共聚焦显微镜原理及其应用
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简述激光共聚焦显微镜的工作原理
激光共聚焦显微镜是一种高分辨率显微镜,它利用激光束的聚焦作用和荧光探针的发光特性,可以在细胞和组织水平上观察生物分子的动态过程。
下面我们来详细了解一下激光共聚焦显微镜的工作原理。
激光共聚焦显微镜的工作原理基于激光束的聚焦作用。
激光束通过透镜系统聚焦到样品表面上,形成一个非常小的光点。
这个光点的大小和形状可以通过调整透镜系统的参数来控制。
当激光束聚焦到样品表面上时,样品中的荧光探针会被激发发出荧光信号。
这个荧光信号会被激光束收集并聚焦到探测器上,形成一幅荧光图像。
激光共聚焦显微镜的另一个重要特点是它的光学切片能力。
由于激光束的聚焦作用,激光共聚焦显微镜可以在样品内部形成一个非常小的光点,这个光点可以在样品内部移动,形成一系列的荧光图像。
通过这些荧光图像,我们可以重建出样品内部的三维结构,实现光学切片的效果。
激光共聚焦显微镜的工作原理还包括荧光探针的选择和激发波长的选择。
不同的荧光探针有不同的发光特性,可以用来标记不同的生物分子。
激发波长的选择也非常重要,不同的荧光探针有不同的激发波长,选择合适的激发波长可以提高荧光信号的强度和分辨率。
激光共聚焦显微镜是一种高分辨率显微镜,它利用激光束的聚焦作
用和荧光探针的发光特性,可以在细胞和组织水平上观察生物分子的动态过程。
它的工作原理包括激光束的聚焦作用、荧光探针的选择和激发波长的选择等。
通过激光共聚焦显微镜,我们可以更加深入地了解生物分子的结构和功能,为生命科学研究提供有力的工具。
荧光共聚焦和激光共聚焦荧光共聚焦显微镜(Fluorescence Confocal Microscopy,FCM)和激光共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscopy,LSCM)是两种常见的高分辨率显微镜技术。
它们能够提供具有亚细胞级别分辨率的三维图像,并广泛应用于生物医学研究、细胞生物学、神经科学等领域。
本文将逐步回答有关这两种技术的问题。
一、什么是荧光共聚焦和激光共聚焦显微镜?荧光共聚焦显微镜和激光共聚焦显微镜是两种基于共焦原理的高分辨率显微镜技术。
共焦显微镜利用聚焦光束与样品相交的特点,通过收集样品反射或荧光产生的信号来获取图像,并排除来自样品深部的散射或荧光信号,从而提高图像的清晰度和分辨率。
二、荧光共聚焦和激光共聚焦显微镜有何区别?荧光共聚焦显微镜和激光共聚焦显微镜在技术原理上是相似的,它们都是通过聚焦光束与样品相交,同时收集样品的信号来获取图像。
然而,它们在光源、探测器和成像模式等方面存在细微差别。
1. 光源:荧光共聚焦显微镜通常使用白光波长或相对宽的光源,如汞弧灯、钨丝灯或LED照明来激发样品中的荧光标记物。
而激光共聚焦显微镜则使用激光器作为光源,能够提供单一波长、高纯度的激光光束。
2. 探测器:荧光共聚焦显微镜的探测器通常是光电管,它能够检测荧光信号的强度和位置。
而激光共聚焦显微镜则使用光电倍增管(PMT)或光电二极管(APD)等高灵敏度探测器,能够实时探测并记录荧光信号。
3. 成像模式:荧光共聚焦显微镜主要采用点扫描模式,即通过聚焦光束在样品上的局部区域进行扫描,获取逐点的荧光强度。
而激光共聚焦显微镜则采用线扫描模式,通过聚焦光束在样品上的线条进行扫描,获取逐线的荧光信号。
三、荧光共聚焦和激光共聚焦显微镜的工作原理是什么?1. 荧光共聚焦显微镜的工作原理:荧光共聚焦显微镜与传统荧光显微镜相似,先用荧光染料或荧光标记的抗体对样品进行标记,然后使用荧光光源激发样品中的荧光标记物。
激光共聚焦显微镜系统的原理和应用激光扫描共聚焦显微镜是二十世纪80年代发展起来的一项具有划时代的高科技产品,它是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,把光学成像的分辨率提高了30%--40%,使用紫外或可见光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察诸如Ca2+ 、PH值,膜电位等生理信号及细胞形态的变化,成为形态学,分子生物学,神经科学,药理学,遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。
激光共聚焦成像系统能够用于观察各种染色、非染色和荧光标记的组织和细胞等,观察研究组织切片,细胞活体的生长发育特征,研究测定细胞内物质运输和能量转换。
能够进行活体细胞中离子和PH值变化研究(RATIO),神经递质研究,微分干涉及荧光的断层扫描,多重荧光的断层扫描及重叠,荧光光谱分析荧光各项指标定量分析荧光样品的时间延迟扫描及动态构件组织与细胞的三维动态结构构件,荧光共振能量的转移的分析,荧光原位杂交研究(FISH),细胞骨架研究,基因定位研究,原位实时PCR产物分析,荧光漂白恢复研究(FRAP),胞间通讯研究,蛋白质间研究,膜电位与膜流动性等研究,完成图像分析和三维重建等分析。
一.激光共聚焦显微镜系统应用领域:涉及医学、动植物科研、生物化学、细菌学、细胞生物学、组织胚胎、食品科学、遗传、药理、生理、光学、病理、植物学、神经科学、海洋生物学、材料学、电子科学、力学、石油地质学、矿产学。
二.基本原理传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面的每一点扫描,标本上的被照射点,在探测针孔处成像,由探测针孔后的光点倍增管(PMT)或冷电耦器件(cCCD)逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像。
照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点不会在探测针孔处成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学横断面,克服了普通显微镜图像模糊的缺点。
共聚焦显微镜从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上,如果物体恰在焦点上,那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源,这就是所谓的共聚焦,简称共焦。
共焦显微镜[confocallaserscanningmicroscope(clsm或lscm)]在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(dichroicmirror),将已经通过透镜的反射光折向其它方向,在其焦点上有一个带有针孔(pinhole)的挡板,小孔就位于焦点处,挡板后面是一个光电倍增管(photomultipliertube,pmt)。
可以想像,探测光焦点前后的反射光通过这一套共焦系统,必不能聚焦到小孔上,会被挡板挡住。
于是光度计测量的就是焦点处的反射光强度。
其意义是:通过移动透镜系统可以对一个半透明的物体进行三维扫描。
激光扫描共聚焦显微镜是二十世纪80年代发展起来的一项具有划时代的高科技产品,它是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,把光学成像的分辨率提高了30%--40%,使用紫外或可见光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察诸如ca2+、ph值,膜电位等生理信号及细胞形态的变化,成为形态学,分子生物学,神经科学,药理学,遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。
激光共聚焦成像系统能够用于观察各种染色、非染色和荧光标记的组织和细胞等,观察研究组织切片,细胞活体的生长发育特征,研究测定细胞内物质运输和能量转换。
能够进行活体细胞中离子和ph值变化研究(ratio),神经递质研究,微分干涉及荧光的断层扫描,多重荧光的断层扫描及重叠,荧光光谱分析荧光各项指标定量分析荧光样品的时间延迟扫描及动态构件组织与细胞的三维动态结构构件,荧光共振能量的转移的分析,荧光原位杂交研究(fish),细胞骨架研究,基因定位研究,原位实时pcr产物分析,荧光漂白恢复研究(frap),胞间通讯研究,蛋白质间研究,膜电位与膜流动性等研究,完成图像分析和三维重建等分析。
共聚焦激光显微镜原理共聚焦激光显微镜是一种高分辨率的显微技术,它利用激光光束对样品进行扫描,通过聚焦和探测来获取高分辨率的图像。
下面将详细介绍共聚焦激光显微镜的原理。
1. 激光扫描共聚焦激光显微镜使用一个激光束对样品进行扫描。
这个激光束可以是单色或多色的,并且可以调节其波长和功率。
在扫描过程中,激光束会被反射、散射或吸收,从而产生不同的信号。
2. 共聚焦共聚焦是指将激光束聚焦到一个非常小的点上,通常在几百纳米以下。
这个点称为焦点,在这个点上产生了强烈的电磁场,可以使样品中的荧光物质发出荧光信号。
同时,在这个点周围也会有一定程度的荧光信号。
3. 探测探测是指检测样品中发出的荧光信号,并将其转换成电子信号。
探测器通常使用光电倍增管或者CCD相机,可以捕捉到非常微弱的荧光信号。
4. 三维成像共聚焦激光显微镜可以进行三维成像。
通过改变激光束的焦距,可以在样品中扫描不同深度的区域。
这样就可以获得样品的三维结构信息。
5. 高分辨率共聚焦激光显微镜具有非常高的分辨率。
由于激光束被聚焦到一个非常小的点上,因此可以获得非常高的空间分辨率。
同时,由于只有在焦点处才会产生荧光信号,因此也可以获得非常高的时间分辨率。
6. 应用共聚焦激光显微镜广泛应用于生物医学研究领域。
它可以用于观察细胞、组织和器官中的结构和功能,并且还可以用于研究生物大分子如蛋白质、核酸等的结构和功能。
总之,共聚焦激光显微镜是一种高分辨率、非侵入性、三维成像技术,在生物医学研究领域具有广泛的应用前景。
1.激光共聚焦扫描显微镜的基本原理?与普通显微镜的区别?1.原理:激光共聚焦扫描显微镜利用激光束经光源前方的照明针孔(激发针孔)形成点光源,在物镜焦平面上形成一个轮廓分明的小点,激发出的荧光经原来的入射光路直接反向回到分光镜,并将荧光直接送到探测器前方的探测针孔(共聚焦针孔),通过探测针孔时先聚焦,由探测针孔后的光电倍增管逐点接收,在计算机屏幕上形成清晰的荧光图像。
照明针孔和探测针孔相对于物镜焦平面是共轭(共焦)的,即光点通过一系列的透镜,最终可同时焦聚于照明针孔和探测针孔。
这样,标本上的被照射点发射的荧光在探测针孔处成像,而来自该点以外的任何发射荧光均被探测针孔阻挡。
2.区别:共聚焦显微镜与普通显微镜相比有许多独特的优点,包括:可以控制焦深、照明强度、降低非焦平面光线的噪音干扰,从一定厚度标本中获取光学切片,即显微CT。
最核心的优点是降低噪音干扰:对于物镜焦平面的焦点处发出的光在针孔处可以得到很好地会聚,可以全部通过针孔探测器接收,而在焦平面上下位置发出的光在针孔处会产生直径很大的光斑,对比针孔的直径大小,则只有极少部分的光可以透过针孔被探测器接收。
而随着距离物镜焦平面的的距离越大,杂散光在探测针孔处的弥散斑就越大,能透过针孔的能量就越少,探测器上产生的信号就越小,这样就能有效防止杂质信号。
2.钙指示剂的类别和优缺点:1. 生物发光蛋白优点:不需要荧光激发系统,光毒性小。
缺点:不能通透细胞膜,对技术要求高,效率较低,需要较多的指示剂。
2. 荧光蛋白指示剂优点:比值测定,荧光信号强。
缺点:染料的信号可变度小,对PH值变化敏感。
3. Fura2(比值型)优点:避免实验设备、细胞类型、实验个体的差异,数据具有高度可比性。
缺点:紫外激发,一定的自发荧光,损害细胞的能量代谢。
4. Fluo3(非比值型)优点:激发,自发荧光小,对细胞的损害较小。
缺点:数据直接为荧光强度值,容易受染料浓度、细胞动态变化等因素的影响。
共聚焦显微镜原理
共聚焦显微镜是一种高分辨率显微镜,它利用共聚焦原理观察样品的表面形貌和结构。
共聚焦显微镜具有高分辨率、高对比度和三维表面重建的优点,因此在材料科学、生物医学和纳米技术等领域得到了广泛的应用。
首先,共聚焦显微镜的工作原理是基于共焦原理。
共焦原理是指在焦平面上同时聚焦激光束和检测信号,通过这种方式可以获得高分辨率的图像。
共聚焦显微镜利用激光光源照射在样品表面,样品表面反射的光信号被激光束收集,然后经过光学系统聚焦到探测器上,最终形成样品的高分辨率图像。
其次,共聚焦显微镜的成像原理是通过探测器接收样品表面反射的光信号,并将这些信号转换成电信号。
然后通过信号处理系统对这些电信号进行处理,最终形成样品的图像。
共聚焦显微镜的成像原理保证了其在观察样品表面形貌和结构时具有高分辨率和高对比度的特点。
另外,共聚焦显微镜在成像过程中还可以实现三维表面重建。
通过对样品表面反射的光信号进行处理,可以获取样品表面的高度信息,从而实现对样品表面的三维重建。
这种特点使得共聚焦显微镜在观察微纳米结构和纳米材料时具有独特的优势。
总的来说,共聚焦显微镜是一种基于共焦原理的高分辨率显微镜,其工作原理是利用激光束和检测信号在焦平面上同时聚焦,成像原理是通过探测器接收样品表面反射的光信号,并将这些信号转换成电信号,最终形成样品的图像。
共聚焦显微镜在观察样品表面形貌和结构时具有高分辨率、高对比度和三维表面重建的优点,因此在材料科学、生物医学和纳米技术等领域得到了广泛的应用。
激光共聚焦扫描显微镜成像的基本原理激光共聚焦显微镜(LCM)是近年来发展起来的一种高分辨率荧光显微成像技术。
它通过将样品置于激光束的焦点处,利用高灵敏度的探测器记录样品发出荧光信号,从而实现对样品内部结构的高分辨率成像。
本文将详细介绍LCM的基本原理、成像途径、成像原理及优缺点等方面的内容。
一、激光共聚焦显微镜的基本原理激光共聚焦显微镜基于利用激光束在三维空间内聚焦成极小的点状光斑,对样品进行扫描成像的技术原理。
在聚焦点位置,通过聚焦光斑的极高光密度,激活样品中的荧光染料,荧光染料则针对特定的结构在荧光信号波长处发出荧光信号,被高灵敏度荧光探测器探测并记录下来,然后通过计算机处理、分析和重建,生成高质量的高分辨率图像。
与普通显微镜最大的区别在于,普通显微镜由于透过整个样品并以相位差效应成像,而激光共聚焦显微镜由于仅仅聚焦于样品表面的非常窄的一点,信号只能从聚焦点的附近探测到,而且该点在扫描过程中会不断变换位置。
换言之,成像并不是透过整个样品实现,而是在样品上面扫描得到,并聚焦于单个点上。
对于毫米量级的样品,其层面精度可以达到25nm。
二、激光共聚焦显微镜成像途径激光共聚焦显微镜的成像途径目前有两种,分别为单光子激发型和双光子激发型。
1、单光子激发型单光子成像模式是利用激光束在荧光染料上发生的单光子激发效应进行成像的一种方式。
在单光子激发光下,荧光染料的各自精细结构会发生辐射跃迁产生能量并发射荧光,同时发射时间对荧光能量的传递产生影响,可以通过荧光转移速率反映。
荧光束在被激活后,将以光子流的形式反射回来,被共聚焦显微镜探测并捕捉。
2、双光子激发型双光子成像模式使用了两次光子激发效应,产生高到对比度的图像,并最小化了样品在激发时所受的损伤输出功率。
双光子成像所需条件包括至少两个光子激发、空间和时间上的集中在样品特定区域。
在这种情况下,激光光束相互作用,将样品中转运载分子激发成放射的谐振态发生荧光发射。
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激光共聚焦显微镜的使用和应用
激光共聚焦显微镜(Confocal Laser Scanning Microscope,CLSM)是一种高分辨率的显微成像技术,它可以获得立体的显微图像,极大地提高了显微图像的解析度,从而推动了生物学、物理学和其他科学研究的发展。
激光共聚焦显微镜结合了激光技术和共聚焦成像技术,可以清晰地观察单个细胞内的分子及形态特征,进而实现深入到细胞内结构的检查及定量测定。
激光共聚焦显微镜的核心部分由激光源、激光扫描系统、棱镜、图像处理计算机及显微镜组成。
激光源可以使用任何可以产生激光的激光器,比如激光管、激光晶体等,以实现不同的波长。
激光扫描系统能够把激光束转化为两个椭圆激光扫描区,从而实现激光的有效分布。
棱镜负责对激光束进行反射和定向,以实现激光的可控扫描和定向。
图像处理计算机负责对获取到的信息进行处理,以实现更为准确的图像记录。
显微镜用来将图像反映到眼睛上,从而获得清晰的图像。
扫描共聚焦显微镜原理一、引言扫描共聚焦显微镜(Scanning Confocal Microscope,SCM)是一种先进的显微成像技术,它在生物学、医学、材料科学等领域有着广泛的应用。
与传统的显微镜相比,扫描共聚焦显微镜具有更高的分辨率和更好的成像质量。
本文将重点介绍扫描共聚焦显微镜的工作原理。
二、扫描共聚焦显微镜的工作原理扫描共聚焦显微镜的基本原理是通过逐点扫描样品,并对每个像素点的荧光信号进行检测和记录,从而获得高分辨率的图像。
以下是扫描共聚焦显微镜的工作原理:1.逐点扫描:扫描共聚焦显微镜使用快速振镜或声光器件等扫描装置,对样品进行逐点扫描。
在每个像素点上,激光束聚焦在样品上,激发荧光。
2.激发荧光:当激光束照射到样品上时,会激发荧光。
这些荧光信号是样品特性的反映,可以用于成像。
3.检测荧光信号:在每个像素点上,荧光信号被检测器收集并转换为电信号。
这个过程是在焦平面上完成的,因此每个像素点都有良好的焦深。
4.记录图像:电信号被记录并转换为数字信号,然后通过计算机进行图像处理和显示。
由于每个像素点的荧光信号都被独立记录,因此最终获得的图像具有高分辨率和高对比度。
5.图像重建:通过将所有像素点的图像信息组合起来,可以重建出整个样品的图像。
这个过程可以通过计算机软件实现。
三、扫描共聚焦显微镜的特点和优势扫描共聚焦显微镜具有以下特点和优势:1.高分辨率:由于逐点扫描和独立检测每个像素点的荧光信号,扫描共聚焦显微镜可以获得高分辨率的图像,远高于传统的显微镜。
2.更好的焦深:由于在焦平面上进行检测,每个像素点都有良好的焦深,使得获得的图像具有更好的立体感。
3.减少杂散光干扰:通过只检测焦平面的荧光信号,扫描共聚焦显微镜有效地减少了杂散光干扰,提高了图像的对比度。
4.定量分析:由于每个像素点的荧光信号都可以独立记录,因此可以对样品进行定量分析,如测量荧光强度、测量荧光光谱等。
5.适合各种样品:扫描共聚焦显微镜适用于各种样品,如生物切片、细胞培养物、组织样本等。
共聚焦细胞膜分子共定位一、引言共聚焦显微镜技术自20世纪80年代问世以来,已经成为生物学、医学和相关领域中一种重要的研究工具。
该技术利用激光聚焦到样品上的一个极小区域,并通过对该区域的图像进行高分辨率、高对比度和高灵敏度的观察,实现了对细胞和亚细胞结构的深入探索。
在本文中,我们将重点探讨共聚焦显微镜技术在细胞膜分子共定位研究中的应用。
二、共聚焦显微镜技术共聚焦显微镜技术通过将激光聚焦到样品上极小的区域,实现了高分辨率和高对比度的成像。
这种技术可以观察细胞和亚细胞结构的形态、位置和动态变化,为研究细胞膜分子的共定位提供了有力支持。
三、细胞膜分子共定位的研究细胞膜是细胞与外界环境之间的界面,其分子结构和功能对于细胞的生存和正常生理活动至关重要。
共聚焦显微镜技术为研究细胞膜分子的共定位提供了有力支持,有助于深入了解细胞膜的结构和功能。
1.细胞膜分子共定位的原理:共定位是指两种或多种蛋白质在同一细胞内的某一区域或亚细胞结构中的同时存在。
通过观察共定位,可以推断出蛋白质之间的相互作用或相互依赖关系,有助于揭示细胞的生理和病理过程。
2.细胞膜分子共定位的方法:共定位研究主要通过荧光标记、免疫标记和基因敲除等技术实现。
荧光标记是一种常用的方法,可以通过将荧光蛋白或荧光染料与目标蛋白质结合,实现对目标蛋白质的观察和定位。
免疫标记则是利用抗体与目标蛋白质的特异性结合进行标记,可以更准确地反映目标蛋白质的位置和表达情况。
基因敲除技术则可以用于研究特定基因表达对其他蛋白质共定位的影响。
3.细胞膜分子共定位的应用:共定位研究在许多生物学和医学领域中都有广泛应用,如神经科学、免疫学、肿瘤学等。
例如,在神经科学中,研究人员可以通过观察神经元中不同蛋白质的共定位情况,了解神经信号转导的机制;在肿瘤学中,研究人员可以通过观察肿瘤细胞中蛋白质的共定位情况,揭示肿瘤发生和发展的机制,为肿瘤的诊断和治疗提供依据。
四、展望随着科技的不断发展,共聚焦显微镜技术也在不断改进和完善。
共聚焦显微镜原理及其应用
传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面的每一点扫描,标本上的被照射点,在探测针孔处成像,由探测针孔后的光点倍增管(PMT)或冷电耦器件(cCCD)逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像。
照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点不会在探测针孔处成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学横断面,克服了普通显微镜图像模糊的缺点。
它是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,把光学成像的分辨率提高了30%--40%,使用紫外或可见光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察诸如Ca2+ 、PH值,膜电位等生理信号及细胞形态的变化,成为形态学,分子生物学,神经科学,药理学,遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。
激光共聚焦成像系统能够用于观察各种染色、非染色和荧光标记的组织和细胞等,观察研究组织切片,细胞活体的生长发育特征,研究测定细胞内物质运输和能量转换。
能够进行活体细胞中离子和PH值变化研究(RATIO),神经递质研究,微分干涉及荧光的断层扫描,多重荧光的断层扫描及重叠,荧光光谱分析荧光各项指标定量分析荧光样品的时间延迟扫描及动态构件组织与细胞的三维动态结构构件,荧光共振能量的转移的分析,荧光原位杂交研究(FISH),细胞骨架研究,基因定位研究,原位实时PCR产物分析,荧光漂白恢复研究(FRAP),胞间通讯研究,蛋白质间研究,膜电位与膜流动性等研究,完成图像分析和三维重建等分析。
共聚焦显微镜的应用。
细胞形态学分析(观察细胞或组织内部微细结构,如:细胞内线粒体、内质网、高尔基体、微管、微丝、细胞桥、染色体等亚细胞结构的形态特征;半定量免疫荧光分析);荧光原位杂交研究;基因定位研究及三维重建分析。
1.细胞生物学:细胞结构、细胞骨架、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化
2.生物化学:酶、核酸、FISH(荧光原位杂交)、受体分析
3.药理学:药物对细胞的作用及其动力学
4.生理学:膜受体、离子通道、细胞内离子含量、分布、动态
5.神经生物学:神经细胞结构、神经递质的成分、运输和传递、递质受体、离子内外流、神经组织结构、细胞分布
6.微生物学和寄生虫学:细菌、寄生虫形态结构
7.病理学及临床应用:活检标本诊断、肿瘤诊断、自身免疫性疾病诊断、HIV等
8.遗传学和组胚学:细胞生长、分化、成熟变化、细胞的三维结构、染色体分析、基因表达、基因诊断
激光共聚焦显微镜在医学领域中的应用:
A.在细胞及分子生物学中的应用
1. 细胞、组织的三维观察和定量测量
2. 活细胞生理信号的动态监测
3. 粘附细胞的分选
4. 细胞激光显微外科和光陷阱功能
5. 光漂白后的荧光恢复
6. 在细胞凋亡研究中的应用
B.在神经科学中的应用
1. 定量荧光测定
2. 细胞内离子的测定
3 神经细胞的形态观察
C.在耳鼻喉科学中的应用
1. 在内耳毛细胞亚细胞结构研究上的应用
2. 激光扫描共聚焦显微镜的荧光测钙技术在内耳毛细胞研究中的应用
3. 激光扫描共聚焦显微镜在内耳毛细胞离子通道研究上的应用
4. 激光扫描共聚焦显微镜在嗅觉研究中的应用
D.在肿瘤研究中的应用
1. 定量免疫荧光测定
2. 细胞内离子分析
3. 图像分析:肿瘤细胞的二维图像分析
4. 三维重建
E.激光扫描共聚焦显微镜在内分泌领域的应用
1. 细胞内钙离子的测定
2. 免疫荧光定位及免疫细胞化学研究
3. 细胞形态学研究:利用激光扫描共聚焦显微镜
F.在血液病研究中的应用
1. 在血细胞形态及功能研究方面的应用
2. 在细胞凋亡研究中的应用
G.在眼科研究中的应用
1. 利用激光扫描共聚焦显微镜观察组织、细胞结构
2. 集合特殊的荧光染色在活体上观察角膜外伤修复中细胞移行及成纤维细胞的出现
3. 利用激光扫描共聚焦显微镜观察视网膜中视神经细胞的分布以及神经原的树枝状形态
4. 三维重建。