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GOST R 50474-1993大肠菌群

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大肠杆菌 食品标准

大肠杆菌 食品标准

大肠杆菌食品标准本标准旨在规定食品中大肠杆菌的限量标准、检测方法、卫生条件、记录与报告、处理措施、培训与教育以及监督与执法等方面的要求。

●限量标准在食品中，大肠杆菌的限量标准应根据不同的食品种类和不同的国家或地区标准而制定。

一般来说，以下限量标准可供参考：●熟肉制品：每100克食品中，大肠杆菌不得超过100个/克。

●鲜奶及奶制品：每100毫升食品中，大肠杆菌不得超过10个/毫升。

●新鲜蔬菜和水果：每100克食品中，大肠杆菌不得超过10个/克。

●饮用水：每100毫升食品中，大肠杆菌不得超过1个/毫升。

检测方法大肠杆菌的检测方法一般采用GB 4789.3-2016中的平板计数法或滤膜法。

具体操作步骤如下：●采样：随机选取样品进行检测。

●培养基制备：使用大肠杆菌选择性培养基，如结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）或麦康凯琼脂。

●样品处理：将样品进行适当稀释，以适合平板计数或滤膜法。

●接种：将稀释后的样品接种到培养基上，进行培养。

●观察与计数：在37℃下培养24-48小时，观察菌落形态，并进行计数。

卫生条件为控制食品中大肠杆菌的数量，应保持良好的卫生条件。

具体要求如下：●加工场所：加工场所应清洁卫生，定期进行清洁和消毒。

●个人卫生：工作人员应保持良好的个人卫生习惯，如勤洗手、穿戴清洁的工作服和口罩等。

●原料控制：对原料进行严格控制，避免污染和交叉感染。

●加工过程：在加工过程中，应严格按照食品安全标准操作程序进行操作，防止污染和交叉感染。

●贮存和运输：在贮存和运输过程中，应采取适当的措施，如低温贮存、避免与污染物质接触等，以保持食品的安全性和卫生质量。

记录与报告为确保食品安全和可追溯性，应做好大肠杆菌检测的记录和报告工作。

具体要求如下：●记录：对大肠杆菌检测的结果进行详细记录，包括采样时间、样品名称、生产厂家、检测结果等信息。

●报告：定期向上级主管部门报告大肠杆菌检测结果，以及采取的处理措施和效果等信息。

处理措施在大肠杆菌检测超标的情况下，应采取以下处理措施：●封存和隔离：立即封存超标批次的产品，并将其与其他产品隔离，以防止交叉感染。

总大肠菌群

总大肠菌群

总大肠菌群（滤膜法）1、适用范围生活饮用水、水源水2、仪器高温蒸汽灭菌器、滤器、口径0.45μm滤膜、培养箱、冰箱、天平、无齿镊子、直径9cm平皿、灭菌试管、灭菌吸管、酒精灯、烧杯、量筒、1000ml容量瓶。

3、步骤(1)储备培养基的制备品红亚硫酸钠培养基：加入蛋白胨10g、酵母浸膏5 g、牛肉膏5 g、乳糖10 g、琼脂20 g、磷酸氢二钾3.5g、无水亚硫酸钠5 g、碱性品红乙醇溶液（50g/L）20mL、蒸馏水1000mL。

配制方法：先将琼脂加到500ml蒸馏水中，煮沸溶解（用大烧杯），于另500ml蒸馏水中加入磷酸氢二钾、蛋白胨、酵母浸膏和牛肉膏，加热溶解，倒入已溶解的琼脂，补足蒸馏水至1000ml，混匀后调pH值为7.2～7.4，再加入乳糖，分装，68.95kPa（115℃，10lb）高压灭菌20min，储备于冷暗处备用。

（建议培养基用多少配多少）乳糖蛋白胨培养基蛋白胨10g，牛肉膏3g，乳糖5g，氯化钠5g，1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml，蒸馏水1000ml。

配制方法：将蛋白胨、牛肉膏、乳糖、氯化钠加热溶解于1000ml蒸馏水中，调节pH为7.2-7.4，再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml，充分混匀，分装于含有倒置的小玻璃管的试管中，于高压蒸汽灭菌锅中，在115℃灭菌20min，贮存于暗处备用。

(2)平皿培养基的制备将上面制备好的备用的培养基加热融化，用灭菌吸管按比例吸取一定量的50g/L的碱性品红乙醇溶液置于灭菌空试管中，再按比例称取所需的无水亚硫酸钠置于另一灭菌试管中，加灭菌水少许，使其溶解后，置沸水浴中煮沸10min以灭菌。

用灭菌吸管吸取已灭菌的亚硫酸钠溶液，滴加于碱性品红乙醇溶液至深红色褪成淡粉色为止，将此亚硫酸钠与碱性品红的混合液全部加到已融化的储备培养基内，并充分混匀（防止产生气泡）立即将此种培养基15ml倾入已灭菌的空平皿内。

待冷却凝固后置冰箱内备用。

此种已制成的培养基于冰箱内保存不宜超过两周。

gb7101标准中大肠菌群标准

gb7101标准中大肠菌群标准

gb7101标准中大肠菌群标准1目的规范食品中大肠菌群计数测定的标准操作规程。

2范围本标准规定了食品中大肠菌群（Coliforms）计数的方法。

本标准适用于食品中大肠菌群的计数。

3术语和定义3.1 大肠菌群coliforms在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。

3.2 最可能数most probable number，MPN基于泊松分布的一种间接计数方法。

4责任质量部组织制订、化验室负责实施。

5内容5.1 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：5.1.1 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃。

5.1.2 冰箱：2 ℃～5 ℃。

5.1.3 恒温水浴箱：46 ℃±1 ℃。

5.1.4 天平：感量0.1 g。

5.1.5 均质器。

5.1.6 振荡器。

5.1.7 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。

5.1.8 无菌锥形瓶：容量500 mL。

5.1.9 无菌培养皿：直径90 mm。

5.1.10 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。

5.1.11 菌落计数器。

5.2培养基和试剂5.2.1 月桂基硫酸盐胰蛋白胨（Lauryl Sulfate Tryptose，LST）肉汤：见附录A 中A.1。

5.2.2 煌绿乳糖胆盐（Brilliant Green Lactose Bile，BGLB）肉汤：见附录A 中A.2。

5.2.3 结晶紫中性红胆盐琼脂（Violet Red Bile Agar，VRBA）：见附录A 中A.3。

5.2.4 磷酸盐缓冲液：见附录A 中A.4。

5.2.5 无菌生理盐水：见附录A 中A.5。

5.2.6 无菌1 mol/L NaOH：见附录A 中A.6。

5.2.7 无菌1 mol/L HCl：见附录A 中A.7。

5.3大肠菌群MPN 计数法5.3.1 检验程序大肠菌群MPN计数的检验程序见图1。

总大肠菌群说明

总大肠菌群说明


滤膜上，然后将滤膜贴在选择性培养基上，经培养后，直接计数滤膜上生长的典型大肠菌群
菌落，算出每升水样中含有的总大肠菌群数。
3 仪器
3.1 滤器
3.2 滤膜，孔径 0.45~0.65μm。直径根据滤器规格，目前常用的有 3.5cm 和 4.7cm 两种。
3.3 抽滤设备。
3.4 无齿镊子。
3.5 高压蒸汽灭菌器。
4.2 三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液
按上述乳糖蛋白胨培养液浓缩三倍配制。
4.3 品红亚硫酸钠培养基（供多管发酵法用）
4.3.1 成分
蛋白胨
10g
乳糖
10g
磷酸氢二钾
3.5g
0ml
无水亚硫酸钠
5g 左右
5%碱性品红乙醇溶液
20ml
4.3.2 储备培养基的制备
先将琼脂加至 900 蒸馏水中，加热溶解，然后加入磷酸氢二钾及蛋白胨，混匀使之溶解，
每 100ml 水样中总大肠 菌群近似数
5 7 9 12 14 16 7 9 12 14 17 19 9 12 14 17 19 22 12 14 17 20 22 25 15 17 20 23 25 28 21 24 28 32 36 40 25 29 32 37 41 45
接种量，ml 10 1 0.1 2 50 2 51 2 52 2 53 2 54 2 55 3 00 3 01 3 02 3 03 3 04 3 05 3 10 3 11 3 12 3 13 3 14 3 15 3 20 3 21 3 22 3 23 3 24 3 25 3 30 3 31 3 32 3 33 3 34 3 35 4 30 4 31 4 32 4 33 4 34 4 35 4 40 4 41 4 42 4 43 4 44 4 45