复习题
一、名词解释
基因重组(gene recombination)：是指DNA片段在细胞内、细胞间，甚至在不同物种之间进行交换，交换后的片段仍然具有复制和表达的功能。
克隆：来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。
限制性内切酶：限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶，能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。
黏性末端：被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。
质粒：是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中核区外的DNA分子。
基因：是一切生物体内储存遗传信息的，有自我复制能力的遗传功能单位。
CDNA ：以RNA为模板，在逆转录酶的作用下，生成的RNA-DNA中的DNA为CDNA。CCCDNA：绝大多数的天然DNA质粒具有共价、封闭、环状的分子结构，即CCCDNA。生物技术：是在细胞水平上，特别是在分子水平上对生物体遗传性实现巨大的接近定向改造的一套内容繁多和复杂的技术。
DNA克隆（分子克隆、基因克隆、重组DNA）：应用酶学方法，在体外将外源性遗传性物质与载体结合成重组DNA分子，继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子的过程。
回文结构：在切割部位，一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。
同尾酶：来源各异，识别的靶子序列也各不相同，但都产生出相同的粘性末端。
目的基因：是人们所需要转移或改造的基因。
ＤＮＡ序列分析：是指对某一段ＤＮＡ分子或片段的核苷酸排列顺序测定，测得组成ＤＮＡ分子的Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ的排列顺序．
基因转移（transgenosis）：是借助于物理、化学或生物的手段将外源基因导入受体细胞，并检查其在该细胞内表达情况的一种技术，是细胞工程中一项重要而应用广泛的技术。
报告基因：系指其编码产物能够被快速地测定，常用来判断外源基因是否已经成功地导入寄主细胞（器官或组织）并检测其表达活性的一类特殊用途的基因．
选择标记基因：简称选择基因，是指可使被转化的细胞获得其亲本细胞所不具备的新的遗传特性，从而使得人们能够使用特定的选择培养基，将转化的新细胞从亲本细胞群体中选择出来的一类特殊的基因．
基因探针：是一段与目的基因互补的核酸序列，可以是ＤＮＡ，也可以是ＲＮＡ，用它与待测样品ＤＮＡ或ＲＮＡ进行核酸分子杂交，可以判断两者的同源程度．
原位杂交：将标记的核酸探针与固定在细胞或组织中的核酸进行杂交，
Dot印迹杂交：将待测ＤＮＡ或ＲＮＡ的细胞裂解物变性后直接点在硝酸纤维素膜上，不需要限制性酶进行酶切，既可与探针进行杂交反应．
基因的转移技术：就是将外源目的基因或DNA片段引人受体生物或细胞并检查其在转化细胞中表达结果的一种技术。
二、填空题
1.1972年斯坦福大学的Berg等人完成了首次体外重组实验，并首次用限制性内切酶切割SV40的DNA片断与 噬菌体的DNA片断，经过连接，组成重组DNA分子，他是第一个实现DNA重组的人。
2.1973年斯坦福大学的Cohen将伤寒沙门氏抗链霉素质粒与含有四环素抗性基因的大肠杆菌质粒pSC101连接成重组质粒，具有双重抗药性。标志着基因工程的诞生。
3.基因工程的意义大规模的生产生物分子，设计构建新物种，搜寻、分离和鉴定生物体尤其是人体内的遗传信息。
4.基因工程的特征跨物种性，无性扩增。
5.限制性内切酶分为I ，II ___，III ___。
6.我国青年科学家陈炬成功地把人的干扰素基因嫁接到烟草的DNA分子上，使烟草获得了抗病毒的能力，试分析：烟草有了抗病毒的能力，这表明，烟草体内产生了人的干扰素。这说明人和烟草共用一套遗传密码；蛋白质合成的方法相同（填“相同”或“不同”）；也说明了DNA是遗传物质。
7. 基因工程中的运载体必须具备A能够在宿主细胞中复制并稳定地保存B具多个限制酶切点，以便与外源基因连接C具有某些标记基因，便于进行筛选。
8.限制酶是一类专门切割DNA的酶，它能特异性识别切割双链（单、双）DNA。
9.限制酶命名采用Smith和A thens提议的方案，第一个字母大写取自来源细菌的___ __属名_；第二、三个字母取自来源细菌的__种名_ ___；第四个字母（如果有）取自来源菌的___株系___。
10.自然界的基因转移与重组有__接合作用_，__转化__，_转导__，__转染__ __。
11.基因工程的基本步骤___切、接、转、增、检。
12.目的基因的提取方法鸟枪法，_反转录法，_根据已知的氨基酸序列合成DNA。
13.聚合酶链反应（PCR）的基本步骤变性__，_ 退火__，_延伸。所用的酶为TaqDNA聚合酶，酶耐热的特性。
14.常用的报告基因ＧＵＳ基因__，ＮＰＴⅡ基因__，ＣＡＴ基因__ ，ＮＯＳ基因__ ，ＬＵＣ基因和ＧＦＰ基因__ 。
15.DNA序列测定常用方法有__，_ __，__ 。
16.运载体的作用_将外源基因转移到受体细胞中去__，利用运载体在受体细胞内，对外源基因进行大量复制__ 。
17.目的基因导入受体细胞常用的受体，微生物用大肠杆菌，植物用拟南芥__
18.Maxam-Gilbert化学裂解法中使戊糖脱落，用于嘌呤环的试剂是硫酸二甲酯，
而联氨可用于肼解嘧啶环。
三、选择题
1、下列目的基因的获取过程中不宜用“鸟枪法”获取的是
A．胰岛素基因 B.抗虫基因C．抗病毒基因 D.固氮基因
2、英国科学家维尔莫特首次用羊的体细胞(乳腺细胞)成功地培育出一只小母羊，取名“多利”，这一方法被称之为“克隆”，以下四项中与此方法在本质上最相近的是
A．将兔的早期胚胎分割后，分别植入两只母兔子宫内，并最终发育成两只一样的兔
B．将人的抗病毒基因嫁接到烟草的DNA分子上，培育出具有抗病能力的烟草新品种C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞
D．将人的精子与卵细胞在体外受精，受精卵在试管内发育
3、用大肠杆菌生产胰岛素需应用的生物工程不包括
A.基因工程
B.细胞工程
