血栓形成机制及血小板膜糖蛋白Ⅱb_Ⅲa受体拮抗剂的研究进展

・２６８・Ｊｏｕｒｎａ／ｏｆＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈ２００９Ａｕｇ；３６（４）血栓形成机制及血小板膜糖蛋白ＩＩｂ／ｍａ受体拮抗剂的研究进展

章靓，陈旺，庞文生，胡娟’（福建中医学院药学系，福建福州３５０１０８）

摘要：血小板膜糖蛋白（ＧＰ）ＩＩｂ／Ⅲａ与纤维蛋白原的结合是血小板聚集的终末共同途径，因而ＧＰⅡｂ／Ⅲａ受体拮抗剂可有效地预防血小板介导的血栓形成。本文对血栓形成的机制以及近年来ＧＰＩＩ

ｂ／Ⅲａ受体拮抗剂在抗血栓方面的研究进展作一简要综述。

关键词：血栓；血小板膜糖蛋白Ⅱｂ／Ⅲａ；受体；拮抗剂中图分类号：Ｒ９７３．２文献标识码：Ａ文章编号：１６７４－０４４０（２００９）０４－０２６８－０４

ＭｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓａｎｄＧＰⅡｂ／ｍ

ａｒｅｃｅｐｔｏｒ

ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ：ａｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓ

ＺＨＡＮＧＪｉｎｇ，ＣＨＥＮＷａｎｇ，ＰＡＮＧＷｅｎ—ｓｈｅｎｇ，ＨＵＪｕａｎ

（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＦｕｊｍｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｆｕｚｈｏｕ３５０１０８，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎｏｆｐｌａｔｅｌｅｔｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ（ＧＰ）ＩＩｂ／ｌｌｌａｗｉｔｈｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎｉｓｔｈｅｆｉｎａｌｃｏｍｍｏｎｐａｔｈｗａｙｏｆｐｌａｔｅｌｅｔａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ．ＧＰⅡｂ／ＩＩＩａｒｅｃｅｐｔｏｒａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓｍａｙｂｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｉｎｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇｐｌａｔｅｌｅｔ—ｍｅｄｉａｔｅｄｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ．ＴｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｒｅｖｉｅｗｓｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓａｎｄｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆＧＰＩＩ

ｂ／ｌｌｌａｒｅｃｅｐｔｏｒａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓｉｎｔｈｅａｎｔｉ－ｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃｔｒｅａｔｍｅｎｔｉｎｒｅｃｅｎｔ

ｙｅａｒｓ．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ；ｐｌａｔｅｌｅｔｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎＩＩｂ／ｌｌａ；ｒｅｃｅｐｔｏｒ；ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ

血栓形成与心脑血管疾病密切相关，世界每年死于心血管病的人数约１３００万¨Ｊ。一些常见疾病，如血小板无力症、动脉粥样硬化、缺血性心脏病、急性心肌梗死、脑血管疾病和静脉血栓形成等均与血小板功能异常密切相关。导致血栓形成的因素很多，主要有血管内皮损伤、内外凝血系统异常和血流动力学异常等，血小板的聚集对心脑血管疾病的发展起着非常重要的作用。本文将对血小板介导的血栓形成过程以及近年来血小板表面膜糖蛋白（ＧＰ）Ⅱｂ／Ⅲａ受体拮抗剂在抗血栓方面的应用作一简要综述。收稿日期：２００９－０４－１３基金项目：陈可冀中西医结合发展基金资助项目（Ｎｏ．ＣＫＪ２００９００９）；福建省高校中药学重点实验室开放课题基金资助项目（Ｎｏ．ＣＫＪ２００７０２４ＺＹＸ２００７０２）；福建省教育厅科技项目基金资助项目（Ｎｏ．ＪＡ０７１２１）作者简介：章靓，女，在读硕士研究生，研究方向：药物质量控制研究，Ｅ—ｍａｉｌ：ｓｍｘｌｓ５２２＠１２６．ｃｏｒｎ・通讯作者：胡娟，女，教授，研究方向：中药活性成分高通量筛选，Ｅ—ｍａｉｌ：ｈｕｊ＠６ｔｃｍ．ｅｄｕ．ｅｌｌ１血小板介导的血栓形成血小板介导的血栓形成分为３个阶段：首先经血管性血友病因子（ｖＷＦ）介导糖蛋白ＧＰＩｂ／Ⅸ／Ｖ复合物与胶原蛋白结合，将血小板黏附于血管内皮下；随着血液的流动，血小板缓慢的向前滚动，同时发生形态的改变，通过膜上胶原受体与胶原牢固结合，将血小板沉积并黏附于受损血管壁上，并释放出一系列的活性因子；释放出的活性因子进一步激活血小板，使ＧＰ１１ｂ／１１ａ发生构象转变，暴露出结合位点，通过纤维蛋白原的“桥联”作用使血小板聚集，进而导致血栓的形成旧’３Ｊ。下文将重点介绍黏附受体、受体激动剂以及整合素受体在血小板聚集过程中所起的作用。１．１黏附受体在血管壁损伤部位，血小板与血管内皮下胶原发生黏附反应。血小板表面胶原受体主要有２类：整合素ｄ：Ｂ，（ＧＰＩａ／ＩＩａ）和ＧＰＶＩ。ＧＰⅥ是氨基酸类化合物，相对分子质量为３４８３６，从ＳＤＳ凝胶电泳上看其表观分子量为６２ｋｕ，其中４５％的相对分子

万方数据国际药学研究杂志２００９年８月第３６卷第４期・２６９・

质量来源于共轭肽链的糖基。在血小板膜上，ＧＰⅥ与ＦｃＲ，／链以盐的形式非共价结合形成复合物，该类受体复合物与胶原蛋白的结合刺激了血小板分泌、形状改变和聚集的信号传导ＨＪ。整合素ａ：Ｂ．是另一个主要胶原受体，经“由内到外”的信号激活后与胶原的亲和力显著增加，协助ＧＰＶＩ共同完成对胶原刺激的信号转导和血小板活化过程”Ｊ。整合素仅：Ｂ，参与黏附，而ＧＰⅥ主要参与血小板黏附后的信号转导和血小板活化。１．２黏附受体激动剂血小板活化后，分泌出一系列凝血酶活性因子，如：二磷酸腺苷（ＡＤＰ），５．羟色胺（５－ＨＴ）等。血小板上的ＡＤＰ受体主要有２类＂Ｊ：Ｐ２Ｙ。和Ｐ＇２Ｙ１２，二者均为Ｇ蛋白配体受体。虽然Ｐ２Ｙ，受体介导的反应较弱，但在ＡＤＰ或胶原诱导的血小板初始活化过程中却起着至关重要的作用。Ｐ２Ｙ，：则与蛋白配体Ｇｉ起协同作用，是维持血小板聚集和血栓稳定的枢纽。血小板活化后，磷脂酶Ａ２被激活，释放出花生四烯酸，并通过环氧合酶（ＣＯＸ）和血栓素合成酶产生新一代的血栓素Ａ：（ＴＸＡ：）。ＴＸＡ：与前列腺素受体通过配体Ｇｑ的偶合作用结合，有助于激活血小板的正反馈作用。１．３整合素受体在血栓形成过程中，整合素ＯｔＩＩｂＢ３（ＧＰⅡｂ／ＩＩＩａ）起着极其重要的作用。它经“由内到外”的信号激活后，与纤维蛋白原的亲和力显著增加，引起血小板聚集，是血栓形成的最后共同通路∽Ｊ。ＧＰＩＩｂ／ｍａ受体主要由２部分组成：ｄ和Ｂ亚单位。相对分子质量为１３６的仅亚单位含有１条重链和１条轻链；相对分子质量为９２的Ｂ亚单位由７６２个氨基酸的多肽组成，包括短胞内区、跨膜区和长胞外区。研究发现，仅ＩＩｂ与８３之间通过非共价键结合，并借助钙维持着其异二聚体的结构。ＧＰＩＩｂ／ｎｌａ受体广泛分布于血小板表面，每一细胞上大约有５００００个ＧＰⅡｂ／１１Ｉａ受体分子。它能识别黏附蛋白分子的２个肽序列，即ＲＧＤ序列及ＫＱＡＧＴＶ序列旧１。ＧＰⅡｂ／ｍａ受体是血小板聚集和血栓形成的一个关键因子，是各种血小板激活剂所产生的激活信号的最后传导通路，已成为抗血小板治疗的靶标。２ＧＰＩＩｂ／ｍａ受体拮抗剂目前临床上广泛使用的抗血小板药物有：ＣＯＸ抑制剂，如阿司匹林等；ＡＤＰ受体拮抗剂，如噻氯匹定、氯吡格雷等。阿司匹林、氯吡格雷等抑制由ＴＸＡ，和ＡＤＰ介导的血小板激活，而ＧＰＩＩｂ／１１Ｉａ与纤维蛋白原的结合是ＡＤＰ、凝血酶、胶原、肾上腺素等多种血小板激活剂诱导血小板聚集过程中的最后共同途径，如图１所示…。近１０年来，以ＧＰＩＩｂ／Ⅲａ为靶点的受体拮抗剂，已成为国内外学者研究的热点‘８｝。

ＧＰＩＩｂ－ｌａ拈抗剂图１抗血小板药物的作用机制

２．１阿昔单抗１９８３年，Ｃｏｌｌｅｒ等一。首次发现小鼠单克隆抗体能直接抑制ＧＰＩＩｂ／Ⅲａ受体与纤维蛋白原的结合，从而抑制血小板的聚集。随后，为了防止免疫原性，将抗体中的Ｆｃ段移除，同时将Ｆａｂ段导人人的免疫球蛋白，形成了嵌合体化合物阿昔单抗（ａｂｃｉｘｉｍａｂ，ｃ７Ｅ３，ＲｅｏＰｒｏ），它是第１个获得美国ＦＤＡ批准的单克隆抗体。Ｔｃｈｅｎｇ等【ｌ引通过临床观察了阿昔单抗在急性心肌梗死血管成形术应用中的利弊，在经皮冠状动脉介入术（ＰＣＩ）治疗中，辅以阿昔单抗能显著增强急性心肌梗死患者３０ｄ的无病生存率，对心瓣术后再狭窄基本无影响。Ｍｏｎｔａｌｅｓｃｏｔ等…。评价了阿昔单抗在ｓＴ段抬高型心肌梗死（ＳＴＥＭＩ）患者治疗中的疗效，调查选取１１０１例患者，随机分为阿昔单抗组和安慰剂组，比较死亡和心肌梗死发生率。随访结果表明，安慰剂组的死亡率为１４．３％，阿昔单抗组为１０．９％；阿昔单抗组的心肌梗死发生率为２．３％，比安慰剂组（５．５％）明显降低，该项研究证实了阿昔单抗在ＳＴＥＭＩ中的应用价值。２．２埃替非巴肽埃替非巴肽（ｅｐｔｉｆｉｂａｔｉｄｅ，Ｉｎｔｅｇｒｉｌｉｎ）是一个合成的环肽，能可逆性阻滞ＧＰＩＩｂ／１Ｉａ受体，选择性高，起效快，本身几乎无抗原性。Ｇｕｒｂｅｌ等¨２ｏ研究了３００和６００ｍｇ负荷剂量氯吡格雷与埃替非巴肽联

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合应用对冠状动脉内支架植入术疗效的影响。研究表明，ＧＰⅡｂ／１１ａ受体抑制剂与氯吡格雷联合应用，抑制血小板聚集的作用可以达到比单独应用负荷剂量氯吡格雷更好，并可以进一步减少心肌坏死发生率。Ｒｏｂｅｒｔ¨乱研究观察了埃替非巴肽治疗急性冠脉综合征（ＡＣＳ）的临床疗效，以患者３０ｄ死亡和心肌梗死发生率为观测点。研究表明ＡＣＳ患者３０ｄ死亡和心肌梗死发生率从对照组的１５．７％降低到埃替非巴肽组的１４．２％，前９６ｈ内可以见到持续的治疗效果，随访６个月仍有益。研究结果还表明，埃替非巴肽对年龄小于６５岁、无糖尿病、未行过冠脉旁路术的男性患者作用更好。２．３替罗非班替罗非班（ｔｉｒｏｆｉｂａｎ，欣维宁）是近年来开发的一个重要的ＧＰⅡｂ／Ⅲｆｌ受体拮抗剂，属非肽类。它通过选择性与血小板膜上ＧＰⅡｂ／ＩＩＩａ受体结合，占据其上的结合位点，使ＧＰⅡｂ／１１Ｉａ受体不能与凝血因子Ｉ结合，从而抑制血小板聚集。替罗非班对各种刺激因素诱发的血小板聚集都有效，其抑制作用与剂量成正比。Ｊａｇｒｏｏｐ等¨４ｏ研究评价了替罗非班在纤维蛋白ｊ形激动剂诱导的血小板变形和聚集中的作用。实验显示，替罗非班不会影响血小板的变形，但却能有效抑制全血中血小板的聚集。Ｄｏｂｒｚｙｃｋｉ等¨纠的研究表明，在ＳＴＥＭＩ患者初级ＰＣＩ中，替罗非班的疗效优于溶栓疗法。替罗非班作为新一代抗血小板聚集药，能有效减少心血管事件，但有潜在出血等不良反应。综上所述，阿昔单抗是一种单克隆抗体，这使其诱发过敏反应的机会增加，且由于阿昔单抗是一种不可逆的血小板抑制剂，它对血小板的作用将持续整个血小板生命周期。埃替非巴肽和替罗非班是人工合成的肽类和非肽类ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ受体拮抗剂，这一特点使其不具有阿昔单抗的抗原性和与受体结合的不可逆性。然而，由于埃替非巴肽和替罗非班对受体的竞争性抑制作用，如果发生出血，输注血小板将无效。２．４基于药效团模型从中草药数据库中搜索ＧＰⅡｂ／Ｉｌｌａ受体抑制剂传统的药物开发模式往往需花费数亿美元数十年的时间，从上万个化合物中才能发掘出一个有应用价值的新药，这种方法周期长、耗资大，有很大的随机性和盲目性。生命科学和信息科学的发展推动了２１世纪创新药物研究的全新面貌，基于靶点设计的药物能高效阻断疾病发生和发展过程中的关键病理环节，已成为药物研发的热点。徐筱杰、胡娟课题组通过对一系列３，４．二氢．１（１日）－异喹啉酮类ＧＰⅡｂ／ＩＩＩａ受体抑制剂进行构象分析，提取其分子中疏水基团、氢键给体、氢键受体、正电荷中心、负电荷中心等特定的化学信息，明确其分子结构与药效之间的关系，建立优化的药效团模型；基于药效团模型从中草药化学成分三维结构数据库中搜索对ＧＰⅡｂ／ｍａ具有抑制活性候选化合物，探索从中草药宝贵资源库中发现抗血栓活性物质。其活性化合物研究结果见文献［１６］报道。