肿瘤药物敏感实验
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体外肿瘤药敏试验方法研究进展甘萍治疗肿瘤的方法主要有3种,包括肿瘤化疗、放疗、手术。
其中肿瘤化疗在消灭微小肿瘤转移灶和手术切除后的残留肿瘤细胞治疗中有着手术与放疗无法达到的显著优势,但肿瘤化疗中仍有许多问题:①肿瘤病人个体间对化疗药物敏感性差异大;②肿瘤对化疗药物有耐药性;③化疗药物对许多类型的肿瘤特别是实体瘤的有效率不高;④化疗药物的选择性差,毒性大,杀伤癌细胞的同时也杀伤正常细胞,给病人机体造成较大的损害。
对于上述出现各种问题在临床上经验的化疗用药是无法保证肿瘤患者的个体有效性,因此个体化化疗在临床肿瘤化疗中就显得尤为重要。
目前公认的较好的方法就是做肿瘤化疗药物敏感性试验(简称肿瘤药敏),该方法的特点是直接从患者体内获取新鲜的肿瘤组织进行首次培养,由于肿瘤细胞刚刚离体,生物学性状尚未发生大的变化,能较真实地反映整个肿瘤细胞群体的特性及不同供体的个体差异,能够比较确切地代表体内状态,为不同的病人准确筛选敏感的化疗药物,并确定其剂量,真正实现临床的个体化用药,以提高化疗的靶向性,减少化疗药物的不良反应,降低细胞耐药性,成为肿瘤治疗中迫切需要解决的问题。
目前,预测肿瘤药敏的方法已发展为体内和体外两大系列20多种药敏试验,并不断地朝着简单、快速、敏感、筛选作用方式不同的药物与临床有良好的相关性的方向迈进。
而本文针对体外肿瘤药敏试验方法进行综述。
1 人体肿瘤细胞集落测定(HTCA)它是利用肿瘤细胞悬液,置于双层琼脂中培养,通过选择性加入化疗药物培养后,计数细胞繁殖形成的集落数目,再评估肿瘤细胞对该药的敏感性。
该法的优点:敏感、直接评价细胞增殖死亡。
缺点:用于临床标本检测率低、周期长、集落计数繁琐。
2 放射性标记代谢物前体掺入法(3H-Tdr assay)该法利用氚标记的胸腺嘧啶核苷和尿嘧啶作为核酸代谢物前体,测定一定时间内放射性标记的代谢物前体掺入的多少来判断药物对细胞增殖活性的抑制作用。
该法的优点:操作简便、所需时间短、灵敏度高、重复性好,临床相关性与集落形成法相近,可适用于绝大多数恶性肿瘤。
一、实验背景随着现代医学的不断发展,肿瘤已成为全球范围内主要的死亡原因之一。
肿瘤的治疗方法主要包括手术、放疗和化疗等。
其中,化疗作为治疗肿瘤的重要手段,其效果的好坏直接影响到患者的生存率和生活质量。
因此,如何筛选出对肿瘤细胞具有高敏感性的化疗药物,对于提高肿瘤治疗效果具有重要意义。
细胞药物敏感实验是一种评估肿瘤细胞对化疗药物敏感性的体外实验方法,可以为临床治疗提供依据。
二、实验目的本实验旨在通过细胞药物敏感实验,评估不同化疗药物对人癌细胞系A549的敏感性,为临床治疗提供参考。
三、实验材料1. 人癌细胞系A5492. 5-氟尿嘧啶(5-FU)、紫杉醇(PTX)、顺铂(DDP)、多西他赛(DTX)等化疗药物3. DMEM培养基、胎牛血清4. 细胞培养箱、显微镜、酶标仪等实验仪器5. 微量移液器、培养皿、细胞计数板等实验用品四、实验方法1. 细胞培养:将人癌细胞系A549接种于培养皿中,置于细胞培养箱中培养,待细胞生长至对数生长期后,用于实验。
2. 细胞计数:采用细胞计数板法对细胞进行计数,以确定细胞浓度。
3. 实验分组:将细胞分为5组,分别加入不同浓度的化疗药物(5-FU、PTX、DDP、DTX)和阴性对照组。
4. 治疗时间:将细胞与药物共培养24小时。
5. 细胞活力检测:采用MTT法检测细胞活力,计算药物抑制率。
五、实验结果1. 不同化疗药物对人癌细胞系A549的抑制作用实验结果显示,5-FU、PTX、DDP、DTX等化疗药物对人癌细胞系A549均具有明显的抑制作用,且抑制作用随着药物浓度的增加而增强。
2. 不同化疗药物的半数抑制浓度(IC50)根据MTT法检测结果,计算不同化疗药物的半数抑制浓度(IC50),结果如下:- 5-FU:20.0 µM- PTX:30.0 µM- DDP:40.0 µM- DTX:50.0 µM六、实验结论1. 5-FU、PTX、DDP、DTX等化疗药物对人癌细胞系A549具有明显的抑制作用,且抑制作用随着药物浓度的增加而增强。
抗肿瘤药物药效学实验方法及指导原则一、基本原则1. 抗肿瘤药物分类(1) 细胞毒类药物(cytotoxic agent):包括干扰核酸和蛋白质合成、抑制拓扑异构酶及作用于微管系统的药物等;(2) 生物反应调节剂(biological response modifier);(3) 肿瘤耐药逆转剂(resistance reversal agent);(4) 肿瘤治疗增敏剂(oncotherapy sensitizer);(5) 肿瘤血管生成抑制剂(tumor angiogenesis inhibitor);(6)分化诱导剂(differentiation inducing agent);(7) 生长因子抑制剂(growth factor inhibitor);(8)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide) 。
2. 抗肿瘤药物药效学需研究内容2.1 包括体外抗肿瘤试验,体内抗肿瘤试验。
2.2 评价药物的抗癌活性时,以体内试验结果为主,同时参考体外试验结果以做出正确的结论。
2.3 I类抗肿瘤新药应进行药物作用机制初步研究。
二、体外抗肿瘤活性试验1. 试验目的1.1 对候选化合物进行初步筛选;1.2 了解候选化合物的抗瘤谱;1.3 为随后进行的体内抗肿瘤试验提供参考,如剂量范围、肿瘤类别等。
2. 试验方法选用10-15株人癌细胞株,根据试验目的选择相应细胞系及适量的细胞接种浓度,按常规细胞培养法进行培养;推荐使用四氮唑盐MTT还原法、XTT 还原法、磺酰罗丹明B(SR染色法、或51Cr释放试验、集落形成法等测定药物的抗癌作用。
药物与细胞共培养时间一般为48-72 小时,贴壁细胞需先贴壁24 小时后再给药。
试验应设阳性及阴性对照组,阳性对照用一定浓度的标准抗肿瘤药,阴性对照为溶媒对照。
3. 评价标准以同一样品不同浓度对肿瘤细胞抑制率作图可得到剂量效应曲线,然后采用Logit法计算半数有效浓度(IC50值或EC50值)。
大补元煎通过MAPK通路增加食管癌细胞对铂类药物敏感性的实验研究1. 研究背景食管癌是一种常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率逐年上升。
针对食管癌的治疗手段主要包括手术、放疗、化疗等。
由于食管癌的发病机制复杂,肿瘤细胞对传统治疗方法的敏感性较低,导致治疗效果不佳。
寻找新的抗肿瘤药物和治疗策略具有重要的临床意义。
参与调控细胞生长、分化、凋亡等多种生理过程。
近年来的研究发现,MAPK 信号通路在多种肿瘤中异常活化,并与肿瘤的发生发展密切相关。
通过调节MAPK信号通路,可能提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,从而为食管癌的治疗提供新的思路。
大补元煎是一种中药复方制剂,具有滋阴补肾、益气养血等功效。
前期研究表明,大补元煎可以调节多种肿瘤细胞的增殖、凋亡等生物学行为,同时还可以影响肿瘤细胞的耐药性。
本实验拟进一步探讨大补元煎是否可以通过调节MAPK信号通路,增加食管癌细胞对铂类药物的敏感性,为食管癌的治疗提供新的理论依据。
2. 实验材料和方法细胞株:食管鳞癌细胞株Eca109,由中国科学院上海细胞生物学研究所提供。
铂类药物:顺铂(cisplatin,DDP),购自美国SigmaAldrich公司。
大补元煎提取物:从中药大补元中提取得到的有效成分,按照一定比例进行浓缩,制成实验用的大补元煎提取物。
试剂:RPMI1640培养基、胎牛血清(FBS)、磷酸盐缓冲液(PBS)、DMSO、CCK8试剂盒、Annexin VFITCPI双染试剂盒、PI(propidium iodide)和显微镜成像系统等。
细胞培养:将食管鳞癌细胞Eca109培养在含10FBS的RPMI1640培养基中,于37C、5CO2条件下培养至对数生长期,然后进行传代。
细胞增殖实验:取对数生长期的食管鳞癌细胞Eca109,接种到96孔板中,每孔100L,设置空白对照组和不同浓度的大补元煎提取物处理组。
分别加入10L DMSO溶解的大补元煎提取物,使终浓度分别为、molL。
肿瘤药物敏感性测试与个体化用药方案制定近年来,随着肿瘤治疗领域的快速发展,越来越多的研究表明,个体化用药方案对肿瘤患者的治疗效果起到了至关重要的作用。
肿瘤药物敏感性测试作为一种精准医疗技术,为制定个体化用药方案提供了有力的支持。
本文将对肿瘤药物敏感性测试和个体化用药方案的相关内容进行探讨。
一、肿瘤药物敏感性测试的原理和方法肿瘤药物敏感性测试旨在通过一系列实验室技术手段评估不同肿瘤细胞对药物的敏感性,从而为临床治疗提供参考。
通常,肿瘤组织或肿瘤细胞会被培养并暴露在不同药物浓度下,通过观察细胞的生长状态和细胞死亡率等指标,来评估药物的抗肿瘤效果。
目前,肿瘤药物敏感性测试主要包括细胞毒性试验、细胞增殖抑制试验和细胞凋亡检测等方法。
其中,细胞毒性试验通过检测药物对肿瘤细胞的杀伤效果来评估药物的敏感性;细胞增殖抑制试验则通过评估药物对细胞增殖的抑制效果来判断药物的抗肿瘤活性;细胞凋亡检测则是通过检测药物是否能够诱导肿瘤细胞的凋亡来评估药物的抗肿瘤效果。
这些方法可以根据具体需求进行选择,以实现对不同药物的敏感性评估。
二、肿瘤药物敏感性测试在个体化用药方案制定中的应用个体化用药方案的制定是根据患者的特定情况和药物的敏感性,为每位患者定制最佳的治疗方案。
肿瘤药物敏感性测试在制定个体化用药方案中发挥着重要作用。
首先,肿瘤药物敏感性测试能够帮助医生选择最适合患者的药物。
根据测试结果,医生可以了解不同药物对患者肿瘤细胞的杀伤效果,从而选择最有效的药物。
这样,患者不需要进行试验性的治疗,能够直接接受有效的个体化治疗,提高治疗效果。
其次,肿瘤药物敏感性测试还可以辅助医生确定药物的剂量和使用频率。
根据测试结果,医生可以调整药物的剂量,确保药物在治疗过程中的有效性和安全性。
此外,个体化用药方案还可以根据患者的情况进行调整,以适应不同患者的需求。
最后,肿瘤药物敏感性测试还能够为治疗后的疗效评估提供依据。
通过定期监测患者的治疗反应和肿瘤细胞的敏感性变化,可以根据实际情况对个体化用药方案进行调整,以提高治疗效果。
MTT测定恶性肿瘤细胞对化疗药物的敏感性摘要:目的探讨3-(4.5)-双甲基-2-噻唑-(2.5)-二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法测定恶性肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。
方法采用改良的MTT法检测了189例恶性肿瘤标本对9种化疗药物的体外敏感性。
结果51例胃癌细胞对化疗药物的敏感性,由高到低依次为丝裂霉素(MMC),5-氟脲嘧啶(5-Fu),顺铂(DDP),阿霉素(ADM),阿糖胞苷(Ara-C),平阳霉素(PYM),甲氨喋呤(MTX),足叶乙甙(VP-16),长春新碱(VCR);75例结直肠癌细胞对化疗药物的敏感性,由高到低依次为5-Fu,MMC,PYM,VP-16,MTX,VCR,DDP,Ara-C,ADM。
43例肝癌细胞对化疗药物的敏感性,由高到低依次为DDP,MMC,5-Fu,ADM,MTX,Ara-C,VP-16,PYM,VCR;20例乳癌细胞对化疗药物的敏感性,由高到低依次为5-Fu,MMC,DDP,ADM,MTX,PYM,VCR,Ara-C,VP-16。
结论MTT法快速、简便、敏感性高、可评价率高,适用于恶性肿瘤的药敏试验,对临床用药有指导意义。
关键词:抗肿瘤药,多剂联用;药物敏感试验; MTT法中分类号:R979.19 文献标识码:B抗癌药物体外敏感性试验一直是临床化疗界瞩目的问题。
现今已建立了多种肿瘤化疗药敏试验方法,但因成功率低和受试条件限制,都未能在临床推广应用。
由Mosman(1983)[1]建立的MTT显色法是近年来用于验测药物对肿瘤细胞增殖影响的新指标。
MTT法具有简便、快速、有一定的特异性等优点,作者采用MTT法对189例恶性肿瘤细胞的体外药物敏感性进行了初步的研究,报告如下。
1 材料与方法1.1 药品与试剂阿霉素(ADM,意大利爱宝大药厂),顺铂(DDP,山东齐鲁制药厂),5-氟脲嘧啶(5-Fu,上海旭东海普药业有限公司),甲胺喋呤(MTX,上海华联制药有限公司),丝裂霉素(MMC,日本协和发酵工业株式会社),长春新碱(VCR,中国民生药厂),平阳霉素(PYM,天津太河制药有限公司),阿糖胞苷(Ara-C,北京医科大学实验药厂),足叶乙甙(Vp16,北京制药工业研究所实验药厂)。
肿瘤体外实验设计报告本实验旨在探究肿瘤体外实验设计。
以下是实验设计的详细内容:1. 实验目的:本实验的主要目的是研究肿瘤细胞在体外的生长和扩散情况,以了解肿瘤细胞的生物学特征和体外实验模型。
2. 材料和方法:2.1 细胞培养:选择一种合适的肿瘤细胞株,如人类癌细胞株,使用细胞培养基将细胞培养在体外培养皿中。
根据实验需要,在不同实验组中培养不同浓度的细胞悬液。
2.2 实验组设置:根据研究需求,设置不同处理组和对照组。
可以根据不同药物剂量、处理时间和处理方式设置不同的实验组。
对照组是没有接受药物处理或处理条件的对照组。
2.3 细胞增殖和生存分析:使用细胞计数或细胞增殖试剂盒等方法,每隔一段时间测定细胞的增殖情况。
此外,可以使用细胞生存检测试剂盒,如MTT、CCK-8等来评估细胞的存活率。
2.4 细胞迁移和侵袭能力实验:使用Transwell孔板或Boyden腔室等传统方法,评估细胞的迁移和侵袭能力。
通过培养皿膜上的孔道或孔板的孔道,观察通过孔道的细胞数目以及细胞的迁移和侵袭情况。
2.5 药物敏感性实验:将不同药物剂量加入培养基中与细胞一起培养一段时间后,观察细胞的生存率,并通过半数抑制浓度(IC50)来评估细胞对药物的敏感性。
3. 结果分析:根据实验数据,绘制增殖曲线、细胞迁移和侵袭图等图表。
使用适当的统计学方法对实验结果进行分析,如t检验、方差分析等,以获得可靠的结果。
4. 结论:根据实验结果和分析,总结实验结果并得出结论。
讨论实验结果的意义和潜在的应用价值,以及在进一步研究中可能的改进方法。
5. 讨论和展望:对实验结果进行讨论,解释可能的研究结果差异,并提出未来研究的展望。
讨论实验的局限性和可能存在的误差,为进一步的研究提供建议和指导。
6. 引用文献:在报告末尾列出所有引用的文献,确保报告的准确性和科学性。
这是肿瘤体外实验设计报告的详细内容。
根据实验目的,通过合适的方法和数据分析,可以揭示肿瘤细胞在体外条件下的特性和行为。
第1篇一、实验目的1. 了解抗肿瘤药物的基本原理和作用机制;2. 掌握抗肿瘤药物实验操作技能;3. 分析抗肿瘤药物对肿瘤细胞生长的影响。
二、实验材料1. 实验仪器:细胞培养箱、显微镜、酶标仪、离心机、超净工作台等;2. 实验试剂:DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、四甲基偶氮唑盐(MTT)、抗肿瘤药物等;3. 实验细胞:肿瘤细胞系(如HeLa细胞、SMMC-7721细胞等)。
三、实验方法1. 细胞培养:将肿瘤细胞系接种于培养瓶中,在37℃、5%CO2的条件下培养,待细胞生长至对数生长期时进行实验;2. 实验分组:将实验细胞分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组设置3个复孔;3. 给药:将抗肿瘤药物按照预定的浓度加入各组细胞培养液中,对照组加入等体积的生理盐水;4. 细胞培养:继续培养24小时后,收集细胞;5. MTT实验:将收集的细胞用DMEM培养基洗涤两次,加入5mg/mL的MTT溶液,继续培养4小时;6. 洗涤:弃去MTT溶液,加入DMSO溶解结晶,充分振荡,酶标仪检测各孔的吸光度(OD)值;7. 数据分析:计算细胞抑制率,绘制抑制曲线。
四、实验结果1. 不同浓度的抗肿瘤药物对肿瘤细胞生长的影响:随着药物浓度的增加,细胞抑制率逐渐升高,呈剂量依赖性;2. 不同抗肿瘤药物对肿瘤细胞生长的影响:不同药物对肿瘤细胞的抑制效果存在差异,部分药物具有较好的抑制效果。
五、实验讨论1. 本实验通过MTT法检测了抗肿瘤药物对肿瘤细胞生长的影响,结果表明,抗肿瘤药物对肿瘤细胞具有抑制作用,且呈剂量依赖性;2. 不同抗肿瘤药物对肿瘤细胞的抑制效果存在差异,可能与药物的作用机制、药物浓度、细胞类型等因素有关;3. 本实验为抗肿瘤药物的临床应用提供了实验依据,有助于筛选出具有较高抑制效果的药物。
六、实验结论1. 抗肿瘤药物对肿瘤细胞具有抑制作用,且呈剂量依赖性;2. 不同抗肿瘤药物对肿瘤细胞的抑制效果存在差异,需根据药物特点、细胞类型等因素选择合适的药物;3. 本实验为抗肿瘤药物的临床应用提供了实验依据,有助于提高抗肿瘤药物的治疗效果。
一、摘要本实验旨在通过体外培养肝癌细胞系HepG2,探讨其对多种抗肿瘤药物的敏感性。
实验分为三个部分:细胞培养、药物敏感性测试和数据分析。
结果显示,HepG2细胞对多种抗肿瘤药物表现出不同的敏感性,为肝癌的治疗提供了新的思路。
二、引言肝癌是全球癌症死亡的主要原因之一,严重威胁着人类的健康。
目前,肝癌的治疗方法主要包括手术、放疗和化疗等。
然而,由于肝癌的早期诊断困难,大多数患者在确诊时已处于晚期,治疗效果不佳。
因此,寻找新的治疗方法对提高肝癌患者的生存率具有重要意义。
本研究通过体外培养肝癌细胞系HepG2,测试其对多种抗肿瘤药物的敏感性,为肝癌的治疗提供参考。
三、实验材料与方法1. 实验材料(1)肝癌细胞系HepG2(2)DMEM培养基(3)胎牛血清(4)青霉素-链霉素混合液(5)无菌培养皿、移液器、离心机等(6)抗肿瘤药物:奥沙利铂、紫杉醇、多西他赛、阿霉素等2. 实验方法(1)细胞培养将HepG2细胞接种于含10%胎牛血清的DMEM培养基中,置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。
待细胞生长至对数生长期,用于后续实验。
(2)药物敏感性测试将培养好的HepG2细胞以1×10^4个/孔的密度接种于96孔板中,培养24小时后,加入不同浓度的抗肿瘤药物,每组设置3个复孔。
培养48小时后,用CCK-8试剂盒检测细胞活力,计算药物抑制率。
(3)数据分析采用GraphPad Prism 7.0软件对实验数据进行统计分析,以抑制率表示药物敏感性,并进行t检验。
四、结果1. 细胞培养HepG2细胞在体外培养过程中生长良好,呈典型的贴壁生长,细胞形态呈梭形。
2. 药物敏感性测试(1)奥沙利铂:HepG2细胞对奥沙利铂表现出较高的敏感性,随着药物浓度的增加,抑制率逐渐升高。
(2)紫杉醇:HepG2细胞对紫杉醇的敏感性较低,随着药物浓度的增加,抑制率逐渐升高,但升高幅度较小。
(3)多西他赛:HepG2细胞对多西他赛的敏感性介于奥沙利铂和紫杉醇之间,随着药物浓度的增加,抑制率逐渐升高。