ’ ； 下 游引物： ５ ， ＿ Ｔ ＴＴＡＡ Ｃ Ｃ Ｃ ＡＡＴ Ｃ ＡＴ Ｔ Ｇ Ｃ ＴＧ Ｔ － ３ ’ ； 引 物探 针 ： ５’ 。 ＴＴ Ｃ Ｃ Ａ ＧＡＴ ＴＡ Ｃ Ａ ＡＣ ＴＴ Ｃ ＡＣ Ｃ ＡＧ－ ３’ 。 靶 基 因 为 ｍｅ ｃ Ａ基 因 ， 扩增终产 物的片段大小 为 ９ ２ ｂ ｐ 。

凝固酶阴性的葡萄球菌ppt课件


2019
-
19
2 、在血琼脂平板上形成较大的菌落，多数致病 菌株能形成β溶血。
溶血现象: α溶血——草绿色溶血，不 完全溶血； β溶血——菌落周围形成明 显的全透明溶血环； γ溶血——不溶血。
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20
3 、在普通肉汤中生长 24 小时，呈均匀混浊，管 底有少量沉淀，培养2~3天后可在培养基表面 形成很薄的菌环。 4、大多数致病菌株能耐高浓度 NaCl，即可在含 10~15%NaCl 培养基中生长，故对严重污染 的病料可用却蒲曼琼脂分离细菌。
二、分类
链球菌分类，迄今尚没有统一，多以其溶血性、
生理生化特性和抗原结构等加以分类。
1. 根据链球菌对绵羊红细胞的溶血能力分类 2.根据生理生化特性分类 3.根据抗原结构分类（主要是Lancefield分类 法）
2019
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1、根据链球菌对绵羊红细胞的溶血能力 分为：
（1）α溶血性链球菌：致病力弱，多引起局部化脓性 炎症； （2）β溶血性链球菌：致病力强，常引起人和动物的 各种链球菌病，大部分致病性链球菌属于此类； （3）γ溶血性链球菌：一般不致病。
–白
色sta.
• 2、目前主要按照细胞组成、血浆凝固酶和毒素产 生的不同，将其分为两种：
– 金黄色sta.
–表
2019
皮sta.
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三、培养特性
• 葡萄球菌对 营养要求不高 ，在普通培养基上生长
良好， 需氧或兼性厌氧 菌。致病菌株最适生长温 度为37℃，最适pH7.4。
2019
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1、在普通琼脂平板上24~48小时，形成：光滑、湿 润、隆起的边缘整齐、不透明的圆形菌落，直径 1~2mm，也有的达3~4mm，在有氧环境中可产 生色素，在无氧环境中不产生色素。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌三种筛查方法比较

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌三种筛查方法比较目的: 以PCR检测的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的mecA基因为金标准，比较耐甲氧西林金葡菌快速胶乳凝聚检测法、头孢西丁纸片法、苯唑西林纸片法三种检验方法在MRSA筛查中的特异性和敏感性。

方法：采用NCCLS 推荐的30 μg头孢西丁纸片法和苯唑西林纸片法，以及快速乳胶法检测。

结果：苯唑西林纸片法检测MRSA阳性47株，阴性36株，敏感性94%，特异性94.7%。

头孢西丁纸片法检测MRSA阳性49株，阴性38株，敏感性98%，特异性100%。

快速胶乳检测法检测MRSA阳性49株，阴性37株，敏感性98.0%，特异性97.4%。

结论：头孢西丁纸片法、快速胶乳检测法与PCR法这个金标准有很高的一致性。

标签：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）；头孢西丁纸片法；快速乳胶检测法；苯唑西林纸片法；筛查耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 的临床院感率不断上升，在世界各地医院都有感染流行，甚至发生暴发流行，几乎在所有使用抗生素的地方都有MRSA 存在，已引起全球范围内的广泛关注[1]。

PCR法检测MRSA特异的青霉素结合蛋白2α（PBP2α）的mecA 基因，是国际公认的金标准，但因为设备、试剂费用高，实验要求严格等因素临床实验室难以常规开展。

本实验通过检测已经经过PCR法检测过的菌株88例，探讨苯唑西林纸片法、头孢西丁纸片法、快速乳胶检测法三种方法的敏感性、特异性和临床实用性。

现报道如下：1 材料与方法1.1 实验材料和试剂1.1.1 菌株来源实验菌株为2003年5月来本院微生物实验室从临床标本分离出的金黄色葡萄球菌88株，标准参考菌株ATCC 25923来自军事医学科学院微生物流行病研究所。

1.1.2 材料和试剂MRSA快速胶乳检测试剂由英国Oxoid公司生产。

头孢西丁纸片（30 μg）、苯唑西林纸片（1 μg）购自北京天坛药物生物技术公司。

水解酪蛋白（M-H）琼脂为杭州天和微生物试剂有限公司产品。

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耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌的检测(一)
【摘要】目的研究我院耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌的感染现状和耐药情况，为临床医生合理使用抗生素提供实验依据。

方法按照《全国临床检验操作规程》进行常规细菌分离培养，应用湖南天地人生物科技有限公司提供的微生物生化药敏试剂卡片进行菌种鉴定，药敏试验采用纸片扩散（K-B）法，苯唑西林琼脂筛选法确证试验。

结果共检测CNS206株，以溶血葡萄球菌和表皮葡萄球菌为主要菌种，耐苯唑西林株检出率56.9%。

结论加强MRCNS的分布及耐药性的监控，对临床治疗及抗生素的合理应用意义重大。

【关键词】耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药
凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）一般认为无致病性，因而对CNS感染的监测不够重视。

近年来经过医院感染调研发现耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）造成的医院感染病例显著增多，对苯唑西林和万古霉素的最小抑菌圈（MIC）水平亦逐年增高。

MRCNS已经引起人们的关注。

通过探讨MRCNS所致医院感染的特点，耐药性以及医院感染的高发区和易感人群，为临床诊治提供依据，指导临床合理使用抗生素。

1材料和方法
1.1标本的来源：
医院感染患者各种标本，包括痰，伤口分泌物，中段尿，血液，泌尿生殖道排泄物中分离出凝固酶阴性的葡萄球菌株260株。

1.2材料：
由湖南天地人生物科技有限公司提供的生化鉴定卡片以及由英国OXOID公司提供的苯唑西林（OXA）药敏纸片。

1.3质控品：
质控标准参考菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923，ATCC29213。

1.4方法：
1.4.1所有送检标本按《全国临床检验操作规程》进行常规细菌培养，应用湖南天地人生物科技有限公司提供的微生物生化，药敏试剂卡鉴定临床标本到种。

1.4.2OXA琼脂纸片扩散（K-B）法：操作按NCCLS规定用头孢西丁药敏纸片（含量30微克/片）做药物敏感性测定，药敏平板放置35度24小时判读结果，执行NCCLS（2001年）标准凝固酶阴性葡萄球菌抑菌环直径=24毫米判定为耐药（R），判读时注意用透射光检查抑菌环内有无耐药菌株或薄菌膜，防止漏检。

1.4.3苯唑西林琼脂筛选法确证试验：选常规细菌培养物中可疑菌落接种到含有1.75微克/毫升OXA并添加4%NaCl的M-H琼脂板上，接种菌液浓度为0.5麦氏比浊标准，接种量为一白金耳置于30-35度之间孵育24小时后观察有无细菌生长。

任何形式的菌落生长都表示对苯唑西林耐药，在OXA琼脂平上生长的凝固酶阴性葡萄球菌则为MRCNS。

2结果
2.1MRCNS菌株分离及分布见表1：
菌种共测定CNS260株，其中MRCNS148株，阳性检出率59.6%。

菌株分布以溶血葡萄球菌和表皮葡萄球菌为主。

细菌名称株数构成比（%）
溶血葡萄球菌6845.9
表皮葡萄球菌4530.4
人型葡萄球菌2013.5
模仿葡萄球菌85.4
头部葡萄球菌53.4
孔氏葡萄球菌21.4
2.2MRCNS发生的部位分布见表2:
MRCNS感染的部位最多的是泌尿生殖道，其次是呼吸道、中段尿，伤口分泌物，血液。

感染的高发区是外科，其次是呼吸科、老干科、ICU、肿瘤科等。

有青霉素过敏史者占相当的比例（45%）。

男性患者多于女性患者（男：女=105：43）。

年龄分布上来看，各个年龄阶段的患者都有。

泌尿生殖道感染患者多见于中青年，占92%；呼吸道感染者以老年人为主，65岁以上者占83%。