专题1 基因工程
1．基因工程又叫做或。就是按照人们的愿望，把一种生物的某种基因提取出来，加以，然后放到另一种生物的细胞里，改造生物的。
2．基因工程是在上进行的设计施工，基本工具是：基因的剪刀(分子手术刀)——；基因的针线(分子缝合针)——；基因的 (分子运输车)——。
3．限制酶(又称 )：主要从中分离纯化出来；能够识别双链DNA分子的某种，并且使每一条链中的两个核苷酸之间的断开，因此具有。DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端有和两种形式。例如，EcoRⅠ限制酶识别的序列是，在之间切割；SmaⅠ限制酶识别的序列是，在之间切割。
4．DNA连接酶的作用是将拼接(即形成，注意不是黏合或形成氢键)成新的DNA分子(注意DNA聚合酶只能在有的条件下将加到DNA片段的，形成磷酸二酯键)；E·coli DNA连接酶来源于，只能将双链DNA片段之间连接起来；而T4 DNA连接酶能缝合，但连接平末端的之间的效率。
5. 最常用的载体是，它是一种、结构简单、独立于细菌之外，并
的很小的。
6．真正被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上进行过的，其上有一个至多个，供外源DNA片段(基因)插入其中；还有特殊的，供。
7．重组质粒进入受体细胞后，在细胞中进行自我复制(具有)，或上，随染色体DNA进行同步复制；在基因工程中使用的载体除质粒外，还、等。
8．基因工程的基本操作流程：→→
→。
9．目的基因主要是指，也可以是一些；目的基因可以从自然界中已有的物种中分离出来( ，建立从中获取或通过获取，一般只适合于，真核基因因为含有不适合该类方法)，也可以用人工的方法合成( ，通过mRNA反转录得到cDNA，然后建立从中获取或通过获取；如果基因比较小且核苷酸序列已知，也可以通过用化学方法直接人工合成)。
10．基因组文库的构建：将某种生物体内的DNA 提取出来，选用适当的，将DNA 切成一定范围大小的DNA片段，然后，将这些DNA片段分别与连接起来，导入中储存，每个受体细菌都含有了一段不同的DNA片段，而这个群体包含了这种生物的。
11．cDNA文库的构建：用某种生物发育的通过产生 (互补DNA)片段，与连接后储存在一个受体菌群中。
12．cDNA文库属于。与基因组文库比较：cDNA文库较小，，仅含有某种生物的，；而基因组文库较大，，含有某种生物的，仅。
13．PCR是的缩写，它是一项利用的原理在生物的核酸合成技术。反应中需要加入的物质有、、( 的DNA聚合酶)、 (dATP、dTTP、dGTP、dCTP)等；基本过程是：加热至90～95℃使→冷却至55～60℃使→加热至70～75℃使，如此反复进行，目的基因以 (2n)形式扩增。
14．是基因工程的核心，其目的是，并且可以，同时，使目的基因能够。
15．基因表达载体的组成：、、、、。启动子是一段有特殊结构的，位于基因的，是的部位，能驱动基因；终止子也是一段有特殊结构的，位于基因的，其作用是使下来；标记基因的作用是为了，从而将含有目的基因的细胞出来，最常用的标记基因是。
16．将目的基因导入植物细胞最常用的方法是，另外还有和等。
17．农杆菌是一种生活在土壤中的，能在自然条件下感染，而对大多数没有
感染能力。当植物体受到损伤，伤口处的细胞会分泌大量的，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的上的 (可转移的DNA)可转移至受体细胞，并且到受体细胞上。
18．农杆菌转化法是将目的基因插入到上，通过农杆菌的作用，使目的基因进入植物细胞并插入到植物细胞中上，使目的基因的遗传特性得以；基因枪法是利用压缩气体产生的动力，将包裹在金属颗粒表面的打入受体细胞中，使目的基因与其整合并表达的方法，是常用的一种基因转化
方法；花粉管通道法是在植物受粉后，，剪去，然后滴加，使目的基因借助进入受体细胞。
19．将目的基因导入动物细胞最常用的方法是，基本的操作程序是：提纯含有目的基因的表达载体→从雌性动物体内取出卵(体内受精或体外受精均可以)→采用显微注射仪进行→早期胚胎培养→胚胎移植(哺乳动物)。
20．原核生物通常作为受体细胞的原因是、、等，其中以应用最为广泛。
21．将目的基因导入大肠杆菌(细菌)最常用的方法是：先用处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，即处于，再将溶于缓冲液中与混合。
22．目的基因导入受体细胞后，是否可以其遗传特性，需要通过：
(1)首先要检测转基因生物的染色体DNA上，检测方法是采用，即在上用等作标记，以此作为，使探针与待检基因组DNA杂交，如果显示出，则表明目的基因已插入染色体DNA中；
(2)其次要检测目的基因，检测方法也是采用，同样用作，但是与杂交；
(3)最后要检测目的基因，检测方法是从转基因生物中提取，用相应的进行，若出现，则表明目的基因已形成蛋白质产品；
(4)有时还要进行的鉴定，如需要做抗虫或抗病的，又如需要将基因工程产品与天然产品的功能进行。
23．用于转基因植物的抗虫基因有、、、
等。Bt毒蛋白基因是从中分离出来的，Bt毒蛋白被害虫的消化酶降解后会成为，但对哺乳动物无毒害作用。
24．用于转基因植物的抗病基因有 (抗病毒)、 (抗病毒)、 (抗真菌)、 (抗真菌)等。
25．用于转基因植物的抗逆基因有 (抗盐碱和抗干旱)、 (抗寒)、抗除草剂基因等。
26． (乳房生物反应器)技术：将与等调控组件，通过等方法，导入哺乳动物的中，然后，将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。
27．治疗遗传病的最有效的手段，它通过把导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。用于基因治疗的基因有三类：、和。
28．是指以作为基础，通过或，对现有进行改造，或制造一种新的，以满足人类的生产和生活的需求。(基因工程在原则上只能生产自然界蛋白质)
29．蛋白质工程的基本途径：→→→。(天然蛋白质合成的过程：→→→→ )
30．蛋白质工程成功难度很大，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的，而目前科学家对大多数蛋白质的的了解还很不够。
附：部分标准答案
专题1 基因工程
1．基因拼接技术 DNA重组技术。修饰改造，，定向地,遗传性状。
2．DNA分子水平限制酶； DNA连接酶；运载体——质粒、噬菌体和动植物病毒等。
3．限制性核酸内切酶原核生物特定核苷酸序列特定部位磷酸二酯键专一性黏性末端平末端 -GAATTC- G与A -CCCGGG- C与G
4．DNA片段磷酸二酯键单个核苷酸末端大肠杆菌互补的黏性末端两种末端，比较低。
5. 质粒裸露的拟核DNA 具有自我复制能力双链环状DNA分子。
6．人工改造限制酶切割位点标记基因，重组DNA的鉴定和选择。
7．复制原点整合到染色体DNA λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。
8．获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。
9．编码蛋白质的基因具有调控作用的因子直接分离基因组文库 PCR 原核基因内含子人工合成 cDNA文库 PCR DNA合成仪。
10．全部限制酶载体受体菌的群体所有基因。
11．某个时期的mRNA 反转录 cDNA 载体
12．部分基因文库无启动子、内含子部分基因，可以进行物种间的基因交流；有启动子、内含子，全部基因部分基因可以进行物种间的基因交流。
13．聚合酶链式反应 DNA双链复制体外复制特定DNA片段模板DNA、DNA引物、Taq 酶(耐高温 dNTP DNA解链→引物结合到互补DNA链→ Taq聚合酶从引物起始进行互补链的合成，指数。
14．基因表达载体的构建使目的基因在受体细胞中稳定存在遗传给下一代表达和发挥作用。
15．启动子、目的基因、终止子、标记基因、复制原点 DNA片段首端 RNA聚合酶识别和结合转录出mRNA DNA片段尾端转录在所需要的地方停止鉴别受体细胞中是否含有目的基因筛选抗生素抗性基因。
16．农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法。
17．原核生物双子叶植物和裸子植物单子叶植物酚类化合物 Ti质粒 T-DNA 整合染色体的DNA上
18． Ti质粒的T-DNA 转化染色体的DNA 稳定维持和表达表达载体DNA 单子叶植物花粉形成的花粉管还未愈合前柱头重组DNA 花粉管通道。
19．显微注射技术卵显微注射。
20．繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少大肠杆菌。
21．转化法 Ca2+ 感受态重组表达载体DNA分子感受态细胞。
22．稳定维持和表达检测与鉴定：
(1)是否插入了目的基因 DNA分子杂交技术含有目的基因的DNA片段放射性同位素探针杂交带
(2)是否转录出了mRNA 核酸分子杂交技术放射性同位素标记的目的基因探针mRNA ；
(3)是否翻译成蛋白质蛋白质抗体抗原—抗体杂交杂交带
(4)个体生物学水平接种实验活性比较。
23．Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因苏云金芽孢杆菌有毒的多肽。
24．病毒外壳蛋白基因病毒的复制酶基因几丁质酶基因抗毒素合成基因
25．调节细胞渗透压的基因鱼的抗冻蛋白基因。
26．乳腺生物反应器目的基因乳腺蛋白基因的启动子重组在一起显微注射受精卵。
27．基因治疗正常基因正常基因、反义基因自杀基因。
28．蛋白质工程蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系基因修饰或基因合成蛋白质蛋白质已存在的
29．从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列基因→表达→形成氨基酸序列的多肽链→形成具有高级结构的蛋白质→行使生物功能
30．高级结构，高级结构。
生物必修三《稳态与环境》知识点总结 第一部分 稳态 知识点总结 （细胞质基质 细胞液） （存在于细胞内，约占 ）、 1.体液 血 浆 ＝ （细胞直接生活的环境） 组织液 （存在于细胞外，约占 ） 淋巴等 2.内环境的组成及相互关系(用图示画出) 考点： 呼吸道，肺泡腔，消化道内的液体不属于人体内环境，则汗液，尿液，消化液，泪液等不属于体液，也不属于细胞外液． 细胞外液的成分 水, 无机盐（Na+, Cl-），蛋白质（血浆蛋白） 血液运送的物质 ： 葡萄糖 甘油 脂肪酸 胆固醇 氨基酸等 ： 尿素 尿酸 乳酸等 ： O2,CO2 等 激素,抗体,神经递质,维生素 组织液，淋巴，血浆成分相近，最主要的差别在于血浆中含有很多的 ，细胞外液是 ，反映了生命起源于海洋， 血浆各化学成分的种类及含量保持动态的稳定，所以分析血浆化学成分可在一定程度上反映体内物质代谢情况，可以分析也一个人的身体健康状况． 理化性质（渗透压，酸碱度，温度） 渗透压 一般来说，溶质微粒越多，溶液浓度 ，对水的吸引力越大，渗透压 ， 血浆渗透压的大小主要与 ， 的含量有关。 人的血浆渗透压约为 ，相当于细胞内液的渗透压。 功能：是维持细胞结构和功能的重要因素。 典型事例： （高温工作的人要补充 ； 严重腹泻的人要注入 ， 海里的鱼在河里不能生存； 吃多了咸瓜子，唇口会起皱； 水中毒； 生理盐水浓度一定要是0.9%； 红细胞放在清水中会 ； 吃冰棋淋会口渴； 白开水是最好的饮料；） 酸碱度 正常人血浆近中性，PH 为 缓冲对：一种弱酸和一种强碱盐 H2CO3／NaHCO3 NaH2PO4/Na2HPO4 CO2+H2O H2CO3 H+ + HCO3- 温度：有三种测量方法（直肠，腋下，口腔），恒温动物（不随外界温度变化而变化）与 变温动物（随外界温度变化而变化）不同．温度主要影响酶。 内环境的理化性质处于 中． 内环境是细胞与外界环境进行 的媒介。 直接参与物质交换的系统： ， ， ， 系统 间接参与的系统（调节机制） 人体稳态调节能力是有一定限度的．同时调节也是相对的。 能引起组织水肿形成因素有哪些？ 补充：尿液的形成过程 尿的形成过程：血液流经肾小球时，血液中的尿酸、尿素、水、无机盐和葡萄糖等物质通过肾小球的过滤作用，过滤到肾小囊中，形成原尿。 当尿液流经肾小管时，原尿中对人体有用的全部葡萄糖、大部分水和部分无机盐，被肾小管重新吸收，回到肾小管周围毛细血管的血液里。原尿经过肾小管的重吸收作用，剩下的水和无机盐、尿素和尿酸等就形成了尿液。 动物和人体生命活动的调节
专题一传统发酵技术的应用1．果酒制作的原理课题 1 果酒和果醋的制作 酵装置要清洗干净；每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全揭开瓶盖等。 3.制作葡萄酒时，为什么要将温度控制在 18～250C？制作葡萄醋时，为什么要将温度控制在 30～350C？ （1）人类利用微生物发酵制作果酒，该过程用到的微生物是， 它的代谢类型是，与异化作用有关的方程式有 。 生活状态：进行发酵，产生大量。 （2）果酒制作条件 传统发酵技术所使用的酵母菌的来源是。 酵母菌生长的最适温度是； PH 呈； （3）红色葡萄酒呈现颜色的原因是：酒精发酵过程中，随着的提高，红色葡萄皮的进入发酵液，使葡萄酒呈色。 （4）在、的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其它微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。 2.果醋的制作原理 （1）果醋发酵菌种是，新陈代谢类型。 （2）当氧气和糖源充足时醋酸菌将糖分解成，当糖源不足时醋酸菌将变为再变成醋酸，其反应式。 3.操作过程应注意的问题 （1）为防止发酵液被污染，发酵瓶要用消毒。 （2）葡萄汁装入发酵瓶时，要留出大约的空间。 （3）制作葡萄酒时将温度严格控制在，时间控制在 d 左右，可通过 对发酵的情况进行及时的监测。 （4）制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在，时间控制在d，并注意适时在充气。 4.酒精的检验 （1）检验试剂：。 （2）反应条件及现象：在条件下，反应呈现。 5.制作果酒、果醋的实验流程 挑选葡萄→→→→ ↓↓ 果酒果醋 温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。200C 左右最适合酵母菌繁殖，因此需要将温度控制在其 最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为 30～350C，因此要将温度控制在 30～350C。4．制葡萄醋时，为什么要适时通过充气口充气？ 醋酸菌是好氧菌，再将酒精变成醋酸时需要养的参与，因此要适时向发酵液中充气。 P4: A 同学：每次排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖；制醋时，再将瓶盖打开，盖上一层纱布，进行葡萄醋的发酵。 来防止发酵液被污染，因为操作的每一步都可能混入杂菌 B 同学：分析果酒和果醋的发酵装置中充气口、排气口和出料口分别有哪些作用。为什么排气口要通过 一个长而弯曲的胶管与瓶身连接？ 充气口：是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的； 排气口：是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的； 出料口：是用来取样的。 排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是防止空气中微生物的污染。使用该装置制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应将充气口连接气泵，输入氧气。 课题 2 腐乳的制作 1.制作原理 （1）．经过微生物的发酵，豆腐中的蛋白质被分解成小分子的和，脂肪被分解成和，因而更利于消化吸收。 （2）．腐乳的发酵有多种微生物参与，如、、、等，其 中起主要作用的是。它是一种丝状，常见、、、 上。 （3）．现代的腐乳生产是在严格的条件下，将优良菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的，保证产品的质量。 2.腐乳制作的实验流程： 让豆腐长出→→→密封腌制。 3.实验注意事项 （1）在豆腐上长出毛霉时，温度控制在，自然条件下毛霉的菌种来自空气中的 。 P4 旁栏思考题 1.你认为应该先洗葡萄还是先除去枝梗，为什么？ 应该先冲洗葡萄，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。 2.你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？ 需要从发酵制作的过程进行全面的考虑，因为操作的每一步都可能混入杂菌。例如：榨汁机、发 （2）将长满毛霉的豆腐块分层加盐，加盐量要随着摆放层数的加高而，近瓶口的表层要。加盐的目的是使豆腐块失水，利于，同时也能 的生长。盐的浓度过低，；盐的浓度过高， 。 （3）卤汤中酒精的含量应控制在左右，它能微生物的生长，同时也与豆腐乳独特的形成有关。酒精含量过高，；酒精含量过低，
专题1 基因工程 1．基因工程又叫做或。就是按照人们的愿望，把一种生物的某种基因提取出来，加以，然后放到另一种生物的细胞里，改造生物的。 2．基因工程是在上进行的设计施工，基本工具是：基因的剪刀(分子手术刀)——；基因的针线(分子缝合针)——；基因的(分子运输车)——。 终止子也是一段有特殊结构的，位于基因的，其作用是使下来；标记基因的作用是为了，从而将含有目的基因的细胞出来，最常用的标记基因是。 16．将目的基因导入植物细胞最常用的方法是，另外还有和等。 17．农杆菌是一种生活在土壤中的，能在自然条件下感染，而对大多数没有
感染能力。当植物体受到损伤，伤口处的细胞会分泌大量的，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的上的(可转移的DNA)可转移至受体细胞，并且到受体细胞上。 18．农杆菌转化法是将目的基因插入到上，通过农杆菌的作用，使目的基因进入植物细胞并插入到植物细胞中上，使目的基因的遗传特性得以；基因枪法是利用压缩气体产生的动力，将包裹在金属颗粒表面的打入受体细胞中，使目的基因与其整合并表达的方法，是 →→) 30．蛋白质工程成功难度很大，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的，而目前科学家对大多数蛋白质的的了解还很不够。
专题4 生物技术的安全性和伦理问题 31．对于转基因生物，公众在安全、安全和安全方面产生了争论。安全主要是指公众担心转基因生物会产生出蛋白或蛋白；安全是担心转基因生物可能会影响到；安全是指转基因生物可能对环境造成或。 32．担忧转基因生物安全性的原因：对、以及等了解有限；转移的基因虽然功能已知，但不少是的基因；外源基因插入宿主基因组的部位往往是。 后用冲洗；实验中要强调所用器械的和实验人员的 ，因为污染杂菌后杂菌会并；外植体最好切取含有的部分，原因是这部分细胞。 45．植物体细胞杂交技术：将不同种的植物，在一定条件下融合成，并把它培
必修三知识点填空 第1 章人体的内环境与稳态 第2 章动物和人体生命活动的调节 1 、单细胞生物直接生活在___________ 中，多细胞生物的体细胞直接生活在 _______________中。 2、人体的体液由存在于细胞内的__________和存在于细胞外的_________组成。 3（1）由___________构成的液体环境叫做内环境，主要包括_________、________和 __________等。 （2）用箭头连接表示血浆、组织液、淋巴三者之间的关系。 4、组织液、淋巴的成分和含量与血浆相近，但又不完全相同，最主要的差别在于血浆中 _________________。 5、细胞外液本质上是一种_____溶液。 6、细胞外液的理化性质的三个主要方面：_____________________。 7、溶液渗透压与溶液的________成正比。血浆渗透压的大小主要与血浆中________、_________的含量有关。细胞外液渗透压的90%以上来源于___和___。 8、正常人的血浆近____性，pH 为_________。血浆pH 之所以能够保持稳定，与它含有 _______、_______等离子有关。 9、__________是细胞与外界环境进行物质交换的媒介。 10、毛细血管壁细胞的直接环境是__________和__________；毛细淋巴管的直接环境是 __________和_____________。 11、目前普遍认为，____________________________调节网络是机体维持稳态的主要调节 机制。人体维持稳态的调节能力是___________的。 12、内环境稳态是机体进行_______________的必要条件。稳态遭到破坏，会出现细胞代 谢_________。 13 、神经调节的基本方式是________ ，其结构基础是__________ 。反射弧包括____________、________________、_____________、__________和_________。 14、神经元的结构包括___________和___________，突起分为_______和______。 15、兴奋在神经纤维上的传导形式是________，方向是_____向的；在神经元之间的传递 形式是__________________________ ，方向是_____向的；在反射弧上的传递是____向的。 16、未受刺激时，神经纤维细胞膜两侧的电位表现为_____________ 。受到刺激产生兴奋时，电位表现为_________________。 17、神经纤维某处受到刺激产生兴奋时，细胞膜外侧局部电流的方向是：从_____部位流向_________部位；细胞膜内侧局部电流的方向是：从_________部位流向________部位。 18、突触是由前一个神经元的_______________，与后一个神经元的_______ __________相接触而形成。突触结构包括：_______________________________ 。 19（1）由于________________只存在于___________的突触小泡中，只能由____________ 释放，然后作用于____________上，因此神经元之间兴奋的传递只能是_____向的。
高中生物选修三基因工程知识点 基因工程：是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果： 经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 （1）两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 （2）与DNA聚合酶作用的异同：
（2）目的：获取大量的目的基因 （3）原理：DNA双链复制 （4）过程： 第一步：加热至90～95℃DNA解链为单链； 第二步：冷却到55～60℃，引物与两条单链DNA结合； 第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。 （5）特点：指数(2^n)形式扩增 第二步：基因表达载体的构建(核心) 1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 （1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA 聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 （2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 第三步：将目的基因导入受体细胞 1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 2.常用的转化方法：
范文 2020年高考生物选修3必考基础知识点复习提纲 1/ 8
专题 1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术。 （一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）Z&X& X&K] （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA 连接酶(1)两种DNA 连接酶（E·coliDNA 连接酶和 T4-DNA 连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：E·coliDNA 连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而 T4DNA 连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。 D NA 连接酶是连接两个 DNA 片段的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——运载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入。 ③具有标记基因，供重组 DNA 的鉴定和选择。 （2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核 DNA 之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状 DNA 分子。 （3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取 3/ 8
高中生物选修三 专题1 基因工程 基因工程：是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 （一）基因工程的基本工具 1. “分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果： 经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2. “分子缝合针”——DNA连接酶 （1）两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 （2）与DNA聚合酶作用的异同： DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 3. “分子运输车”——载体 （1）载体具备的条件：
①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 （2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 （3）其它载体：λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。 （二）基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1. 目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 2. 原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。 3. PCR技术扩增目的基因 （1）PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 （2）目的：获取大量的目的基因 （3）原理：DNA双链复制 （4）过程： 第一步：加热至90～95℃DNA解链为单链； 第二步：冷却到55～60℃，引物与两条单链DNA结合； 第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。 （5）特点：指数(2^n)形式扩增 第二步：基因表达载体的构建(核心) 1. 目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2. 组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 （1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱
高中生物选修三基因工程主要知识点（1.1、1.2） 一、基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 一、基因工程的三大工具：限制性核酸内切酶—“分子手术刀”；DNA连接酶—“分子缝合针”；基因进入受体细胞的载体—“分子运输车”。 二、限制性核酸内切酶的特点：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且是每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 三、限制酶识别序列的特点：反向对称，重复排列。 四、限制酶在原核生物中的作用：切割外源DNA，保护细菌细胞。 五、为什么限制酶不剪切原核生物自身的DNA分子？原核生物本身不含相应特异性序列；对DNA分子进行甲基化修饰。 六、两种常见的DNA连接酶：E〃coli DNA连接酶：源自大肠杆菌，只连接黏性末端；T4DNA连接酶：提取自T4噬菌体，两种末端均可连接，连接平末端效率低。 七、DNA连接酶和DNA聚合酶的相同点：都是蛋白质；都能生成3'磷酸二酯键。不同：前者在两个片段之间形成3'磷酸二酯键，后者只能将单个核苷酸连接到已有片段上；前者不需要模版，后者需要。 八、载体需要满足的条件：有一到多个限制酶切点；对受体细胞无害；导入基因能在受体细胞内复制和表达；有某些标记基因；分子大小合适。 九、质粒：一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。 十、标记基因的作用：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 十一、三类载体：质粒；λ噬菌体的衍生物；动植物病毒。 十二、获取目的基因的方法：说法一：从自然界已有的物种中分体（鸟枪法、反转录法）、用人工的方法合成；说法二：从基因文库中获取（鸟枪法、反转录法）、利用PCR技术合成、用化学方法人工合成。 十三、基因库：一个物种中全部个体的全部基因的总和；基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，个个受体菌分别含有这种生物的不同的基因；基因组文库：含有某种生物全部基因的基因文库；部分基因文库：只含有一种生物部分基因的基因文库；cDNA文库：用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中。 十四、 文库类型cDNA文库基因组文库 文库大小小大 启动子无有 内含子无有 基因多少某种生物的部分基因某种生物的全部基因 物种间基因交流可以部分基因可以 十五、人工合成目的基因的两个条件：基因比较小；核苷酸序列已知。 十六、目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以使一些具有调控作用的因
选修3知识点复习 专题1 基因工程 （一）基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。原理是基因重组，操作水平是分子水平。优点：打破物种界限；定向地改造生物的遗传性状。 （二）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。 （2）功能：使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（3）特点具有专一（特异）性。 （4）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 （1）两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 （2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的脱氧核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能够稳定保存并复制；②有一至多个限制酶酶切位点③含有标记基因，便于筛选。④对受体细胞无害。 （2）最常用的载体是质粒，化学本质是DNA分子。（3）其它载体：λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 （三）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取 1.目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因。 3.人工合成目的基因的两个条件：基因比较小；核苷酸序列已知。 4.PCR技术扩增目的基因 （1）PCR是多聚酶链式反应的缩写，原理DNA双链复制。 （2）过程：第一步变性：加热至90～95℃，DNA解链，不需要解旋酶；第二步复性：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链。变性和复性利用了DNA的热变性原理；第三步延伸：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。 第二步：基因表达载体的构建基因表达载体的组成：除了目的基因外，还必须有启动子、终止子、标记基因等。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位。标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 第三步：将目的基因导入受体细胞常用的导入方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射法。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。 第四步：目的基因的检测和鉴定 1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。 2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是分子杂交技术。 3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。 4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如：转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 （四）基因工程的应用 1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。 2.动物基因工程：提高动物生长速度；改善畜产品品质；用转基因动物生产药物：如乳腺生物反应器和膀胱生物反应器，方法是将目的基因导入哺乳动物的受精卵中，使其发育成转基因动物。 3.基因治疗是把正常基因导入病人的体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗的目的，这是治疗遗传病最有效的手段。 （五）蛋白质工程的概念：基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程师在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。 专题2 细胞工程 （一）植物细胞工程 1.植物组织培养技术（1）原理：植物细胞的全能性 （2）过程：离体的植物器官、组织或细胞脱分化愈伤组织再分化植物体
第一章人体的内环境与稳态 第一节细胞生活的环境 一、细胞与外界的物质交换 1、单细胞生物生活在水中，直接与外界环境进行物质交换。直接从水中获得生存所需的营养物质和氧气，并把废物直接排入水中。 2、多细胞生物通过（）与外界进行物质交换，（）是细胞与外界环境进行物质交换的媒介。 二、内环境内环境与细胞内液的转换 1、概念：血浆（）细胞 内环境=细胞外液组织液 淋巴（） 细胞外液与细胞内液共同构成（），其中含量较多的是（），占到（）。营养物质通过（）等系统，氧气通过（）等系统进入机体细胞；代谢废物（CO2、尿素等）主要通过（）等系统排出体外。（P8图） 2、体内大多数细胞的具体内环境是（），红细胞的内环境是（），淋巴细胞的具体内环境是（），毛细淋巴管壁细胞的内环境是（），毛细血管壁细胞的具体内环境是（）。 3、细胞外液本质上是一种（），说明生命系统起源于原始海洋。血浆成分：含量最多的是（）、其次是（），此外还有无机盐、各种营养物质、各种代谢废物、气体、激素等，血浆与组织液、淋巴的成分相比，主要差异为：（）。 4、细胞外液的理化特性：渗透压、PH、温度 （1）渗透压：指溶液中（）对（）的吸引力，取决与溶液浓度，浓度越高渗透压越大，浓度越低渗透压越小。血浆渗透压主要与（）含量有关。细胞外液的渗透压90%取决于（）。37℃时，血浆渗透压为（），与0.9%的NaCl等渗。当红细胞放在清水中，会因为（）而破裂，放在浓度较高的溶液中，会因为（）而死亡。 （2）PH：血浆PH为（），与（）、（）等离子有关 （3）温度：（）左右 第二节内环境稳态的重要性 1、内环境的稳态：正常机体通过调节的作用，使各个（）、（）协调活动，共同维持（），叫做稳态。内环境稳态是进行正常生命活动的必要条件。某种器官的功能出现障碍，就会引起稳态失调，例如：是形成尿液的器官，当发生（），就会出现（），最终会引起死亡。 2、稳态的调节机制是：（）
生物选修3知识点 专题1 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过_________________，赋予生物以_____________，创造出__________________________。基因工程是在 _____________上进行设计和施工的，又叫做_____________。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——__________________________ （1）来源：主要是从_____________中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA 分子的某种_____ _的核苷酸序列，并且使每一 条链中 ______ _部位的两个核苷酸之间的_____________断开，因此具有_____ 性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA 片段末端通常有两种形式： ________ _和 _______ _ 2.“分子缝合针”——_________ (1)两种DNA 连接酶（ 和 ）的比较： ①相同点：都缝合_______ __键。 ②区别：E ·coliDNA 连接酶来源于_______ __，只能将双链DNA 片段互补的_______ 之间的磷酸二酯键连接起来；而T 4DNA 连接酶能缝合_______ ，但连接平 末端的之间的效率较_ 。 (2)与DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将______ ___加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接____ _____的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——______ ___ （1）载体具备的条件：①___________________________________________。 ②___________________________________________。 ③___________________________________________。 （2）最常用的载体是___ __,它是一种裸露的、结构简单的、独立于 ，并具有_________ 能力的_____ ____DNA 分子。 （3）其它载体：_______________________ ____ (二)基因工程的基本操作程序 第一步：_________________ _ 1.目的基因是指： 。 2.原核基因采取 获得，真核基因是______ ___。人工合成目的基因的 常用方法有________ _和______ ___。 3.PCR 技术扩增目的基因 （1）原理：_______ __ （2）过程：第一步：加热至90～95℃使______ __；第二步：冷却到55～60℃，____________ _____；第三步：加热至70～75℃， 酶从 起始互补链的合成。 第二步：__________ _____ 1.目的：使目的基因在受体细胞中______________ _，并且可以 ，使目的基因 能够 。 2.组成：________ __＋____ ______＋______ ____＋________ __
选修3 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA 重组技术。 操作水平：DNA分子水平 原理：基因重组 优点：1.突破物种界限 2.定向改造生物的遗传特性 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点切割，因此具有专一性。 （3）作用的化学键：切割磷酸二酯键 (4)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)作用：将两个具有相同粘性末端的DNA片段连接起来，形成重组DNA （2）连接的化学键：磷酸二酯键 （3）与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。 （1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 （2）最常用的载体是质粒,它是一种环状DNA分子。 （3）其它载体：噬菌体、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1.从基因文库中获取（不知道目的基因的核苷酸序列的情况下采用） 2.人工合成。常用方法有：（1）反转录法（已经获得mRNA的情况下采用） （2）化学合成法（知道目的基因的核苷酸序列、基因比较小的情况下采用） 3.PCR技术扩增目的基因（知道目的基因两端的核苷酸序列、基因比较大的情况下采用） （1）PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 （2）目的：获取大量的目的基因 （3）原理：DNA双链复制 （4）过程：第一步：变性，加热至90～95℃DNA解链为单链；（高温解旋） 第二步：复性，冷却到55～60℃，引物与两条单链DNA结合； 第三步：延伸，加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。 （5）特点：指数(2n)形式扩增 第二步：基因表达载体的构建(核心) 1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
选修3《现代生物科技专题》知识点总结 专题1 基因工程 一、基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”—— （1）来源：主要是从生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别 DNA分子的某种的核苷酸序列，并且使每一条链中部位的两个核苷酸之间的断开，因此具有性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 和。 2.“分子缝合针”—— (1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于，只能将双链DNA片段互补的 之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合，但连接平 末端的之间的效率较。 (2)与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将加到已有的核苷酸片段的末端， 形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”—— （1）运载体具备的条件： ①。 ②。 ③具有，供。 （2）最常用的运载体是，它是一种裸露的、结构简单的、独立于 ，并具有的双链。 二、基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1.目的基主要是指：，也可以是一些具有的因子。 2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有 法和法。 3.PCR技术扩增目的基因 （1）PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 （2）目的：获取大量的目的基因 （3）原理： （4）过程：第一步：加热至90～95℃，DNA解链为； 第二步：冷却到55～60℃，与两条单链DNA结合； 第三步：加热至70～75℃，从引物起始进行的合成。 第二步：基因表达载体的构建 1.目的：使目的基因在受体细胞中，并且可以， 使目的基因能够。 2.组成：＋＋＋＋ （1）启动子：是一段有特殊结构的，位于基因的，是 识别和结合的部位，能驱动基因，最终获得所需的。 （2）终止子：也是一段有特殊结构的，位于基因的。 （3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中，从而将 筛选出来。常用的标记基因是。
必修三知识点填空 第1章人体的内环境与稳态 第2章动物和人体生命活动的调节 1、单细胞生物直接生活在___________中，多细胞生物的体细胞直接生活在 _______________中。 2、人体的体液由存在于细胞内的__________和存在于细胞外的_________组成。 3（1）由___________构成的液体环境叫做内环境，主要包括_________、________和__________等。 （2）用箭头连接表示血浆、组织液、淋巴三者之间的关系。 4、组织液、淋巴的成分和含量与血浆相近，但又不完全相同，最主要的差别在于血浆中_________________。 5、细胞外液本质上是一种_____溶液。 6、细胞外液的理化性质的三个主要方面：_____________________。 7、溶液渗透压与溶液的________成正比。血浆渗透压的大小主要与血浆中________、_________的含量有关。细胞外液渗透压的90%以上来源于___和___。 8、正常人的血浆近____性，pH为_________。血浆pH之所以能够保持稳定，与它含有_______、_______等离子有关。 9、__________是细胞与外界环境进行物质交换的媒介。 10、毛细血管壁细胞的直接环境是__________和__________；毛细淋巴管的直接环境是__________和_____________。 11、目前普遍认为，____________________________调节网络是机体维持稳态的主要调节机制。人体维持稳态的调节能力是___________的。 12、内环境稳态是机体进行_______________的必要条件。稳态遭到破坏，会出现细胞代谢_________。 13、神经调节的基本方式是________，其结构基础是__________。反射弧包括____________、________________、_____________、__________和_________。 14、神经元的结构包括___________和___________，突起分为_______和______。 15、兴奋在神经纤维上的传导形式是________，方向是_____向的；在神经元之间的传递形式是__________________________，方向是_____向的；在反射弧上的传递是____向的。 16、未受刺激时，神经纤维细胞膜两侧的电位表现为_____________。受到刺激产生兴奋时，电位表现为_________________。 17、神经纤维某处受到刺激产生兴奋时，细胞膜外侧局部电流的方向是：从_____部位流向_________部位；细胞膜内侧局部电流的方向是：从_________部位流向________部位。 18、突触是由前一个神经元的_______________，与后一个神经元的_______ __________相接触而形成。突触结构包括：_______________________________。 19（1）由于________________只存在于___________的突触小泡中，只能由____________释放，然后作用于____________上，因此神经元之间兴奋的传递只能是_____向的。
生物选修3知识点 专题1 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过_________________ 建议收藏下载本文，以便随时学习！ ，赋予生物以_____________，创造出__________________________。基因工程 是在_____________上进行设计和施工的，又叫做_____________。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——__________________________ （1）来源：主要是从_____________中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种_____ _的核苷酸序列，并且使每一条链中______ _部位的两个核苷酸之间的 _____________断开，因此具有_____ 性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： ________ _和_______ _ 2.“分子缝合针”——_________ (1)两种DNA连接酶（和）的比较 ： ①相同点：都缝合_______ __键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于_______ __，只能将双链DNA片段互 补的_______ 之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝 合_______ ，但连接平末端的之间的效率较_ 。 (2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将______ ___加到已有的核 苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接____ _____ 的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——______ ___ （1）载体具备的条件：①___________________________。 ②___________________________。 ③___________________________。 （2）最常用的载体是___ __,它是一种裸露的、结构简单的、独立于，并具有_________ 能力的_____ ____DNA分子。 （3）其它载体：_______________________ ____ (二)基因工程的基本操作程序 第一步：_________________ _ 1.目的基因是指：。 2.原核基因采取获得，真核基因是______ ___。人工合成 目的基因的常用方法有________ _和______ ___。 3.PCR技术扩增目的基因 （1）原理：_______ __
选修3《现代生物科技专题》知识点总结 1.1 DNA重组技术的基本工具 1、基因工程的概念 又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基 因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向改造生物的遗传性状。 优点：定向地改造生物的遗传性状； 实现基因在不同物种之间的转移，迅速培育出生物新品种 2、基因拼接的理论基础： （1）大多数生物的遗传物质是DNA （2）DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。 （3）双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构。 3、外源基因在受体内表达的理论基础： （1）基因是控制生物性状的独立遗传单位。 （2）遗传信息的传递都遵循中心法则。 （3）生物界共用一套遗传密码。 （一）基因工程的基本工具 1?“分子手术刀”一一限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是原核生物 （2）功能：能够识别双链DNA分子的特定的核苷酸序列，有特定的切割位点（专一性）。 （3）作用部位：磷酸二酯键 （3）结果：形成两种末端：黏性末端和平末端。 注意：用同种限制酶分别切割目的基因和载体，从而形成相同的黏性末端，然后用DNA连接酶将目的基因和载体连接起来 2?“分子缝合针” 一一DNA连接酶 ①作用：恢复磷酸二酯键。 ②种类：E?coliDNA连接酶：来源于大肠杆菌，连接黏性末端；
T4DNA连接酶：来源于噬菌体，连接黏性末端和平末端。 3. “分子运输车”--- 载体 (1)载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 ④对受体细胞无害 (2)常用的载体：细菌的质粒、入噬菌体的衍生物、动植物病毒(天然质粒不能直接使用) 1.2 基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1. 目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 2. 方法：①从基因文库中获取目的基因 (方法：根据基因的核苷酸序列、基因的功能在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特性。) ②利用PCR技术扩增目的基因(适用于已知目的基因的一段核苷酸序列) ③通过化学方法人工合成(适用于目的基因较小，或已知目的基因核苷酸序列) 3. 基因组文库与cDNA文库的区别 4. PCR技术扩增目的基因 (1)PCR的含义：全称多聚酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 (2)目的：快速获取大量的目的基因 (3)原理：DNA M制 (4)使用的前提：已知目的基因的一段核苷酸序列 (5)条件：模板DNA、引物、热稳定DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸 (6)过程：第一步：变性，加热至90?95C DNA解链为单链，断裂氢键； 第二步：退火，冷却到55?60C,引物与两条单链DNA结合，形成局部双链DNA