激光多普勒血流仪优化大鼠全脑缺血再灌注模型

大鼠大脑中动脉缺血再灌注后不同时间点梗死体积的变化王祎媛;方莹莹;周小龙【摘要】目的:在局灶缺血模型中,研究再灌注后0h、6h、24 h、48 h、72 h对大鼠梗死灶体积的影响.方法:将大鼠分为假手术组(sham组)和实验组,实验组在激光多普勒血流仪的监测下进行手术,术后有3分症状的入主,然后随机分为0h组、6h 组、24 h组、48 h组、72 h组.在不同的时间点处死大鼠,行TIC染色,然后计算梗死体积.结果:再灌注24 h之前,随着再灌注时间的延长梗死体积逐渐增大,0～24h,梗死体积变化有显著性差异；但再灌注24 h之后,梗死体积不再发生实质性的增加,24 ～ 72 h,梗死体积无显著性差异.结论:在研究局灶脑缺血梗死体积的实验中,24 h是一个非常重要的时间点.【期刊名称】《赣南医学院学报》【年(卷),期】2012(032)004【总页数】2页(P489-490)【关键词】局灶性脑缺血;梗死体积;时间点【作者】王祎媛;方莹莹;周小龙【作者单位】广东省妇幼保健医院药剂科;南方医科大学基础医学院神经生物教研室,广东广州510010;赣南医学院,江西赣州341000【正文语种】中文【中图分类】R743Abstract:Objective:To study the infarct volum of the brain at different time point(0 h，6 h，24 h，48 h，72 h)after the reperfusion of middle cerebral artery occlusion(MCAO).Methord:The rats were divided into sham group and experiment group，the rats in experiment group were induced MCAO at the monitor of laser Doppler flowmetry，then randomly divided into 0 h group，6 h group，24 h group，48 h group，72 h group at different time point，rats were killed and stained with TTC solution，the infarct volum.Result:Reperfusion before 24 h，the infarct volum is becoming bigger and bigger as the time elapse，but after 24 hours，the infarct volum will not change.Conclusion:In the study of focal cerebral ischemia and infarct volum experiments，the 24h is a very important time point. Key words:MCAO;infarct volum;time point中风以其高发病率、高死亡率、高致残率已经成为严重威胁人类生命与健康的主要疾病之一［1］。

均可下调ＣＲＥＢ的表达而缓解肝纤维化，降低α ＳＭＡ的表达水平，其作用强度与秋水仙碱相当，且其疗效有一定的量效关系。

提示抑制ＣＲＥＢ的活性是ＢＹＧ抗ＥＨＦ的机制之一，至于ＢＹＧ对ｃＡＭＰ／ＰＫＡ／ＣＲＥＢ信号通路其他关键蛋白及其相关的活性因子的影响尚需进一步研究。

【参考文献】［１］　韦凌霞，丁茂鹏，王志旺，等．ｃＡＭＰ／ＰＫＡ／ＣＲＥＢ信号通路调控组织器官细胞纤维化及中医药干预作用的研究进展［Ｊ］．中国现代应用药学，２０２０，３７（８）：１０１９ １０２４．［２］　ＬｉＧＸ，ＪｉａｎｇＱＱ，ＸｕＫＳＨ．ＣＲＥＢｆａｍｉｌｙ：Ａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｒｏｌｅｉｎｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ，２０１９（１６３）：９４ １００．［３］　ＰｏｖｅｒｏＤ，ＢｕｓｌｅｔｔａＣ，ＮｏｖｏＥ，ｅｔａｌ．Ｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓ：ａｄｙｎａｍｉｃａｎｄｐｏｔｅｎｔｉａｌｌｙｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅｐｒｏｃｅｓｓ［Ｊ］．ＨｉｓｔｏｌＨｉｓｔｏｐａｔｈｏｌ，２０１０，２５（８）：１０７５ １０９１．［４］　王志旺，付晓艳，程小丽，等．育阴软肝颗粒剂对肝纤维化大鼠ＴＧＦ β１表达的影响［Ｊ］．中国应用生理学杂志，２０１８，３４（２）：１６９ １７２．［５］　周　滔，刘成海，陈　园，等．气血理论在慢性肝病肝纤维化治疗中的指导作用［Ｊ］．上海中医药大学学报，２００７，２１（２）：３４ ３６．［６］　陈永红，朱正平．朱正平论肝炎病毒的中医病因学属性及治疗切要［Ｊ］．四川中医，２０１２，３０（５）：６ ７．［７］　ＷｅｎＳＪ，ＷｅｉＹＹ，ＺｈａｎｇＸＬ，ｅｔａｌ．Ｍｅｔｈｙｌｈｅｌｉｃｔｅｒｉｌａｔｅａｍｅｌｉｏｒａｔｅｓａｌｃｏｈｏｌ ｉｎｄｕｃｅｄｈｅｐａｔｉｃｆｉｂｒｏｓｉｓｂｙｍｏｄｕｌａｔｉｎｇＴＧＦ β１／Ｓｍａｄｓｐａｔｈｗａｙａｎｄｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．ＩｎｔＩｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０１９，７５：１０５７５９．［８］　何丽明，倪赛宏，傅水莲，等．双去甲氧基姜黄素对硫代乙酰胺诱导小鼠肝纤维化的影响及机制［Ｊ］．中药材，２０１９，４２（２）：４３０ ４３４．［９］　窦慧馨，张得钧．酒精性肝病分子发病机制研究进展［Ｊ］．国际消化病杂志，２０１２，３２（１）：４４ ４７．［１０］ＨｉｎｚＢ，ＣｅｌｅｔｔａＧ，ＴｏｍａｓｅｋＪＪ，ｅｔａｌ．Ａｌｐｈａ ｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｓｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｃｏｎｔｒａｃｔｉｌｅａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．ＭｏｌＢｉｏｌＣｅｌｌ，２００１，１２（９）：２７３０ ２７４１．［１１］ＳｈａｒｍａＮ，ＬｏｐｅｚＤＩ，ＮｙｂｏｒｇＪＫ．ＤＮＡｂｉｎｄｉｎｇａｎｄｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅｋｉｎａｓｅ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｄｏｍａｉｎｏｆＣＲＥＢ［Ｊ］．ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ，２００７，２８２（２７）：１９８７２ １９８８３．［１２］ＹａｎｇＹＲ，ＷａｎｇＨ，ＬｖＸＷ，ｅｔａｌ．ＩｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔｏｆｃＡＭＰ ＰＫＡｐａｔｈｗａｙｉｎａｄｅｎｏｓｉｎｅＡ１ａｎｄＡ２Ａｒｅｃｅｐｔｏｒ ｍｅｄｉａｔｅｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆａｃｅｔａｌｄｅｈｙｄｅ ｉｎｄｕｃｅｄａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆＨＳＣｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ，２０１５，１１５：５９ ７０．［１３］ＷａｎｇＱ，ＤａｉＸＦ，ＹａｎｇＷＺｈ，ｅｔａｌ．Ｃａｆｆｅｉｎｅｐｒｏｔｅｃｔｓａｇａｉｎｓｔａｌｃｏｈｏｌ ｉｎｄｕｃｅｄｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓｂｙｄａｍｐｅｎｉｎｇｔｈｅｃＡＭＰ／ＰＫＡ／ＣＲＥＢｐａｔｈｗａｙｉｎｒａｔｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＩｎｔＩｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０１５，２５（２）：３４０ ３５２．大鼠脑缺血／再灌注过程中血流量和脑组织含水量的变化趋势张　冉１，马梦尧１，苏欣宇１，孟　想１，姜鲲鹏１，李　曙１△，洪　云２（１．皖南医学院病理生理学教研室，安徽芜湖２４１００２；２．皖南医学院弋矶山医院超声医学科，安徽芜湖２４１００１）【摘要】　目的：研究大鼠脑缺血／再灌注过程中血流量及与脑组织水含量变化的趋势。

线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型的改进1 材料与方法1. 1 实验动物与分组成年健康雄性Wistar 大鼠110 只, 体质量250～300 g ,由山东省医学科学院动物中心提供。

分别应用Zea Longa 法、刘亢丁法及改良法建立脑缺血再灌注模型各35 只;假手术组5 只。

均为缺血2 h 再灌注24 h 取材。

1. 2 改良法建立脑缺血再灌注模型在Zea Longa 线栓法建立MACO 再灌注动物模型的基础上进行了改良。

具体改良要点如下:术中垫高大鼠颈部,小针管吸痰;在分离颈动脉鞘过程中滴少许5 g/ L 普鲁卡因;选择直径0. 28 mm 的尼龙线直接涂硅胶长约0. 5 cm 使其直径为0. 30 mm (勿烧成圆头) ;显露翼腭突动脉不结扎,在插线过程中当尼龙线进入颈内动脉时,将颈内动脉轻轻拉紧,先向外旋转15°～20°再向后旋转10°～15°,术中用灯泡照射保持肛温36～37 ℃。

1. 3 动物模型成功的评价标准1. 3. 1 神经功能评分采用Longa 等[4 ] 的方法在术后24 h 进行5 级制评分。

评分标准:1 级(0 分) 无神经缺损体征;2 级(1 分) 不能充分屈曲对侧前爪;3级(2 分) 向麻痹侧转;4 级(3 分) 向麻痹侧倾倒;5 级(4 分) 不能自发行走,意识丧失。

1. 3. 2 梗死灶及脑水肿的测量断头取脑,四氮唑( TTC) 染色后正常组织呈红色,梗死组织呈白色。

间隔7μm 作连续冠状切片,测量皮质区、基底核区和两侧大脑半球的面积[5 ] ,通过数学处理计算梗死的体积。

2 结果3 种方法的手术时间、动物死亡率、神经功能评分、梗死体积结果见表1 。

由表1 可知,改良法的手术时间短、动物死亡率低、神经缺失体征明显、梗死灶固定( t = 2. 3～6. 7 ,χ2 = 4. 69 、4. 19 , P < 0. 05) 。

大鼠脑干缺血再灌注模型制备—脑干缺血再灌注损伤病理和脑干血流变化目的：脑干缺血再灌注模型的建立对于脑干缺血损伤及再灌注损伤的病理，病生理及药理学研究具有重要意义。

目前国内外文献对此模型的研究鲜有报道，以往对于脑干缺血的研究只停留在脑干持续缺血后一系列病生理，电生理及生化等方面，并且多集中于犬、猴等大型动物。

因此我们尝试应用大鼠制作脑干缺血再灌注模型，对再灌注后早期的病理，病生理进行了观察，并且观察了夹闭前后和再灌注前后脑干血流的变化。

方法：雄性wistar大鼠，分为再灌注组，夹闭组和假手术组。

于大鼠基底动脉(BA)第一无分支区和第二无分支区分别应用微型动脉夹夹闭若干时间后再行开放来制作缺血再灌注模型；缺血组只夹闭BA不予开放；而假手术组只暴露BA。

观察大鼠BA夹闭再通后的神经症状。

应用TTC(2，3，5-氯化三苯基四氮唑)染色确定缺血范围及程度。

分别在BA 夹闭后0.5h，1h，2h，3h，6h及再灌注1h后取脑干组织进行光镜观察。

应用激光多普勒技术测量基底动脉夹闭前后以及再通后的血流值。

应用统计软件SPSS(10.0版)对相关数据进行统计学处理及分析。

结果：两点夹闭基底动脉后大鼠出现不同程度的呼吸不规则、抽搐、呃逆、瞳孔扩大或缩小、对光反应减弱、肢体瘫痪及昏睡等症状，随着血管的再通，这些症状并没有减轻。

TTC染色显示于第一、第二无分支区夹闭基底动脉后，缺血范围主要集中在脑桥和延髓上部。

基底动脉闭塞后，脑干组织血流量较闭塞前明显减少，再通后血流量与闭塞前基线值并不一致，夹闭时间0.5h、1h和1.5h组的血流量较基线值高，而2h和3h组的再通后血流量较基线值低。

光镜结果：夹闭0.5h未见组织缺血，可见组织出血，再灌注后可见明显的血管扩张充血及血管周围出血；夹闭1h未见组织缺血损伤；夹闭2h，可见缺血分界区，缺血区可见组织水肿，染色浅淡，部分神经元胞膜增厚、皱缩、核仁浓染，轻度髓鞘脱失，再灌注后，浅染区较闭塞组减少，髓鞘脱失不明显，但有明显的血管扩张出血和少量组织出血；夹闭3h，可见明显的缺血分界区，缺血中心区组织水肿、浅染、间隙增大，神经元有明显的缺血损伤，胞体出现空泡现象，尼氏体减少或消失，细胞皱缩等，可见轻度髓鞘脱失，再灌注后缺血损伤程度减轻，可见明显的出血现象；夹闭6h，缺血区明显扩大，有时可由腹侧延伸至背侧，缺血中心区出现神经元固缩和变性坏死，边缘区可见神经元胞体皱缩、尼氏体减少，髓鞘脱失严重，再灌注后缺血范围未见明显减小，并可见组织出血，髓鞘脱失严重，部分缺血区内可见白细胞浸润。

全脑缺血再灌注动物模型建立方法引言全脑缺血再灌注是一种临床上常见的危重症，常见于心脏骤停、溺水等情况下，出现全脑缺血缺氧，随后通过复苏措施进行再灌注。

建立全脑缺血再灌注动物模型对于深入研究相关疾病的发病机制，评估治疗方法具有重要意义。

本文将介绍一种常用的全脑缺血再灌注动物模型的建立方法。

动物模型选择建立全脑缺血再灌注模型时，主要选择小鼠或大鼠作为实验动物。

一般情况下，小鼠更为常用，因其易于操作、成本较低，且其脑血管结构与人类相似，因此具有较高的可比性。

对于大鼠，其相对较大的体积能够更好地模拟人体情况，但操作相对较为复杂。

手术操作准备在进行全脑缺血再灌注动物模型的建立前，需要进行手术操作的准备工作。

首先需要进行动物的麻醉和固定，确保手术操作的安全性。

其次需要准备全脑缺血再灌注模型所需的仪器和设备，包括导管、监测仪器等。

在手术操作前，还需要对实验动物进行术前处理，包括禁食、定时给予抗生素等。

手术操作步骤1. 麻醉和固定：将实验动物置于麻醉箱内，使用合适的麻醉药物使其达到麻醉状态。

随后将其固定在手术台上，以确保手术操作的稳定性。

2. 手术部位暴露：在麻醉状态下，对实验动物进行皮肤消毒，随后进行手术部位的切开，暴露出颅骨表面。

3. 血管结扎：通过显微外科手术操作，对实验动物的颅骨表面的动脉和静脉进行结扎，以模拟全脑缺血的状态。

4. 缺血时间控制：根据实验设计的需要，控制全脑缺血的时间，一般为15至20分钟。

5. 再灌注：在全脑缺血一定时间后，通过解开血管结扎，使血液重新灌注至大脑。

6. 术后处理：对实验动物进行术后处理，包括给予液体、保暖、饲养等。

检测指标和评价方法建立全脑缺血再灌注模型后，需要对实验动物进行一系列的检测和评价，以评估其神经功能恢复情况。

常用的评价指标包括神经行为学评分、脑组织病理学检测、神经元凋亡检测、脑组织炎症因子检测等。

通过对这些指标的检测和评价，可以全面地评估全脑缺血再灌注模型的建立效果，为后续的实验研究提供可靠的依据。

关于两种方法制作大鼠大脑中动脉栓塞再灌注模型比较【摘要】目的制作短暂性大鼠大脑中动脉栓塞再灌注模型，比较颈总动脉进线法和颈外动脉进线法(改良LONGA法)优劣。

方法颈总动脉进线法和改良LONGA法栓塞大鼠大脑中动脉，栓塞2 h后再灌注24 h，以LONGA法标准对模型评分，并对梗死体积进行测定， 7 d时流式细胞仪检测细胞凋亡情况。

结果改良LONGA 法和颈总动脉进线法神经行为学评分分别为2.30±0.82和1.00±0.63，两种方法比较差异有显著性（t=6.886，P<0.05）；两法脑梗死体积相比差异有显著性(t=3.96～4.45，P<0.05)；两法细胞凋亡率比较差异有显著性（F=348.46，q=22.89，P<0.05）。

结论与颈总动脉进线法相比，改良LONGA法大鼠神经行为学评分高、脑梗死体积大、凋亡细胞数多，模型稳定性好。

【关键词】脑中动脉；再灌注损伤；细胞凋亡；大鼠［ABSTRACT］ Objective To make a transient middle cerebral artery occlusion model in rats， and to compare the methods of occlusion of common carotid artery and LONGA’s technique. Methods The cerebral artery occlusion was obtained via blockage of either common carotid artery (CCA) or external carotid artery (modified LONGA’s group). After two hours of artery occlusion and 24 hours of reperfusion， the rats were evaluated by LONGA’s score standard. The volume of cerebral infarction was estimated by TTC staining. The number of apoptotic cells was detected by flow cytometry after seven days of occlusion. Results The neurological behavior scorings in modified LONGA’s group and CCA group were 2.30±0.82 and 1.00±0.63， respectively (t=6.886，P<0.05). The infarction volume between the two groups was significantly different (t=3.96-4.45，P<0.05). The number of apoptotic cells was significantly different between the two groups (F=348.46，q=22.89，P<0.05). Conclusion Compared with the CCA occlusion group， the neurological behavior scoring of modified LONGA’s group was higher， the infarction volume was larger， the number of apoptotic cells was greater， and thestability was better.［KEY WORDS］ Middle cerebral artery; Reperfusion injury; Apoptosis; TTC staining; Rats大脑中动脉栓塞再灌注模型是局灶性脑缺血的标准模型。

大鼠四血管阻断全脑缺血模型探讨作者：blue_snowlotus近年来，利用啮齿类动物复制全脑缺血模型，在缺血性脑损伤的研究中，特别是在海马缺血选择性易损性的研究等方面应用较为广泛。

该模型的共同特点是缺血能暂时广泛的影响各个脑区，但病理改变多发生在选择性易损区域，这在治疗药物的开发研究上应用较多。

我做的是大鼠四血管阻断法全脑缺血模型，因此在此主要探讨大鼠四血管阻断全脑缺血模型。

大鼠四血管阻断全脑缺血模型：即双侧椎动脉和双侧颈总动脉阻断，方法有很多，比较公认的是Pulsinelli法，适用于脑缺血的急性和慢性实验研究。

该方法需要做两步手术，具体方法是：大鼠10%水合氯醛（300mg/kg,ip）麻醉后，俯卧位固定，在枕骨后切开皮肤，暴露第一颈椎两侧的翼小孔，用尖端直径为0.5mm的电凝器插入翼孔，烧灼双侧的椎动脉，造成永久性闭塞。

待动物适应24h 后，在颈部正中切口，暴露双侧颈总动脉，用动脉夹夹闭阻断，10-15min后松开动脉夹可恢复血流，进行再灌注实验，以大脑皮层、纹状体和海马缺血最为明显。

模型制作的关键步骤是凝断双侧椎动脉，有些大鼠翼孔很小，电凝器根本插不进去，可以用牙科微型小磨钻，将翼孔扩大，直视下用电凝器凝断双侧椎动脉，用磨钻扩大翼孔也要注意，容易损伤椎动脉造成出血。

另外，电凝针插入翼孔的角度也要掌握好，向外下（约于大鼠脊柱正中线呈50度角）插入翼孔，不然容易损伤脊髓。

高血糖可加重脑损伤，增加梗塞面积1.4倍，所以做手术前大鼠禁食12h.还可以防止麻醉过程中呕吐物窒息呼吸道。

另外在实验过程中需注意控制脑温，因为脑温每降低10℃，大脑代谢率可降低50％。

一般控制在37℃±0.3℃。

判断模型成功的标准很多，最客观的指标应该是多普勒血流检测仪，探头安置于右侧顶叶皮质，深度l mm，监测局部脑血流，一般夹闭颈总动脉后脑血流降低大于5O为模型成功。

国内多用的指标是脑电图的检测，银制电极固定于前囟后，中线旁2mm，参考电极可置于对侧对称部位，夹闭颈总动脉30s后脑电图即有变化，逐渐变为等电位线，以脑电图变为等电位线为模型成功标准。

电针对大鼠脑缺血再灌注后局部脑血流量的影响曾超;刘喆;王改梅【摘要】目的观察电针百会、大椎对大鼠脑缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)后不同时间点局部脑血流量(regional cerebral blood flow,rCBF)的影响.方法采用激光多普勒血流仪器记录大鼠缺血前、缺血即刻、再灌注即刻和再灌注不同时间(处死前)4个时相的rCBF.结果通过对4个时相的rCBF观察,缺血前各组之间无明显差异;缺血即刻各组大鼠rCBF均较假手术组和相应同组的缺血前降低;再灌注即刻各组(除假手术组外)均比相应同组缺血即刻的均值升高;再灌注不同时间各组(除假手术组外)均比相应同组再灌注即刻的均值有不同程度的升高,并且同时相的药物组、电针组比模型组有不同程度的升高.结论电针可以提高I/R损伤后大鼠的脑血流值,并且电针的时间不同提高的程度有所不同.【期刊名称】《上海针灸杂志》【年(卷),期】2012(031)006【总页数】3页(P441-443)【关键词】电针;脑缺血再灌注;脑血流量;大鼠【作者】曾超;刘喆;王改梅【作者单位】浙江中医药大学附属第三医院,杭州310005;浙江中医药大学附属第三医院,杭州310005;浙江中医药大学附属第三医院,杭州310005【正文语种】中文【中图分类】R2-03缺血性脑卒中是威胁人类健康与生存的主要疾病之一,具有死亡率、致残率高的特点,是目前重点防治的一种疾病[1]。

临床上处理缺血性脑损伤的原则是尽早恢复血液再灌注,使缺血脑组织重新得到氧的供应,提供代谢所必需的营养物质并清除代谢废物。

然而近年来发现[2],缺血后的血流恢复在某些情况下能导致进一步的组织损伤,降低局部脑血流量(regional cerebral blood flow, rCBF),这种恢复血流灌注后的有害情况称为缺血再灌注损伤,抑制再灌注损伤,成为目前治疗缺血性脑卒中的关键环节。

本实验通过观察电针治疗 ischemia/reperfusion(I/R)模型大鼠,对大鼠rCBF的影响,研究电针对急性局部脑缺血的治疗效果并探讨其作用机理。

激光多普勒血流仪评价活体大鼠大脑中动脉栓塞模型成功的可行性分析刘宇;孟然;闫峰;罗玉敏;吉训明【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2011(027)003【摘要】目的:探讨激光多普勒血流仪(LDF)评价活体大鼠脑缺血/再灌注损伤模型制作成功的可行性和可靠性分析.方法:10只体重280-310 g的雄性SD大鼠用传统线栓法制作单侧大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,神经功能评分,LDF监测插栓前后大鼠脑血流动态变化.于缺血2 h和再灌注24 h断头取脑,TTC染色检测脑片梗死灶体积.结果:基线血流均值为(224.99±75.00)PU,局灶神经功能障碍评分0分.插栓成功MCAO模型,缺血2 h血流均值为(67.23±6.90)PU,与基线血流差值为157.76PU,降幅约为70%(P＜0.01),差异显著.拔拴后血流均值为(216.01±7.30)PU,与缺血2 h血流差值为148.78PU(P＜0.01),差异显著;与基线血流差值为-8.98PU(P＞0.05),无显著差异.再灌注24 h后,局灶神经功能障碍评分10.35分,脑片TTC染色显示梗死及水肿灶.插栓不成功模型LDF监测显示仍有血流通过,降幅少于基线的50%,再灌注24 h后,局灶神经功能障碍评分0分,TTC染色未见梗死灶.结论:LDF对大鼠脑血流的监测是除神经功能评分以外另一种判断活体大鼠MCAO 模型制作成功的可靠而实用的方法.【总页数】5页(P620-624)【作者】刘宇;孟然;闫峰;罗玉敏;吉训明【作者单位】北京大学第九临床医学院,北京世纪坛医院神经内科,北京,100038;北京大学第九临床医学院,北京世纪坛医院神经内科,北京,100038;首都医科大学宣武医院脑血管病研究所,北京,100053;首都医科大学宣武医院脑血管病研究所,北京,100053;首都医科大学宣武医院脑血管病研究所,北京,100053【正文语种】中文【中图分类】R331【相关文献】1.激光多普勒血流仪在大鼠脑缺血再灌注模型制作中的应用效果评价 [J], 郭伟;冯国营;苗艳英;许晓博;张连双;刘桂香;许春胜2.激光多普勒血流仪优化大鼠全脑缺血再灌注模型 [J], 杨彬;余丽娟;王佳;赵磊;胡馨月;纪超男;魏玉玲;阳群芳;蒋青松3.激光多普勒血流仪在改良大鼠颈动脉狭窄模型中的应用 [J], 陈实;余文珍;刘盛泽;张永亮;刘丽娜;肖颖4.大鼠大脑中动脉栓塞模型的复制与评价 [J], 陈珍5.激光多普勒血流仪评价鹿茸对于动脉硬化大鼠的影响 [J], 李子娟;韩杰;王雁彬;李廷荃因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

双调蛋白对大鼠局灶性脑缺血-再灌注的影响钟政;王思露;姚雪芹;李清;王贤裕【摘要】目的观察双调蛋白(Areg)经侧脑室注射对大鼠局灶性脑缺血-再灌注(I/R)损伤的影响,并探讨其可能机制. 方法取3个月龄健康雄性清洁级SD大鼠共96只,采用随机数字表法分为6组,每组16只.假手术组:只暴露颈总动脉及分叉处;I/R组:制作I/R模型;溶剂对照组:侧脑室注射标准蛋白质溶液(5 μl);Areg组:侧脑室注射Areg(2 μg/5 μl);AG1478组[AG1478,Areg的受体表皮生长因子受体(EGFR)的阻断剂]:侧脑室注射AG1478(2.5 μg/5 μl);Areg复合AG1478 (AAG)组:侧脑室给予AG1478(2.5 μg/5 μl),30 min后,再给予Areg(2 μg/5 μl).上述后4组在给药30 min后制备局灶性脑I/R损伤模型.再灌注24 h后,比较各组之间脑梗死体积、神经行为学评分及脑组织凋亡细胞数量变化;再灌注6 h后检测缺血脑组织内EGFR 及蛋白激酶B(Akt)的磷酸化水平. 结果与假手术组比较,I/R组的脑梗死体积、脑组织凋亡细胞数量明显增加,神经行为学评分降低(均P<0.05).与I/R组比较,Areg组的脑梗死体积、脑组织凋亡细胞数显著降低,神经行为学评分明显增加,EGFR和Akt的磷酸化水平明显增高(均P<0.05).与I/R组比较,AG1478组的脑梗死体积、细胞凋亡数量增加,EGFR和Akt的磷酸化水平降低(均P<0.05);与Areg组比较, AG1478组和AAG组的脑梗死体积、细胞凋亡数明显增加,EGFR和Akt的磷酸化水平、神经行为学评分明显降低(均P<0.05). 结论 Areg通过激活EGFR-Akt信号通路减少缺血脑组织的梗死体积、改善神经功能、抑制细胞凋亡,对I/R脑损伤具有一定的保护作用.%Objectives To observe the effect of amphiregulin (Areg) via lateral ventricle injection on focal cerebral ischemia/reperfusion (I/R) injury in rats and to investigate its possible mechanism. Methods A total of 96 3-month old health specified pathogen free SD rats were randomlydivided into 6 groups (n=16 in each group):sham operation group (sham group),only exposure of common carotid artery and bifurcation;I/R group,making I/R model;solvent control group,lateral ventricle injection of standard protein solution(5 μl);Areg group,lateral ventricle injection of Areg(2 μg/5 μl);AG1478 group [AG1478,a blocker of Areg receptor epidermal growth factor receptor(EGFR),lateral ventricle injection ofAG1478 (2.5 μg/5 μl);Areg combined AG1478 (AAG) group,lateral ventricle giving AG1478 (2.5 μg/5 μl),and then giving Areg (2 μg/5 μl) after 30 mm.The model of focal cerebral I/R injury was induced after 30 min administration of the above last 4 groups.After 24 h of reperfusion,the volume of cerebral infarction, the neurobehavioral score and the number of apoptotic cells in the brain tissue were compared among the groups. After 6 h of reperfusion,the phosphorylation levels of EGFR and protein kinase B(Akt)in ischemic brain tissue were detected. Results Compared with the sham group,the cerebral infarction volume and the number of apoptotic cells in brain tissue were increased significantly,while the neurobehavioral score was decreased(all P<0.05).Compared with the I/R group,the volume of cerebral infarction,the number of apoptotic cells in the brain tissue were decreased significantly,and the neurobehavioral score was increased in the Areg group,the levels of EGFR and Akt phosphorylation were significantly higher (all P <0. 05). Compared with the I/R group,the volume of cerebral infarction and the number of apoptotic cells of the AG1478 group were increased,the levels of EGFR and Akt phosphorylation were decreased(all P<0.05);Compared with the Areggroup,the volume of cerebral infarction and the number of apoptotic cells of the AAG group and AG1478 group were increased significantly,and the levels of EGFR and Akt phosphorylation were decreased significantly(allP<0.05). Conclusions Areg reduces the infarct volume in ischemic brain tissue,improves nerve function,and inhibits apoptosis by activating EGFR-Akt signaling pathway. Therefore,it has some protective effect for cerebral I/R injury.【期刊名称】《中国脑血管病杂志》【年(卷),期】2018(015)002【总页数】6页(P83-88)【关键词】脑缺血;再灌注损伤;细胞凋亡;受体,表皮生长因子;双调蛋白;大鼠【作者】钟政;王思露;姚雪芹;李清;王贤裕【作者单位】442000 湖北医药学院附属医院(十堰市太和医院)麻醉科湖北医药学院麻醉学研究所;442000 湖北医药学院附属医院(十堰市太和医院)麻醉科湖北医药学院麻醉学研究所;442000 湖北医药学院附属医院(十堰市太和医院)麻醉科湖北医药学院麻醉学研究所;442000 湖北医药学院附属医院(十堰市太和医院)麻醉科湖北医药学院麻醉学研究所;442000 湖北医药学院附属医院(十堰市太和医院)麻醉科湖北医药学院麻醉学研究所【正文语种】中文缺血性卒中是病死率极高的急性神经系统疾病，即使从该疾病中存活下来的患者其身心健康也受到了严重损害[1]。

大鼠全脑缺血模型制备方法评价二血管阻断法阻断双侧颈总动脉（ common该法手术简便易于操作，成功carotid artery ， CCA ）率高。

加动脉放血造成低血压而形缺点：仅形成不完全脑缺血，成前脑缺血。

若单纯结扎造成的低血压严重干扰其双侧 CCA 而不降低血压，则他器官的血供及实验结果；不难以使脑血流量（ cerebral能在动物清醒状态下进blood flow ， CBF ）降低至缺行，无法进行神经行为学的观血和能量代谢紊乱的程度。

察。

因此，该模型对探讨缺血性脑损伤的发病机制、评价抗脑缺血药物的疗效更有价值。

颅内加压法小脑延池内注入人工脑脊液，使颅内压升高超过动脉血压 2.7~9.3 kPa （ 1 kPa≈0.133 mmHg ），同时给予神经节阻滞剂三甲噻方，防止颅内高压反射性引起高血压。

颈部加压法麻醉动物，颈部套一止血带，加压至 80~93 kPa，减少脑血流量，造成脑缺血。

断头法断头造成全脑不可逆缺血，取下脑组织冰冻贮存，常用于生化和代谢分析。

低氧法结扎单侧 CCA 合并全脑缺氧， PaO2 维持在 2.8 kPa。

由于脑部不是真正的缺血，采用这一模型得到的结论不适用于脑缺血，但可比较缺氧与脑血流量减少引起效应的不同。

胸内血管夹闭法开胸，夹闭左侧 CCA 、头臂干、左侧锁骨下动脉，造成全脑缺血。

大鼠局灶性脑缺血模型制备方法栓塞法颈动脉注射血凝块栓复制栓塞性脑卒中模型的方法过去只用在中型体积动物，现已在大鼠中应用。

Kudo 等［ 12］采用 <100 μm 的同源血凝块栓悬液，注入CCA ，在颈外动脉（externalcarotid artery ， ECA ）的颈内动脉（ internal carotid artery ，ICA ）开口处置一可逆性插管，栓子则由 ICA 进入 MCA ，导致同侧大脑皮层、海马、深层灰质结构的梗塞。

也有人用碳素颗粒、花生四烯酸钠作为栓塞剂制成脑梗塞模型。

大鼠脑干缺血再灌注模型制备—脑干缺血再灌注损伤病理和脑干血流变化的开题报告
一、研究背景
脑干缺血是指由于脑干区域的缺血缺氧所引起的一系列病变和生理功能障碍，其病理机制复杂，临床常常导致患者死亡或重度残疾。

为了探究脑干缺血的发生机制及治疗方法，建立动物模型来模拟临床情况已成为研究该领域的重要手段。

二、研究目的
本研究目的是通过建立大鼠脑干缺血再灌注模型，观察脑干缺血再灌注损伤病理和脑干血流变化，为进一步研究脑干缺血的发生机制及治疗方法提供实验依据。

三、研究内容
1. 建立大鼠脑干缺血再灌注模型：选用健康雄性Sprague-Dawley 大鼠，按照常规的手术操作方法，暴露脑干，通过中颅窝钻孔或颅骨钻孔将大鼠脑干缺血1小时，再进行再灌注，模拟临床脑干缺血再灌注的情况。

2. 观察脑干缺血再灌注损伤病理：取出大鼠脑干，对组织进行病理切片，HE染色，观察神经元坏死和炎症细胞浸润情况。

3. 检测脑干血流变化：采用多普勒超声技术，对大鼠脑干血流变化进行监测和记录，观察在脑干缺血再灌注过程中血流的变化情况。

四、研究意义
本研究的建立大鼠脑干缺血再灌注模型，可以模拟临床脑干缺血再灌注损伤的情况，为这类疾病的研究提供实验依据。

观察脑干缺血再灌
注损伤病理和脑干血流变化，有助于了解脑干缺血再灌注的病理机制，为进一步寻找治疗方法提供理论依据。