总多酚的测定
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福林酚测多酚原理福林酚是一种常用的多酚类化合物,其含量的测定对于食品、药品、化妆品等行业具有重要意义。
福林酚的测定方法有很多种,其中常用的方法包括高效液相色谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱-质谱联用法等。
本文将着重介绍福林酚测多酚的原理及相关方法。
首先,我们来了解一下福林酚的结构特点。
福林酚是一种多酚类化合物,其分子结构中含有多个酚羟基,这使得它具有较强的抗氧化性能。
在食品、药品等行业中,福林酚常被用作抗氧化剂,能够有效延长产品的保质期,保持产品的品质。
福林酚的测定方法中,高效液相色谱法是一种常用且准确的方法。
该方法利用高效液相色谱仪对样品中的福林酚进行分离和检测。
在色谱柱的作用下,样品中的福林酚会按照其特定的化学性质在色谱柱中被分离出来,然后通过检测器进行检测和定量。
这种方法具有分离效果好、灵敏度高、准确性高的特点,适用于各种类型的样品。
另外,紫外分光光度法也是一种常用的福林酚测定方法。
该方法利用福林酚在紫外光下的吸收特性来进行测定。
通过测定样品在特定波长下的吸光度,可以计算出样品中福林酚的含量。
这种方法操作简单、快速,适用于一般的样品测定。
除了上述两种方法外,高效液相色谱-质谱联用法也是一种准确性较高的福林酚测定方法。
该方法结合了高效液相色谱和质谱的优势,不仅可以对福林酚进行分离和检测,还可以对其分子结构进行进一步的确认。
这种方法适用于对福林酚进行深入研究和分析的场合。
总的来说,福林酚的测定方法多种多样,每种方法都有其适用的场合和特点。
在实际的应用中,需要根据具体的情况选择合适的方法进行测定。
同时,在进行福林酚测定时,需要注意样品的处理和准备工作,以确保测定结果的准确性和可靠性。
综上所述,福林酚测多酚的原理及方法是一个复杂而又重要的课题。
通过本文的介绍,相信读者对福林酚的测定方法有了更深入的了解,希望能对相关领域的研究和实践工作有所帮助。
福林酚法测定多酚含量原理
福林酚法是一种测定多酚含量的方法。
福林是一种具有还原性的酚类
物质,可以与多酚反应生成具有蓝色,紫色,红色等吸光度较高的络合物。
该方法的原理基于福林与多酚之间的氧化还原反应。
福林酚法的测定步骤如下:
1.加样:取适量待测样品,放入试管中。
2.福林试剂的配制:将适量的福林溶于适量的乙醇中,制成福林试剂。
3.加入福林试剂:将制备好的福林试剂加入试管中,与待测样品充分
混合。
4.氢氧化钠溶液的配制:将适量的氢氧化钠溶解于适量的蒸馏水中,
制成氢氧化钠溶液。
5.加入氢氧化钠溶液:将制备好的氢氧化钠溶液滴加到试管中,与混
合液充分混合。
6.开始反应:将试管加热,使福林与多酚之间的反应加速进行。
7.定时停止反应:经过一段时间后,停止加热反应。
8.冷却:待试管冷却后,测定反应液的吸光度。
9.测定吸光度:使用分光光度计等设备,测定反应液的吸光度。
10.计算:根据反应液的吸光度值,参照标准曲线,计算出待测样品
中多酚的含量。
福林酚法的原理是基于福林与多酚之间的氧化还原反应。
福林具有还原性,在碱性条件下,可以与多酚发生氧化还原反应。
福林通过氧化还原反应,可以将多酚从原来的无色状态转变为有色络合物。
反应过程中福林的还原能力会逐渐消耗,导致吸光度降低。
因此,反应液的吸光度与多酚的含量之间有一定的正比关系。
福林酚法的优点是操作简单,灵敏度高,对于多酚含量的测定具有一定的准确度和可靠性。
因此,福林酚法广泛应用于食品、医药、化妆品等领域中对多酚含量的测定。
桃金娘根中没食子酸和总多酚含量测定目的测定桃金娘根中没食子酸和总多酚的含量。
方法没食子酸的含量测定采用超高效液相色谱法。
色谱条件:以甲醇-0.5%磷酸(15︰85)为流动相,采用二级管阵列检测器(PDA)检测,检测波长为215 nm,流速为0.2 mL/min。
总多酚的含量测定采用分光光度法,以没食子酸为对照品,福林酚试剂为显色剂,在748 nm波长下进行测定。
结果没食子酸在3.853~115.6 μg/mL(r = 0.9999)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,回收率为98.73%~100.76%。
总多酚分析的线性范围为1.0~7.0 μg/mL(r = 0.9995),回收率为98.04%~101.17%。
结论该方法简便、快速、重现性好,可用于桃金娘根的质量控制及定量分析。
[Abstract] Objective To determine the content of gallic acid and total polyphenol in Radix Rhodomyrti. Methods Gallic acid in Radix Rhodomyrti was determined by ultra performance liquid chromatography (UPLC)with photo-diode-array (PDA)at 215 nm,and the mobile phase was methol-0.5% phosphate acid solustion (15∶85)at a flow rate of 0.2 mL/min. The content of total polyphenol was analyzed by spectrophotometry at 748 nm,gallic acid was selected as the reference substance. The colour-developing agent was Folin-Ciocalteu′s phenol reagent. Results The linear range for gallic acid and total polyphenol was 3.853-115.6 μg/mL (r = 0.9999)and 1.0-7.0 μg/mL (r = 0.9995)respectively. The recovery rate of gallic acid was 98.73%-100.76% and recovery rate of total polyphenol was 98.04%-101.17%. Conclusion The method is simple,rapid and good reproducible,can be used for quality control and quantitative analysis of Radix Rhodomyrti.[Key words] Radix Rhodomyrti;Gallic acid;Total polyphenol;UPLC;Spectrophotometry桃金娘[Rhodomyrtus tomentosa(Ait.)Hassk]是一种优良的野生植物资源,尤盛产于中国和日本的南部等地区[1-2];桃金娘根(Radix Rhodomyrti)为桃金娘的干燥根,含有黄酮苷、花色苷等黄酮类成分以及植物多糖成分和没食子酸等化合物多种活性成分[3-5],以“通经活血、收敛止血”功效收载于《兽药国家标准(化学药品、中药卷)第一册》中[6]。
福林酚法测多酚含量的原理多酚是一种重要的天然物质,具有多种生物活性和药理作用。
因此,测定多酚含量对于食品、药品、化妆品等领域具有重要意义。
福林酚法是一种常用的测定多酚含量的方法,本文将介绍福林酚法测多酚含量的原理。
一、福林酚法的基本原理福林酚法是以福林酚为试剂,测定多酚含量的方法。
福林酚是一种酚类化合物,可以和多酚发生氧化反应,生成深褐色的产物,其吸光度与多酚的含量成正比。
因此,通过测定深褐色产物的吸光度,可以计算出多酚的含量。
二、福林酚法的步骤福林酚法的具体步骤如下:1.制备福林酚试剂:将福林酚和氢氧化钠混合,加入水中搅拌至完全溶解。
2.制备标准曲线:取一定浓度的多酚标准品,加入福林酚试剂,混合均匀后,测定吸光度。
根据吸光度和多酚标准品的浓度,绘制标准曲线。
3.测定样品:取一定量的样品,加入福林酚试剂,混合均匀后,测定吸光度。
根据标准曲线,计算出样品中多酚的含量。
三、福林酚法的优缺点福林酚法测多酚含量具有以下优点:1.简单易行:福林酚法的操作简单,不需要复杂的仪器和技术。
2.灵敏度高:福林酚法对多酚的检测灵敏度高,可以检测到微量的多酚。
3.稳定性好:福林酚试剂具有较好的稳定性,可以长期保存。
但福林酚法也存在一些缺点:1.受干扰:福林酚法对一些物质具有交叉反应,如还原糖、蛋白质等,会对多酚含量的测定造成干扰。
2.适用性有限:福林酚法只适用于测定含有酚羟基的多酚,对于不含酚羟基的多酚无法测定。
四、福林酚法的应用举例福林酚法广泛应用于食品、药品、化妆品等领域的多酚含量测定。
以下是一些应用举例:1.测定茶叶中多酚含量:茶叶中含有大量的多酚,可以通过福林酚法测定其含量,从而评估茶叶的品质和功效。
2.测定葡萄酒中多酚含量:葡萄酒中含有丰富的多酚,可以通过福林酚法测定其含量,从而评估葡萄酒的品质和营养价值。
3.测定化妆品中多酚含量:化妆品中含有多种多酚,可以通过福林酚法测定其含量,从而评估化妆品的功效和安全性。
福林酚法测定总酚含量-操作流程图2017.10【安全事项】本实验所用的福林酚试剂(或称Folin酚试剂、Folin-Ciocalteu试剂)有严重的腐蚀性。
【测定方法与操作流程图】【文献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao, Dongfeng Chen. Fl os Chrysanthemi Indici Protects against Hydroxyl-induced Damages to DNA and MSCs via Antioxidant Mechanism: A Chemistry Study. Journal of Saudi Chemical Society, 2015, 19, 454-460【溶液配制】(1)0.25mol/L 福林酚试剂的配制:取原装的福林酚试剂(浓度为2mol/L)2毫升,加蒸馏水14毫升,充分混合,得0.25mol/L的福林酚试剂,共16 毫升。
(2)15%Na2CO3溶液的配制:取Na2CO3•10 H2O溶3.0 克,溶于20毫升水中,混匀即得。
(3)连苯三酚1标准液的配制:精确称取连苯三酚标准品10毫克.用甲醇溶解并定容到50毫升,得0.2毫克/毫升的连苯三酚标准液。
(4)样品液的的配制:精确称取待测样品10毫克.用甲醇2溶解并定容到10毫升,得1毫克/毫升的样品液。
【连苯三酚标准曲线的绘制】0.2毫克/毫升样品液加样量(x毫升) 甲醇(05-x)A760值A760平均值SD0.000 0 0.50 0.030.0386670.0174421本文使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使用咖啡酸、槲皮素、儿茶素、芦丁等作为标准品,绘制标准曲线。
2也可以用无水乙醇、95乙醇、水,视样品的溶解性而度。
食品中食品中多酚含量的新测定方法食品中多酚含量的新测定方法随着人们对饮食健康的重视,食品中的多酚成分备受关注。
多酚作为一种重要的营养物质,具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种保健功能,被广泛应用于食品、保健品等领域。
因此,准确测定食品中多酚含量,对于评估其营养价值和功能性成分具有重要意义。
过去,多酚的测定方法主要依靠高效液相色谱(HPLC)和分光光度法。
这些方法虽然准确可靠,但操作复杂、耗时耗能,且需要昂贵的仪器设备。
随着科技的进步,研究人员对食品中多酚含量的测定方法进行了改进和创新,提出了一些新的测定方法。
近年来,基于电化学的多酚测定方法越来越受到关注。
电化学是利用电极表面与被测物质发生氧化还原反应来测定分析物浓度的方法。
其中,常用的电化学测定方法包括循环伏安法、差分脉冲伏安法和方波伏安法。
循环伏安法是最常用的电化学测定方法之一。
其原理是在电极上施加固定的电压,然后通过改变电压的范围扫描,从而获得电流电压曲线。
利用电流峰值的大小与多酚的浓度之间的关系,可以测定食品中多酚的含量。
然而,循环伏安法存在一定的局限性,例如对电极材料和电解液的选择有一定要求。
差分脉冲伏安法是一种基于峰值电流的测定方法。
它通过测定峰值电流的大小来确定多酚的浓度。
该方法的优点是准确性高、灵敏度好。
然而,差分脉冲伏安法需要操作者具备一定的电化学知识和技术,对于一般消费者来说不太方便。
方波伏安法是一种最新的电化学测定方法,其原理是在施加方波电压的条件下,记录电化学反应在电极上所产生的电流信号。
相比于循环伏安法和差分脉冲伏安法,方波伏安法具有快速、简便、稳定等优点。
研究人员发现,食品中的多酚成分在方波电压的条件下,具有良好的氧化还原反应。
因此,利用方波伏安法测定食品中多酚含量成为可能。
尽管新的测定方法在多酚的测定方面具有一定的优势,但仍然需要进一步的研究和验证。
例如,对于不同类型的食品样品,新方法的适用性需要进行广泛的验证。
此外,考虑到不同食品的复杂性,还需要对多酚测定方法进行标准化、规范化。
一、实验目的1. 掌握福林酚法测定多酚含量的原理和方法。
2. 了解实验操作步骤和注意事项。
3. 通过实验,学会使用可见分光光度计进行定量分析。
二、实验原理多酚类化合物是一类具有多个酚羟基的有机化合物,广泛存在于植物中。
福林酚法是一种常用的测定多酚含量的方法,其原理如下:在碱性条件下,多酚类化合物与福林酚试剂中的磷钼酸化合物反应,生成蓝色化合物。
蓝色的深浅与多酚含量成正比。
通过比色法,可测定样品中多酚的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 样品:茶叶、苹果、葡萄等富含多酚的植物提取物。
- 福林酚试剂:预先配制好。
- 磷钼酸试剂:预先配制好。
- 乙醇:分析纯。
- 蒸馏水:分析纯。
2. 实验仪器:- 可见分光光度计- 移液器- 烧杯- 比色皿- 电子天平四、实验步骤1. 样品处理:准确称取一定量的样品,加入适量的乙醇,超声提取,离心分离,取上清液待测。
2. 标准曲线绘制:- 准备一系列已知浓度的多酚标准溶液。
- 分别吸取1mL标准溶液于比色皿中,加入5mL福林酚试剂,混匀,静置5min。
- 加入5mL磷钼酸试剂,混匀,静置10min。
- 以蒸馏水为空白,用可见分光光度计在波长680nm处测定吸光度。
- 以多酚浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
3. 样品测定:- 分别吸取1mL样品溶液于比色皿中,按照标准曲线绘制步骤进行操作。
- 测定样品溶液的吸光度。
- 从标准曲线上查得样品溶液中多酚的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制:根据实验结果,绘制标准曲线,得出线性方程为:y = 0.0165x + 0.0146,相关系数R² = 0.9977。
2. 样品测定:根据标准曲线,计算样品溶液中多酚的含量。
以茶叶提取物为例,样品溶液中多酚含量为:x = (A - 0.0146) / 0.0165 = 0.0186,即样品溶液中多酚含量为18.6mg/L。
六、实验结论本实验采用福林酚法测定了茶叶提取物中的多酚含量,结果表明该方法操作简便、准确度高,适用于多酚类化合物的定量分析。
多酚提取方法:多酚含量的提取按照Chiou等(2007)年的方法进行,取1g果肉,0-4℃冰浴研磨,加入10ml 75%甲醇,然后放入离心管中,超声波处理15min,然后摇床摇动12h,10, 500g离心10min,取上清液,然后残渣加入10ml 75%甲醇重复提取2次,合并上清液,用50ml蒸馏烧瓶30℃低压蒸馏2h,然后用蒸馏水溶解定溶到10ml,用于多酚含量的测定。
多酚检测方法:色谱条件:C18柱((250×4.6 mm);波长:280;流速:1 mL min-1流动相:A:乙酸/水(1:50, v:v)B:乙腈/甲醇(10:15, v:v)设置梯度洗脱:0 min:90% A and 10% B10 min:80% A and 20% B15 min:70% A and 30% B25 min:60% A and 40% B30 min:50% A and 50% B40 min:50% A and 50% B.标样图谱:(自己做的数据)标准样品重量g 定容体积ml 稀释倍数浓度g/ml ug/ml 出峰时间gallic acid 0.0061 25 100 0.00000244 2.44 4.914546 (+)catechin 0.0067 25 40 0.0000067 6.7 12.91146 ferulic acid 0.0059 25 40 0.0000059 5.9 21.38777 chlerogenic 0.0063 25 100 0.00000252 2.52 11.72349 caffeic acid 0.0097 25 100 0.00000388 3.88 15.92295 香豆酸0.0048 25 100 0.00000192 1.92 22.75522 phlorizin 0.005 25 100 0.000002 2 27.58096。
Folin-Ciocalteus法测定马铃薯中的总多酚李静;聂继云;毋永龙【摘要】An improved UV spectrophotometry method was developed for analysis of total polyphenols in potato. Folin-Ciocalteus method for total polyphenols determination in potato was studied. After a series of optimization experiments, the best determination procedure of Folin-Ciocalteus method was put forward, that is, 5.0 mL water, 1.0 mL coloration reagent, and 3.0 mL 7.5%sodium carbonate solution were added orderly into 1.0 mL extraction of sample or standard gal ic acid,then blended, and measured at 765 nm after coloration for 2 h. Under this procedure, relative standard deviation of the method was 7.7%, and average recovery rate was 100%-108%.This method is applicable to conventional laboratory determination of total polyphenols in potato.%本文建立了紫外分光光度计法准确测定马铃薯中的总多酚。
一、实验原理
多酚类物质包括花青苷、黄酮苷、单宁等,具体又可分为若干种。多酚类物
质含有酚羟基,有的还含有羧基,属于极性有机化合物,常用极性溶剂提取,如
甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、水以及由这些溶剂按比例组成的复合溶剂。由以
上溶剂直接提取的多酚物质,实质为各种多酚的混合物(总多酚提取液),
不同的原料中所含酚类物质的种类不同,需要进一步的分离鉴定。
常用的植物多酚总量的测定方法中较为普遍使用的方法有:酒石酸亚铁比色法、
FD 法、FC 法、普鲁士蓝法等。其中酒石酸亚铁分光光度比色法应用较多。
酒石酸亚铁分光光度比色法的原理:过量的酒石酸亚铁与提取液中多酚反应
生成稳定的紫褐色络合物,溶液颜色的深浅与溶液中多酚含量成正比。
测定总多酚
时所用的标准物则需根据样品中所含多酚的种类而定,比如测定茶叶中茶多酚含
量时,儿茶酚能较好地代表茶多酚,则以儿茶酚作标准物;而测定藤茶多酚时,
则以没食子酸作标准物较合适。
二、实验材料、试剂与仪器
材料:茶叶;
仪器:水浴锅,分光光度计,三角瓶,容量瓶,吸管等;
试剂:
(1)酒石酸亚铁溶液:称取1.00g硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)和5.00g酒石酸
钾钠(C4H4O6NaK·4H2O)混合后加蒸馏水溶解定容到1000mL
(2)pH 7.5磷酸盐缓冲液:称取60.20g Na2HPO4·12H2O和
5.00g NaH2PO4·12H2O混合后加蒸馏水溶解定容到1000ml。
三、操作步骤
(一)标准曲线的制作或茶多酚含量经验值的应用
标准曲线的制作参照GB-8313-87《茶—茶多酚测定》方法。为简化操作,可用
在一定操作条件下吸光度值为1.00时,供试液中茶多酚的浓度为7.826 mg/mL”
这一经验值,直接由待测液的吸光度值计算样品中茶多酚的含量。
1.福林试液的配制: 取钨酸钠10g与钼酸钠2.5g,加水70ml、85%磷酸5ml
与盐酸10ml,置200ml烧瓶中,缓缓加热回流10小时,放冷,再加硫酸锂15g、
水5ml与溴滴定液1滴煮沸约15分钟,至溴除尽,放冷至室温,加水使成100ml。
滤过,滤液作为贮备液。置棕色瓶中,于冰箱中保存。临用前,取贮备液2.5ml,加
水稀释至10ml,摇匀,即得。 用10mL乙醇溶液溶解0.5000g没食子酸,
定容至100mL,分别移取3.0mL到100mL容量瓶中,用蒸馏水定容。加入福林
-薛卡多(Folin-Ciocalteu)试剂显色,在765nm波长下测定吸光度。每个浓度
做三个平行试验,取平均值,根据标准曲线。 取样品溶液1mL,按照上
述的制作方法,测定其吸光度,每个样品做三个平行试验,取平均值,计算样品
中的多酚含量。 反应原理为酚类化合物在碱性条件下可以将钨钼酸还原,生
成蓝色的化合物,颜色的深浅与酚类化合物含量呈正相关,在波长760 nm左右
有最大吸收。
2. 酒石酸亚铁比色法。 其测定原理是茶多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色
络合物。用分光光度法测定其含量。
茶多酚标准溶液的配制称取提取纯品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混匀,即
为每毫升含1mg提取纯品的标准溶液(mg/mL) 。 茶多酚的含量。茶多酚
标准曲线的绘制。分别吸取茶多酚标准溶液1. 0mL、2. 0mL、3. 0mL、4. 0mL 于
4 个50mL 容量瓶中,各加水至10mL,再加酒石酸亚铁溶液10mL,加入pH为7. 5
的磷酸缓冲液至刻度,混匀后用1㎝比色皿,以空白试剂作参比,于波长540nm处测
定吸光度(A) ,绘制出标准曲线。