亲和色谱法
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1、气相色谱法(GC)—gas chromatography用气体做为流动相的色法。
2、气液色谱法(GLC)—gas liquid chromatography 将固定液涂在载体上作为固定相的气相色谱法。
3、气固色谱法(GSC)—gas solid chromatography 用固体(一般指吸附剂)作固定相的气相色谱法。
4、程序升温气相色谱法—programmed temperature gas chromatography 色谱柱按照预定的程序连续地或分阶段地进升温的气相色谱法。
5、反应气相色谱法—reaction gas chromatography 试样以过色谱前、后的反应区进行化学反应的气相色谱法。
6、裂解气相色谱法—pyrolysis gas chromatography 试样经过高温、激光、电弧等途径,裂解为较小分子后进入色谱柱的气相色谱法。
7、顶空报相色谱法—haed (应为head -编者注)space gas chromatography d在密闭的容器中与液体(或)固体)试样处于势力学平衡(应为热力学平衡 -编者注)状态的气相组分,是间接测定试样中挥发性组分的一种方法。
8、毛细管气相色谱法—capillary gas chromatography 使用具有高分离效能的毛细管柱的气相色谱法。
9、多维气相色谱法—multidimensional gas chromatography 将两个或多个色谱柱组合,通过切换,可进行正吹、反吹或切割等的气相色谱法。
10、制备气相色谱法—preparative gas chromatography 用能处理较大量试样的色谱系统,进行分离、切割和收集组分,以提纯化全物的气相色谱法。
11、色谱柱:chromatographic column内有固定相用以分离混合组分的柱管。
12、填充柱:packed cklumn (应为column-编者注)填充了固定相的色谱柱。
《生化分离》考试复习题库一、选择题1.下列不是超临界萃取工艺的方法是()。
A 等温法B 等压法C 吸附法D 交换法2.影响絮凝效果的因素有很多,但不包括()。
A 絮凝剂的浓度B 溶液pH值C 溶液含氧量D 搅拌速度和时间3.葡聚糖凝胶色谱属于排阻色谱,在化合物分离中,先被洗脱下来的为()。
A 杂质B 小分子化合物C 大分子化合物D 两者同时下来4.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度()。
A 增大B 减小C 先增大,后减小D 先减小,后增大5.下列不能提高发酵液过滤效率的措施是()。
A 增大滤过面积B 降低料液温度C 加压或减压D 加入助滤剂6.下列方法中,哪项不属于改善发酵液过滤特性的方法A 调节等电点B 降低温度C 添加表面活性物质D 添加助滤剂7.助滤剂应具有以下性质()A 颗粒均匀、柔软、可压缩B 颗粒均匀、坚硬、不可压缩C 粒度分布广、坚硬、不可压缩D 颗粒均匀、可压缩、易变形8.在发酵液中除去杂蛋白质的方法,不包括()A 沉淀法B 变性法C 吸附法D 萃取法9.下列关于速率区带离心法说法不正确的是()A 样品可被分离成一系列的样品组分区带B 离心前需于离心管内先装入正密度梯度介质C 离心时间越长越好D 一般应用在物质大小相异而密度相同的情况10.助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒,它能使滤饼疏松,滤速增大。
以下不属于助滤剂的是()A 氯化钙B 纤维素C 炭粒D 硅藻土11.细胞破碎的方法可分为机械法和非机械法两大类,下列不属于机械法的是()A 加入金属螯合剂B 高压匀浆法C 超声破碎法D 珠磨法12.萃取操作是利用原料液中各组分()的差异实现分离的操作。
A 溶剂中的溶解度B 沸点C 挥发度D 密度13.两相溶剂萃取法的原理为:A 根据物质在两相溶剂中的分配系数不同B 根据物质的熔点不同C 根据物质的沸点不同D 根据物质的类型不同14.下列溶液不是双水相的是()。
A PEG/葡聚糖B PEG/磷酸盐C PEG/硫酸铵D 磷酸盐/硫酸铵15.在萃取操作中,分离系数越小,组分()分离。
第一部分色谱法一、基本概念1.色谱法:试样组分在固定相和流动相间的溶解、吸附、分配、离子交换或其他亲和作用的差异为依据而建立起来的各种分离分析方法。
2.保留时间:被测组分从进样开始到柱后出现浓度最大值所需的时间。
3.调整保留时间:扣除死时间后的保留时间。
4.相对保留值:某组分2的调整保留值与另一组分1的调整保留值之比。
5.标准偏差:0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半。
6.半峰宽度:峰高为一半处的宽度,又称半峰宽或区域宽度。
7.峰底宽度:自色谱峰两侧的转折点所作切线在基线上的截距。
8.分配系数:在一定温度和压力下,组成在固定相和流动相之间分配达到平衡时,组分在固定相中的平均浓度与在流动相中的平均浓度的比值。
9.分配比:在一定温度和压力下,在两相间达到分配平衡时,组分在两相中的质量比。
10.分离度:相邻两组分色谱峰保留值之差与两个组分色谱峰峰底宽度总和之半的比值。
11.程序升温:色谱分析中柱温由低到高呈阶段性升温过程。
12.梯度洗脱(梯度洗提):流动相中含两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变流动相中溶剂的配比和极性,通过流动相中极性的变化来改变被分离组分的容量因子k和选择性因子,以提高分离效果。
(百度:在同一个分析周期中,按一定程序不断改变流动相的浓度配比。
)13.硅烷化担体:用硅烷化试剂和担体表面的硅醇、硅醚基团起反应,以消除担体表面的氢键结合能力,从而改进担体的性能。
(硅烷化)14.离子对色谱法:将一种(或多种)与溶质分子电荷相反的离子(称为对离子或反离子)加到流动相或固定相中,使其与溶质离子结合形成巯水型离子对化合物,从而控制溶剂离子的保留行为。
15.反相液-液色谱:流动相的极性大于固定相的极性。
二、填空题1.为消除担体表面的活性中心,提高柱效,通常要对其进行预处理,常用的处理方法有酸洗、碱洗、硅烷化等。
2.空间排阻色谱法与其它色谱法的不同之处在于它是按分子的大小进行分离。
色谱法(chromatography),又称为层析法。
它是利用样品中不同组分在固定相和流动相中的作用能力的差别,使各组分在两相中以不同的速率移动,从而达到分离的目的。
色谱法不仅用于有色物质的分离,而且大量用于无色物质的分离。
所以,色谱法已经失去原先含义,但名称仍沿用至今。
色谱法具有分离和分析两种功能,是分析混合物最有力的手段,也是目前应用最广泛的一种分离方法☐色谱装置中,表面积较大、相对静止不动的一相(固体或附着在固体上的液体),称为固定相;☐携带有混合物、按一定方向移动的一相(气体或液体),称为流动相;☐装有固定相的管柱(玻璃管或不锈钢管)称为色谱柱。
三、色谱分离法的分类(一)根据流动相的相态不同气相色谱—以气体作流动相液相色谱—以液体作流动相超临界流体色谱—以SCF作流动相(二)根据固定相的附着方式柱色谱—固定相装在圆柱管中薄层色谱—固定相涂敷在玻璃或金属板上纸色谱—液体固定相涂在纸上(三)根据分离机理的不同吸附色谱;分配色谱;离子交换色谱;凝胶色谱亲和色谱(四)根据操作压力的不同低压色谱—操作压力 < 0.5 MPa中压色谱—操作压力 0.5~4.0MPa高压色谱—操作压力 4.0~40MPa四、色谱法的特点优点:1)分离效率高—短时间内可分离多达数百个组分的复杂物质;2)检测能力强—10-11~10-15 g 级,痕量水平;3)样品用量少—μL~ng 级;4)设备较简单,应用范围广。
缺点:处理量小,操作周期长,不能连续操作。
第二节吸附柱色谱一、基本原理吸附色谱法:是依靠样品中不同组分与吸附剂之间的分子吸附力的差异而实现分离的色谱方法。
其固定相为固体吸附剂,如,硅胶、氧化铝、活性炭等。
溶质与吸附剂之间的吸附力,主要是范德华力,也存在着氢键吸附色谱的分离,是基于反复多次的“吸附-解吸附”过程,由于样品中不同组分与固定相吸附能力的差异,便可顺次从柱中流出而得到分离二、吸附色谱系统的组成吸附剂(固定相)、洗脱剂(流动相)和被分离物构成了吸附色谱的主体。
色谱法又称色层法、层析法,是分离、提纯和鉴定化合物的重要方法之一。
其基本原理色谱法,又称为色层法、层析法,是一种重要的分离、提纯和鉴定化合物的方法。
它起源于20世纪50年代初期,随着技术的发展,现已演变出多种类型,成为现代化学分析的重要手段之一。
一、基本原理色谱法的基本原理是通过不同物质在固定介质上的相互作用差异,实现物质分离并且分析。
常用的分离基质有液相、气相、固相等,其中气相层析法(Gas Chromatography, GC)和液相层析法(Liquid Chromatography, LC)是最常用的两种方法。
在色谱法中,首先需要将混合物分离为各种单独成分。
为了实现这一目的,需要先设定一个分离场景,选择合适的固定相和流动相(或气相),然后通过受样品浓度和性质限制的物质流动速率实现分离。
而不同成分在固定相和流动相(或气相)中的作用力不同,使得它们依据自己的特性,以不同的速率通过固定相,从而分离成分。
分离后的成分在分析感兴趣的成分时,可以通过各种检测方式进行鉴定和定量。
这是因为,高度纯净的单一成分的比色、荧光、质谱等物理化学属性都是独特的。
二、常用色谱法的分类(一)气相层析法气相色谱法主要利用气相固定相之间相互作用力的不同来实现样品分离和鉴定。
气相色谱法的基本组成部件包括载气、进样系统、固定相柱(也称柱子)和检测器。
该方法的优点是实现分离效率高、可准确鉴定复杂混合溶解物、对样品量不敏感等,广泛应用于环保、医学、食品安全等多个领域,被誉为同位素技术以来的第二次化学分析革命。
(二)液相层析法液相层析法主要利用液态混合物中成分与固定相之间的化学反应性质、吸附性、离子交换等机理实现分离。
液相色谱法的主要组成部件包括载流相、进样器、固定相柱和检测器等。
该方法的优点是分离效果好,可分离基态异构体和光化学异构体,适用范围广,以肽、蛋白质、核酸等大分子为对象的高效液相层析技术(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)得到了广泛应用。
色谱分析法名词解释色谱分析法、又称层析法,色层法,层离法。
是一种物理或物理化学分离分析方法。
是先将混合物中各组分分离,而后逐个分析。
其分离原理是利用混合物中各组分在固定相和流动相中溶解、解析、吸附、脱附或其他亲和作用性能的微小差异,当两相作相对运动时,使各组分随着移动在两相中反复受到上述各种作用而得到分离。
色谱法已成为分离分析各种复杂混合物的重要方法,但对分析对象的鉴别能力较差。
色谱分析法的分类比较复杂。
根据流动相和固定相的不同,色谱法分为气相色谱法和液相色谱法。
按色谱操作终止的方法可分为展开色谱和洗脱色谱。
按进样方法可分为区带色谱、迎头色谱和顶替色谱。
色谱法分离效率高、分离速度快、灵敏度高、可进行大规模的纯物质制备。
色谱分析法chromatography基于混合物各组分在体系中两相的物理化学性能差异(如吸附、分配差异等)而进行分离和分析的方法。
国际公认俄国M.C.茨维特为色谱法的创始人。
色谱法体系中的两相作相对运动时,通常其中一个相是固定不动的,称为固定相;另一相是移动的,称为流动相。
在色谱分析过程中,物质的迁移速度取决于它们与固定相和流动相的相对作用力。
溶质和两相的吸引力是分子间的作用力,包括色散力、诱导效应、场间效应、氢键力和路易斯酸碱相互作用。
对于离子,还有离子间的静电吸引力。
被较强吸引在固定相上的溶质相对滞后于较强地吸引在流动相中的溶质,随着移动的反复进行与多次分配,使混合物中的各组分得到分离。
色谱分析法的分类比较复杂。
根据流动相和固定相的不同,色谱法分为气相色谱法和液相色谱法。
①气相色谱法的流动相是气体,又可分为:气固色谱法,其流动相是气体,固定相为固体;气液色谱法,其流动相是气体,固定相是涂在惰性固体上的液体。
②液相色谱法的流动相是液体,又可分为?液固色谱法,其流动相是液体,固定相是固体;②液液色谱法,其流动相和固定相均是液体。
按吸附剂及其使用形式可分为柱色谱、纸色谱和薄层色谱。
按吸附力可分为吸附色谱、离子交换色谱、分配色谱和凝胶渗透色谱。