冷冻保存精子,把“根”留住

超低温冷冻技术应用于鱼精子保存的研究进展鱼类是重要的水产资源之一，但其精子保存和利用面临着很多挑战。

传统的鱼精子保存技术主要是低温保存，但此方法存在精子损伤或死亡的问题。

近年来，超低温冷冻技术在鱼精子保存方面的应用成为了研究的热点，在提高精子储存质量方面取得了重要进展。

超低温冷冻技术是一种物理方法，采用低温存储方式将细胞或组织冷冻在极低温度下，从而达到保存和利用的目的。

该技术在人类和动物领域都有广泛应用，并逐渐在水产领域得到应用。

超低温冷冻技术可以减缓细胞代谢，防止细胞死亡，延长细胞储存寿命，同时保持细胞的完整性和功能。

超低温冷冻技术的成功应用离不开冷冻介质的选择和调控。

常用的冷冻介质有甘油、乳糖、蔗糖、酪蛋白和胆固醇等。

此外，添加不同的物质，如抗氧化剂、防抱死剂和增粘剂等，也可以改善鱼精子的冷冻质量。

超低温冷冻技术对鱼类精子保存的影响主要包括以下几个方面。

首先，超低温冷冻技术可以改善鱼精子的贮存稳定性。

通过优选冷冻介质和添加辅助物质，冷冻鱼精子可以达到长期储存的目的。

研究表明，用7.5%甘油作为冷冻介质可以明显提高鲤鱼、鳕鱼和金枪鱼等鱼类精子的存活率。

其次，超低温冷冻技术可以提高鱼精子的存活率。

研究表明，将鱼精子冷冻在极低温度下，保持其形态和活力，有望达到高存活率的目的。

以贤雄鱼为例，使用增粘剂和胆固醇为助剂，将鱼精子以极低温度（-196℃）保存5天，细胞存活率达到了80%以上。

第三，超低温冷冻技术可以保持鱼精子的生殖功能。

研究表明，细胞冷冻后，即使没有死亡，生殖功能也可能受到损害。

但通过超低温冷冻技术，可以在一定程度上恢复受损的生殖功能。

比如，经过良好保存的鳕鱼精子，在完成冷冻、解冻等程序后，仍可以在水中进行有效的受精作用。

总的来说，超低温冷冻技术在鱼精子保存方面的应用展现出了广泛的前景。

但是，仍需进一步探索该技术在不同鱼类的保存效果和规模化应用方面、冷冻介质和辅助物质的选择以及细胞死亡原因等方面的问题。

为什么精子和卵子冷冻多年而不失效？我们知道，胎儿是从一枚男性的精子与一枚女性的卵子结合成受精卵后发育而来。

在现代医学中，卵子和精子实际上可以冷冻多年，并在需要时再使用它们。

那么，这要如何操作呢？由于精子和卵子从本质上来说是细胞，长时间冷冻会不会影响它们的“有效性”？如果没有，那么同样的原理和技术是否可以用来“保存”整个人体，即冷冻身体并多年后使他们复活？冷冻保存：冷冻精子和卵子无论人的身体以及生活方式多么健康，无论是男性还是女性，人的生育率都会随着年龄的增长而下降，特别是会在35-45岁的年龄时会急剧下降。

一些人可能很早就会出现这样的情况，其他人则可能晚一些。

卵子质量的下降使得染色体异常的婴儿增加，流产的风险也在增加。

这种情况的解决方法就是冷冻保存卵母细胞。

简而言之，冷冻保存是将组织冻结起来，在将来可以使用。

由于冷冻的精子细胞、卵子和胚胎不会老化，无论出现了医学问题还是其他问题，都可以维持个体的生育能力。

此外，这不是只能冷冻几年，卵子可以被长期冷冻。

这就是为什么一个女人可以冻结她的卵子，作为维持她以后生育能力的有效手段。

除此之外，当女性变老且不像她年轻时那样有活力时，冷冻多余的胚胎可以降低随后人工辅助受孕的成本。

为什么人们会选择冷冻她们的卵子？如前文所述，冷冻卵子的最大优势在于它有助于保持女性生育能力。

现在，这是优势。

但为什么人们首先选择冷冻卵子/精子？其中有这么几个原因。

第一，一些人可能因为医学原因而想推迟生育。

例如，如果一个人即将要开始化疗，他们可能想冻结他们的卵子/精子，那么将来就可以使用，因为癌症治疗可能会降低生育能力。

第二，许多人因为个人原因推迟生育。

有一个有趣的现象，在第一批“卵子冷冻”女性（从2005年到2011年）中，超过80%的人没有伴侣。

这背后也有一些原因，其中之一就是现代女性想要在生育孩子之前，更加关注于自己的事业。

卵子如何长期保持冷冻而不失其有效性？人们可能会想知道卵子/精子细胞如何能长时间冷冻而不失“有效性”。

有了冷冻精子孕育孩子现实的成功，网上盛传，可能会有一批人将从丁克一族走到冷冻一族。

因为，一些丁克，为防止年老后想要孩子时，精子质量不好，或根本就达不到授孕的精子数量了，年轻时想把自己的精子冷冻“存”起来，留条后路。

然而，采访中发现，无论是医学专家，还是伦理学家，都不赞成这种做法，因为，冷冻精子只是一种辅助生育手段，为不孕不育患者提供最后的帮助。

在精子健康时，把它们冷冻起来，以备不时之需，如同给生育买了份保险。

那这份保险靠谱吗？冷冻会不会伤害精子？带着这样的疑问，本报记者走访了北京大学人民医院相关专家。

/上海不孕不育专科医院冷冻精子不会变质？在一些人眼中，精子冷冻复苏就像自己家中冰箱中的冻肉化冻一样，而且会变质。

但事实上并非如此。

“目前精子冷冻技术已相当成熟，加入保护剂的精子一旦冷冻保存起来，它的生物活性就停止了，这意味着精子并不变质。

”北京大学人民医院生殖医学中心助理研究员梁蓉说。

临床上，将通过手淫射出的精液收集，取少量做抽样检查后，剩下的加入保护剂，超低温(零下100多℃)冷冻起来。

需要使用的时候，将储存精子的样品管于室温下浸在自来水或双蒸水中或仅仅暴露于空气之中(两者均在室温下22℃ 左右进行)进行解冻。

“加入保护剂，可防止精子细胞内水分结冰后，体积增大撑破细胞膜。

”梁蓉说，但在解冻过程中，有一半左右的精子细胞会死亡，原因很多，如精子细胞内冰晶融化时，胞内液体会和胞外保存液发生交换，如果进入细胞内的液体过多、过快，会破坏精子细胞。

“但是剩下的精子，如果活力良好，足够进行辅助生育技术。

”北京大学人民医院生殖中心主任医师沈浣说：“理论上，一个受精卵只需要一个精子，如果健康精子数量过少，可以选用显微注射法，将精子一个一个注入卵细胞中。

”理论上可无限期保存“精子冷冻后，生物活性停止，理论上可长期保存。

”梁蓉说。

伊恩·莫里斯的精子就是最典型的例子。

而且，他还不是时间最长的，2004年，英国曼彻斯特的圣玛丽医院宣布一条令医学界轰动的消息：一名32岁的母亲利用试管婴儿技术于2002年顺利生下一名男婴，而她所使用的精子，竟是已被冷冻21年——1979年当她的丈夫接受睾丸癌手术治疗前所冷藏的精子。

实验十五精液的冷冻保存一.实验特点实验类型：综合型实验实验类别：专业基础课计划学时：2学时每组人数：3～4人二、实验目的要求精子具有受温度变化直接影响本身活动力和代谢能力力的生物学特性。

利用这一特性，将精液特殊处理后，保存在超低温下，精子代谢活动完全受到抑制，停止能量消耗，处于生命静止状态，长期保存下来。

一旦升温精子又能复苏并维持其原来的受精能力。

要求同学们了解精液冷冻保存的技术操作过程和精液冷冻保存原理，初步学会冷冻保存方法。

三．实验原理冰晶化是水在降温过程中的一定温度下，水分子重新按几何图形排列形成冰晶。

冰晶可造成精细胞（精子）内外的溶质浓度和渗透压增高，引起细胞内脱水、原生质变干、酸碱失去平衡、细胞膜和顶体以及整个组织和结构破坏等致死性伤害，最后导致精子发生不可逆的变化而死亡。

一般精液内含85%～95%的水分，精子内也含有及少量的水分，这些水分在降温过程中在-0.6～-60℃温度区内缓慢降温能形成冰晶。

降温速率越慢，所形成的冰晶越大，其中特别以-15～-25℃时冰晶形成最多。

在冷冻精液过程中只有避开这个有害温度区，才能得以长期保存。

快速升降温度的办法，难以达到完全玻璃化冻结条件。

为此，在制作冷冻精液的稀释液内，要加入一定量的甘油等抗冻害物质。

甘油具有极强的亲水性，可限制水分子形成冰晶而处于过冷状态，降低水形成冰晶的温度，即缩小精子的有害温度的上限。

此外甘油容易渗透精子内，可降低渗透压改变的不良影响及营养作用等，增强精子的抗冻害能力和无冻害生存环境。

精液在冷冻过程中不可避免地要形成冰晶，精子能否生存的关键在于冰晶的大小，冰晶越大对精液伤害越大，反之冰晶越小，伤害越小甚至无损伤。

因此，只要避免大冰晶形成，并使精子稳定在微晶的状态下，一旦升温精子又能复苏并维持其原来的受精能力。

四．实验材料和仪器精液、2.9%的柠檬酸钠溶液、50～100ml烧杯、滴管、10 ml试管、低温温度计、20～80目纱网、漏勺、灭菌纱布袋、液氮罐、液氮、载玻片、盖玻片、显微镜、保温箱。

对室温下储存野生动物精子的研究近年来，随着人类对于野生动物保护意识的不断提高，越来越多的科学家开始关注野生动物精子的储存技术，以期将这种宝贵的资源充分利用起来。

在与此相关的各种研究领域中，对室温下储存野生动物精子的研究也引起了广泛的关注。

野生动物种群的数量逐年减少，这是现代人类面临的一个严峻问题。

虽然采取一系列措施，如加强保护、减少猎杀等，依然难以遏止野生动物数量的下降。

因此，如何有效地保存野生动物的生殖系统是非常重要的。

传统储存方式在以前，储存野生动物精子的方法主要有两种：一种是低温冷冻，另一种是低温液氮保存。

低温冷冻是目前应用最广泛的一种保存方式。

将采集到的野生动物精子与用适当浓度的冻精液冻结在-196度的液氮中，可保存数十年甚至数百年。

其缺点是保存过程非常复杂，需要高科技的低温保存设备和昂贵的液氮。

低温液氮保存则是新一代储存方式。

采用低温液氮保存，能够更有效地保护野生动物精子的质量和数量。

虽然对设备要求更高，但应用前景更广泛。

室温储存方式然而，随着科技的发展，对室温储存野生动物精子的研究也越来越多。

很多人认为，野生动物精子的保存还可以通过室温储存等方法来完成，从而大大降低保存成本。

在室温储存野生动物精子的过程中，最主要的技术手段是防干燥。

只要能够保证防干燥，在适当的情况下，野生动物精子依然可以很好地保存。

比如，它可以被保存数个小时，或者是几天，整个过程保持在室温下。

但是，室温环境下精子的寿命通常只有数小时，即使有一些特殊例外。

室温储存技术的应用室温储存野生动物精子的技术应用存在几个局限性。

首先，它不能不用移植同时储存多个物种的野生动物精子，因为不同物种需要不同的室温或湿度要求。

其次，野生动物精子部分的储存时间很短，因此适用于一些突发事件的情况，如研究中心的紧急物资缺乏，或者是传染病爆发等。

室温保存野生动物精子也有一些优点。

比如，它能够更有效地保护野生动物精子的质量和数量。

同时，由于不需要动用冷冻或液氮设备，所以它的成本相对较低。

精子冷冻贮存6.1 引言精子冷冻保存是男科实验室工作中的一个重要组成部分，特别对不孕不育门诊的男科实验室来说。

从19世纪40年代末起，人类就开始研究精子低温生物学。

发现甘油能保护精子免受冷冻损伤，可以将人类精子冷藏在–79℃的干冰上(Polge et al., 1949; Bunge &herman, 1953; Bunge et al., 1954)。

随着液氮广泛应用，人类精子冷冻贮存技术取得快速发展，在许多国家建立起商业用途的精子库和国际间合作服务项目(Perloff et al., 1964; David et al., 1980; Clarke et al., 1997; Leibo et al., 2002)。

由于采用不同的冷冻保护剂和不同冷冻程序，出现许多冷冻贮存实验设计方案。

冻融后细胞存活率主要取决于细胞内冰晶形成量能降低至何种程度，通过选择恰当的冷冻保护剂和采用最适冷冻速率和复融速率来减少细胞内水形成冰晶提高细胞的存活率(Sherman, 1990; Keel & Webster, 1993; Watson, 1995)。

特别在复融过程中，当精子处于–130℃（玻璃化转化状态的关键温度）以上时间太长，细胞内有害的冰晶增多发生重结晶。

人类精子能够耐受一定范围内的冷冻和复融率。

它们对快速冷冻（冷体克）产生损伤不敏感，主要原因可能是精子细胞膜中脂质双分子层结构的不饱和脂肪酸增加细胞膜流动性。

而且因为细胞内水分含量少（约为50%），精子比其它细胞更能耐受低温导致损伤。

但是低温仍对精子功能仍产生不良影响，特别是对精子活力影响比较大。

一般而言，只有大约50%的活动精子能在冻存后复苏保持活力(Keel & Webster, 1993)。

优化精子冷冻保存方法减低对活动精子的损害从而提高妊娠率(Woodset al., 2004)。

影响供精人工授精的妊娠率的因素包括复融后精子质量、人工授精的时机，而最为关键的是受方因素如年龄，前次供精妊娠情况以及与排卵、子宫输卵管相关疾病(Le Lannou & Lansac, 1993)。

精子保存操作规程
《精子保存操作规程》
一、目的
为了确保精子保存工作的顺利进行，保证精子质量，制定本规程。

二、适用范围
本规程适用于所有精子保存工作。

三、工作流程
1. 取样：精子保存前，需先进行取样，确保精子的质量和数量。

2. 加工：将取样得到的精子进行加工处理，包括冷冻、保存、标注等操作。

3. 存储：存储精子时，需保证存储环境的稳定和温度的恒定。

4. 管理：对存储精子的信息进行记录和管理，确保精子的跟踪和管理。

5. 检测：定期对存储的精子进行检测，保证其质量。

四、责任分工
1. 取样负责人：负责取样工作，确保取得高质量的精子样本。

2. 加工负责人：负责精子加工处理工作，确保精子的存储质量。

3. 存储负责人：负责存储环境的维护和管理，保证其稳定性。

4. 管理负责人：负责精子信息的记录和管理，确保其跟踪和管理。

5. 检测负责人：负责定期检测存储的精子样本，确保其质量。

五、注意事项
1. 对精子的取样、加工、存储等操作均需在无菌条件下进行，避免外界污染。

2. 存储精子时，需保证存储温度的稳定，避免因温度变化而影响精子质量。

3. 对存储的精子信息需进行详细记录，包括取样时间、处理方法、存储温度等。

4. 如发现存储的精子质量出现异常，需要及时通知相关负责人进行处理。

六、附则
本规程自发布之日起生效，如有需要修改，需经过相关负责人和主管部门的审批。

以上为《精子保存操作规程》，希望所有工作人员能严格按照规程进行操作，确保精子保存工作的顺利进行。

冷冻精子、卵子，提前保存生育力阳光一生，将陪你度过你健康、阳光、快乐人生的每一天前不久，据外媒报道，Facebook宣布，为公司女性员工增加一项新的福利，免费冷冻卵子，旨在帮助那些有意把精力放在工作上而又想不影响今后生育孩子的女性。

同时，苹果也计划向女员工提供该福利。

这就涉及到一个问题，即生育力的保存。

卵子冷冻刚刚开始，技术还不成熟人的生育能力是有限的，尤其是对于女性而言。

在某些意外的情况下，生育力还可能会被无情的缩短或终止。

卵子或精子的冷冻即是生育力保存的一种方法。

世界上第一家卵子库已经在美国芝加哥威斯康辛大学医学院建立。

我国目前虽然还没有卵子库，但卵子冷冻技术却并不落后于国外同行的脚步。

除在试管婴儿治疗中的卵子冷冻外，各大生殖中心也已开展，或准备开展自卵冷冻“业务”。

卵子冷冻无疑为那些有可能遭遇生育障碍的人提供了一份“平安”保险。

事实上，卵子冷冻在许多胚胎冷冻被禁止的国家成为生育能力保存的手段之一。

尽管这份保险姗姗来迟，尽管还有许多不尽人意的地方。

卵母细胞脆弱冷冻及复苏伤害较大任何医疗措施都是有风险的，冷冻卵子同样不能例外。

相对于胚胎冷冻技术，卵子冻存技术还不理想，这主要是由于人类卵母细胞较大且脆弱，冷冻与复苏都会对其带来很大伤害，从而降低了受孕成功率。

另外，用冷冻卵子获得的后代的健康，尚缺乏远期观察。

卵子不像精子那样容易获得，需要经阴道穿刺取卵，这就存在一定的手术风险。

为获得较多的卵子，取卵前还需要超促排卵治疗，用药过程中有可能发生与促排卵有关的并发症，如卵巢过度刺激综合征等等。

如上所述，卵子冷冻尽管是女性生育力保存的重要手段，但与我们的期望还有差距。

尤其是对于那些想推迟生育年龄，盲目将卵冷冻，以为想用时就能心想事成的女性朋友。

如果说，冷冻卵子可以规避以后不能生育的风险，那这种风险的规避也是有限的。

因此辅助生殖专家不提倡那种没有任何医疗指征，仅仅为了暂时不生育就盲目将卵冷冻的做法。

什么年龄干什么事，这句话是有一定道理的，最起码没有违背人类发展的自然规律。