CPP酪蛋白磷酸肽
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高效液相色谱法检测婴幼儿配方乳粉中酪蛋白磷酸肽魏敏,李兴佳,柴艳兵,李飞,刘丽,张耀广*(石家庄君乐宝乳业有限公司,农业农村部乳品质量安全控制重点实验室,河北石家庄 050021)摘 要:建立一种高效液相色谱法检测婴幼儿配方乳粉中酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptides,CPP)含量的方法。
对3 种样品前处理方法及2 种上机条件进行优化,确定最优条件。
结果表明:最优前处理条件为用盐酸(1 mol/L)调节乳粉样品溶液pH 4.6后用水转移至50 mL容量瓶中,用滤纸过滤后作为待测液;上机检测时用0.05%三氟乙酸-0.05%乙腈作为流动相体系进行梯度洗脱;样品加标回收率为94.50%~95.45%,线性良好(R2=0.999 8),方法检出限为2.0 mg/100 g。
该方法样品前处理简单、稳定性和可靠性好,检测结果满足线性、精密度、准确度及检出限要求,可用于婴幼儿配方乳粉中CPP含量的测定。
关键词:婴幼儿配方乳粉;高效液相色谱法;酪蛋白磷酸肽Determination of Casein Phosphopeptides in Powdered Formulae for Infants and Young Children byHigh Performance Liquid ChromatographyWEI Min, LI Xingjia, CHAI Yanbing, LI Fei, LIU Li, ZHANG Yaoguang*(Key Laboratory of Dairy Quality and Safety Control, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Shijiazhuang Junlebao Dairy Co. Ltd.,Shijiazhuang 050021, China)Abstract: An analytical method was developed for the determination of casein phosphopeptides (CPP) in powdered formulae for infants and young children by high performance liquid chromatography. Three pretreatment methods and two operating conditions were optimized. The results showed that the optimal pretreatment conditions were as follows: transferring samples to a 50 mL volumetric flask after pH adjustment to 4.6 with 1 mol/L hydrochloric acid, and then filtering them through a filter paper. The chromatographic separation was carried out by gradient elution using 0.05% trifluoroacetic acid as mobile phase A and 0.05% acetonitrile as mobile phase B. The spiked recovery was between 94.50% and 95.45%, good linearity was observed with R2 = 0.999 8, and the detection limit was 2.0 mg/100 g. The method had the advantages of simple sample pretreatment as well as good stability and reliability, and the results from this method met the requirements in terms of linearity, recovery, accuracy, precision and detection limit. Thus it could be used to determine the content of CPP in powdered formulae for infants and young children.Keywords: powdered formulae for infants and young children; high performance liquid chromatography; casein phosphopeptidesDOI:10.15922/ki.jdst.2019.05.005中图分类号:TS252.7 文献标志码:A 文章编号:1671-5187(2019)05-0021-04引文格式:魏敏, 李兴佳, 柴艳兵, 等. 高效液相色谱法检测婴幼儿配方乳粉中酪蛋白磷酸肽[J]. 乳业科学与技术, 2019, 42(5): 21-24. DOI:10.15922/ki.jdst.2019.05.005. WEI Min, LI Xingjia, CHAI Yanbing, et al. Determination of casein phosphopeptides in powdered formulae for infants and young children by high performance liquid chromatography[J]. Journal of Dairy Science and Technology, 2019, 42(5): 21-24. DOI:10.15922/ki.jdst.2019.05.005. 收稿日期:2019-06-12基金项目:“十三五”国家重点研发计划重点专项(2018YFC1604302)第一作者简介:魏敏(1983—)(ORCID: 0000-0002-8753-8633),女,中级工程师,本科,研究方向为乳品质量与安全。
酪蛋白磷酸肽(CPP)对大鼠钙吸收利用的影响张亚非;周羽并;吴凤兰;张明珠;张纫华;于江虹【期刊名称】《营养学报》【年(卷),期】1994(16)1【摘要】酪蛋白磷酸肽(CPP)是从牛奶中提取出的一种多肽制品,在中性和弱碱性的环境下可提高钙的溶解度和钙溶液的稳定性。
将CPP按0.5%和0.2%浓度分别加入大鼠基础饲料和低钙饲料中,并设一组含5%脱脂奶粉为阳性对照。
每组10只断乳大鼠,进行四周生长试验和三天代谢试验。
结果表明,基础饲料添加0.5%CPP组的大鼠钙吸收率和钙储留率比对照组升高6%左右,差别有显著性意义。
低钙饲料添加0.2%CPP亦使钙吸收率和储留率增加5%~6%,差别有非常显著的意义(P<0.01)。
奶粉的钙吸收率和利用率在各组中最高。
CPP作为促进钙吸收利用的食品添加剂有进一步研究应用的前景。
【总页数】5页(P73-77)【关键词】酪蛋白磷酸肽;钙代谢【作者】张亚非;周羽并;吴凤兰;张明珠;张纫华;于江虹【作者单位】暨南大学医学院营养学教研室,广州轻工研究所【正文语种】中文【中图分类】R151.2【相关文献】1.酪蛋白磷酸肽(CPP)对铁吸收影响的研究 [J], 牟光庆;鹿保鑫;王新;张丽萍2.酪蛋白磷酸肽(CPP)对生长期大鼠骨密度的影响 [J], 生庆海;耿倩;邱泉若3.使用酪蛋白磷酸肽-无定形磷酸钙(CPP-ACP)改良新型夜间牙齿漂白术的初步临床报告 [J], Boniek Castillo Dutra Borges;Adriana Alcantara Meira de Vasconselos;Ana Gabriela Gama Cunha;Fabio Henrique de Sa Leitao Pinheiro;Claudia Tavares Machado;Alex Jose Souzados Santos;刘若宇4.酪蛋白磷酸肽(CPP)对生长期大鼠骨密度及神经肽Y表达的影响研究 [J], 王素星; 魏金刚5.酪蛋白磷酸肽(CPP)与钙、铁营养研究进展 [J], 段俊红;王之盛;周安国因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
酪蛋白磷酸肽的结构特性及营养功能研究进展>以植物性饲料为主的动物饲粮中含有大量的植酸、草酸等成分,在小肠下端pH7~8环境下易与钙结合生成难溶性沉淀,削减钙的汲取,导致各类动物缺钙的发生。
假如饲粮中钙的浓度过高,产蛋母鸡对其消化汲取(肯定与相对两者)降低。
协作饲料中添加过量钙不仅降低动物食欲,削减采食量,且过量钙可抑制微量元素(锌、锰、铁以及可能有铜)的汲取,并干扰磷的消化汲取[1]。
故导致动物钙缺乏的主要养分原因是汲取率低下,解决的主要途径是增加钙的汲取率,而不应盲目提高日粮中钙的含量。
增加钙的汲取率的关键在于增加肠道中离子态钙的数量,而来源于牛乳蛋白的酪蛋白磷酸肽(CaseinPhosphopeptides,CPPs)由于具有阻挡钙离子在肠道形成沉淀和促进钙及其它二价矿物离子汲取的功能而备受关注。
本文拟对酪蛋白磷酸肽(CPPs)的来源、分子结构、养分生理作用、作用机理及在动物养殖中的应用前景作一综述。
1酪蛋白磷酸肽(CPPs)的来源与结构酪蛋白占牛乳总蛋白的80%,含有αs1、αs2、β和к-酪蛋白四种主要成分,其比例为34:8:33:9,一级结构均已精确测定。
α和β酪蛋白含有高含量的磷酸丝氨酰残基,其中αs酪蛋白氨基酸残基数为199,含8个磷酸丝氨酰基,β-酪蛋白由209个氨基酸残基构成,含5个磷酸丝氨酰基。
Hiroshi等(1974)[2]用动物试验表明,酪蛋白可在动物肠道内形成CPPs并确定其结构为SerP-SerP-SerP-Glu-Ile-Pro-Asn。
Nicholas等(1974)[3]用胰蛋白酶水解酪蛋白,经过精制、纯化得到CPPs,其核心结构为:-SerP-SerP-SerP-Glu-Glu-。
CPPs结构中的磷酸丝氨酰残基(-Ser(P)-)成簇存在,在肠道pH弱碱性环境下带负电荷,可阻挡消化酶的进一步作用,使CPPs不会被进一步水解而在肠中稳定存在。
这些氨基酸的负电荷侧链,尤其是磷酸基团是矿物质结合的位点。
天然功能性食品添加剂——酪蛋白磷酸肽
沈国强
【期刊名称】《中国高校科技与产业化》
【年(卷),期】2000(000)010
【摘要】酪蛋白磷酸肽(CPP)是由牛乳酪蛋白通过生物技术制得的一种新型功能性食品添加剂,它具有促进人体吸收钙的生理活性。
由于在人的小肠下部pH一般呈中性到弱碱性,在此条件下,矿物质不易溶解而产生沉淀,导致对钙的吸收率大大下降。
【总页数】1页(P45)
【作者】沈国强
【作者单位】无锡轻工业大学科技开发中心
【正文语种】中文
【中图分类】N09
【相关文献】
1.天然提取物和功能性食品添加剂 [J], 尤新
2.新型功能性食品添加剂--酪蛋白磷酸肽的结构、功能及应用 [J], 刘炜;冯凤琴;施林巍
3.天然功能性食品添加剂的开发动向及其应用 [J], 李英;杨明
4.新型功能性食品添加剂-酪蛋白磷酸肽(CPP) [J], 刘炜
5.功能性食品添加剂领域——天然食用色素的研究进展 [J], 尤诗莹
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天然功能性食品添加剂——酪蛋白磷酸肽的研究进展摘要:酪蛋白磷酸肽( CPPs) 是含有成簇的磷酸丝氨酸的生物活性肽,现已证明,CPPs 具有重要生理功能。
本文就CPPs 的结构、理化性质、制备工艺、检测方法、生理功能及应用进行了系统的概述。
关键词:酪蛋白磷酸肽;结构;制备;生理功能;应用引言酪蛋白磷酸肽(Casein Phosphope Ptides,CPPs)是以牛奶酪蛋白为原料,经过单一或复合蛋白酶的水解,再对水解产物分离纯化后得到的含有磷酸丝氨酸簇的天然生理活性肽[1]。
CPPs能促进机体肠粘膜对钙、铁、锌和硒,尤其是钙的吸收和利用,被誉为“矿物质载体”。
CPPs是目前唯一促进钙吸收的活性肽,同时在提高机体免疫力、改善繁殖性能等方面也有重要作用。
日本、德国等国家已把CPPs定为功能性食品,与CPPs相关的研究越来越受到我国科学家和食品工作者的广泛关注。
1 CPPs的结构牛乳酪蛋白的主要成分为αs1、αs2、β和κ-酪蛋白,除κ一酪蛋白外,α和β一酪蛋白都具有成簇存在的磷酸丝氨酸残基(Ser一P)。
酪蛋白经体外酶水解后,产生CPPs,CPPs的核心部位是由3个磷酸丝氨酸残基组成的一个一Ser(P)一残基簇,后面紧接着2个一Glu一残基,即一serP一SerP一SerP一Glu一Glu一,现已证明这个结构是发挥其生物活性必不可少的。
Hiroshil等1974年用动物实验表明,酪蛋白可在动物体内形成CPPs,并确定其结构为serP一serP-SerP一Glu一Ile一Pro一Asn。
1996年Nieholasf 习等用胰蛋白酶水解酪蛋白,得到包含有一SerP一SerP一SerP-Glu一Glu一序列的CPPs,从而得知了CPPs实际上是一类含有磷酸丝氨酸和谷氨酸的短肽,其产品分子量不均一[2]。
2 CPPs的理化性质2.1 溶解性 CPPs 产品具有良好的溶解性,其pH值为2.0~10.0,其溶解性除在pH值4.0 约为90%外,其他均高于90%,且溶解性随 pH 值的增高而增大。
酪蛋白磷酸肽名词解释1. 引言1.1 概述本文旨在对酪蛋白磷酸肽进行详细解释。
酪蛋白磷酸肽是一种在生物体中普遍存在的分子,在不同领域具有广泛的应用价值。
通过深入研究酪蛋白和磷酸肽的定义、特性以及其在医学、食品工业和农业等领域中的应用等方面,我们可以更好地理解和利用这一分子的作用与意义。
1.2 文章结构文章主要由五个部分组成:引言、酪蛋白磷酸肽名词解释、分析方法和技术、应用领域与研究进展以及结论。
引言部分将对本文的主题进行概述,并简要介绍各个章节内容。
接下来,将深入解释酪蛋白和磷酸肽在科学上的定义和特性。
然后,会介绍一些常用于研究和分析酪蛋白磷酸肽的方法和技术。
之后,会探讨该物质在医学、食品工业和农业等领域的应用,并介绍最新的研究进展。
最后,结论部分将总结核心观点,展望未来酪蛋白磷酸肽领域的发展,并提出可能存在的挑战和解决方案。
1.3 目的本文的目的是对酪蛋白磷酸肽进行全面解释,包括其定义、特性、作用和意义等方面。
同时,通过介绍在酪蛋白磷酸肽研究中常用的分析方法和技术以及该物质在医学、食品工业和农业等领域中的应用和研究进展,旨在增加读者对该分子的了解,并为相关领域的科学家和专业人士提供有益的参考信息。
2. 酪蛋白磷酸肽名词解释:2.1 酪蛋白的定义和特性:酪蛋白是一种存在于乳制品中的重要蛋白质。
它主要由氨基酸组成,并具有良好的水溶性。
酪蛋白在乳品中起到了多种功能,包括提供营养、增加口感和改善乳制品的质地。
酪蛋白有多个不同的变体,包括αS1-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白。
2.2 磷酸肽的定义和特性:磷酸肽是一种含有磷酸基团(PO4)的肽类化合物。
在生物体内,磷酸化反应是一种常见的信号转导机制,可以调节蛋白质的活性、互作和位置。
磷酸肽能通过磷酸基团与其他分子相互作用,从而影响细胞的代谢、生长和分化等生理过程。
2.3 酪蛋白磷酸肽的作用和意义:酪蛋白磷酸肽是指在酪蛋白分子中发生磷酸化反应形成的肽链。
它们在乳制品中起到了重要的功能作用。
酪蛋白磷酸肽的营养作用及其应用 ©2009-2-16 国家食物与营养咨询委员会唐婷,马力(西华大学生物工程学院,成都 610039)摘要:酪蛋白磷酸肽(CPPs)是从牛奶的酪蛋白中提取的一种生物活性肽,现已证明具有促进钙、铁等矿物元素吸收、防止蛀牙等生理功能。
本文介绍了CPPs 的生理功能和作用机理,并对其在食品和药物方面的应用作了简单介绍。
关键词:酪蛋白磷酸肽;生理功能;应用酪蛋白磷酸肽(Casein Phosphope Ptides,CPPs)是以牛奶酪蛋白为原料,经过单一或复合蛋白酶的水解,再对水解产物分离纯化后得到的含有磷酸丝氨酸簇的天然生理活性肽。
CPPs在动物的小肠环境中能与钙、铁、锌、硒等二价矿物质离子结合,防止产生沉淀,增强肠内可溶性矿物质的浓度,从而促进肠黏膜对钙、铁、锌、硒,尤其是钙的吸收和利用[1],被誉为“矿物质载体”。
CPPs是目前唯一促进钙吸收的活性肽[2],同时在提高机体免疫力、改善繁殖性能等方面也有重要作用。
日本、德国等国家已把CPPs定为功能性食品,我国在这方面的研究越来越受到科学家和食品工作者的广泛关注。
本文就CPPs 的营养作用及在食品、药物方面的应用作一综述。
1 酪蛋白磷酸肽的生理机能及作用机理1.1 促进肠道对矿物元素的吸收Ca在肠道中必须以离子的形式才能被吸收,在小肠前段VD作为Ca吸收促进剂可加强Ca在小肠前段的主动吸收。
而在小肠后段Ca的吸收形式是被动扩散,吸收效率取决于小肠内Ca离子的游离浓度,但它在中性和弱碱性环境下易与酸根离子形成不溶性盐而流失。
由于CPPs带有高浓度的负电荷,既可以抵抗消化道中各种酶的水解,又可以与钙结合成可溶物,从而有效地防止钙在小肠中性或偏碱环境中形成磷酸钙沉淀,同时它还可以有效地增加钙在体内的滞留时间,该结合物在被肠壁细胞吸收后才把钙释放出来。
早在20世纪40年代,Mellander等首次从酪蛋白的胰蛋白酶水解产物分离到磷酸肽,并证明这些肽的Ca盐在生理pH下具有非常好的溶解性,无论正常婴儿还是佝偻病患儿,对CPPs形式的钙比对自然条件下的Ca都能更好地利用。
CPP(酪蛋白磷酸肽)
英文名称:Casein phosphopeptides(CPP);Casein calcium peptide
中文名称:酪蛋白磷酸肽(酪蛋白钙肽)
化学名称:
化学分子式:
特性与用途:是富含磷酸丝氨酸的多肽。
由牛乳蛋白用胰蛋白
酶水解后精制而成。
当CPP进入小肠后,磷可与
小肠内的钙结合而使钙保持可溶状态,以促进钙
的吸收和骨质形成。
也有提高铁的吸收率的作
用。
用于强化营养,促进婴幼儿骨骼形成,预防
和改善骨质疏松。
质量标准:日本企标,1990
项目结果
CPP-I CPP-II CPP-III 外观白色粉末白色粉末白色粉末水分% ≤10 ≤10 ≤10
蛋白质(干基计)/% ≥90≥90≥78
酪蛋白磷酸肽(干基计)/% ≥12≥12≥85
灰份/% ≤7≤7≤18
As(As2O3计)/(mg/kg) ≤0.1 ≤0.1 ≤0.1 10%水溶液pH值7+1 7+1 7+1
异味有苦味无无
异物无无无
农药残留和抗生素检不出检不出检不出
功用:
1.促进小肠对钙的吸收。
人的饮食中的谷类食物含有大量的植酸、肌醇六磷酸等高磷成分,在小肠下端PH7~8环境下与钙结合而生成磷酸钙沉淀。
而CPP能抑制磷酸钙沉淀的形成,使游离钙保持较高的浓度,促进钙的被动吸收,成为维生素D作为钙吸收促进剂的又一途径。
2.促进骨骼对钙的利用。
动物实验表明,CPP能促进钙的吸收和利用,减弱破骨细胞作用及抑制骨的再吸收。
3.促进牙齿对钙的利用。
过去认为,餐后咀嚼乳酪能刺激唾液分泌,使碱性的唾液缓冲牙斑上的酸性物质对牙釉质的腐蚀,有助于防止龋齿的发生。
近年研究发现,乳酪中含有的CPP能将食物中的钙离子结合在龋齿处,减轻釉质的去矿物化,从而达到抗龋目的。
4.研究发现,在含有CPP的培养液中的精子,明显具有更高的穿透卵细胞的能力,还能减少精子的变异程度而使胚胎发育更加稳定。
CPP还能提高铁、锌、镁等金属离子的生物利用度,因而被称为具有金属载体功能的肽类物质。
目前,国外已将CPP应用于儿童咖喱饭、饮料、口香糖等食品和保健品中。
对儿童缺钙、老年人骨质疏松、不育症的治疗和牙齿保健方面的研究和应用也在进行之中。
因为CPP是从天然蛋白质中提取的多肽,具有不良反应小、安全可靠的优点,因而将会得到更广泛的应用。
国外研究了酪蛋白、脱脂乳蛋白和CPP的致敏反应,发现CPP的致敏性很小,表明它能够适用于对牛奶过敏的体质。
但也应注意到,影响CPP作用的因素非常复杂,在钙代谢过程中的作用还须进行深入的研究。
5.CPP除了促进钙吸收功能外,还可促进铁、锌等二价矿物营养素的吸收。
铁和锌是除了钙以外中国人最易缺乏的矿物质,若单纯、过度补钙,会对铁和锌的吸收造成一定的影响。
若将CPP添加于强化钙、铁、锌的营养食品或营养保健品中,则不仅可提高钙的吸收,同时还可提高铁和锌的吸收利用率。