色谱法之一些问题

气相色谱常见问题及处理方法01气相色谱系统的基本组成是什么？气相色谱系统的基本组成有：1.气源：常用的有N2、H2、Air、Ar、He等高压气体钢瓶，也可采用氢气发生器、氮气发生器、无油空气泵；2.气路控制系统：由开关阀、稳定阀、针形（调节）阀、切换阀和气阻、压力表、流量计等组成；3.进样系统：即汽化室，可以根据不同的分析要求，装置不同的进样器内衬。

对于气体样品，最好采用六通阀定体积进样，可获好的重复性，对液体样品，一般采用微量注射器进样，对固体样品，多用裂解器或脉冲炉配合；4.色谱分离系统：色谱柱是解决样品组份分离的关键，有填充柱和毛细柱二大类，根据不同的分析要求来具体配置；5.检测器：是将样品中的化学组份转化为电讯号，灵敏度和稳定性是关系到整个仪器性能的心脏部件，常用有TCD、FID、ECD、FPD、NPD；6.色谱工作站7.温度控制器：有恒温控制和程序升温控制二种方式；8.检测器电路：每种类型检测器都必须配置一个控制和测量的电路，从而实现非电量转换。

例如，配合高灵敏度TCD，就要配置一个热导池恒流电源，对FID就需配置一个微电流发大器。

02气体为什么要净化？气体纯度要影响灵敏度、稳定性。

净化工作主要是脱除水份、氧（TCD、ECD）和碳氢化合物，碳氢化合物将影响基线稳定性。

对于高纯气体分析，要求载气纯度要比被测气体纯度高一个数量级才能正常工作，否则要出倒峰，例如分析高纯Ar（O2≤2PPm，N2≤5PPm），就要求高纯Ar载气中O2、N2都要小于1 PPm才行。

应用ECD时，载气中内的H2O和O2将严重影响灵敏度。

03对进样的五点基本要求是什么？为保证定性定量精度，进样的基本要求是：1.快速：是指取样要快，取样后送进仪器要快，样品应进入汽化室中载气流速的区域；2.重复：是指取样要重复、送入仪器的操作也要重复，对气体样品，要控制住气体样品的流量和压力恒定，以便保证进样和进被测气体的进样量一致性；3.进样器温度要正确设置：对液体样品，进样汽化温度要设置正确，要高于试样的平均沸点，温度太低会造成高沸点组份汽化不完全，温度太高，可能会引起某些组份的分解；4.进样死体积要尽量小：指汽化室到色谱柱的连接气路体积要尽可能小，气体进样阀到色谱柱的连接管尽量短，从而减少死体积对峰变宽的影响；5.对不同柱型要配置不同的进样器结构，以便获得理想的柱效和好的峰形。

高效液相色谱法分离度不合格的原因及处理方法
高效液相色谱法(HP1C)是一种常用的分析方法，用于分离和定量复杂混合物中的化合物。

分离度不合格可能有以下几个原因：
1.柱选择不当：不同的柱具有不同的分离性能和分离机理。

柱选择不当可能导致分离度不足。

建议根据样品性质选择合适的柱。

2.流动相问题：流动相的成分和流速对分离度有重要影响。

如果流动相成分不适合或者流速过高，可能会导致分离度不佳。

可以尝试调整流动相的成分和流速。

3.样品制备问题：样品的制备对分离度也有一定影响。

如果样品中有杂质或者未充分溶解，可能会影响分离度。

可以尝试优化样品制备方法。

4.柱温控制问题：柱温的控制对于一些温度敏感的化合物也非常重要。

如果温度控制不当，可能会影响分离度。

可以尝试优化柱温设置。

处理方法：
1.优化分析条件：根据分析物的性质和样品矩阵，优化柱的选择、
流动相的成分和流速等条件。

2.检查样品制备方法：确保样品制备充分、杂质减少，对于困难溶解的样品可以考虑使用适当的溶剂或提取方法。

3.检查仪器性能：检查液相色谱仪的性能，包括流速、温度、压力等参数是否正常。

4.质量控制：建立严格的质量控制标准，确保每一次分析都符合要求。

如果以上方法仍然不能解决问题，建议咨询有经验的分析人员或仪器供应商，以获得更专业的帮助。

薄层色谱法注意事项薄层色谱法是一种常用的化学分析技术，用于分离、鉴定和定量分析化合物。

在进行薄层色谱实验时，需要注意以下几点：1. 实验前准备：在进行薄层色谱实验之前，应先准备好所需的试剂、溶剂、色谱板和开发室等实验器材。

同时，要确保色谱板的纯净度和质量良好，避免板上有杂质或损坏。

2. 样品的处理：样品在进行薄层色谱之前需要进行合适的处理，如提取、纯化等操作。

样品的处理要严格控制条件，避免产生不必要的干扰物。

3. 色层施加：色层施加是薄层色谱实验的关键步骤，要注意施加的均匀性和厚度的控制。

色层应均匀地覆盖在色谱板上，厚度一般为0.1-0.3毫米。

施加色层时要避免过程中的振荡或晃动，以确保色层的平整度。

4. 试剂的选择：在进行薄层色谱实验时，要根据不同的分析目的选择适当的试剂和溶剂。

试剂和溶剂的选择要有一定的理论基础，避免对被测物质产生干扰或损坏。

5. 开发条件的控制：开发是薄层色谱的重要步骤，要控制好开发室的湿度和温度。

湿度和温度的变化会影响色层的分离效果，因此要保持开发室的相对稳定。

6. 结果的解读：薄层色谱实验得到的结果需要进行正确的解读和分析。

需要注意结合实验数据和色谱数据来对结果进行推断和判断，避免因误解结果而导致错误的结论。

7. 安全操作：在进行薄层色谱实验时，要注意安全操作，避免接触有毒、易燃、腐蚀性的物质。

实验时要佩戴适当的防护装备，如实验手套、护目镜等。

总之，薄层色谱法是一种常用的化学分析技术，能够在短时间内对混合物进行分离和鉴定。

在进行实验时，注意以上几点，可以保证实验结果的准确性和可靠性。

气相色谱分析常见问题及解决方法1. 基线噪音过大 （FID 小于0.02MV ）可能的原因可能的原因 解决方案解决方案 注释注释进样器被污染 清洗进样器 尝度进行浓缩测试：气路也可能需要清洗清洗色谱柱被污染老化色谱柱 将烘烤时间限制在1-2小时小时 用溶剂清洗色谱柱用溶剂清洗色谱柱仅用于键合交联固定相仅用于键合交联固定相检查进样口是否污染检查进样口是否污染检测器被污染 清洗检测器通常噪音随时间增大，而不是突然增大载气不纯或快用完使用高纯度气体；也要检查捕集阱是否过期或漏气通常是在更换气瓶之后问题出现通常是在更换气瓶之后问题出现 色谱柱插入检测器过长 重新安装色谱柱 参考GC 手册，确定适当的插入距离手册，确定适当的插入距离 进入检测器的气体流速不正确不正确按照建议的值调节流速按照建议的值调节流速 参考GC 手册，确定适当的流速手册，确定适当的流速 使用MS MS，，ECD 或TCD 时有泄漏有泄漏 检查并排除泄漏检查并排除泄漏 通常位于柱接头或进样器处通常位于柱接头或进样器处 电源压力不稳 要用稳压电源隔垫或者衬管漏气更换隔垫和衬管在高温分析时要使用合适的隔垫在高温分析时要使用合适的隔垫2. 基线不稳定或干扰可能的原因可能的原因 解决方案解决方案注释注释进样器被污染 清洗进样器 尝试进行浓缩测试，气路也可能要清洗尝试进行浓缩测试，气路也可能要清洗 检测器不平衡检测器不平衡 使检测器稳定使检测器稳定 某些检测器可能需要24小时才能稳定小时才能稳定 色谱柱没有老化好 充分老化色谱柱 对痕量分析要更严格一些对痕量分析要更严格一些 在程序升温过程中载气流速改变流速改变 在很多情况下是正常的 MS MS，，TCD 和ECD 响应随流速变化响应随流速变化 色谱柱被污染修整色谱柱修整色谱柱 将色谱柱前端切去1/21/2——1米 用溶剂清洗色谱柱用溶剂清洗色谱柱仅用于键合交联色谱柱仅用于键合交联色谱柱 检查进样口污染检查进样口污染 色谱柱活性色谱柱活性 不可逆，更换色谱柱不可逆，更换色谱柱 仅影响活性化合物仅影响活性化合物溶剂相极性不匹配溶剂相极性不匹配改变样品溶剂改变样品溶剂 较旱流出的峰或靠近溶剂前沿的峰更容易出现拖尾易出现拖尾 使用保留间隙使用保留间隙3-5米保留间隙足够米保留间隙足够 不分流进样或柱上进样的溶剂效应显著的溶剂效应显著降低初始色谱柱温度降低初始色谱柱温度 保留值增加，峰拖尾会减弱保留值增加，峰拖尾会减弱分流比过低 增加分流比 分流放空的流速比应为20ml/min 或更高或更高 色谱柱安装差色谱柱安装差 重新安装色谱柱重新安装色谱柱 较早流出的峰更容易拖尾较早流出的峰更容易拖尾 某些活性化合物总是有拖尾拖尾无对胺类和羧酸最为常见对胺类和羧酸最为常见3. 分裂峰可能的原因可能的原因 解决方案解决方案注释注释进样技术改变进样技术，快进快出通常与不正确的推进推杆有关，或进样针中有样品。

【气相色谱分析】气相色谱分析四个常见问题1.气相色谱分析测试过程中常见问题及解决气相色谱分析测试过程中常见问题及解决一、标定时有峰丢失可能的原因及应接受的排出方法1.注射器有毛病，用新注射器验证。

2.未接入检测器，或检测器不起作用，检查设定值3.进样温度太低，检查温度，并依据需要调整4.柱箱温度太低，检查温度，并依据需要调整5.无载气流，检查压力调整器，并检查泄漏，验证柱进品流速6.柱断裂，假如柱断裂是在柱进口端或检测器末端，是可以补救的，切去柱断裂部分，重新安装二、前沿峰1.柱超载，削减进样量2.两个化合物共洗脱，提高灵敏度和削减进样量，使温度降低10～20度，以使峰分开3.样品冷凝，检查进样口和柱温，如有必要可升温4.样品分解，接受失活化进样器衬管或调低进样器温度三、拖尾峰1.进样器衬套或柱吸附活性样品：更换衬套。

如不能解决问题，就将柱进气端去掉1～2圈，再重新安装2.柱或进样器温度太低：升温（不要超过柱最高温度）。

进样器温度应比样品最高沸点高25度3.两个化合物共洗脱：提高灵敏度，削减进样量，使温度降低10～20度，以使峰分开4.柱损坏：更换柱5.柱污染：从柱进口端去掉1～2圈，再重新安装毛细管分析常见问题的解决四、只有溶剂峰1.注射器有毛病：用新注射器验证。

2.不正确的载气流速（太低）：检查流速，如有必要，调整之3.样品太稀：注入已知样品以得出良好结果。

假如结果很好，就提高灵敏度或加大注入量。

4.柱箱温度过高：检查温度，并依据需要调整5.柱不能从溶剂峰中解析出组分：将柱更换成较厚涂层或不同极性6.载气泄漏：检查泄漏处（用肥皂水）7.样品被柱或进样器衬套吸附：更换衬套。

如不能解决问题，就从柱进口端去掉1～2圈，并重新安装气相色谱仪气相色谱仪气相色谱分析测试过程中常见问题及解决_气相色谱仪2.气相色谱分析方法的建立步骤气相色谱分析方法的建立步骤在实际工作中，当我们拿到一个样品，我们该怎样如何定性和定量，建立一套完整的分析方法是关键，下面介绍一些常规的步骤：1、样品的来源和预处理方法GC能直接分析的样品必需是气体或液体，固体样品在分析前应当溶解在适当的溶剂中，而且还要保证样品中不含GC不能分析的组分（如无机盐），可能会损坏色谱柱的组分。

气相色谱法测定废气中非甲烷总烃存在的问题与对策
气相色谱法是一种常用的测定废气中非甲烷总烃含量的方法，但在使用过程中可能会遇到一些问题。

本文将从样品制备、色谱分析和数据分析三个方面探讨问题，并提出相应的对策。

样品制备方面可能会出现的问题是废气样品的收集和制备。

当废气中的非甲烷总烃浓度较低时，样品的收集和制备过程中可能会引入空气中的杂质。

对策是采用适当的样品收集方法，避免空气污染的影响，并通过吸附管、净化器等对样品进行预处理，去除杂质。

色谱分析方面可能会出现的问题是非甲烷总烃的分离和检测。

由于废气中的非甲烷总烃种类繁多，可能会出现共沸物的干扰，使分离和定量分析变得困难。

对策是选择适当的色谱柱，提高分离效果，并采用适当的柱温程序和流速，优化分离条件。

可以通过增加样品的预处理步骤，例如液相萃取、气相萃取等，去除干扰物质，提高仪器的检测灵敏度。

数据分析方面可能会出现的问题是废气样品中非甲烷总烃含量过高或过低，导致测定结果的不准确。

过高的含量可能会使色谱柱过载，导致峰形变宽或峰高不对称，影响分析结果。

对策是在样品制备阶段通过稀释样品来获得合适的含量范围。

而过低的含量可能会导致峰信号过低，难以准确测定。

对策是增加样品量或增加进样浓度，提高测定灵敏度。

气相色谱法测定废气中非甲烷总烃存在的问题主要包括样品制备、色谱分析和数据分析三个方面。

通过采取适当的对策，例如适当的样品收集方法、优化分离条件和增加进样浓度，可以提高测定结果的准确性和可靠性。

在实际应用中，需要根据具体情况选择适当的方法和参数，以获得满意的分析结果。

气相色谱法的注意事项与常见问题解答气相色谱法（GC）是一种广泛应用于化学分析中的分离和检测技术。

它通过样品中化合物之间的不同挥发性和亲和力来分离它们，然后利用检测器进行定量分析。

虽然GC在实验室工作中非常常见，但对于初学者而言，使用GC仍然可能存在一些注意事项和常见问题。

在本文中，我将介绍一些值得注意的事项，并解答一些常见的问题。

首先，注意样品的准备是非常重要的。

在进行气相色谱分析之前，样品必须被适当地制备成气相可溶性的形式。

此外，样品的浓度也要适中，过高或过低的浓度都可能导致分析结果的失真。

此外，样品中的杂质也可能影响分析结果，因此必要时应进行样品预处理，例如使用固相萃取技术或其他净化方法。

其次，正确选择适当的柱是至关重要的。

柱是GC中的核心组件，它承担着分离化合物的任务。

不同类型的柱有不同的分离机理和性能，因此需要根据分析目标来选择合适的柱。

常见的柱类型有非极性柱、极性柱和选择性柱等。

了解样品的性质以及目标化合物与静态相之间的亲和力是选择适当柱的关键所在。

此外，柱温和程序也需要仔细控制。

柱温是影响分离效果和保证分析结果准确性的重要因素之一。

在GC分析过程中，样品中的化合物在柱上会发生吸附和解吸过程。

因此，控制柱温温度程序，使样品中的化合物以适当的速率通过柱，并尽可能减少吸附和解吸的影响，是确保分析结果准确的关键。

另外，对于GC仪器的操作也需要一些注意事项。

首先是进样方式的选择。

进样方式是指将样品引入进色谱柱之前的步骤，常见的进样方式有气相进样和液相进样等。

选择适当的进样方式可以提高分析效率和灵敏度。

此外，注射体积和进样速度也需要控制在适当范围内，以避免柱塞压力过高或过低，影响分析结果。

最后，常见的问题解答。

在进行GC分析时，常常会遇到一些问题，例如峰形不良、峰尖不对称、峰裂分离不完全等。

对于这些问题，可能的原因有样品残留、柱污染、进样器积累等。

解决这些问题的方法包括更换柱、调整进样体积和进样速度，或者进行柱清洗等。

气相色谱常见问题及解决方法
气相色谱常见问题及解决方法包括：
1. 色谱峰形状畸变问题：可能原因包括柱温不稳定、进样量过大、进样器污染、柱老化等。

解决方法可以是调节柱温稳定性、减少进样量、清洁进样器、更换柱子等。

2. 色谱峰分离不良问题：可能原因包括柱子选择不合适、进样器选择不合适、流速不合适等。

解决方法可以是选择合适的柱子、进样器、调整流速等。

3. 柱子寿命较短问题：可能原因包括进样量过大、进样器污染、样品中存在较多杂质等。

解决方法可以是减小进样量、清洁进样器、预处理样品等。

4. 色谱峰尾扩散问题：可能原因包括柱温过高、流速过快、柱老化等。

解决方法可以是降低柱温、调整流速、更换柱子等。

5. 色谱峰漂移问题：可能原因包括进样器温度过高、进样器污染、柱子老化等。

解决方法可以是降低进样器温度、清洁进样器、更换柱子等。

6. 噪声问题：可能原因包括进样器污染、柱子老化、仪器问题等。

解决方法可以是清洁进样器、更换柱子、维护仪器等。

7. 保留时间不稳定问题：可能原因包括进样量不稳定、柱温不稳定、流速不稳定、进样器问题等。

解决方法可以是调整进样
量、提高柱温稳定性、稳定流速、检查并维护进样器等。

8. 色谱柱效不稳定问题：可能原因包括柱子老化、进样器问题、进样量过大等。

解决方法可以是更换柱子、检查并维护进样器、减小进样量等。

这些是气相色谱常见问题及解决方法的一些例子，具体问题和解决方法还需根据实际情况来确定。

⽓相⾊谱分析的问题⽓相⾊谱分析的问题下列情况对⾊谱分离及峰形状的影响如何？1、进样速度缓慢，样品不是瞬间进⼊⽓化室，也就是样品不是瞬间⽓化完全，这将导致峰变宽峰⾼变低或者峰拖尾再甚者出现两个或两个以上的峰。

这要看你的缓慢程度。

2、⽓化室温度过低，样品在⽓化室⽆法⽓化，会引起凝结，也就是样品停留在⽓化室，⽆法进⼊⾊谱柱，也就没有⾊谱峰的出现。

这样很伤仪器3、进样⼝胶垫漏⽓，造成峰拖尾。

影响标准曲线的相关系数（〉0.999）的因素？（1）标样的配置：很重要，⼒求精确。

（2）各梯度溶液的稀释：⼒求精确。

（3）进样量和进样⼿法：在⾊谱各项参数设置完全⼀样的情况下，⼒求⼀致。

⾊谱分析中，分离度R的范围通常是多少理论上越⼤越好，存在⽆穷⼤的可能；赞同相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的⽐值。

也叫分辨率。

当R⼤于1.5时，基本上物质都已经完全分离了！⾄于30和50的分离度，在⾊谱学上意义是⼀样的！；赞同只需要在1.5以上就可以了，分离度太⼤就牺牲了分析样品的时间，耗时太长，在实际⼯作中需要快速测定的。

⽓相⾊谱分析⽅法有哪些定量⽅法，其优缺点是什么？外标法，内标法，⾯积归⼀法，标准加⼊法。

⾯积归⼀法适⽤于较纯的试剂，可进⼀定量，根据⾯积算出含量。

标准加⼊法：仲裁法，⽐较准确，除去溶剂基质对定量的影响。

内标法使⽤于样品前处理较复杂的样品，如萃取，衍⽣等等，只要内标与标准品保持统⼀的浓度就可以准确定量了。

⾊谱分析法中,什么性质的物质可⽤⽓相⾊谱来分析?GC主要是利⽤物质的沸点、极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离待分析样品在汽化室汽化后被惰性⽓体（即载⽓，也叫流动相）带⼊⾊谱柱，柱内含有液体或固体流动相，由于样品中各组分的沸点、极性或吸附性能不同，每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。

但由于载⽓是流动的，这种平衡实际上很难建⽴起来。

也正是由于载⽓的流动，使样品组分在运动中进⾏反复多次的分配或吸附/解吸附，结果是在载⽓中浓度⼤的组分先流出⾊谱柱，⽽在固定相中分配浓度⼤的组分后流出。

气相色谱分析测试常见问题及解决方法一、气相色谱法有哪些特点？答：气相色谱是色谱中的一种，就是用气体做为流动相的色谱法，在分离分析方面，具有如下一些特点：１、高灵敏度：可检出１０-１０克的物质，可作超纯气体、高分子单体的痕迹量杂质分析和空气中微量毒物的分析。

２、高选择性：可有效地分离性质极为相近的各种同分异构体和各种同位素。

３、高效能：可把组分复杂的样品分离成单组分。

４、速度快：一般分析、只需几分钟即可完成，有利于指导和控制生产。

５、应用范围广：即可分析低含量的气、液体，亦可分析高含量的气、液体，可不受组分含量的限制。

６、所需试样量少：一般气体样用几毫升，液体样用几微升或几十微升。

７、设备和操作比较简单仪器价格便宜。

二、气相色谱的分离原理为何？答：气相色谱是一种物理的分离方法。

利用被测物质各组分在不同两相间分配系数（溶解度）的微小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配，使原来只有微小的性质差异产生很大的效果，而使不同组分得到分离。

三、何谓气相色谱？它分几类？答：凡是以气相作为流动相的色谱技术，通称为气相色谱。

一般可按以下几方面分类：１、按固定相聚集态分类：（１）气固色谱：固定相是固体吸附剂，（２）气液色谱：固定相是涂在担体表面的液体。

２、按过程物理化学原理分类：（１）吸附色谱：利用固体吸附表面对不同组分物理吸附性能的差异达到分离的色谱。

（２）分配色谱：利用不同的组分在两相中有不同的分配系数以达到分离的色谱。

（３）其它：利用离子交换原理的离子交换色谱：利用胶体的电动效应建立的电色谱；利用温度变化发展而来的热色谱等等。

３、按固定相类型分类：（１）柱色谱：固定相装于色谱柱内，填充柱、空心柱、毛细管柱均属此类。

（２）纸色谱：以滤纸为载体，（３）薄膜色谱：固定相为粉末压成的薄漠。

４、按动力学过程原理分类：可分为冲洗法，取代法及迎头法三种。

四、气相色谱法简单分析装置流程是什么？答：气相色谱法简单分析装置流程基本由四个部份组成：1、气源部分2、进样装置3、色谱柱4、鉴定器和记录器五、气相色谱法的一些常用术语及基本概念解释？答：１、相、固定相和流动相：一个体系中的某一均匀部分称为相；在色谱分离过程中，固定不动的一相称为固定相；通过或沿着固定相移动的流体称为流动相。

气相色谱法测定废气中非甲烷总烃存在的问题与对策
气相色谱法是一种有效的测定废气中非甲烷总烃含量的方法。

但是，在使用该方法时，可能会出现一些问题。

本文将探讨气相色谱法测定废气中非甲烷总烃存在的问题以及解决
对策。

问题1：油烟干扰
在废气中，油烟和非甲烷总烃含量相似，可能会对测量结果产生干扰。

对策：使用沉淀法或吸收法去除废气中的油烟，使得样品中仅含有非甲烷总烃。

同时，在标准燃烧中，确认样品中的油烟被完全燃烧。

问题2：样品的准确取样
取样器和传输管道中的吸附和扩散作用可能会降低非甲烷总烃的含量。

对策：使用适当的材料和精密取样器和传输管道，以确保在取样和传输过程中没有任
何损失和干扰。

问题3：基线漂移
如果气相色谱仪的温度、气压和流量不稳定，可能会导致基线的漂移。

对策：定期检查和校准气相色谱仪的温度、气压和流量等参数，以确保它们不受干扰。

同时使用内标法进行数据校正。

问题4：灵敏度
气相色谱法测定非甲烷总烃含量时，可能会出现检测灵敏度不够的问题。

对策：调整气相色谱的条件，提高样品的检测灵敏度，并使用内标法进行数据校正来
确保结果的准确性。

薄层色谱法实验报告思考题薄层色谱法是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于化学、生物、药学等领域。

在进行薄层色谱法实验的过程中，我们需要考虑一些问题，以确保实验的准确性和可靠性。

以下是一些薄层色谱法实验报告的思考题，希望能够帮助大家更好地理解和应用薄层色谱法。

1. 实验前的准备工作。

在进行薄层色谱法实验之前，我们需要做好充分的准备工作。

这包括准备样品溶液、薄层板、色谱柱等实验材料，以及调节色谱仪的参数和条件。

在实验前，我们需要考虑哪些因素？如何确保实验的准确性和可重复性？2. 样品的制备和处理。

样品的制备和处理对薄层色谱法实验结果有着重要的影响。

在进行实验前，我们需要考虑如何选择合适的溶剂、样品浓度、样品处理方法等因素，以确保样品能够被充分分离和分析。

3. 实验过程中的注意事项。

在进行薄层色谱法实验的过程中，我们需要注意一些实验细节和操作技巧。

例如，在样品上板、色谱条件调节、显色显带等方面，我们需要注意哪些问题？如何避免实验操作中的误差和偏差？4. 实验结果的分析和解释。

薄层色谱法实验得到的结果需要经过分析和解释，以得出准确的结论。

在进行结果分析时，我们需要考虑哪些因素？如何根据色谱图谱和定量数据得出结论？如何避免结果分析中的主观性和误导性？5. 实验中可能遇到的问题和解决方法。

在进行薄层色谱法实验的过程中，我们可能会遇到一些问题，如色谱分离不清晰、显色显带不明显等。

在面对这些问题时，我们应该如何分析和解决？如何避免实验中可能出现的困难和挑战？通过对以上思考题的讨论和思考，我们可以更好地理解和应用薄层色谱法，提高实验的准确性和可靠性。

希望大家能够在实验中认真思考和总结，不断提升自己的实验技能和科研水平。

简述薄层色谱法常见问题及相应解决方案薄层色谱解决方案所谓薄层色谱法，是指通过利用各成分对同一吸附剂的吸附能力不同，在流动相流过固定相的过程中，连续发生吸附、解吸、再吸附、再解吸，实现各成分相互分离的吸附薄层色谱法分离法。

以下根据网上资料，对薄层色谱的一些问题进行简述：1.如何选择薄层色谱的展开剂：薄层色谱在流动相的选择具有较大的灵活性，而流动相的选择目的是使绝大部分样品能达到较好的分离，与此对应的是流动相要有适当的强度和组成。

流动相强度越大，溶质比移值越大，但很可能降低分离能力；另外单一溶剂很难分离较复杂的混合物，根据相似相溶原理，要使用多元溶剂体系。

一般展开剂体系选择如下：根据分离样品性质、薄层色谱板性质选择一个二元溶剂体系，通过调节溶剂比例以寻求适合比移值。

2.薄层色谱的通用显色方法：理想的显色希望灵敏度高、斑点颜色稳定、斑点与背景间的对比度好、斑点的大小及颜色的深度与物质的量成正比。

在样品组成未知的情况下，通用显色方法显得成尤为重要。

一般显色方法有方便并且不破坏样品的紫外照射法，还有通用性强的点蒸汽法，还有制造荧光背景，使原来紫外下无荧光物质被鉴别的荧光试剂法，以及对绝大多数有机物有效但却会存在破坏性的硫酸溶液。

3.怎么提高薄层色谱的点样效率：因为点样是造成薄层色谱定量误差的主要来源。

由于定量毛细管更适合较小体积的点样；微量注射器更适合较大体积的点样。

这主要是因为微量注射器受小气泡、溶液回爬现象的影响较大。

为避免不同定量毛细管间的点样误差，一般建议一块薄层板上用同定量毛细管。

但应注意更换样品时，应将毛细管用超声波或不同极性溶剂清洗干净。

由于资料有限，因而上述对薄层色谱使用过程中的一些问题概述并不全面，欢迎补充。

薄层色谱仪的相关介绍薄层色谱又叫薄板层析，是色谱法中的一种，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固—液吸附色谱；它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分离；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大；因此，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的质。

薄层色谱法的特点和点样时应当注意哪些问题薄层色谱如何操作薄层色谱法的特点1、不需要而精密的气相色谱仪分析仪器，分析天平除外，设置和操作简单。

2、与纸色谱分析法相比，优越于可以使用腐蚀性的显色剂。

3、可选择的流动相和固定相范围比纸色谱法广泛。

4、打开快速，且扩散的作用小，斑点比纸色谱集中，检出灵敏度比较高。

技术上多样化，不仅有多中打开方式（例如，分布打开，连续打开，双向打开，浓度梯度打开等）对多而杂的混合物进行分别，分析。

5、适用于分别，分析少量样品。

6、与气相色谱法相比，薄层色谱法适用于分别，气相色谱仪分析受热不稳定的难以挥发的样品，这点与液相色谱法及早期的液相柱色谱法相同。

7、薄层色谱法和纸谱法都是手工操作，自动化程度较低，分别效果，和重现性都较差，分别多而杂混合物由确定的困难。

纸色谱只用于分别，然后用比色法定量。

而气相色谱仪薄层色谱法分别后可直接测量斑点面积定量，或用滴定法、比色法定量。

薄层色谱法点样时注意哪些问题用打孔器把滤纸制成直径2毫米的小园片，随后把小园片戳附在小号缝衣针的针尖上，其大头部分固定在软木塞上，用微量注射器吸取酒样和配制的标准溶液，缓慢地点加在小园滤纸片上，边点加边用吹风机以100℃以上的热风把点样吹干。

在活化并经过冷却的薄层板上，用缝衣针的大头把硅胶薄层抠掉一小孔，直径略小于2毫米，在小孔中用少许淀粉浆糊，把点加的酒样或标准溶液的滤纸片粘附于小孔上。

打开是薄层色谱法紧要的步骤，打开剂与打开方式的选择都会对试验结果造成很大的影响。

因此操作人员要依据试验要求与实际情况选择合适的打开剂与打开方式。

打开剂打开剂的极性增大次序为：石油醚环己烷二硫化碳四氯化碳二氯乙烯苯二氯甲烷氯仿乙醚四氢呋喃乙酸乙酯丙酮丁酮正丁醇乙醇甲醇水冰醋酸吡啶有机酸。

打开剂的选择标准：选择打开剂时要求打开剂对薄层吸附剂有确定亲和力，能把被分别物从吸附剂表面解析下来，但又不能过强，否则被解析下来的物质不易再吸附。

液相色谱常见问题及处理方法液相色谱常见问题及处理方法HPLC灵敏度不够的主要缘由及解决方法1、样品量不足，解决方法为增加样品量2、样品未从柱子中流出。

可依据样品的化学性质转变流淌相或柱子3、样品与检测器不匹配。

依据样品化学性质调整波长或改换检测器4、检测器衰减太多。

调整衰减即可。

5、检测器时间常数太大。

解决方法为降低时间参数6、检测器池窗污染。

解决方法为清洗池窗。

7、检测池中有气泡。

解决方法为排气。

8、纪录仪测压范围不当。

调整电压范围即可。

9、流淌相流量不合适。

调整流速即可。

10、检测器与纪录仪超出校正曲线。

解决方法为检查纪录仪与检测器，重作校正曲线。

为什么HPLC柱柱压过高柱压过高是HPLC柱用户最常遇到的问题。

其缘由有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。

1、拆去爱护预柱，看柱压是否还高，否则是爱护柱的问题，若柱压仍高，再检查；2、把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；3、将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流淌相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流淌池）。

这时，假如柱压仍不下降，再检查：4、更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力提升。

若柱压还高，请与厂商联系。

一般状况下，在进样器与爱护柱之间接一个在线过滤器便可避开柱压过高的问题，SGE供应的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。

液相色谱中峰消失拖尾或消失双峰的缘由是什么？1、筛板堵塞或柱失效，解决方法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。

2、存在干扰峰，解决方法为使用较长的柱子，改换流淌相或更换选择性好的柱子如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化漂移现象1、温度掌握不好，解决方法是采纳恒温装置，保持柱温恒定2、流淌相发生变化，解决方法是防止流淌相发生蒸发、反应等3、柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡快速变化现象1.流速发生变化，解决方法是重新设定流速，使之保持稳定2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。

高效液相色谱法的常见问题及解决方法高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法，这些方法在使用的过程中往往会遇到诸如鬼峰、基线漂移、拖尾、分叉峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题，如何解决这些问题呢?1.用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在?如何解决?关于漂移问题：①温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定;②流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等;③柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡;关于快速变化问题①流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定;②泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出;③流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合;2.液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?①筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子;②存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子;③可能柱超载，减少进样量;3.HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法①样品量不足，解决办法为增加样品量;②样品未从柱子中流出。

可根据样品的化学性质改变流动相或柱子;③样品与检测器不匹配。

根据样品化学性质调整波长或改换检测器;④检测器衰减太多。

调整衰减即可;⑤检测器时间常数太大，解决办法为降低时间参数;⑥检测器池窗污染。

解决办法为清洗池窗;⑦检测池中有气泡。

解决办法为排气;⑧记录仪测压范围不当。

调整电压范围即可;⑨流动相流量不合适。

调整流速即可;⑩检测器与记录仪超出校正曲线。

解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。

4.做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在?如何解决?①泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理;②比例阀失效，更换比例阀即可;③泵密封垫损坏，更换密封垫即可;④溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法;⑤系统检漏，找出漏点，密封即可;⑥梯度洗脱，这时压力波动是正常的。

摘要：色谱方法在药物研发中占据重要地位，本文介绍了一些常用的色谱方法原理以及在药物研发，尤其质量控制中应用的注意之处，并列举了申报资料中色谱法应用的一些常见问题，以引起大家的关注。

关键词：色谱法类型常见问题色谱法是一种分离分析技术，通过将样品中的组分分离，再逐个分析，因此是分析混合物、检测化合物纯度的有力手段，因而在药物研发中广为应用，包括原料药、中间体、制剂和生物体液中化合物的定性和定量，涉及的待测物包括手性或非手性药物、过程杂质、残留溶媒、附加剂（如防腐剂）、分解产物、从容器和密闭包装或制造过程中带入的杂质、植物药中的农药和代谢物等，包括制备工艺研究、中间体控制、质控检验、稳定性及药物动力学研究等过程。

因此，色谱方法在药物研发中占据举足轻重的地位。

一、色谱法的几种常见类型1、HPLC法：（1）手性液相色谱将“手性识别”或“手性环境”引入色谱系统中，以形成暂时非对映异构体复合物，从而直接分离药物对映体；或将对映体衍生化生成非对映体，而得以分离。

即分离光学异构体可用手性固定相、衍生化后在非手性固定相上或在非手性固定相上用流动相手性添加剂形成非对映体来实现。

（2）离子交换色谱使用表面有离子交换基团的离子交换剂作为固定相。

带负电荷的交换基团（如磺酸基和羧酸基）可以用于阳离子的分离；带正电荷的交换基团（如季胺盐）可以用于阴离子的分离。

不同离子与交换基的作用力大小不同，在树脂中的保留时间长短不同，从而被相互分离。

可用pH程序洗脱。

（3）离子对/亲和色谱常用反相离子对色谱，用缓冲液和加入的对离子（与被分离的样品荷相反电荷）分离。

分离受pH、离子强度、温度、浓度和共存的有机溶剂类型的影响，亲和色谱，一般用于大分子，使用配合体（共价结合在固体基质上的生物活性分子），与其同类的抗原（分析介质）反应，生成可逆转的复合物，通过改变缓冲条件洗脱。

（4）正相色谱将各种不同的有机官能团通过化学反应共价结合到固定相惰性载体上，固定相极性＞流动相极性。