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全脑缺血再灌注后海马 EphA 受体基因表达的变化特点杨锦珊;龙根;徐莉;谢敏杰;王伟【摘要】目的：观察EphA 受体在海马全脑缺血再灌注后基因表达的改变。
方法：SD 大鼠50只随机分为假手术组10只及全脑缺血再灌注组40只，Pulsinelli 四血管阻断法建立全脑缺血再灌注模型，采用半定量 RT-PCR观察假手术组及缺血组在缺血后不同时间点（6 h、1 d、3 d、7d）EphA 受体 mRNA 含量变化的情况，免疫荧光双标法检测 EphA4受体在海马的细胞定位。
结果：EphA1-A8及EphA10 RNA 在正常海马组织均有表达， EphA4受体含量多。
在缺血状态下，EphA1、EphA2、EphA3、EphA6、EphA7及 EphA8的 mRNA 表达水平一过性上调，EphA4、EphA5和 EphA10的 mRNA 表达水平逐步上调；EphA4受体亦是缺血后变化最显著的EphA 受体。
免疫荧光双标显示 EphA4主要分布于海马CA1-CA3区及 DG 区 NeuN 阳性锥体神经元。
结论：在海马不同的 EphA 受体对缺血呈现出不同的应答模式，EphA4是海马正常条件下表达最为丰富的 EphA受体并且在缺血条件下出现最为显著地表达变化。
EphA4受体主要分布于海马CA1-CA3区以及 DG 区 NeuN阳性锥体神经元。
%Objective: To observe the gene expression of EphA receptors in the normal and ischemic hippocampus in rats. Methods: Fifty SD rats were randomly divided into two groups: sham group (n=10) and ischemia group (n=40). The Pulsinelli four-vessel occlusion model was used to induce transient global ischemia. Semi-quantitative RT-PCR was applied to measure gene expressions of EphA receptors in hippocampus at different time points (6h, 1d, 3d, 7d). To detect the cellular location of EphA4 receptors in the hippocampus,dual immunofluorescence was employed. Results: All EphA receptors includingEphA1-A8 and EphA10 were expressed in normal hippocampus, and EphA4 the most abundantly expressed in normal hippocampus. EphA receptors exhibited different change pat-terns of RNA expressions in the hippocampus after transient global ischemia. EphA1, EphA2, EphA3, EphA6, EphA7 and EphA8 presented a transient up-regulation of RNA expression. However, EphA4, EphA5 and EphA10 expressed in persisted up-regulation of RNA since transient global ischemia. EphA4 also the most significantly ex-pressed in the ischemic hippocampus. Immunofluorescence study showed that EphA4 was mainly distributed in the NeuN-positive pyramidal neurons in the hippocampus, especially in the CA1-CA3 and DG regions. Conclusion:EphA receptors exhibited different patterns in RNA expression in the hippocampus after ischemia. EphA4 receptor, the most abundantly expressed in normal hippocampus, experienced dramatic change in the ischemic hippocampus. EphA4 was mainly located in the NeuN-positive pyramidal neurons in the hippocampus, especially in the CA1-CA3 and DG regions.【期刊名称】《神经损伤与功能重建》【年(卷),期】2015(000)002【总页数】5页(P102-106)【关键词】EphA 受体;短暂性全脑缺血模型;海马;EphA4 受体;锥体神经元【作者】杨锦珊;龙根;徐莉;谢敏杰;王伟【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科武汉 430030; 福建医科大学附属第一医院神经内科福州 350000;华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科武汉 430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科武汉430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科武汉 430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科武汉 430030【正文语种】中文【中图分类】R741;R741.02Eph受体家族是目前已知最大的受体蛋白酪氨酸激酶家族，目前在哺乳动物中发现表达的有14种，根据其序列同源性及与配体亲和力分为2个亚家族：EphA （EphA1～EphA8，EphA10）和EphB（EphB1～EphB4，EphB6）。
SHOCK, Vol. 32, No. 2, pp. 201-209, 2009 第一个以复方中药制剂作为研究药物在SHOCK杂志发表的文章抗氧化剂养血清脑颗粒对缺血再灌注损伤引起的大脑微循环障碍的改善作用徐想顺1），马治中2），王芳1），胡白和1），王传社1）2），刘育英1），赵新荣1），安利华1），常昕1，廖福龙1），樊景禹1），新见英幸1），韩晶岩11）北京大学医学部天士力微循环研究中心2）北京大学医学部基础医学院中西医结合教研室3）北京大学医学部基础医学院解剖学教研室4）北京大学医学部基础医学院神经科学研究所摘要：养血清脑颗粒（CG）是治疗头痛，眩晕和脑血管疾病的中药复方制剂。
为了阐明CG的临床疗效，本实验研究CG对缺血再灌注造成的大脑微血管结构和功能损伤的改善作用。
138只沙鼠被分为四组，根据研究的不同指标，每组包含36只或者30只沙鼠。
为了观测不同组沙鼠（正常组，缺血再灌注组以及缺血再灌注加给药组）的大脑微循环，我们将麻醉后沙鼠的前囟点前开一颅窗。
用高速摄影机测定连续观察并记录细静脉红细胞流速，用共聚焦显微镜系观察和记录大脑皮层FITC标记白蛋白细静脉渗出动态、细静脉管径和细静脉壁粘附白细胞数，测定细静脉管壁DHR荧光强度以及丙二醛的生成量，用扫描电镜和透射电镜观察皮层微血管超微结构的变化，用激光多普勒观察脑表面血流量。
实验结果表明：CG前给药在0.4g/kg和0.8g/kg剂量下可以显著的减轻缺血再灌注引发的沙鼠大脑微血管的损伤，CG0.4g/kg+缺血再灌注组、CG0.8g/kg+缺血再灌注组和单纯缺血再灌注组白细胞粘附数分别为2.43 ± 0.24、2.28 ± 0.18和6.00 ± 0.35, 白蛋白渗出数分别为2.51 ± 0.40、2.33 ± 0.29和4.77 ± 0.24, DHR荧光强度分别为7.06 ± 0.81、5.93 ± 0.42和28.38 ± 2.70, 丙二醛表达量分别为16.35 ± 0.52、14.34 ± 0.68和21.46 ± 0.71, 大脑皮层血流量分别为0.43 ± 0.07、0.46 ± 0.02和0.17 ±0.08。
激光多普勒测速技术王素红多普勒效应多普勒效应是由于波源或观察者的运动而出现观测频率与波源频率不同的现象。
由澳大利亚物理学家J. Doppler1842年发现的。
声波的多普勒效应在日常生活中，我们都会有这种经验：当一列鸣着汽笛的火车经过某观察者时，他会发现火车汽笛的声调由高变低。
为什么会发生这种现象呢？这是因为声调的高低是由声波振动频率的不同决定的，如果频率高，声调听起来就高；反之声调听起来就低。
这种现象称为多普勒效应。
为了理解这一现象，就需要考察火车以恒定速度驶近时，汽笛发出的声波在传播时的规律.其结果是声波的波长缩短，好像波被压缩了。
因此，在一定时间间隔内传播的波数就增加了，这就是观察者为什么会感受到声调变高的原因；相反，当火车驶向远方时，声波的波长变大，好像波被拉伸了。
光波的多普勒效应当单频的激光源与探测器处于相对运动状态时，探测器所接收到的光频率是变化的。
当光源固定时，光波从运动的物体散射或反射并由固定的探测器接收时，也可观察到这一现象，这就是光学多普勒效应。
它又被称为多普勒-斐索效应，是因为法国物理学家斐索（1819—1896）于1848年独立地对来自恒星的波长偏移做了解释，指出了利用这种效应测量恒星相对速度的办法。
光波与声波的不同之处在于，光波频率的变化使人感觉到是颜色的变化。
如果恒星远离我们而去，则光的谱线就向红光方向移动，称为红移；如果恒星朝向我们运动，光的谱线就向紫光方向移动，称为蓝移。
20世纪20年代，美国天文学家斯莱弗在研究远处的旋涡星云发出的光谱时，首先发现了光谱的红移，认识到了旋涡星云正快速远离地球而去。
1929年哈勃根据光谱红移总结出著名的哈勃定律：星系的远离速度υ与距地球的距离r成正比，即υ = Hr, H 为哈勃常数。
根据哈勃定律和后来更多天体红移的测定，人们相信宇宙在长时间内一直在膨胀，物质密度一直在变小。
由此推知，宇宙结构在某一时刻前是不存在的，它只能是演化的产物. 因而1948年伽莫夫（G. Gamow）和他的同事们提出大爆炸宇宙模型。
TCD及临床应用简介颅内多普勒超声（transcranial Doppler, TCD）是一种非侵入性的检测脑供血状态的技术。
通过利用多普勒效应，可以对颅内动脉的血流速度进行实时监测和定量评估，为临床提供了重要的检测手段。
本文将着重探讨TCD在临床应用中的意义和前景。
脑血流监测TCD作为一种无创、实时、可重复的检测脑供血的方法，广泛应用于脑血流监测领域。
它可以通过监测脑动脉的血流速度和血流阻力指数来评估脑血流状态。
通过TCD检测，我们可以及时发现和诊断脑血管病变，如脑缺血、脑出血等，为临床医生提供了重要的参考依据。
脑卒中临床应用脑卒中是一种常见且严重的脑血管疾病，影响着全球大量人口的生活质量和寿命。
TCD作为一种快速有效的脑血流监测方法，在脑卒中的早期筛查和评估中起到了重要的作用。
通过TCD的使用，我们可以准确测量患者的中大动脉的血流速度和阻力指数，早期发现血流异常，及时采取干预措施，降低患者的病情恶化风险。
脑血管病变评估除了脑卒中，TCD在评估其他脑血管病变方面也有广泛的应用价值。
例如，在评估脑动脉狭窄或闭塞时，TCD可以通过测量前大脑动脉和中大脑动脉的血流速度来确定血管病变的程度和严重程度。
此外，TCD还可以监测脑动脉瘤破裂等血管异常情况，提供重要的诊断依据，为治疗和手术的决策提供支持。
TCD在神经外科手术中的应用TCD在神经外科手术中也有广泛的应用。
通过对颅内动脉的血流速度和阻力指数的监测，可以帮助外科医生监测手术期间的脑血流动力学变化。
在颅内肿瘤切除手术中，TCD可以用来评估术中脑灌注的情况，帮助外科医生决定手术范围和保护脑功能。
结语随着医学技术的不断发展，TCD作为一种方便、经济且有效的脑血流监测方法，在临床应用中发挥着越来越重要的作用。
它可以提供对脑供血状态的准确评估，为临床医生诊断和治疗脑血管疾病提供重要的参考依据。
随着技术的进一步改进和发展，TCD有望在神经科学领域的更多方面实现应用，为研究与临床提供更多有价值的信息。
第31卷第1期济 宁 医 学 院 学 报2008年3月Vol131,No11J OU RNAL O F J ININ G M EDICAL COLL EGE Mar,2008海马额叶局部脑血流灌注异常对学习记忆功能的影响及生化机制Ξ孔令斌1 于德华2 李 浩3(1济宁医学院 2同济大学医学院 3山东大学软件学院)提 要 目的 探讨海马、额叶rC B F灌注异常对学习记忆功能的影响及其发生的生化机制。
方法 将64只雄性健康成年SD大鼠随机分为手术组和假手术组。
两组再分别被随机分为手术A、B、C、D组和假手术A0、B0、C0、D0组,各亚组大鼠分别于实验开始后4h、8h、24h、3d时依次采用“Y型电迷宫”、Peri Fl ux PF3型激光多谱勒血流仪和生化分析仪测定其学习记忆能力、额叶、海马的rC B F及其G A BA、AchE的含量。
比较各手术组和假手术组的学习记忆分值、rCB F量、额叶、海马区G ABA、AchE的含量,并动态观察其不同时间的变化情况。
结果 手术组大鼠的学习指标EN、达标所需日数、TR T(s)分别为52109±8143、0156±0112、14142±0151,明显大于假手术组(29146±5131、0134±0105、12123±0139),而主动回避率(%)63157±6113,明显低于假手术组(84132±4187),两组差异均具有显著性(P<0105)。
手术组大鼠右侧额叶、海马区术后4h、8h、24h、3d时的rCBF明显低于假手术组相应脑区同一时点的rCBF(P<0105)。
手术组大鼠手术后不同时间额叶、海马区Ach E、G ABA含量则较对照组显著升高(P<0105)。
结论 大鼠右侧额叶、右侧海马的rCB F的降低可能是导致其学习记忆能力障碍的重要危险因素;大鼠额叶、海马rCBF的降低所致该脑区G ABA、AchE含量的变化,可能是大鼠学习记忆功能降低的生化基础。
经颅多普勒血流分析仪技术参数和配置
一、性能要求
颅内外血管、椎血管、锁骨下及颈部血管等常规检查、脑血流长程监护、微栓子监测、发泡实验等（双通道）
二、性能参数
硬件要求：
1、计算机一套（WindoWS7及以上系统）中文操作界面，独立TCD硬件，支持外接显示器。
知名品牌彩色激光打印机1台，高清晰图文工作站一套。
2、配备优质的高灵敏度探头2MHz左右手持探头4MHz左右手持探头
3、具备多种探头接口
4、数字化传输多普勒信号
软件要求：
1、具备自动血栓检测功能
2、具备多种报告模板和常用诊断用语，方便编辑报告，具备常规诊断软件（含颅内外血管动力学诊断软件）；设备可以接入医院PACS系统
3、检测参数：Vs、Vd›Vm、PkRLS/D、HR、SBl等
4、可以进行栓子分析并且可以手动添加栓子事件，数据可以再次分析并且可以
手动标示
5、全程多参数记录曲线，TCD报告显示监护曲线和监护图谱
6、自动计时、自动计数、自动去除伪差，智能发泡结果分级
7、具备自动增益功能。
