紫外吸收分光光度法测定维生素E添加剂
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年第!∀
期中国饲料一∀
一
紫外吸收分
光光
度法
测
定维生素#
添加剂
昆
明市饲料公司李星明杨贺新
各
种单一维生
素添加剂由于价
格都较昂
贵而稳定性
又较差加之一经复合后再进行检
测就很困难
因此其分析对于复合多维添加
剂的生产来
说无论对防范假冒
伪劣品和控
制
产成品
质量即显得
十分重要
维生
素添加剂品
种繁多
分析方法也
较繁
杂
这就给
普通实验室的常规检验工作造成一
定的
困
难由于大多数维生素都具特征紫
外吸
收光谱
因而在
单一维生素的
分析中
紫外吸
收
分光光度法是主要的
分析方法之一对有些
维生素的分析∃
如维生素%&
此法
目
前仍是其
它分析方法所
难以取
代的紫外吸收分
光光度
法测定维生
素添加剂具有试剂简单检测方
便且专一
性强
等优
点一
般使用标准品
比较法
或吸
收系数法
进行
定量标准品比较法虽然测
定系统误差较小但每次都必须平行
进行标准
品测定增加了
分析量而使用紫外
分光光
度
法吸收系数直
接定量当吸收系数一经确定
后在
分析时即可无需使用
标准品因而简化
了操作适于生产企业的一
般日常检验
工作
几年来我们应用该法检测多数品种维生素添
加剂均获得了令人满意的结果其中对∋
(
醋
酸醋的
分析方法较
有代表
性现
介绍如下
材
料与
方法
食
品与试
剂
∗+
,
紫外分光光度计皂化
回流装置恒
温水浴!−.氢氧化钾溶液
乙醚甲醇/+.
乙醇
所有试剂均为分析纯
!
样品的
处理饲用0。
醋酸醋一般为微
粒
胶囊包裹化学稳定性较
好进行皂化处理
使其转
变为相应的醇式结构而充分溶解释
放同时通过萃取除去部分不相
关物质
准确称取−样品
置于!+−12
皂化瓶
中加入+.乙醇+−12
乙醚−12
及
氢氧化钾
溶液!
−12
沸水浴回流皂∀−
一3−
分钟然后
将
皂
化瓶内容物转入!+41
2
分液
漏斗中加人蒸
馏
水3−12
乙醚5612
猛烈振摇
分钟
静置
分
层将下层
醇液
放入另一!+−
12
分
液漏斗
中
加
入乙醚7−12
振摇弃去下层
提取液合并于
第一个分液漏斗中用3−.乙醇5612
和+−12
蒸馏水
各洗一次弃去洗液将萃取液转
移至
!+
612
容量瓶中并用乙
醚定容从
中吸取
51
2
水浴上减压
蒸干用甲醇
溶解残
余物并定
容至−12
容量瓶中然后在紫
外分光光度计
上用8
91
比色
皿以甲醇作空白在
波长!
3−
一
∀+6:1
之间间隔!
一−:1
扫描测定吸
光度
∀
定量方法在∋(
的测定波长范围内存
在一背景吸收此背景吸收随样品及皂
化条
件
的差异会产生一定的变化如果不加
以校正
会对测定造成误差利用“
基线校正
法”
可满意
的消除该背景吸收
在座标纸上以吸光
度为纵座
标波长为横
座标描绘吸收
曲线然后在曲线
左端!
−:1
∃
人&
最低吸收处
和右端∀!
−:1
以&
曲线
接近平
坦处作一切作从吸收峰顶端!
!:1
处作一垂
线相交于∃%’
声!&
点其高度就是经校正后的吸
光度%1;<∃
校正&
即%1;<∃
校正&=%
一%(
见图
含量计
算公式如下(
%1;<∃
校正&
一
∋
.=
二畏幕井宁兰书三二>
−−
#8二>?
义≅
一“
%1;<∃
校正&
一经校正后所得最大吸收波
一∀!
一中国
饲料!
年第!∀
期
长处的吸光
度
#
次一∋
。醋酸醋的吸收系数
一
比色皿
厚度
≅
一26612
被测溶液中样
品的克
数方法稳定后也可不必扫描吸收曲线
只
需测定%
入入处的吸光度%
%%
然后按
下式计
算校正吸光度(
Α
%一%
%
1;<∃
夜止&=%
一下一一
二=
∃%
一人&
一%
%
一%
−
−
+!
结果与
讨论
!)
吸
光系数#
次的测
定准确称取∋#
醋酸
酷纯品∃
美国Δ8,Ε%&−
左
右按样品处理
方法进行操
作然后从已定
容的!+−
12
乙醚溶
液中吸取512
减压蒸干迅速用甲醇
溶解定容
于!+12
容量瓶中扫描测
定吸光
度并
求出
%
1;<∃
校正&
计算吸光系
数#
滋
%Χ入Χ
#8兰%1;<∃
校正&
≅
!
−
图8
∋。!!∀!
−入
紫外吸收曲
线
表同时作重复试验
以考查方法精密度结
果见表
精密
度试验结果
!∀3
+ ∗7
∋#
醋酸酷∃Φ
&−! ++−∀33−
!−−
∀!∗∗−∀−
−!7∀∀−∗∗−!!+−
!7
%1
;<∃
校正&−
−−−−
∀++−
+∀∀−
+∀−
∀−− ++−
++77−+
∀∀−
∀
#8盔
+∀+ ∀ + −∀++∀ −++∗
#Γ
蕊平均值值 −
标准
差−
7
变异系数∃.&
23
以上测定得出的吸光系数#
撬值与一般
资料中所列数据
比较略低这主要是由于标准
品的结构
和背景校正的不同所致实验中曾用
Η
一生育酚标准
品进行
了测定其结果与资料同
所
以在应用本法时最好不要盲
目使用资料中给
出的数据而应实测吸收系数该吸收系数一经
得后日常分析中即可根据其计
算∋
。
的含量
%:
丫
∃
校正&!)!
线性回归
分析从已皂化定容标示量为
+
−.的样品溶液中分别
吸取
!∀3512
在
−12
容量瓶内减压蒸干用甲醇定容其浓度
约相当于!++ +3!3−拌ΦΙ12
分别测定
吸光度
以%
1;<∃
校正&
对浓度作曲线见图!
同时用最小二乘法作
回归分析结果见表!
表!
回
发试验结果
−7
− 浓
度∃
产ΦΙ12&&
。
讥+−)
瓷+−)
认7。‘/
(+。
‘(
(。
%1
;<∃
校
正&
回归方程ϑ=−−
∗
Κ−−−
+∀!>>
相关系数∃
Λ&−
−3
−!
!
7+ 73!3−
Μ∃ΝΦΙ
8:2&
图!
线性关系曲
线考虑
到仪器
性能的限制吸光度在−
一
−
之间时测量误差较小因此测定浓度最好
在!
−
一+−拌ΦΙ12
为宜
!∀
回收实验用实测含量为37
纬的样品
加入不同量
的标准∋
醛酸酷然后按样品处理
操作测定
回收率结果见表∀