高效液相色谱仪操作培训综合评价建议

国产高效液相色谱仪安全操作及保养规程高效液相色谱仪是一种用于分离、检测、鉴定物质成分的分析仪器，广泛应用于化学、药学、生命科学、环境监测等领域。

国产高效液相色谱仪具有体积小、分辨率高、灵敏度好、操作简便等特点，深受用户欢迎。

为保障设备的安全性、提高设备的使用寿命，下面介绍国产高效液相色谱仪的安全操作及保养规程。

安全操作规程1. 操作前的准备工作在操作高效液相色谱仪之前，需要进行以下准备工作：•熟悉仪器的使用说明书、安全操作规程、设备的适用范围及技术参数等；•检查仪器的电气接地是否正常；•校正仪器的流量计、压力计、波长计等仪器，确保仪器处于良好状态；•选择合适的试剂、色谱柱、移液管等试剂及配件，避免使用过期、损坏或不适用的试剂；•启动仪器，进行预热、调试、清洗等操作，确保仪器处于正常工作状态。

2. 使用中的操作规程在使用国产高效液相色谱仪时，需要注意以下操作规程：•操作过程中应保持专注，避免走神或干扰他人的工作；•正确选择、安装试剂及配件，操作时要轻拿轻放，防止出现破损、泄漏等危险；•严格按照仪器的操作流程操作，避免出现误操作或操作失误；•在操作过程中要经常观察仪器的运行状态，如发现异常情况应及时停机检查；•操作结束后，及时清洗、消毒试剂及配件，确保仪器的卫生和安全性；•关机时，应按照操作说明书的要求，正确操作关机步骤。

3. 维护保养规程国产高效液相色谱仪是昂贵的分析仪器，正确的维护保养能够延长设备的使用寿命，提高设备效率，降低设备故障率。

以下是维护保养规程：•定期清洗、消毒柱部、泵部、检测器等部件，并检查各部件的连接、密封是否正常；•定期更换泵的推杆、密封圈、乳头等易损件；•定期校验、校准仪器的流量计、压力计、波长计等仪器；•定期更换、保养色谱柱；•定期更换系统的溶剂、试剂瓶等部件，避免出现试剂变质、污染等情况；•定期检查仪器的电气接地是否正常；•遵守厂商的维护保养要求，注意维修保养的次数和间隔时间。

高效液相色谱培训小结分析：XXX 我来研究院已经一年多，主要做基本分析操作，需要负责液相，为了严格保证分析数据的准确性，必须以严谨科学的态度对待，从制备样品过程到仪器采集过程都要非常谨慎、认真。

这次有幸得到公司提供的培训机会，去上海Agilent 科技大学培训中心参加了为期四天的液相色谱培训。

培训期间老师讲述了从硬件、软件及维护保养各个方面的问题，让人一下充实了不少。

通过这次的学习培训，使我对分析过程有了深入的理解，并对高效液相色谱仪的使用和维护有了更全面的了解和更多的认识，现在做总结如下：液相色谱主要分为：溶剂柜、脱机机、泵、自动进样器（手动进样器）、柱温箱、检测器。

各个模块由CAN线进行通讯连接，使得各个模块形成一整套系统。

化学工作站和仪器系统之间用LAN线连接。

一、硬件1、在线脱气机2、泵（我公司使用的是四元泵，当使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液接到四元比例阀下面的通道上（A或D）,有机溶剂接到上面的通道上（B或C）。

如果经常使用盐溶液，建议定期用水冲洗所有的通道以去除阀口上可能出现的盐沉淀。

）3、进样器（我公司为标准自动进样器。

进样体积重复性高，进样动态范围宽，连续冲洗流路并有洗针功能，降低样品残留，可以容纳不同规格的样品瓶。

灵活的进样程序编程可以进行样品前处理，使用旁路可以降低延迟体积。

）4、柱温箱5、检测器（我公司使用的是VW检测器用于产品开发及质量控制。

）二、化学工作站1、方法的编辑和保存2、谱图处理及优化3、积分参数优化4、光谱功能5、校正表建立，设定报告，报告设计三、日常维护和常见色谱故障1、溶剂准备：溶剂过滤是要防止固体颗粒损伤仪器或柱头。

常用0.45um的滤膜，使用色谱纯的溶剂。

定期更换溶剂，避免溶剂瓶直接日照，每两天更换或过滤溶剂，用滤膜过滤溶剂去除微生物，在使用时一定要脱气。

2、保护色谱柱①过滤所有的溶剂和样品②使用保护柱③仪器在使用完毕，要冲洗整个系统，移走系统中缓冲液④在适当的溶剂中保存柱子⑤柱子在不使用时，两端密封保存⑥注意色谱柱的pH直使用范围⑦不要高压冲洗柱子⑧不要高温下过长时间使用硅胶键合相3、常见色谱故障①双峰原因：柱头塌陷或柱床运动、柱前滤芯堵塞、样品量过大、进样器流路存在分叉流路。

高效液相色谱仪操作培训综合评价建议
高效液相色谱仪操作培训综合评价建议：
1. 内容完整性：评价培训内容是否全面，是否包含基础概念介绍、仪器操作步骤、常见故障排除等方面，是否能够满足学员的学习需求。

2. 教学方法：评价培训的教学方法是否多样化，是否利用实际案例、图表、演示等方式进行教学，是否能够提高学员的学习兴趣和理解能力。

3. 实践环节：评价培训是否设置了足够的实践环节，是否提供了实际仪器进行操作的机会，是否有辅导员全程指导学员进行实验操作，提供及时的解惑与指导。

4. 效果检验：评价培训是否设置了考核机制，通过实际操作、报告撰写等方式对学员进行能力评估，以检验培训的效果和学员的学习成果。

5. 实用性评价：评价培训的实用性，是否能够帮助学员解决实际工作中遇到的问题，是否提供了实际操作中的技巧和注意事项，是否能够提高学员的实际操作能力。

6. 反馈机制：评价培训是否设立了学员反馈机制，是否有专人负责收集学员的意见和建议，是否能及时反馈，改进课程内容和教学方法。

7. 培训师资评价：评价培训师资的专业水平和教学能力，培训师资是否具备丰富的实践经验，是否能够解答学员的问题，解决学员的实际困惑。

以上是对高效液相色谱仪操作培训的综合评价建议，通过以上评价可以全面了解培训的内容和效果，进而提供改进意见和建议。

高效液相色谱仪的操作与维护指南高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）作为一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、药学、环境科学等领域。

为了保证仪器的正常运行和获得可靠的分析结果，正确的操作和科学的维护是非常重要的。

本指南将详细介绍高效液相色谱仪的操作和维护方法，以帮助用户正确使用该仪器。

一、高效液相色谱仪的操作方法1. 准备工作在操作前，需要先进行一些准备工作。

首先，检查仪器是否处于稳定的工作环境中，以确保仪器不受外界干扰。

其次，检查所有的连接与密封件是否完好，确保流体不会泄漏。

最后，检查溶剂和样品的储存条件，保证其符合要求。

2. 开机与关闭正确的开机和关闭步骤可以延长仪器的寿命。

开机前，需要检查电源和其他外部连接。

按照仪器的说明书，按顺序打开电源和其他必要的开关。

关闭仪器时，应按照相反的顺序关闭开关，并断开电源。

3. 样品准备与进样在进行进样操作前，需要准备好样品和溶剂。

样品准备时，应遵循相应的样品制备方法，确保样品的准确性和稳定性。

进样时，应根据实验需求设置适当的进样方式，并注意定量准确。

4. 仪器参数设置在进行分析之前，需要设置仪器的参数，以调整流速、温度、检测波长等参数。

仪器的参数设置应根据实验目的和样品特性进行优化调整，确保获得准确的分析结果。

5. 分析运行与数据处理设置好仪器参数后，可以开始进行分析运行。

根据实验要求和样品特性，选择合适的分析方法和梯度程序。

在分析过程中，应定期检查仪器运行状态，注意观察流速、峰面积、保留时间等数据，并记录相关结果。

6. 仪器清洗与维护分析结束后，必须对仪器进行清洗和维护。

首先，关闭流体通道，清除流体残留物和样品残留物。

然后，根据仪器说明书的要求，进行仪器的常规清洗和维护工作。

定期检查和更换液相柱、检测器等易损件，以保证仪器的正常运行。

二、高效液相色谱仪的维护方法1. 液相柱维护液相柱作为HPLC分离的重要组件，需要定期维护和保养。

使用高效液相色谱仪会碰到的问题及操作规程使用高效液相色谱仪会碰到的问题高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分构成。

储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的调配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附—解吸的调配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分别成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。

高效液相色谱仪在使用过程中通常会碰到下面几个问题：1. 色谱柱中的流动相见排干吗？不少做色谱分别试验的人碰到过这样的情形：不慎未适时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。

如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中全部流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，假如泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。

即使泵中充分了空气，泵也不会将空气排入色谱柱。

由于泵只能输送液体，而不能输送空气。

相比之下，另一个更可能发生的情况是忘掉盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。

同样，整个色谱柱干枯的情况不太简单发生，多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了，因挥发掉全部溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。

即使色谱柱真的变干了，也不愿定就不可救药了。

可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂（如经氦气脱气的甲醇）冲洗色谱柱以除去气体。

较低的表面张力有助于浸润填料表面；已脱气的溶剂应当能够溶解并去除滞留在填料中的气体。

色谱柱大约需要（以1mL/min的流速）冲一个小时或更多的时间被彻底浸润，恢复到正常状态。

2. 使用PEEK（polyetheretherketone）管路和接头需要注意什么问题？假如常常需要更改流路或更换不同品牌的色谱柱，使用PEEK材料制成的管路和接头会特别便利。

PEEK管路简单连接；PEEK接头不仅无需工具，手拧即可固定，而且简单调整锥箍之外的管路长度，便利与不同品牌或规格的色谱柱相连接。

高效液相色谱操作反思总结
高效液相色谱（HPLC）是一种常用的分离、纯化和检测化合物的方法，广泛应用于化学、生物等领域。

在进行HPLC实验时，需要注意一些操作细节，以下是我对HPLC实验操作的反思总结：
1. 样品处理：样品处理对分离效果和色谱柱寿命有很大影响。

在进行HPLC操作之前，需要对样品进行处理、提取和纯化。

在此过程中应注意，要避免使用对柱寿命有害的有机溶剂，如氯仿、四氯化碳等。

2. 色谱柱选择和预处理：色谱柱是分离的关键，不同的柱选择和处理方法会产生不同的分离效果。

在柱选取时要注意其它物质的相容性、性能、价钱等因素，柱预处理包括洗涤、保养和平衡等步骤也要认真进行。

3. 溶剂质量控制：HPLC操作中，溶剂质量对分离效果影响较大，所以要注意购买质量好的溶剂，并进行严格的质量控制和标记。

4. 压力和流速控制：压力和流速是影响HPLC分离效果的重要系统参数，高于某一限度会对分离产生影响。

在实验中，应按照实验要求仔细调整柱压和流速。

5. 检测方法和参数设置：检测方法和参数的选择和设置，例如波长、检测器类型、灵敏度等都对色谱分离结果的准确性和可靠性有很大影响。

总之，在HPLC操作过程中需要严谨认真，注意每个细节的控制，以取得更加优秀的实验结果。

高效液相色谱仪使用中常见问题及对策高效液相色谱（HPLC）作为一种分离技术和方法，目前已经发展到一个全新的阶段。

高精度的输液泵，应用广泛的色谱分离柱，低噪音、高灵敏度的各种检测器和功能强大的数据处理软件系统的出现，都推动了液相色谱技术的迅猛发展。

液相色谱仪正以它分辨率高、分析速度快和应用广泛的优点倍受仪器分析工作者的青睐，广泛地应用于医药卫生、环境监测、食品检测等领域。

作者本人从事液相色谱分析工作二十多年，应用HPLC技术在血药浓度、生物胺、核苷酸、蛋白质浓度测定等实际工作中，积累了许多的方法和经验，在这里与大家交流，希望能对同行们有所帮助和借鉴，共同促进液相色谱分析技术的发展。

1高效液相色谱仪的基本工作原理高效液相色谱仪如图1所示，是由溶液贮器、高压泵、进样系统、色谱分离柱、检测器和数据处理系统几部分组成。

高压泵从溶液贮器中抽走流动相，流经整个仪器系统，形成密闭的液体流路。

样品通过进样系统注入色谱分离柱，在柱内进行分离。

柱流出液进入检测器，使已被分离的组分逐一被检测器收集，并将响应值转变为电信号后经放大被数据处理系统记录色谱峰，通过数据处理系统对记录的峰值进行存储和计算[1]。

液相色谱仪是依靠色谱柱进行分离的。

研究证明：物质的色谱过程是指物质分子在相对运动的两相（液相和固相）中分配“平衡”的过程。

液相色谱是以具有吸附性质的硅胶颗粒为固定相，各种洗脱液为流动相。

当液体样品在载体流动相的推动下，在液-固两相间作相对运动时，由于各组分在两相中的分配系数（K）不同，则使各自的移动速度不同，即产生差速迁移。

各组分在两相间经过多次分配，从而达到使混合物分离的目的。

上式反映了物质在两相中进行吸附、解吸、再吸附、再解吸…过程中，由于在两相中浓度的不同，而存在分配系数上的差异。

既然分配系数及其差异是引起组分在液相色谱柱分离的根本原因，那么，必然地也会同色谱理论中可测宏观量之间存在着某种定量关系，事实上，色谱理论中通常用容量因子k’的概念来反映物质在两相中的分配关系：k’值可以非常方便地表达组分在两相的分配，又很容易从色谱实验数据中直接测得，是色谱理论中重要的基本参数之一[2]。

高效液相色谱仪安全操作及保养规程前言高效液相色谱仪（HPLC）是一种用于化学分析和检测的重要工具。

为了确保高效液相色谱仪的安全运行和最佳性能，需要遵守一系列的安全操作和保养规程。

本文档提供了详细的操作和保养步骤，以协助用户正确地使用和保护高效液相色谱仪。

安全操作规程操作前1.确保操作人员已经接受了高效液相色谱仪的操作培训并掌握了正确的操作方法。

2.在操作前检查仪器的电源是否正常，仪器的机械结构是否稳定，是否有明显损坏或松动的部件。

3.确保试剂和溶剂的选择和准备符合分析要求，并遵守相关安全规程，如使用防护手套和护目镜。

4.加载样品前必须确定样品的性质和浓度，并根据需要适当稀释和过滤。

操作时1.操作人员应当始终注意安全。

在操作过程中避免直接接触样品和溶剂，避免口误和吞咽样品或溶剂。

2.操作过程中，若发现异常状况，如机器停滞或跑偏、压力急剧增高等，应立即停止操作并检查仪器或相关部件。

3.调整某些参数时，如流速、温度、压力等，应尽量保持小幅度调整，避免快速快速调整。

4.操作结束后，必须关闭仪器并注销相关操作，清理工作区域和操作台面，清洗使用的管道、器皿和附件，并将物品归位。

操作恢复1.若长时间未使用高效液相色谱仪，请在使用前仔细检查机器各部位是否存在异常。

2.重新启动仪器时，请按照操作手册上的步骤重新进行仪器的初始化和调试。

废物处理高效液相色谱仪所使用的溶剂和其他化学废物，必须按照当地的环保规定进行处理和处置。

在处理前应该咨询相关专业人员。

保养规程日常检查和保养1.每天开始操作前，检查仪器的所有零部件是否齐全，零部件是否完整，清洁状态如何。

2.操作后，每天对样品室、管路等部位进行清洁，确保无污物堆积和管路没有堵塞现象。

3.每周对色谱柱进行洗涤和清洁，可以使用去离子水和乙醇为主要清洗溶剂，以确保柱子的性能和使用寿命。

4.定期对机械结构和电子部件进行检查和保养，保证设备运行的稳定性。

液路检查和保养1.定期检查操作中常温箱的工作状态和温度。

实验室高效液相色谱仪管理、使用以及维护探讨摘要：在实验室里想要取得良好的色谱分离效果，就要对高效液相色谱仪进行科学的管理、使用以及维护，并且仪器的使用寿命也受到了管理和使用维护方式的影响。

本文对实验室里的高效液相色谱仪的管理、使用以及维护进行了分析探讨，并且提出了有关的建议对策。

关键词：高效液相色谱仪；管理；使用及维护根据科学技术的发展，高效液相色谱因为其具备灵敏度高、选择性高并且效率高的特性，在化工专业得到了比较广泛的应用。

实验室的高效液相色谱仪除了能够进行微量组分的分析测定以外，还能够用来进行制备分离，它的应用范围要远远超过其他的分离检测设备，对于生化医药样品的分析检测结果更为突出，在食品安全、环境科学、农药检测等多个领域都得到了非常广泛的应用。

一、实验室高效液相色谱仪使用时的注意事项（一）、需要注意周边的环境高效液相色谱仪和其他的分析仪器一样，对于使用时的周边环境的照明度有着一定的要求。

在使用高效液相色谱仪的时候，需要保证实验室内的光照亮度适中，不能够让阳光直射。

为了避免阳光对仪器进行直射，需要让仪器的显示屏侧面对着光线。

实验室需要配备遮光的窗帘，方便对室内的光线进行调节。

除此以外，实验室需要具有良好的通风条件，对实验室进行通风能够帮助排除实验室内产生的有害气体，保证实验室人员的生命安全。

对实验室进行通风主要有两种方式，第一种是进行自然通风，利用门窗等进行通风，第二种是强制通风，利用通风柜、排风扇等进行通风。

对于实验室的湿度和温度也有着要求。

合适的温度和湿度能够保证仪器的正常运行和稳定的性能。

高效液相色谱仪对于温度的要求在20—30℃，在使用的时候，温度的变化不能超过3℃，避免出现大幅度的波动。

在夏季的时候需要保证温度不超过30℃，避免高温对仪器的性能产生影响。

室内的湿度需要控制在60%以下。

（二）、需要谨慎使用色谱柱在进行新的色谱柱的使用的时候，需要对说明书进行仔细的阅读，并且要对柱效进行测试，这种对柱效进行的测试需要定期开展，对于其色谱图需要进行保留，并且对反应条件进行记录。

高效液相色谱仪1260培训总结高效液相色谱仪1260培训总结本人于2012年9月24日参加了安捷伦中国药典及杂质分析行业研讨会，重点学习了安捷伦最新HPLC/UHPLC技术在杂质分析中的应用和高效液相色谱仪1260的使用和维护。

通过这次的学习培训，使我对药物分析过程中的杂质分析手段有了更全新的认识，并对高效液相色谱仪1260的使用和维护有了更全面的了解和更多的认识，现在做总结如下：1.HPLC/UHPLC在杂质分析中的应用。

高效液相色谱（HPLC）在药物分析中的应用越来越广，高效液相色谱由于具有高选择性和高灵敏度，并可同时用于有关物质检查与含量测定的特点，已成为医药研究的有力工具。

如在中草药有效成分的分离和纯度测定，人工合成药物成分的定性和定量测定，新型高效手性药物中手性对映体含量的测定等方面都需要用到高效液相色谱的不同测定方法予以解决。

而目前超高效液相色谱（UHPLC）更体现了它在药物杂质分析中的应用。

超高效液相色谱较高效液相色谱有更快的分析速度，节省化学试剂，提高工作通量，提高分离度，提高实验室效率等好处。

在药物杂质分析中应用广泛，主要用于药物中杂质的分析。

2.安捷伦高效液相色谱仪1260的使用。

安捷伦高效液相色谱仪1260由几部分组成，脱气机，四元泵、进样器、柱温箱和检测器。

安捷伦1260HPLC系统采用积木式堆积结构，方便用户按照自己的需要配置不同的的系统，整个系统的流路自上而下设计、连接，减小了系统的死体积和延迟体积。

脱气机的原理就是使用半透膜管路，允许气体分子通过，液体分子无法通过，使用真空脱气机可以降低噪声，保证保留时间的重现性，与He脱气相比，更方便，更节省费用。

四元泵比单元泵多了四元比例阀，由单元泵可以升级到四元泵，除了要加上四元比例阀外，还要更换主板。

需要注意的是，当使用盐溶液和有机溶剂时，要将盐溶液接到四元比例阀下面的通道上，有机溶剂接到上面的通道上。

如果经常使用盐溶液，要定期用水冲洗所有的通道以去除阀口上可能出现的盐沉淀。

高效液相色谱仪的基本操作和使用1.准备工作：-确保高效液相色谱仪的设备和耗材齐全。

-检查色谱柱，确保色谱柱选择正确并在有效使用期内。

-检查溶剂的质量和纯度，确保溶剂无杂质。

-设置所需的操作温度。

2.连接高效液相色谱仪：-将进样器连接到色谱柱，并将进样针座固定住。

- 将固相柱插入色谱柱座，然后将电导/ UV-Vis检测器连接到色谱柱座。

3.样品制备：-将待测样品溶解于合适的溶剂中，并进行必要的前处理步骤（如过滤、稀释等）。

-对于固体样品，可以采用适当的溶解方法，如超声波处理等。

4.设置色谱仪参数：-开启电源，等待色谱仪预热稳定。

- 打开色谱仪的软件，并设置所需的参数，包括流速、波长（对于UV-Vis检测器）、进样量、运行时间等。

5.校准仪器和程序：-制备标准品溶液，并用标准曲线法对色谱仪进行校准，以确保仪器输出的结果准确可靠。

-确认色谱仪的波长和检测器的线性范围，并根据需要进行修正。

6.进样：-打开进样器盖，用吸尘器吸出残液，然后用纯溶剂将针清洗干净。

-分别进行空白样品和待测样品的进样，保证进样量准确。

7.开始运行：-在软件界面上点击“开始运行”，观察色谱图输出的曲线形状和峰的出现。

-根据需要，可以进行多次重复运行。

8.结果分析：-对于定性分析，根据色谱图的特征峰形状、保留时间和波长，进行物质的鉴别。

-对于定量分析，根据标准曲线和色谱图的峰面积，计算出待测样品中目标物质的浓度。

9.清洗仪器：-运行结束后，关闭仪器，并将进样器和色谱柱进行清洗。

10.维护：-定期检查仪器的性能和功能是否正常。

-及时更换色谱柱、固相柱和检测器，确保仪器的正常运行。

-做好仪器维护和维修记录。

高效液相色谱仪操作规程
《高效液相色谱仪操作规程》
一、实验目的
本实验旨在通过高效液相色谱仪分析样品，准确测定目标化合物的含量，并学习高效液相色谱仪的操作方法和技巧。

二、实验设备
1. 高效液相色谱仪
2. 注射器
3. 色谱柱
4. 移液管
5. 色谱仪软件
三、操作步骤
1. 打开高效液相色谱仪的电源并进行系统初始化，启动色谱仪软件。

2. 调整流速，进样量等参数，使得实验条件符合要求。

3. 将样品通过移液管注入色谱柱中，注意避免样品泡沫和气泡的产生。

4. 设置色谱条件，如梯度洗脱，流速等，启动色谱分析。

5. 记录实验数据和结果，并进行数据处理和分析。

6. 清洗色谱仪，保持设备清洁。

四、实验注意事项
1. 在操作色谱仪时，要严格按照操作步骤进行，严禁随意更改参数。

2. 在进行样品进样时，要小心操作，避免产生气泡和样品泡沫。

3. 在进行色谱分析时，注意梯度洗脱条件的设置，保证分析结果准确。

4. 在实验结束后，及时清洗色谱仪，保持设备干净。

五、实验结果
根据实验数据和结果，可以得出目标化合物的含量和纯度，并进行结果的解释和分析。

通过《高效液相色谱仪操作规程》的学习，使我们更加熟悉高效液相色谱仪的操作方法和技巧，能够准确进行样品分析，为科研工作的开展提供了重要的技术支持。

高效液相色谱仪（HPLC）作为一种重要的分析仪器，在科学研究、药物研发、环境监测等领域都有着广泛的应用。

然而，由于其操作较为复杂，使用中需要注意的问题也比较多。

本文将对HPLC使用中需要注意的几点问题进行全面评估，并根据此撰写一篇有价值的文章。

一、样品制备在进行HPLC分析前，样品制备是至关重要的一步。

需确保样品的准确称量和适当稀释，以避免因样品过浓或过稀导致分析结果不准确。

要注意避免样品污染或降解，尤其是针对易挥发性或光敏性样品，在样品制备过程中应采取相应的保护措施，如避光、密封等。

二、色谱柱选择色谱柱是HPLC的核心组件，其选择对分析结果有着直接影响。

在选择色谱柱时，需考虑分析物的特性、分离要求以及实验条件等因素，合理选择适合的色谱柱才能保证分析结果的准确性和可靠性。

色谱柱的保养和更换也是需要注意的问题，及时清洗和更换老化的色谱柱可以延长色谱柱的使用寿命并提高分析效果。

三、流动相及流速流动相的选择和流速的设定直接影响色谱分离的效果。

不同的分析物需要选择不同的流动相，而流速的调整则会影响分离的时间和分离效果。

在使用HPLC时，需要根据实际样品特性和分析要求，合理选择流动相组成和流速参数，以达到最佳的分离效果和分析速度。

四、仪器条件设置HPLC仪器的条件设置也是影响分析结果的重要因素。

包括但不限于，检测波长、柱温、进样量、检测方式等参数的设定，都需要根据具体的分析要求进行合理设置。

需要定期校正仪器的各项参数和检测灵敏度，以确保分析结果的准确性和可靠性。

五、数据处理与结果解释在HPLC分析结束后，得到的数据处理和结果解释也是使用中需要注意的问题。

在数据处理过程中，需要注意确保所用的数据处理软件和算法的准确性和稳定性，以避免因错误的数据处理而导致分析结果出现偏差。

在结果解释中，需要充分考虑实验条件、对照样品和标准曲线等因素，以得出准确可靠的分析结果。

总结与观点HPLC在使用中需要注意的问题包括样品制备、色谱柱选择、流动相及流速、仪器条件设置以及数据处理与结果解释等多个方面。

高效液相色谱仪（hplc）的操作经验（对外版）本人从事药品质检工作经验一段时间，将自己对仪器操作的一些感悟写出来，力求让那些初学者能够轻松掌握。

因为本人刚开始也是很茫然的，看着一大堆文字资料无从下手，所以也能体会做为一个新手遇到的困难。

现在这个操作流程与以往教科书中繁琐的讲解不同，力求以最简洁的语言让出学者学到东西，从一个新手开始出发学习hplc的操作。

好的那么我们就以这台岛津lc-20at为例，给大家讲讲具体的操作流程。

一台完整的色谱分析仪应包含：进样系统（泵），输液系统，分离系统，检测系统，数据处理系统。

先介绍下这台色谱仪的主要部件：上部为检测器spd-20a，通常为紫外检测器，下部为泵，为排气，冲洗色谱柱之用途；右面的环状物是进样器(六通阀)，将溶液注入其中；再右边的柱状成为注温箱，控制温度的作用（15~25C。

）注温箱的内部便是心脏部分—色谱柱，用于分离各组分。

此图为数据处理系统。

需要在计算机上安装lcsolution软件，便可进行积分等操作，对峰进行处理，控制整个流程。

以此计算含量，相关物制等。

介绍完基本部件，那么我们开始讲讲操作的流程。

1配置流动相。

通常用甲醇和水80：20，75：25，或者乙腈配址流动相（不同物质流动相不同）。

抽滤，超声使溶解。

2开启计算机，泵，和检测器。

用大针管冲洗进样口，待走一段基线后，准备进样。

3流动相配置好后，将滤器换入该流动相中，盖好塞子，开泵，冲洗。

4冲洗完毕后，点击[单词运行]打开方法文件，先进一针空白。

然后用流动相润洗几次，进样。

（样品溶液取1mg至10ml容量瓶，超声），进样量应为进样环体积5倍。

数据保存在相应文件夹下。

5等待峰走完后，开始积分。

出去空白的峰不积分之外，其他都需积分。

打印报告，可以看到峰面积，含量等数据。

6清洗。

同样用大针管注入纯水。

半小时后可关机。

注意保存数据。

以备查验。

高效液相色谱仪使用中应注意的几个问题
使用高效液相色谱仪时，需要注意以下几个问题：
1. 柱温控制：高效液相色谱仪通常需要在一定的温度下进行分析。

因此，使用过程中需要确保柱温控制系统稳定，并按照要求设置适当的柱温。

2. 流速控制：在使用高效液相色谱仪时，需要准确控制流速以保证分离效果。

不同的分析条件有不同的最佳流速范围，因此在实验前要进行流速校正并按需调节。

3. 样品准备：样品准备是影响分析结果的重要环节。

首先需要确保样品充分溶解，可以使用适当的溶剂和溶解条件。

其次，在样品准备过程中要注意避免造成杂质的污染。

4. 柱的选择和保养：根据分析目标，要选择适合的色谱柱。

不同的柱具有不同的分离能力和选择性，因此要根据样品特性选择适合的柱。

同时，注意柱的保养和更换周期，定期进行柱的清洗和调整。

5. 检测器选择和参数设置：高效液相色谱仪通常配备有不同类型的检测器，如紫外检测器、荧光检测器等。

根据分析目标选择合适的检测器，并设置合理的检测参数。

6. 质量控制和数据分析：使用高效液相色谱仪分析时，要注意进行质量控制以确保分析结果的准确性和可靠性。

此外，对于分析数据要进行合理的统计和分析，以得出有意义的结论。

这些问题都是在使用高效液相色谱仪时需要注意的关键点，正确操作和维护设备可以提高分析的准确性和可靠性。

高效液相色谱仪的使用与故障分析摘要：随着国家经济的飞速发展，人们的生活水平也不断的提高，从物质到精神的极大满足，人们对食品安全的关注度越来越高，保障食品安全势在必行。

高效液相色谱是检测过程中的常用仪器，发挥着不可替代的作用。

高效液相色谱可以检测防腐剂、甜味剂、色素、霉菌毒素、活性成分、营养素和食品中可能存在的各种污染物等。

关键词：液相色谱仪；使用；故障引言随之衍生而来的高效液相色谱法作为制备分离和分析分离的重要手段备受科研工作者青睐。

但与此同时液相色谱的技术难度和仪器设备也变得越来越复杂，因此色谱柱一些条件的改变或环境的微小扰动也会影响色谱仪的测量。

1高效液相色谱仪的介绍液相色谱仪是科研中用来分离、分析物质的重要检测设备。

在20世纪六十年代末与七十年代初，人们在经典液相色谱的基础上进行了一系列改进，采用高压泵加快液体流动速率，采用微粒固定相提高柱效从而克服了经典液相色谱分离速度慢、柱效低的缺点。

现代高效液相色谱填料粒径小，为了达到适用的流动相流速，高效液相色谱柱有很高的柱前压，加上其他方面的改进，高效液相色谱仪变得越来越复杂和昂贵。

为了能指导人们更加高效便捷地使用液相色谱仪，笔者列举了高效液相色谱仪测量的各种影响因素，包括仪器硬件配置、参数设置和环境影响，并给出了合适选择建议与解决方案。

2液相色谱仪故障分析及解决办法2.1系统失压系统失压的原因包括：1）溶剂系统故障。

检查溶剂瓶中是否有液体，流动相是否走空，溶剂管路中是否存在气泡。

2）漏液。

注意检查色谱柱两端是否拧紧，接头处是否存在漏液现象。

3）检查流动相滤头是否堵塞。

滤头堵塞可能导致溶剂无法进入管路，导致系统失压。

2.2系统超压系统超压的原因包括：预柱、色谱柱堵塞；在线过滤器堵塞；单向阀堵塞；管路堵塞。

故障排查方法遵循分段方法，从系统末端，分段的去除管路或模块。

需要注意的是，单向阀由阀套和阀芯组成，红宝石材质的阀芯容易被乙腈黏住，造成单向阀堵塞。