FoLin-CiocaLteu法测定多酚含量

Folin-Ciocalteu比色法测定香椿皮中多酚含量黄筑艳;刘力;乐意【摘要】建立了Folin-Ciocalteu法测定香椿皮总酚酸含量.以没食子酸为对照品,采用Folin-Ciocalteu法测定香椿皮中多酚含量.结果表明:香椿皮总多酚的含量在0～0.048 mg/mL范围内呈良好线性关系(R2=0.9997),精密度RSD为0.34％,重复性RSD为0.35％,稳定性RSD为0.23％,样品平均回收率为104.5％,RSD为1.43％.该多酚测定方法简单、快捷、准确,是测定香椿皮总多酚可靠的方法.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2014(042)004【总页数】3页(P126-127,157)【关键词】香椿皮;多酚;Folin-Ciocalteu比色法【作者】黄筑艳;刘力;乐意【作者单位】贵州大学药学院,贵州贵阳550003;贵州大学药学院,贵州贵阳550003;贵州大学药学院,贵州贵阳550003【正文语种】中文【中图分类】O657香椿皮为楝科香椿属植物香椿的树皮。

香椿皮味苦涩、凉，具有除热、燥湿、涩肠、止血、杀虫等功效，可治久泻、久痢、肠风便血等疾病［1］。

香椿皮含有黄酮、脂溶性成分、挥发油等成分。

目前，对香椿的研究主要集中在香椿叶、香椿子等方面［2－6］，对香椿皮多酚类物质的研究较少。

多酚具有抗肿瘤、抗氧化、预防动脉硬化等作用。

为了建立一种快速、准确地测定香椿皮中多酚的方法，本试验采用Folin－Ciocalteu比色法对香椿皮的含量测定进行方法学考察，对香椿皮多酚的含量进行研究，为今后开展香椿皮多酚的研究，合理开发香椿皮资源具有重要意义。

香椿皮采于贵州省兴义市郊，采收后自然晾干，粉碎过20目筛。

经贵阳中医学院陈德媛教授鉴定为 Toona sinensis(A.Juss.)Roem。

没食子酸对照品，购于中国药品生物制品检定所;Folinciocaileu试剂(1 mol/L)，购于上海荔达生物科技有限公司;碳酸钠、乙醇为分析纯。

Ｆｏｌｉｎ－Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ法测定鱼腥草多酚的含量蔡文国，吴 卫*，邵金凤，陈 鹊，王元彪，刘正琼(四川农业大学农学院，四川 雅安 625014)摘 要：目的：探索优化Folin-Ciocalteu 法测定鱼腥草中多酚含量。

方法：运用不同的溶剂超声提取鱼腥草叶片，比较不同时间提取物用Folin-Ciocalteu 法测得的吸光度。

并以乙醇2h 提取液为对象研究不同的碳酸钠溶液、Folin-Ciocalteu 显色剂加入量、反应温度及时间对吸光度大小及稳定性的影响。

结果：甲醇提取效率最高，其次为乙醇、丙酮和水；提取时间2h ；较适宜测定方法为采用0.5mL 提取液，加入2.0mL 20%的碳酸钠缓冲液、1.5mL Folin-Ciocalteu 显色剂，蒸馏水定容至50.0mL ，55℃保温1.5h ，测定波长为760nm 。

结论：该方法比较快速、准确和稳定，适合推广。

关键词：鱼腥草；多酚；Folin-Ciocalteu 法；超声提取Determination of Polyphenol Content in Houttuynia cordata Thunb. by Folin-Ciocalteu Colorimetric MethodCAI Wen-guo ，WU Wei*，SHAO Jin-feng ，CHEN Que ，WANG Yuan-biao ，LIU Zheng-qiong(Agronomy College, Sichuan Agricultural University, Ya ’an 625014, China)Abstract ：Objective: To establish a quantitative method to assay total polyphenols in Houttuynia cordata Thunb.. Method:Four solvents (methanol, ethanol, acetone and water) were used to extract Houttuynia cordata Thunb. with the assistance of ultrasonic in order to explore the effects of extraction solvent type and length of extraction on the extraction of total polyphenols.Subsequently, the 2 h ethanol extract was used to optimize 20% sodium carbonate amount, Folin-Ciocalteu regent amount,reaction temperature and length of reaction. Results: Methanol was the best extraction solvent, followed by ethanol, acetone and water. The optimum conditions for determining total polyphenols in Houttuynia cordata Thunb. were as follows: a mixture of 0.5 mL of methanol extract, 2.0 mL of 20% sodium carbonate and 1.5 mL of Folin-Ciocalteu reagent diluted with distilled water to 50.0 mL for incubation at 55 ℃ for 1.5 h, followed by detection at 760 nm. Conclusion: The method is simple, accurate and provides an appropriate method for measuring total polyphenols in Houttuynia cordata Thunb.Key words ：Houttuynia cordata Thunb.；polyphenol ；Folin-Ciocalteu ；ultrasonic extraction中图分类号：TS207.3 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2010)14-0201-04收稿日期：2009-10-20基金项目：教育部留学回国人员科研启动基金项目作者简介：蔡文国(1987—)，男，硕士研究生，研究方向为中草药资源评价与利用。

※分析检测食品科学2010, Vol. 31, No. 04 179Folin-Ciocalteu比色法测定苹果渣中的多酚韩菊，魏福祥(河北省污染防治生物技术实验室，河北科技大学环境科学与工程学院，河北石家庄050018)摘要：采用超临界CO2萃取技术从苹果渣中提取多酚，以没食子酸为标准物质，系统研究了Folin-Ciocalteu(FC)比色法测定多酚的条件，建立了Folin-Ciocalteu比色法测定苹果渣中多酚的方法。

适宜的显色条件为FC试剂用量0.3mL、饱和碳酸钠溶液用量1.5mL、反应时间20min、反应温度25～35℃。

结果表明：在1～10μg/mL范围内，没食子酸吸光度与其质量浓度呈良好的线性关系，r＝0.9994；并进行了高、中、低3个不同加标水平的加标回收率测定实验，相应的回收率分别为99.66%、98.79%、98.20%，平均值为98.82%，RSD为1.93%。

该法测定样品快速、准确，重复性好，可应用于实际样品的测定。

关键词：多酚；Folin-Ciocalteu法；苹果渣；超临界CO2萃取Determination of Polyphenols in Apple Pomace by Folin-Ciocalteu ColorimetryHAN Ju，WEI Fu-xiang(Key Laboratory of Contaminant Controlling in Biology of Hebei Province, College of Environmental Science and Engineering,Hebei University of Science and Technology, Shijiazhuang 050018, China)Abstract：Folin-Ciocalteu colorimetric assay for polyphenols extracted from apple pomace by supercritical CO2 extractionusing gallic acid as reference substance was systematically investigated for developing an optimal colorimetric method for thedetermination of polyphenols in apple pomace. The optimum colorimetric conditions were determined as follows: 0.3 mL of Folin-Ciocalteu reagent, 1.5 mL of saturated Na2CO3 solution, 20 min of reaction time and 25－35 ℃of reaction temperature. Thecalibration curve for quantifying polyphenols exhibited a good linearity in the range of 1－10 μg/mL (r = 0.9994). The averagerecoveries of gallic acid at high, medium and low spike levels were 99.66%, 98.79% and 98.20% (n = 5), respectively, which werereaveraged at 98.82%, with a RSD of 1.93%. The proposed method demonstrates the advantages of rapidity as well as high accuracyand reproducibility.Key words：polyphenols；Folin-Ciocalteu colorimetry；apple pomace；supercritical CO2 extraction中图分类号：O657.32文献标识码：A文章编号：1002-6630(2010)04-0179-04苹果渣是果汁厂榨汁后的下脚料，其中含有丰富的研究上[3-6]，而对苹果多酚测定的系统研究较少。

实验三FoLin-CiocaLteu法测定多酚含H1.目的要求掌握FoLin-CiocaLteu法测定多酚的方法。

2.方法原理多酚与FoLin-CiocaLteu试剂发生特异性反响，反响产物对特定波长的有最大吸收，且吸光值与多酚的量在一定浓度范围内成线性关系。

先以标准酚类物质建立标准曲线，再测定待测样品吸光值，据此可求出待测样品中多酚的含量。

3.主要实验仪器及材料可见一紫外分光光度计、电子分析天平、车乌酸钠(Na2WO - 2HO)、钳酸钠( NaMoO・2HO)、磷酸、盐酸、漠水、硫酸锂(Li 2SO)、没食子酸或单宁、碳酸钠。

4.掌握要点1)掌握FoLin-CiocaLteu在试剂配制方法，2)掌握标准曲线及回归方程的求法；3)掌握样品多酚含量的FoLin-CiocaLteu测定方法。

5.实验内容1)FoLin-CiocaLteu 试剂的配制：将100g 鸨酸钠(Na2WO - 2HO), 25g 钳酸钠(Na 2MoO • 2HO) ,700 mL蒸僻水，50 mL 85漩酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中，充分混合，文火缓慢回流10h，在参加150g 硫酸锂(Li 2SO),50 mL蒸僻水及数滴液漠，然后将烧瓶内溶液开口煮15min,以驱除过量的漠，冷至室温后用容量瓶定容至1000mL过滤。

滤液呈微绿色。

吸取10 mL 1 moL/ mL的Na0H容液，放入100 mL锥形瓶内，参加2滴酚猷指示剂，用上述滤液滴定。

当溶液的颜色由绿经紫红到紫灰，到突然转变成墨绿色即为滴定终点。

根据滴定所用的滤液量计算其酸度(相当于2 moL/ L HCL溶液)。

将滤液稀释到H*浓度为1 moL/ L ,此液即为FoLin酚试剂。

将其置于棕色试剂瓶内，保存在冰箱中。

用前稀释2倍。

2)标准曲线建立标准曲线的制作：用10mL蒸僻水溶解0.5000g没食子酸，定容至100mL分别移取0, 1.0 , 2.0 , 3.0 , 5.0 , 7.0mL到100mL容量瓶中，定容。

植物总多酚常用的含量测定方法有Folin-Ciocalteu法,酒石酸亚铁法,普鲁士蓝法和高锰酸钾法等。

1.福林试液的配制：取钨酸钠10g与钼酸钠2.5g，加水70ml、85％磷酸5ml与盐酸10ml,置200ml烧瓶中,缓缓加热回流10小时，放冷，再加硫酸锂15g、水5ml与溴滴定液1滴煮沸约15分钟，至溴除尽，放冷至室温，加水使成100ml。

滤过,滤液作为贮备液。

置棕色瓶中,于冰箱中保存。

临用前，取贮备液2.5ml，加水稀释至10ml，摇匀，即得。

????用10mL乙醇溶液溶解0.5000g没食子酸，定容至100mL，分别移取3.0mL到100mL容量瓶中，用蒸馏水定容。

加入福林－薛卡多（Folin-Ciocalteu）试剂显色，在765nm波长下测定吸光度。

每个浓度做三个平行试验，取平均值，根据标准曲线。

??取样品溶液1mL值，计算样品中的多酚含量。

类化合物含量呈正相关，在波长2.酒石酸亚铁比色法。

提于再加酒石酸亚铁溶液10mL,加入pH为7.5的磷酸缓冲液,于波长540nm处测定吸光度(A),绘制出标准曲线。

一、实验原理??多酚类物质包括花青苷、黄酮苷、单宁等，具体又可分为若干种。

多酚类物质含有酚羟基，有的还含有羧基，属于极性有机化合物，常用极性溶剂提取，如甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、水以及由这些溶剂按比例组成的复合溶剂。

由以上溶剂直接提取的多酚物质，实质为各种多酚的混合物（总多酚提取液），不同的原料中所含酚类物质的种类不同，需要进一步的分离鉴定。

常用的植物多酚总量的测定方法中较为普遍使用的方法有:酒石酸亚铁比色法、FD法、FC法、普鲁士蓝法等。

其中酒石酸亚铁分光光度比色法应用较多。

??酒石酸亚铁分光光度比色法的原理：过量的酒石酸亚铁与提取液中多酚反应生成稳定的紫褐色络合物，溶液颜色的深浅与溶液中多酚含量成正比。

测定总多酚时所用的标准物则需根据样品中所含多酚的种类而定，比如测定茶叶中茶多酚含量时，儿茶酚能较好地代表茶多酚，则以儿茶酚作标准物；而测定藤茶多酚时，则以没食子酸作标准物较合适。

收稿日期:2010-03-21基金项目:国家 十一五 科技支撑计划重点课题(2006BAD06B02);作者简介:吴亮亮(1986-),男,江苏泗阳人,南京农业大学食品科学研究生,从事食品功能成分研究与开发。

E -m a i:l wu liang liang0404@si na .com*通讯作者:石雪萍(1974-),女,河南南阳人,副研究员,主要从事营养与食品功能成分研究。

E -m ai:l stbdw @yahoo .co do:i 10.3969/.j issn .1006-9690.2010.06.015Folin-C iocalteu 比色法测定花椒中多酚含量的研究吴亮亮1,2,石雪萍1*,张卫明1(1.南京野生植物综合利用研究院,江苏南京210042;2.南京农业大学食品科技学院,江苏南京210095)摘 要 研究了以没食子酸为标准品,采用Fo li n-C i o ca lteu 比色法,测定花椒多酚含量的适宜条件。

结果表明:当Fo li n-C i oca lteu 试剂与10%N a 2CO 3溶液之比为1 2(V V ),F o li n-C iocalteu 试剂体积为4mL,反应温度为25 ,反应时间为120m i n 时,多酚含量在1~6 g /mL 范围内与吸光值呈良好的线性关系。

测定了4种花椒中的多酚含量,四川青花椒多酚含量最高。

关键词 花椒;多酚;比色法中图分类号:S573 文献标识码:A 文章编号:1006-9690(2010)06-0054-03Study on Deter m i nation of Pol yphenol Content i n Zant hoxy l u m byFolin -C i ocalteu Col ori m etryW u L iang liang 1,2,ShiXuep i n g 1*,Zhang W e i m i n g1(1.Nan ji n g I nstitute for Co m prehensive U tilization o fW ild P lan,t N anjing 210042,China ;2.N anjing Ag ricult u re Un i v ersity ,Schoo l o f Food Science &Technology ,N anjing 210095,Ch i n a)Abst ract Using ga llic ac i d as the standard ,the opti m ized cond iti o ns for deter m i n i n g content of pheno l of Zant h oxylum by Folin-C ioca lteu Co lori m etry .The resu lts w ere as fo ll o w s :vo l u m e rati o bet w een Fo li n -C i o calteu reagen t and 10%Na 2CO 31 2(V /V ),vo l u m e o f Fo li n -C i o calteu 4mL ,reacti o n te m pera ture 25 ,and reaction ti m e 120m i n .There is a good li n ear ity bet w een content o f pheno l and absor bance i n the range o f 1~6 g /mL .The content of po lypheno ls of four k i n ds o f Zanthoxy lu m w ere deter m ined .The highest con tent of po lypheno l is Z.schinifo lium fro m S ichuan .K ey w ords Zanthoxy l u m ;po lypheno;l co l o ri m etr y 花椒属(Zanthoxylum L .),属芸香科(Ru tace ae),全世界约有250种,分布于亚洲、美洲、非洲及大洋洲的热带和亚热带地区。

Folin-Ciocalteus法测定马铃薯中的总多酚李静;聂继云;毋永龙【摘要】An improved UV spectrophotometry method was developed for analysis of total polyphenols in potato. Folin-Ciocalteus method for total polyphenols determination in potato was studied. After a series of optimization experiments, the best determination procedure of Folin-Ciocalteus method was put forward, that is, 5.0 mL water, 1.0 mL coloration reagent, and 3.0 mL 7.5%sodium carbonate solution were added orderly into 1.0 mL extraction of sample or standard gal ic acid,then blended, and measured at 765 nm after coloration for 2 h. Under this procedure, relative standard deviation of the method was 7.7%, and average recovery rate was 100%-108%.This method is applicable to conventional laboratory determination of total polyphenols in potato.%本文建立了紫外分光光度计法准确测定马铃薯中的总多酚。

Folin-Ciocalteu光度法测定栲胶法脱硫过程总多酚曹家兴;袁园;浮建军;张震;姚小秋;钱福军;莫友彬;薛敏华【摘要】The tannin extract desulfurization process is based on the redox state transition of polyphenol. The content of polyphenol in Folin-Ciocalteu reagent was optimized by using the band data to replace the traditional single-wavelength data. The quantitative method of total polyphenol for tannin extract desulfurization process was established.The concentration of gallic acid was linear in the range of 1.0-6.5 μg/mL with a correlation coefficient of 0.9997. The precision (RSD) was 0.21%, and the recoveries were in the range of 97.4%-108.9%. The method was applied to determine the concentration of total polyphenol during the regeneration process of typical tannin extract. The results showed that the polyphenols in tannin extract could not be oxidized to quinone in the oxidation regeneration process.%基于栲胶法脱硫过程中多酚的氧化还原状态转化,本文采用谱带数据取代传统的单波长数据对Folin-Ciocalteu试剂测定多酚含量进行了条件优化试验及分析,建立了适用于栲胶法脱硫过程中总多酚的定量方法:没食子酸质量浓度为1.0~6.5μg/mL范围内符合线性定量关系,相关系数为0.9997,方法精密度RSD为0.21%、加标回收率在97.4%~108.9%,应用该方法测定了典型栲胶法脱硫液氧化再生过程中总多酚浓度及其变化规律,测定结果表明栲胶中的多酚在氧化再生过程中不能全部被氧化为醌态.【期刊名称】《天然气化工》【年(卷),期】2018(043)002【总页数】5页(P46-50)【关键词】栲胶;脱硫过程;总多酚;Folin-Ciocalteu法;分析【作者】曹家兴;袁园;浮建军;张震;姚小秋;钱福军;莫友彬;薛敏华【作者单位】广西大学化学化工学院,广西南宁530004;广西大学化学化工学院,广西南宁530004;广西大学化学化工学院,广西南宁530004;广西大学化学化工学院,广西南宁530004;广西大学化学化工学院,广西南宁530004;广西大学化学化工学院,广西南宁530004;广西化工研究院,广西南宁530001;广西大学化学化工学院,广西南宁530004【正文语种】中文【中图分类】TQ028.4;TQ113.26;TQ546.5;O657.32栲胶是一种天然多酚类化合物[1]，多酚类的化学结构使其容易被氧化成相应的醌又易于还原成原来的酚，在碱性条件下多酚更易被氧化[2]，是氧化脱硫的良好载体。

Folin-Ciocalteu比色法测定核桃仁多酚含量李淑芳;范志远;杨建华;藩莉;赵廷松;刘娇;石桌功【摘要】用70％甲醇超声提取核桃仁中的总多酚,Folin-Ciocalteu比色法研究该提取物中总多酚含量测定的适宜条件.结果表明:核桃仁提取物加Folin-Ciocalteu 试剂0.5mL、10％ Na2CO3溶液8mL,反应温度25℃、反应时间2.5h,在770nm 处测定吸光度,总多酚的含量与吸光度呈良好的线性关系.测定方法的平均回收率为98.4％,相对标准偏差(RSD)为4.28％.该方法具有操作方便,稳定性、重现性、精密度好等优点,适宜于核桃仁提取物总多酚含量的测定.【期刊名称】《西南农业学报》【年(卷),期】2013(026)004【总页数】4页(P1670-1673)【关键词】核桃仁;Folin-Ciocalteu法;多酚;超声提取【作者】李淑芳;范志远;杨建华;藩莉;赵廷松;刘娇;石桌功【作者单位】云南省林业科学院,云南昆明650204;西南林业大学,云南昆明650204;云南省林业科学院,云南昆明650204;云南省林业科学院,云南昆明650204;云南省林业科学院,云南昆明650204;云南省林业科学院,云南昆明650204;云南省林业科学院,云南昆明650204;云南省林业科学院,云南昆明650204【正文语种】中文【中图分类】S664.1核桃有丰富的营养和广泛的医疗保健作用，核桃仁中除了含有丰富的不饱和脂肪酸、蛋白质和少量的碳水化合物外，还含有丰富的具有生理活性的多酚类物质，不仅对人体起到了积极的抗氧化作用，而且对核桃仁本身防止氧化也起到很好的保护作用［1～3］，并直接影响核桃仁的外观和口感品质［4～5］。

有研究表明食用一定量的植物多酚对疾病有预防及抑制作用，因此，近年来酚类物质由于其特有的抗氧化活性和保健价值正成为广大学者研究的热点［6～7］。

国外采用 Folin-Ciocalteu法测定核桃仁总酚的报道很多［8～9］，但国内对核桃仁总酚的定量测定采用 Folin-Denis［10］、高压液相色谱(HPLC)法［2］、普鲁土蓝法［11］等研究方法，未见Folin-Ciocalteu法对核桃酚类物质含量测定的报道。

多酚含量测定-总酚含量测定(操作流程图) 2017.10【测定方法与操作流程图】【溶液配制】(1)0.25mol/L Folin酚(福林酚)试剂的配制：取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL，加蒸馏水7mL，充分混合，得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。

(2)15%Na2CO3溶液的配制：取Na2CO3•10H2O溶3.0g，溶于20mL水中，混匀即得。

(3)连苯三酚1标准液的配制：精确称取连苯三酚标准品10mg．用甲醇溶解并定容到50mL，得0.2mg/mL的连苯三酚标准液。

(4)样品液的的配制：精确称取待测样品10mg．用甲醇2溶解并定容到10mL，得1mg/mL的样品液。

【连苯三酚标准曲线的绘制】1本文使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使用咖啡酸、槲皮素、儿茶素、芦丁等作为标准品，绘制标准曲线。

2也可以用无水乙醇、95乙醇、水，视样品的溶解性而度。

1.9276670.15 0.35 1.917图Folin酚法测定多酚含量的标准曲线（以连苯三酚为例,平行测三次）（以连苯三酚为例，A = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998，线性范围：连苯三酚0.00-0.06mg/mL，A值在0.039-1.928之间）。

【多酚含量的计算】依上述公式A = 32.16733*C + 0.06012, 由A值即可求得浓度C值。

【说明】(1)不同的分光光度计所测得的A值可能不一样，所以，同一次实验要用同一台分光光度计；(2)Folin-Ciocalteu试剂：可向试剂公司购买，一般其浓度为2 mol/L。

也可以自配方法如下：将100g钨酸钠(Na2WO4 ·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水，50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中，充分混合，文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴，然后将烧瓶内溶液开口煮15min，以驱除过量的溴，冷至室温后用容量瓶定容至1000mL，过滤。

foline-ciocalteu method
"Folin-Ciocalteu法"是一种用于测定物质中总酚含量的分析方法。

该方法常被用于测定植物、食品、饮料等样品中的多酚类化合物的含量。

以下是Folin-Ciocalteu法的基本原理和步骤：
原理：
Folin-Ciocalteu法是一种氧化还原反应，通过反应物质中的酚类化合物与Folin-Ciocalteu试剂中的重铁离子（Fe^3+）发生还原反应，生成蓝色络合物。

这个络合物的光学密度与样品中酚类化合物的含量成正比。

步骤：
1.制备试剂：准备Folin-Ciocalteu试剂。

这通常是一种含有磷酸、钼酸、重铁离子等的试剂。

2.制备标准溶液：准备含有已知酚类化合物浓度的标准溶液，用于构建标准曲线。

3.样品制备：将待测样品制备成适当的溶液。

这通常涉及样品提取和适当的稀释。

4.反应：将标准溶液和待测样品与Folin-Ciocalteu试剂混合，并在一定的反应时间后测定光学密度。

5.测定：使用分光光度计或分光光度计测量试剂的吸光度，以获得标准曲线。

然后，测定待测样品的吸光度，并使用标准曲线确定酚类化合物的浓度。

Folin-Ciocalteu法是一种相对简便而广泛应用的方法，用于快速评估样品中多酚类物质的总量。

在使用该方法时，确保按照相关标准操作步骤，并参考已有文献或方法论文进行准确性和可靠性的验证。