药理研究中常用学习记忆障碍动物模型的行为学分析_郭德玉
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塞络通胶囊对多发梗死性痴呆大鼠认知功能障碍的干预作用目的:研究塞络通胶囊(塞络通)对多发梗死性痴呆(multiinfarct dementia,MID)大鼠学习记忆功能的改善作用及其机制。
方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组以及塞络通高、低剂量组。
采用SD大鼠颈内动脉注射微球血管栓塞剂的方法建立多发梗死性痴呆模型;手术成功后第10天,大鼠分别灌胃给予蒸馏水、盐酸美金刚(20mg·kg-1)以及高、低剂量的塞络通(16.5,33.0mg·kg-1),每日1次,连续60d;检测塞络通不同剂量对模型大鼠Morris水迷宫潜伏期、路径长度,以及脑组织胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响。
结果:与假手术组比较,多发梗死性痴呆大鼠在Morris水迷宫实验中的潜伏期及路径长度均明显延长(P<0.05或P <0.01),脑组织ChAT活性明显降低(P<0.05);塞络通干预60d后明显缩短模型大鼠在Morris水迷宫实验中的潜伏期及路径长度(P<0.05或P<0.01);并且明显降低脑组织AchE活性而升高ChAT活性(P<0.05或P<0.01)。
结论:塞络通对多发梗死性痴呆大鼠认知功能障碍具有一定程度的改善作用,作用机制可能与其对脑组织ChAT活性以及AchE活性不同的调节相关。
标签:塞络通胶囊;多发梗死性痴呆;认知障碍1材料1.1动物SD种大鼠,55只,雄性,230~260g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,合格证号SCXK(京)20070001。
1.2药物与试剂塞络通胶囊由神威药业集团提供,批号090914;盐酸美金刚片(易倍申)由丹麦灵北制药厂生产,批号200809;海藻酸钠微球血管栓塞剂(KMG),规格100~200μm,由北京圣医耀科技发展有限责任公司提供,批号20020606。
胆碱乙酰转移酶(ChAT)试剂盒、乙酰胆碱酯酶(AchE)试剂盒、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒均由南京建成生物工程研究所生产,批号分别为20100901,20100826,20100831;水合氯醛由国药集团化学试剂公司生产,批号20081027。
动物行为学实验方法文献综述动物行为学实验主要有学习记忆类、药物成瘾类、抗焦虑抑郁类、抗疲劳类、神经精神类、痛觉测试类共六大类。
其中抗焦虑抑郁类又可作为大部分动物行为学实验的前置实验,作为每一组动物的焦虑度的一个评判。
当然洞板实验测得的探索性也可以作为一组动物的生理心理指标的。
1 学习记忆类学习记忆类实验要求实验动物与实验员之间已经建立熟识的条件,保证实验员与动物的接触不会对实验动物产生试验中的干扰因素。
1.1、抑制性(被动)回避--在记忆研究中,一个最重要的动物模型就是抑制模仿活动或学习习惯。
被动回避实验通过动物学会去掉某种特定的行为而逃避某种讨厌的事情。
1.1.1 跳台实验:原理:在一个开阔的空间,动物大部分时间都在边缘与角落里活动。
在方形空间底部铺以铜栅,铜栅通电;方形空间中心设置一个高的平台当把动物放在平台上时,它几乎立即跳下平台,并向四周进行探索。
如果动物跳下平台时受到电击,其正常反应是跳回平台以躲避伤害性刺激。
多数动物可能再次或多次跳至铜栅上,受到电击后又迅速跳回平台。
观察指标:以36 V连续电刺激5分钟,小鼠受到电击后的正常逃避反应为跳上橡皮台,记录5分钟内动物跳下平台的次数作为训练期错误次数,为学习成绩;24小时后,在底部铜栅通电的情况下,依前法将动物轻置于橡皮台上,记录测试时小鼠第一次跳下平台的时间即潜伏期和5 min 内的跳下平台的次数即测试期错误次数,作为记忆保持成绩。
优点:简便易行,根据试验设备的不同,一次可同时试验多只动物(6只动物),可实现组间平行操作。
既可观察药物对记忆过程的影响,也可观察对学习的影响。
有较高的敏感性,尤适合于药物初筛。
缺点: 动物的回避性反应差异较大,因此需要检测大量的动物。
如需减少差异或少用动物,可对动物进行预选或按学习成绩好坏分档次进行试验。
1.1.2 避暗实验原理:利用小鼠或大鼠具有趋暗避明的习性设计的装置,一半是暗室,一半是明室,中间有一小洞相连。
全身麻醉药物与学习记忆尚游姚尚龙华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉学教研室武汉430022全身麻醉药物除了具有镇静、催眠的作用外,还具有遗忘(amnesia)作用,这是导致术后认知功能障碍的重要原因之一。
大量的临床研究观察了各种全麻药物对于患者学习记忆功能的影响;但是临床研究不能很好的控制其它外部因素(如手术、应激等)的影响,因而进行动物实验深入研究全麻药物对于学习记忆能力的影响尤为重要。
本文就近年来此方面的研究状况作一简要介绍。
丙泊酚丙泊酚快速起效,苏醒迅速,持续输注后无蓄积等优点,因而普遍用于麻醉诱导与维持,ICU镇静。
最初认为丙泊酚仅具有顺行性遗忘作用;应用较大剂量的丙泊酚(100、150mg/kg)进行研究后,发现其也可以产生逆行性遗忘,且对于3h 以内的事件的影响较强[1]。
为了观察低于镇静剂量的丙泊酚是否仍然对学习记忆具有影响,Pain等[2]给大鼠腹腔注射低于镇静剂量的丙泊酚(9mg/kg),结果发现大鼠的记忆能力仍受到损伤。
丙泊酚可以促进或者直接激活γ-氨基丁酸(GABA)A受体,使Cl-内流,产生超极化,GABA A受体是丙泊酚全麻作用的重要靶位。
GABA A受体可能同样在丙泊酚的遗忘作用中具有重要地位,但是目前还缺乏从整体研究的资料[3]。
此外,丙泊酚对于学习记忆的影响也可能是通过其对5-羟色胺(5-HT)的影响而发挥作用的。
利用微透析技术进行研究发现,丙泊酚促进5-HT的释放;对大鼠进行逃避反射训练后应用丙泊酚,24h后其进入暗箱的潜伏期较对照组明显缩短,而在进行训练前应用5-HT1A受体阻断剂螺沙群(Spiroxatrine)可以完全拮抗丙泊酚的这一作用[4]。
杏仁体是参与学习记忆活动的重要脑区,毁损基侧杏仁复合体后应用丙泊酚的大鼠与单纯毁损大鼠学习能力相似,假手术组大鼠则需要增加学习次数;毁损组应用丙泊酚后其记忆能力与单纯毁损大鼠无差异,假手术组大鼠应用丙泊酚后记忆能力受损[5],这说明基侧杏仁复合体可能是丙泊酚产生遗忘作用的靶位。