微生物学简答题50题
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2020届微生物学期末考试经典题目题库整理问答题1、如何从土壤中分离得到一个微生物的纯培养体?答:首先要根据分离对象选择适宜的培养基。
若要分离真菌应选用马丁-孟加拉红选择培养基;若要分离细菌应选用牛肉膏蛋白胨培养基;若要分离放线菌应选用高氏培养基。
土样采回来后,用常规的十倍稀释分离法进行稀释分离,若分离细菌,一般稀至10-8, 若分离放线菌,一般稀至10-6;若分离真菌,一般稀至10-4。
取最后三个稀释度倒平板获得单个菌落。
将平板上出现的单菌落转接斜面培养,同时镜检菌体的纯度,若不纯,应将培养的单菌落斜面再次进行稀释分离。
倒平板获得单菌落,转接斜面培养,同时镜检菌体的纯度。
反复几次直到得到菌体单一的单菌落方可认为是某一微生物的纯培养体.2、革兰氏染色反应的成败关键是什么?为什么革兰氏染色有十分重要的理论与实践意义?答案:因通过革兰氏染色,可把几乎所有的细菌都分成G+和G-菌两大类细菌,在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异。
因此,任何细菌只要通过革兰氏染色,即可提供不少重要的生物学特性方面的信息。
革兰氏染色反应的成败关键是:1). 菌龄:12-24小时的纯培养物。
2)革兰氏染色操作时,要严格控制酒精脱色时间,菌液涂布均匀而薄。
3. 培养基的组成。
3、简述防腐的种类及其应用。
答案:防腐的种类很多,主要有①低温,利用4①以下的温度保藏食物、菌种等;①缺氧,采用在密封容器中加入除氧剂来有效地防止食品和粮食等的腐烂;①干燥,采用晒干、烘干或红外线干燥等方法对食物等进行保藏;①通过盐腌和糖渍等高渗来保藏食物。
①高酸度;①加防腐剂。
4、根据温度、氧、pH可将微生物分为哪些类型?答案:按照微生物的最适生长温度可将微生物分为三种类型:①嗜冷菌;①中温菌;①嗜热菌。
按照微生物与pH的关系,可将微生物分为三种类型:①嗜酸菌;①嗜中性菌;①嗜碱菌。
按照微生物与氧的关系,可将微生物分为两大类:①好氧菌;①厌氧菌。
微生物学简答题及答案1.什么是微生物?简述其3大特点和所属类群。
答:一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。
特点:个体微小(<0.1 mm);构造简单;进化地位低。
类群:原核类:细菌,放线菌,蓝细菌;立克次氏体,支原体,衣原体。
真核类:真菌(酵母菌,霉菌),原生动物,显微藻类。
非细胞类:病毒,类病毒,朊病毒。
2.什么是马铃薯晚疫病?试述其在历史上对人类的一次严重危害。
答:一种由病原性真菌引起的严重植物病害。
19世纪中叶,在欧洲发生了一场马铃薯晚疫病大流行,毁灭了5/6的马铃薯,个别地方甚至颗粒无收,并引起爱尔兰等地大量居民饿死或逃往北美。
起因:当地过分强调种植单一高产粮食作物~马铃薯;当时连年气候异常,长期阴雨,温湿度过高,十分有利于病原真菌的生长繁殖和传播。
3.如何理解“在近代科学中,对人类福利最大的一门科学要算是微生物学了”?答:不同的人群或个人有其不同的幸福观或福利观。
一般都集中在追求钱、权、利、名、业、健(健康长寿)等几个方面。
健康在幸福观上应居首位;在近代多门科学中,对人类健康的关系最为密切、已作出了重要贡献并将进一步作出更大贡献的科学就是微生物学。
4.人类认识微生物世界的主要障碍是什么?在微生物学发展早期,学者们是如何逐一克服的?答:主要障碍有以下几点:a个体微小:列文虎克利用其自制的显微镜,克服了肉眼的局限性,首次观察到多种微生物的个体形态;b外貌不显:主要由科赫学派克服的,他们创立了许多显微镜技术,染色技术、悬滴培养技术和显微摄影技术,使人们对细菌等的外貌能清楚地观察到了;c杂居混生:由科赫等人发明的明胶和琼脂平板分离微生物纯种的方法,克服了微生物在自然界中的杂居混生状态,从而进入了研究微生物纯培养阶段;d因果难联:把微生物作用的因果联系起来的学者很多,如巴斯德提出了活的微生物是传染病、发酵和腐败的真正原因;科赫提出了证明某病的病原菌的“科赫法则”等。
5.微生物学的发展经历了哪5个时期?各期的代表人物是谁?答:史前期:我国古代劳动人民;初创期:(荷兰的)列文虎克;奠基期:(法国的)巴斯德和(德国的)科赫;发展期:(德国的)布赫纳成熟期:华脱生和克里克。
简答题结合图示比较G+ 和G-细菌的细胞壁结构, 简要说明其特点和化学组成的区别。
答:革兰氏阳性细胞壁主要由厚而致密的肽聚糖层组成,成分单一。
革兰氏阴性细胞壁是复杂的多层结构。
革兰氏阳性细胞壁由一层组成,厚20-80nm,化学组成为肽聚糖、磷壁酸(特有)。
革兰氏阴性细胞壁由两层组成,内壁层厚2-3nm,化学组成为肽聚糖,外壁层厚8-10nm,化学组成为蛋白质、脂多糖、肽聚糖和类脂..革兰氏阳性肽聚糖层次多、厚,交联度高(机械抗性强、对溶菌酶、青霉素敏感),不含类脂和脂蛋白(不形成内毒素),革兰氏阴性肽聚糖层次少、薄,交联度低(机械抗性差、对溶菌酶、青霉素不敏感),类脂、脂蛋白组成外膜(内毒素)2.细菌的拟核具有什么特点? 它与真核生物的细胞核有何不同?答:细菌的拟核为一裸露的双链DNA,没有组蛋白包裹,但和少量碱性蛋白结合,无核膜、核仁。
细菌是原核生物,细胞核为原核、无核膜、核仁、单个染色体,DNA不与组蛋白结合,没有有丝分裂,真核生物细胞核为真核、有核膜、核仁、多条染色体,DNA与组蛋白结合,能进行有丝分裂。
3.细菌能形成哪些内含物? 简要说明其特点和作用。
答:细菌形成的内含物有:核糖体、气泡、储藏颗粒。
原核细胞核糖体是蛋白质的加工厂。
每一个细胞内有成千上万的核糖体,其组成为:RNA (2/3, called rRNA) and 蛋白质(1/3) 大小: 17nm * 20nm(亚显微颗粒结构),沉降系数(分子量)为70s。
气泡存在于某些光合细菌和水生细菌中,外有2nm厚的蛋白质膜包裹。
它使细菌具有浮力,使其趋向于适宜光强度和氧浓度高的区域。
储藏颗粒:糖原和淀粉(碳素和能量贮存物质)、聚- β-羟基丁酸(碳源)、藻青素(氮源)、异染粒(磷源)、硫滴和硫粒(硫源)、磁小体4.什么是荚膜? 说明其化学组成和生理功能。
、答:有些细菌在一定营养条件下,可向细胞表面分泌层厚度不定的胶状物质,称为糖被。
糖被的主要成分为多糖和少量多肽或蛋白质。
1、正常菌群的作用a.生物拮抗b.营养作用c.免疫作用d.抗衰老作用2、简述肺炎链球菌和甲型溶血性链球菌的区别方法胆汁溶菌试验、荚膜肿胀试验、动物毒力实验、Optochin敏感实验3.简述肠杆菌科细菌的共同生物学特性a.形态结构:中等大小的G-菌,大多有菌毛、鞭毛,少数有荚膜,没有芽胞。
b.培养:兼性厌氧或无氧,营养要求不高。
c.生化反应:乳糖发酵试验可初步鉴别志贺菌、沙门菌等致病菌和大部分非致病肠道杆菌,前二者不发酵乳糖。
d.抗原结构⑴O抗原:存在于细胞壁脂多糖(LPS)最外层,具有属特异性。
⑵H抗原:菌体失去鞭毛后发生H-O变异医学`⑶荚膜抗原:具有型特异性。
e.抵抗力:对理化因素抵抗力不强。
f.变异:最常见耐药性变异4、简述病毒对宿主细胞的病变作用①病毒感染对宿主细胞的直接作用:(1)杀细胞效应.(2)稳定状态感染,细胞融合,细胞表面出现病毒基因编码的抗原.(3)包涵体形成.(4)细胞凋亡.(5) 基因整合与细胞转化.②病毒感染的免疫病理作用:(1)抗体介导的免疫病理作用.(2)细胞介导的免疫病理作用.(3)免疫抑制作用.5.列举5种可通过粪-口途径传播的病毒脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒、轮状病毒、甲型乙肝病毒、戊型乙肝病毒6.从病原菌方面简述细菌感染的致病机制a.细菌的毒力b.侵入细菌的数量c.细菌侵入门户与部位7.简述破伤风的防治原则a.正确处理伤口;清创并对伤口用过氧化氢溶液(H2O2)冲洗创面以消除厌氧环境。
b.局部或全身应用抗生素:如大剂量使用青霉素,防止伤口局部细菌的生长繁殖。
c.注射破伤风抗毒素(TAT):中和游离的破伤风外毒素,患者进行紧急预防接种和对症治疗。
d.应用破伤风类毒素进行预防接种:中国计划免疫规程中规定使用白百破(DPT)三联疫苗对儿童进行计划免疫,另对军人和易受外伤的高危人群,可提前注射破伤风类毒素进行预防。
8.简述病毒的特点a.形体微小,具有比较原始的生命形态和生命特征,缺乏细胞结构;b.只含一种核酸,DNA或RNA;c. 依靠自身的核酸进行复制,DNA或RNA含有复制、装配子代病毒所必需的遗传信息d..缺乏完整的酶和能量系统9.构成细菌毒力作用的物质基础①侵袭力:荚膜、微荚膜,菌毛(粘附素),侵袭性酶(血浆凝固酶、透明质酸酶等)②毒素:外毒素主要由革兰阳性菌产生,为蛋白质,由细胞毒、神经毒素和肠毒素组成。
1、微生物是如何命名的举例说明答:微生物的命名是采用生物学中的二名法,即用两个拉丁字命名一个微生物的种,这个种的名字是由一个属名和一个种名组成,属名和种名都用斜体表示,属名在前,用拉丁文名词表示,第一个字母大写;种名在后,用拉丁文的形容词表示,第一个字母小写;如大肠埃希氏杆菌的名字是Escherichia coli2、写出大肠埃希氏杆菌和枯草杆菌的拉丁名全称答:大肠埃希氏杆菌的名称是Escherichia coli枯草杆菌的名称是Bacillus subtilis3、微生物有哪些特点答:1个体极小:微生物的个体极小,有几纳米到几微米,要通过光学显微镜才能看见,病毒小于微米,在光学显微镜可视范围外,还需要通过电子显微镜才可看见2分布广,种类繁多:环境的多样性如极端高温,高盐度和极端PH造就了微生物的种类繁多和数量庞大3繁殖快:大多数微生物以裂殖的方式繁殖后代,在适宜的环境条件下,十几分钟至二十分钟就可繁殖一代;在物种竞争上取得优势,这是生存竞争的保证;4易变异:多数微生物为单细胞,结构简单,整个细胞直接与环境接触易受外界环境因素影响,引起遗传物质DNA的改变而发生变异;或者变异为优良菌种,或使菌种退化;4、细菌有哪几种形态各举一种细菌为代表;答:细菌有四种形态:球状,杆状,螺旋状和丝状;分别叫球菌,杆菌,螺旋菌和丝状菌;球菌:金黄色葡萄球菌,杆菌:芽孢杆菌,螺旋菌:弧菌,丝状菌:铁丝菌5、叙述革兰氏染色的机制和步骤;答:机制:①革兰氏染色与细菌等电点有关②革兰氏染色与细胞壁有关步骤:1在无菌操作条件下,用接种环挑取少量细菌于干净载玻片上涂布均匀,固定;2用草酸结晶紫染液1分钟,水洗;3用碘-碘化钾媒染1分钟,水洗;4用中性脱色剂如乙醇脱色,革兰氏阳性菌不褪色仍呈紫色,格兰仕阴性菌褪色,呈无色;5用蕃红染液复染1分钟,革兰氏阳性菌仍呈紫色,格兰仕阴性菌呈红色;革兰氏阳性菌与格兰仕阴性菌及被区别开来6、细菌有哪些一般结构和特殊结构它们各有哪些生理功能答:细菌是单细胞生物;所有细菌均有:细胞壁、细胞质膜、细胞质及其内含物、细胞核物质;部分细菌有特殊结构:芽孢、鞭毛、荚膜、粘液层、菌胶团、衣鞘及光合作用片层等;细胞壁是包围在细菌体表面最外层的、具有坚韧而带有弹性的薄膜;可以起到:①保护原生质体免受渗透压引起破裂的作用;②维持细菌的细胞形态;③细胞壁是多孔结构的分子筛,阻挡某些分子进入和保留蛋白质在间质格兰氏阴性菌细胞壁和细胞质之间的区域④细胞壁为鞭毛提供指点,使鞭毛运动;细胞质膜的生理功能有:①维持渗透压的梯度和溶液的转移;②细胞质膜上有合成细胞壁和形成横膈膜组分的酶,故在膜的外表面合成细胞壁③膜内陷形成的中间体含有细胞色素,参与呼吸作用;④细胞质膜上有琥珀酸脱氢酶、NADH脱氢酶、细胞色素氧化酶、电子传递系统、氧化磷酸化酶及腺苷三磷酸酶;在细胞上进行物质代谢和能量代谢;⑤细胞质膜上有鞭毛基粒,鞭毛由此长出,即为鞭毛提供附着点; 荚膜的主要功能有:①具有荚膜的S-型肺炎链球菌毒性强,有助于肺炎链球菌侵入人体;②荚膜可保护致病菌免受宿主吞噬细胞的吞噬,保护细菌免受干燥的影响;③当缺乏营养时,假膜可被用作碳源和能源,有的荚膜还能做氮源;④废水生物处理中细菌的荚膜有生物吸附作用,再爆气池中因爆气搅动和水的冲击力容易把细菌粘液冲刷入水中,以增加水中有机物,它可被其他微生物利用;粘液层的主要功能有:在废水生物处理过程中有生物吸附作用,在曝气池中因曝气搅动和水的冲击力容易把细菌黏液冲刷入水中,以致增加水中有机物,它可被其它微生物利用;菌胶团的主要功能有:吸附作用衣鞘的主要功能有:粘液层或荚膜硬质化而形成芽孢的主要功能有:可抵抗外界不良环境鞭毛的主要功能有:细菌可以通过鞭毛来改变运动状态7、何谓细菌菌落细菌有哪些培养特征这些培养特征有哪些实践意义答:细菌菌落就是由一个细菌繁殖起来由无数细菌组成具有一定形态特征的细菌集团;细菌培养特征:1在固体培养基上的培养特征:菌落特征;2在明胶培养基中的培养特征:能产生明胶水解酶水解明胶,不同的细菌将明胶水解成不同的溶菌区;3在半固体培养基中的培养特征:细菌可呈现各种生长状态,根据细菌的生长状态判断细菌的呼吸类型和鞭毛有无;4在液体培养基中的培养特征:在液体培养基中,细菌整个个体与培养基接触,可以自由扩散生长;8、蓝细菌是一类什么微生物分几纲,其中有哪几属与水体富营养化有关答:蓝细菌使古老的微生物,只有原始核,没有核膜和核仁,只有染色体,支局叶绿素,没有叶绿体;吸收二氧化碳,无机盐和水合成有机物作为自身营养,并放出氧气;分为两纲,分别为:色球藻纲和藻殖段纲;其中微囊藻属和腔球藻属可以引起富营养化水体发生升华;鱼腥藻属在富营养化水体中形成升华;9、病毒是一类什么样的微生物它有什么特点答:病毒没有合成蛋白质的机构——核糖体,也没有合成细胞物质和繁殖所必备的酶系统,不具独立的代谢能力,必须专性寄宿在活的敏感宿主细胞内,依靠宿主细胞合成病毒的化学组成和繁殖新个体;其特点是:病毒在活的敏感宿主细胞内是具有生命的超微生物,然而,在宿主体外却呈现不具生命特征的大分子物质,但仍保留感染宿主的潜在能力,一旦重新进入活的宿主细胞内又具有生命特征,重新感染新宿主;10、病毒具有什么样的化学组成和结构答:病毒的化学组成有蛋白质和核酸;还含有脂质和多糖;整个病毒体分两部分:蛋白质衣壳和核酸内芯,两者构成核衣壳;蛋白质衣壳是由一定数量的衣壳粒按一定的排列组合构成的病毒外壳;核酸内芯有两种:核糖核酸RNA和脱氧核糖核酸DNA;11、叙述大肠杆菌T系噬菌体的繁殖过程;答:大肠杆菌T系噬菌体的繁殖过程有:吸附、侵入、复制、聚集与释放;首先,大肠杆菌T系噬菌体以它的尾部末端吸附到敏感细胞表面上某一特定的化学成分,或是细胞壁,或是鞭毛,或是纤毛;噬菌体侵入宿主细胞后,立即引起宿主的代谢改变,宿主细胞内的核酸不能按自身的遗传特性复制和合成蛋白质,而由噬菌体核酸所携带的遗传信息所控制,借用宿主细胞的合成机构复制核酸,进而合成噬菌体蛋白质,核酸和蛋白质聚集合成新的噬菌体,这个过程叫装配;大肠杆菌T系噬菌体的装配过程如下:先合成含DNA的头部,然后合成尾部的尾鞘、尾髓和尾丝,并逐个加上去就装配成一个完整的新的大肠杆菌T系噬菌体;噬菌体粒子成熟后,噬菌体的水解酶水解宿主细胞壁而使宿主细胞破裂,使菌体被释放出来重新感染新的宿主细胞一个宿主细胞可释放10到1000个噬菌体粒子;12、什么叫毒性噬菌体什么叫温和噬菌体答:侵入宿主细胞后,随即引起宿主细胞裂解的噬菌体称作毒性噬菌体;侵入宿主细胞后,不引起宿主细胞裂解的噬菌体称作温和噬菌体;13、灭活宿主体外病毒的化学物质有哪些它们是如何破坏病毒的答:主要物质有:酚,低渗缓冲溶液,甲醛,亚硝酸,氨,醚类,十二烷基硫酸钠,氯仿,去氧胆酸钠,溴,碘,臭氧,乙醇,强酸,强碱等其他氧化剂;强酸强碱除本身可以灭活病毒外,还能改变pH值,病毒对高pH值敏感,碱性环境可以破坏蛋白质衣壳和核酸,当pH值到达11时,可严重破坏病毒;氯和臭氧灭活病毒的效果极好,它们对病毒蛋白质和核酸均有作用;低渗缓冲溶液的环境能使病毒蛋白质衣壳发生细微变化,阻止病毒附着在宿主细胞上;甲醛只破坏病毒的核酸,不改变病毒的抗原特性;含脂类被膜的病毒对醚、十二烷基硫酸钠、氯仿、去氧胆酸钠等脂溶剂敏感而被破坏;14、酶是什么它有哪些组成各有什么生理功能答:酶是动物、植物及微生物等生物体内合成的,催化生物化学反应的,并传递电子、原子和化学基团的生物催化剂;酶的组成有两种:①单成分酶,只含蛋白质;②全酶,由蛋白质和不含氮的小分子有机物组成,或由蛋白质和不含氮的小分子有机物加上金属离子组成;每个组分的生理功能为:酶蛋白起加速生物化学反应的作用;辅基和辅酶起传递电子、原子和化学基团的作用;金属离子除传递电子外,还起激活剂的作用;15、简述酶蛋白的结构和酶的活性中心;答:酶蛋白是由20种氨基酸组成;组成酶蛋白的氨基酸按一定的排列顺序由肽键连成多肽链,两条多肽链之间或一条多肽链卷曲后相邻的基团之间以氢键、疏水键、范德华引力及金属键等相连而成;酶的活性中心是指酶蛋白分子中与底物结合,并起催化作用的小部分氨基酸微区;16、酶可分为哪6大类写出起反应通式答:1氧化还原酶类,反应通式AH2+B=A+BH22转移酶类,反应通式 AR+B=A+BR3水解酶类,反应通式 AB+H2O=AOH+BH4裂解酶类,反应通式AB=A+B5异构酶,反应通式 A=B6合成连接酶,反应通式 A+B+ATP=AB+ADP+Pi或A+B+ATP=AB+AMP+Pii无机焦磷酸17、酶的催化作用有哪些特征答:1 酶积极参与生物化学反应,加快反应速度,缩短反应到达平衡的时间,但不改变反应的平衡点;酶在参与反应的前后,其性质和数量不变;2 酶的催化具有专一性,一种酶只作用于一种物质或一类物质,或催化一种或一类化学反应,产生一定的产物;3 酶的催化作用条件温和,酶只需在常温常压和中性溶液中就可催化反应的进行;4 酶对环境条件极为敏感;高温高压、强酸强碱都可使酶失去活性;5 酶的催化效率极高,比无机催化剂的催化效率高几千倍至几百万倍;18、影响酶活力酶促反应速度的主要因素有哪些并加以讨论;答:1 酶浓度对酶促反应的影响:酶促反应速度与酶分子的浓度成正比;但是,当酶的浓度很高时,底物转化速度逐渐平缓;2 底物浓度对酶促反应的影响:底物的起始浓度较低时,酶促反应速度与底物浓度成正比,当所有酶与底物结合后,即使再增加底物浓度,中间产物浓度也不会增加了;3 温度对酶促反应的影响:各种酶在最适范围内,酶活性最强,酶促反应速度最大;在适宜温度范围内,温度每升高10度,酶促反应速度可提高1-2倍;4 pH对酶促反应的影响:酶在最适pH范围内表现出来的活性,大于或小于最适pH,都会降低酶的活性;5 激活剂对酶促反应的影响:许多酶只有当某种激活剂存在时,才表现出催化剂活性或强化其催化活性;6 抑制剂对酶促反应的影响:抑制剂能减弱甚至破坏酶活性,它可降低酶促反应速度; 19、微生物需要那些营养物质供给营养时应注意些什么为什么答:1 水; 2 碳源和能源; 3 氮源; 4 无机盐; 5 生长因子供给营养时要注意碳氮磷的比例,因为不同微生物细胞的元素组成比例不同,对各营养元素要求的比例也不同,因此要合适的碳氮磷的比例;20、根据微生物对碳源和能源的需要不同可把微生物分成哪几种类型答:根据微生物对碳源和能源的需要不同可把微生物分成:无机营养微生物;有机营养微生物;混合营养微生物;21、什么叫选择培养基那些培养基属于选择培养基答:用以抑制非目的微生物的生长并使所要分离的微生物生长繁殖的培养基;麦康盖培养基为含胆汁酸盐的培养基,用于大肠杆菌的培养的选择培养基;乳糖发酵培养基也是适用于大肠杆菌生长的选择培养基;22、什么叫鉴别培养基那些培养基属于鉴别培养基答:几种细菌由于对培养基中某一成分的分解能力不同,其菌落通过指示剂显示出不同的颜色而被区分开,这种其鉴别和区别不同细菌作用的培养基,叫做鉴别培养基;远藤氏培养基能区别大肠埃希氏菌,枸橼酸盐杆菌,产气杆菌,副大肠杆菌;此外,还有醋酸铅培养基,伊红-美蓝培养基;23、比较微生物细胞吸收营养物质的四种方式的异同答:24、生物氧化的本质是什么可分为哪几种类型各类型有什么特点答:微生物的生物氧化的本质是氧化与还原的统一过程,是指细胞内一系列产能代谢的总称;此过程中有能量的产生和转移;有还原力H的产生以及小分子中间代谢物的产生,这是微生物进行新陈代谢的物质基础;根据最终电子受体或最终受氢体的不同,可将微生物的生物氧化分为3类;发酵,好氧呼吸和无氧呼吸;发酵:过程中有机物仅发生部分氧化,以它的中间代谢产物即分子内的低分子有机物为最终电子受体,释放少量能量,其余的能量保留在最终产物中;好氧呼吸:其特点是底物按常规方式脱氢,经完整的呼吸链电子传递体系传递氢,同时底物氧化释放出的电子也经过呼吸链传递给O2,O2得到电子被还原,与脱T的H结合成H2O,并释放能量ATP;无氧呼吸:其特点是底物按常规脱氢后,经部分电子传递体系递氢,最终有氧化态的无机物个别为有机物受氢;25、微生物生长曲线四个阶段各有何特点及实践意义答:典型的微生物生长曲线包括四个时期:调整期、对数期、稳定期、衰亡期; 调整期特点:生长速率常熟为零、菌体粗大、RNA含量增加、代谢活力强、对不良环境的抵抗能力下降;对数期特点:最快、代谢旺盛、酶系活跃、活细菌数和总细菌数大致接近、细胞的化学组成形态理化性质基本一致;稳定期特点:活细菌数保持相对稳定、总细菌数达到最高水平、细胞代谢产物积累达到最高峰、是生产的收获期、开始形成;衰亡期特点:细菌死亡速度大于新生成的速度、整个群体出现负增长、细胞开始畸形、细胞死亡出现现象;实践意义:根据微生物的生长曲线可以明确微生物的生长规律,对生产实践具有重大的指导意义;故根据对数期的生长规律可以得到培养菌种时缩短工期的方法:接种对数期的菌种,采用最适菌龄,加大接种量,用与培养菌种相同组成的培养基;有如,根据稳定期的生长规律,可知稳定期是产物的最佳收获期,也是最佳测定期;26、微生物计数的方法有哪些答:1.血细胞计数法将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上,在显微镜下计算4~5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再以此为依据,估算总菌数;①此法的缺点是不能区分死菌和活菌;②对压在小方格界线上的细菌,应当取平均值计数;③此法可用于测定培养液中酵母菌种群数量的变化2.稀释涂布平板法原理:每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落;培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌;①这一方法常用来统计样品中活菌的数目②统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是当两个活多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落;因此统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示;③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含细菌、酵母、芽孢与孢子等的数量均可用此法测定;但不适于测定样品中丝状体微生物,例如放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等的营养体等;④此法若不培养成菌落,可通过将一定量的菌液均匀地涂布在玻片上的一定面积上,经固定染色后在显微镜下计数,这样又称涂片计数法;染色可用台盼蓝,台盼蓝能使死细胞染成蓝色,可分别计数死细胞和活细胞;3.滤膜法滤膜法是当样品中菌数很低时,可将一定体积的湖水、海水或饮用水灯样品通过膜过滤器;然后将滤膜干燥、染色,并经处理使膜透明,再在显微镜下计算膜上或一定面积上的细菌数;此法也可以通过培养观察形成的菌落数来推算样品中的菌数;例如测定饮用水中大肠杆菌的数目:将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养;在该培养基上大肠杆菌的菌落呈现黑色,可根据培养基上黑色菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数目;此法也是统计样品中活菌的数目;4.比浊法原理是在一定范围内,菌是悬液中细胞浓度与混浊度成正比,即与光密度成正比,菌越多,光密度越大;因此可借助与分光光度计,在一定波长下,测定菌悬液的光密度,以光密度表示菌量;实验测量时一定要控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内,否则不准确;5.显微镜直接计数法在稀释涂布的基础上不培养成菌落而通过染色的方法在显微镜下直接计数27、微生物与温度的关系如何高温是如何杀菌的高温杀菌力与什么有关系答:温度是微生物的重要生存因子;在适宜的温度范围内,温度毎升高10摄氏度,酶促反应速度将提高1~2倍,微生物的代谢速率和生长速率均可相应提高;适宜的培养温度使微生物以最快的生长速率生长,过高或过低的温度均会降低代谢速率和生长速率;高温主要破坏微生物的机体的基本组成物质——蛋白质,酶蛋白和脂肪;;蛋白质被高温严重破坏而发生凝固,为不可逆变性,微生物经超高温处理后必然死亡;细胞质膜含有受热易溶解的脂类,当用超高温处理时,细胞质膜的脂肪受热溶解使膜产生小孔,引起细胞内含物泄漏而死亡;高温的杀菌效果和微生物的种类,数量,生理状态,芽孢有无及pH都有关系; 28、嗜冷微生物为什么能在低温环境生长繁殖答:嗜冷微生物具备更有效的催化反应的酶,其主动传送物质的功能运转良好,使之能有效地集中必需的营养物质,嗜冷微生物的细胞质膜含有大量的不饱和脂肪酸,在低温下保持半流动性;29、在培养微生物过程中,什么原因使培养基pH下降什么原因使pH上升在生产中如何调节控制pH答:微生物在培养基中分解葡萄糖,乳产生有机酸会引起培养基的pH下降,培养基变酸;微生物在含有蛋白质、蛋白胨及氨基酸等中性物质培养基中生长,这些物质可经微生物分解;产生NH3和胺类等碱性物质,使培养基pH上升;在生产过程中,处理城市生活污水、污泥中含有蛋白质,可不加缓冲性物质;如果不含蛋白质、氨等物质,处理前就要投加缓冲物质;缓冲物质有碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化铵及氨等;以碳酸氢钠最佳;霉菌和酵母菌对有机物具有较强的分解能力;pH较低的工业废水可用霉菌和酵母菌处理,不需要碱调节pH,可节省费用;30、为什么常规活性污泥法要采用稳定期的微生物而不采用对数期的微生物答:对数期微生物:生长繁殖快,代谢活力强,能大量去除废水中的有机物,相应的,要求进水有机物浓度高;由于进水有机物浓度高,出水有机物浓度也相应提高,且这时期微生物不易自行凝聚成菌胶团,沉淀性能差,导致出水水质差,静止期微生物:代谢活力比对数期差,但仍有相当的代谢活力,且生物吸附能力强,泥水分离效果好,出水水质好;31、名词解析:灭菌、消毒答:灭菌是指把物体上所有的微生物包括细菌芽孢在内全部杀死的方法,通常用物理方法来达到灭菌的目的;消毒是指杀死病原微生物,但不一定能杀死细菌芽孢的方法,通常用化学的方法来达到消毒的作用;32、氧气对好氧微生物的用途是什么充氧效率与微生物生长有什么关系答:氧对好氧微生物有两个作用:1 作为微生物好养呼吸的最终电子受体;2参与甾醇类和不饱和脂肪酸的生物合成;充氧量与与好氧微生物的生长量、有机物浓度等成正相关性;33、紫外线杀菌的机理是什么何谓光复活和暗复活现象答:紫外辐射的波长范围是200~390nm,紫外辐射对微生物有致死作用是由于微生物细胞中的核酸、嘌呤、嘧啶、及蛋白质对紫外辐射有特别强的吸收能力;DNA和RNA对紫外辐射的吸收峰在260nm处,蛋白质对紫外辐射的吸收峰在280nm处.紫外辐射能引起DNA链上两个邻近的胸腺嘧啶分子形成胸腺嘧啶二聚体,致使DNA不能复制,导致微生物死亡;经紫外辐射照射的菌体或孢子悬液,随即暴露于蓝色可见光下,有一部分受损伤的细胞可恢复其活力,这种现象叫光复活;在黑暗条件下修复DNA链称为暗复活; 34、常用的有哪几种有机化合物杀菌剂它们的杀菌机制是什么答:1 醇:醇是脱水剂和脂溶剂,可使蛋白质脱水,变性,溶解细胞质膜的脂类物质,进而杀死微生物机体;2 甲醛:甲醛可与蛋白质的氨基结合而干扰细菌的代谢能力;3 酚:酚与其衍生物能引起蛋白质变性,并破坏细胞质膜;4新洁而灭:是一种表面活性强的杀菌剂;对许多非芽孢型的致病菌、革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌有着极强的致死作用;5 合成洗涤剂:去污能力强,还有杀菌作用;6 染料:有抑菌作用;35、在天然环境和人工环境中微生物之间存在哪几种关系举例说明;答:有种内关系和种间关系,包括:1 竞争关系:在好氧生物处理中,当溶解氧或营养成为限制因子时,菌胶团细菌和丝状菌表现出明显的竞争关系;2 原始合作关系互生关系:固氮菌具有固定空气中氮气的能力,但不能利用纤维素作碳源和能源,而纤维素分解菌分解纤维素为有机酸对他本身的生产繁殖不利,但当两者一起生活时,固氮菌固定的氮为纤维素分解菌提供氮源,纤维素分解菌分解纤维素的产物有机酸被固氮菌用作碳源和能源,也为纤维素分解菌解毒;3 共生关系:原生动物中的纤毛虫类、放射虫类、有孔虫类与藻类共生;4 偏害关系:乳酸菌产生乳酸使pH下降,抑制腐败细菌生长;5 捕食关系:大原生动物吞食小原生动物;6 寄生关系:蛭弧菌属有寄生在假单胞菌等菌体中的种;36、青霉素为什么能给人和动物治病答:青霉素对溶血性链球菌等链球菌属,肺炎链球菌和不产青霉素酶的葡萄球菌具有良好抗菌作用;对肠球菌有中等度抗菌作用,淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、白喉棒状杆菌、炭疽芽孢杆菌、牛型放线菌、念珠状链杆菌、李斯特菌、钩端螺旋体和梅毒螺旋体对本品敏感;本品对流感嗜血杆菌和百日咳鲍特氏菌亦具一定抗菌活性,其他革兰阴性需氧或兼性厌氧菌对本品敏感性差.本品对梭状芽孢杆菌属、消化链球菌厌氧菌以及产黑色素拟杆菌等具良好抗菌作用,对脆弱拟杆菌的抗菌。
完整版)微生物学试题及答案A.酸奶B.啤酒C.巧克力D.葡萄酒10.下列哪种方法不能用于分离微生物?A.平板法B.涂布法C.过滤法D.振荡法微生物学试题1一、名词解释(每小题4分,共5小题20分)1.无菌技术:在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染,自身也不污染操作环境的技术称为无菌技术。
2.菌落:在固体培养基中,单个或少数细菌细胞生长繁殖后,会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团,这种集团称为菌落。
3.平板:平板是最常用的固体培养基形式,用于获得微生物纯培养。
它是冷却凝固后固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面。
4.发酵:发酵是指在无氧条件下,底物脱氢后产生的还原力[H]不经过呼吸链传递而直接交给某一内源氧化性中间代谢产物的一类低效产能反应。
5.培养基:培养基是人工配制的、适合微生物生长、繁殖和产生代谢产物的混合营养基质。
二、填空题(每空0.5分,共6小题12分)1.细菌基本形态可以分为球形、杆状和螺旋形。
2.霉菌菌丝有两类,一类是单核菌丝,如酵母菌和毛霉,另一类是多核菌丝,例如青霉和链霉菌。
3.在某些原核生物细胞壁外,会着生一些特殊的附属物,包括胞囊、菌毛、鞭毛等。
4.根据营养物质在机体中生理功能的不同,可以将它们分为碳水化合物、蛋白质、脂类、核酸和无机盐5大类。
5.微生物的系统命名采用拉丁文命名法,即加属种名。
6.病毒粒子衣壳对称体制包括:正二十面体、正二十四面体和复杂对称体。
三、选择题(每小题1分,共10小题10分)1.产生假根是根霉的形态特征。
2.革兰氏阳性菌细胞壁特有成分是肽聚糖。
3.微生物从糖酵解途径获得2个ATP分子。
4.处于对数生长期的细菌其特点是生长迅速。
5.深层穿刺接种细菌到试管半固体培养基中可以观察细菌是否能运动。
6.加压蒸汽灭菌锅灭菌参数是121℃,20~30min。
7.霉菌适宜生长的pH范围为4.0-6.0.8.strR是链霉素抗性突变株的一种菌株。
绪论1.什么是微生物,微生物学?2.请简要阐述微生物的四大特点3.“微生物对人类的重要性,你怎么强调都不过分。
”试用具体事例来说明这句话的深刻意义原核微生物3.原核微生物是指一大类细胞核无核膜包裹,只有称作核区的裸露DNA的原始单细胞生物,包括真细菌和古细菌两大群。
4.细菌L-型指细菌在特定的条件下,由基因自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株,多形态,有的可通过细菌滤器而又称滤过型细菌,在固体培养基上形成“油煎蛋”似的小菌落。
5.芽孢指某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体。
6.菌落指在固体培养基上,由一个细菌或孢子生长、繁殖的肉眼可见的群体,称为菌落。
7.菌苔指在固体培养基上,由多个细菌或孢子生长、繁殖形成的肉眼可见的群体,称为菌苔。
8.质粒指细菌细胞质内存在于染色体外或附加于染色体上的遗传物质,绝大多数由共价闭合环状双螺旋DNA分子构成。
(四)问答题1.简述古细菌与真细菌的区别。
简述原核微生物和真核微生物的主要区别?原核微生物是指一大类细胞核无核膜包裹,只有称为核区的裸露的DNA的原始的单细胞生物,包括真细菌和古细菌两大类。
真核微生物是指细胞核具有核膜、能进行有丝分裂、细胞质中存有线粒体或同时存在叶绿体等细胞器的微生物,包括真菌、微藻类、原生动物、地衣等。
2.试述细菌革兰氏染色的原理和结果?革兰氏染色是1884年由丹麦人革兰氏(Christian Gram)发明,其染色要点:①先用结晶紫染色,菌体呈紫色;②再加碘液媒染,菌体呈紫色;③然后用乙醇脱色;革兰氏阳性细菌呈紫色,革兰氏阴性细菌无色;④最后用沙黄或番红复染,革兰氏阳性细菌呈紫色,革兰氏阴性细菌呈红色。
革兰氏染色结果与细胞壁组成有关,因为革兰氏阳性细胞壁较厚,肽聚糖含量较高,网络结构紧密,含脂量又低,当它被酒精脱色时,引起了细胞壁肽聚糖层网状结构的孔径缩小,从而阻止了不溶性结晶紫-碘复合物的逸出,故菌体呈紫色;可是革兰氏阴性细菌的细胞壁肽聚糖层较薄,含量低,而脂类含量高,当酒精脱色时,脂类物质溶解,细胞壁透性增大,结晶紫-碘复合物也随之被抽提出来,故革兰氏阴性细菌呈复染液的红色。
微生物学简答题论述题汇总1. 什么是微生物学?微生物学是研究微生物的学科,微生物是一类非常微小的生物体,包括细菌、真菌、病毒等。
微生物学研究微生物的分类、结构、生理功能以及其在生态系统中的作用等方面内容。
2. 微生物的分类有哪些?微生物可以根据不同的分类标准进行分类,常见的分类包括根据细胞结构分为细菌、真菌和原生生物;根据生物体大小分为超微生物、微生物和鞭毛虫等;根据营养方式分为光合微生物和化学合成微生物等。
3. 微生物在生态系统中的作用是什么?微生物在生态系统中扮演着重要的角色。
首先,微生物参与了物质循环过程,例如分解有机物质、氮循环和硫循环等。
其次,微生物对生态系统中的生物多样性起到了维护和平衡的作用。
最后,微生物还参与了生态系统的能量流动,例如光合作用和化学合成。
4. 细菌和病毒的区别是什么?细菌和病毒是两类不同的微生物。
细菌是真核细胞,具有细胞壁和细胞质,可以自主繁殖。
细菌可以以自养或异养的方式获取养分,并且某些细菌对人类和环境有益。
而病毒则不是细胞,而是一种包覆着蛋白质壳的遗传物质。
病毒需要寄生在其他细胞中生存和繁殖,且会引起许多传染病。
5. 抗生素是如何抑制细菌生长的?抗生素是一类可以抑制或杀死细菌的药物。
它们通过干扰细菌的生理过程来发挥作用。
常见的抗生素作用机制包括抑制细菌的蛋白质合成、破坏细菌的细胞壁合成、抑制核酸合成或阻断膜功能等。
抗生素的选择和使用应根据细菌的特征、药物的特性以及患者的情况进行决策。
6. 真菌的生活方式有哪些?真菌是一类以寄生或分解有机物为生的微生物。
真菌主要有两种生活方式:母细胞分裂和丝状生物体。
母细胞分裂是指通过细胞分裂过程产生子孢子,子孢子在适宜的环境条件下萌发成新的真菌体。
丝状生物体是指真菌通过长出丝状结构来获取养分和繁殖。
真菌的生活方式因物种而异,某些真菌可以同时采用多种不同的生活方式。
7. 病毒如何感染宿主细胞并复制?病毒感染宿主细胞的过程分为吸附、穿透、解除壳、复制和释放五个步骤。
正常菌群对宿主的生理学作用:⑴生物拮抗,其作用机制为:①受体竞争;②产生有害代谢产物;③营养竞争;④合成细菌素。
⑵营养作用:参与宿主的物质代谢、营养物质转化和合成。
⑶免疫作用⑷抗衰老作用⑸抗肿瘤作用:①降解致癌物质;②激活巨噬细胞——抑制肿瘤细胞。
外毒素和内毒素的主要区别(一)致病物质黏附素:定植因子抗原Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ(CFA Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)外毒素:志贺毒素(Stx),耐热肠毒素(ST),不耐热肠毒素(LT)其他致病物质:内毒素、荚膜、载铁蛋白、Ⅲ型分泌系统Ⅲ型分泌系统:是指细菌通过绒毛样结构与宿主细胞紧密接触,形成一个孔可引起腹泻的大肠埃希菌分六类:肠产毒型大肠埃希菌( ETEC)、肠致病型大肠埃希菌(EPEC)、肠出血型大肠埃希菌(EHEC)、肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)、肠集聚型大肠埃希菌(EAEC)、弥漫黏附型大肠埃希菌(DAEC)。
致病物质肠产毒型大肠埃希菌(ETEC):定植因子(菌毛)、肠毒素产生LT/ST致小肠粘膜上皮细胞大量分泌液体和电解质肠致病型大肠埃希菌(EPEC):细菌粘附。
VT毒素(非洲绿猴细胞毒素)细菌粘附于绒毛,导致刷状缘破坏、绒毛萎缩、上皮细胞排列紊乱和功能受损。
VT 毒素。
肠出血型大肠埃希菌(EHEC):菌毛、毒素(志贺毒素)产生志贺样毒素(Vero毒素),终止蛋白质合成,使肠上皮细胞死亡脱落,吸收能力减弱,分泌能力增强肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC):侵袭力(特殊质粒)、内毒素(多数菌株无动力学器官)侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞,形成溃疡肠集聚型大肠埃希菌(EAEC):肠集聚耐热毒素、菌毛、α溶血素聚集性黏附、产生毒素,使大量液体分泌弥漫黏附型大肠埃希菌(DAEC):刺激绒毛伸长分析干扰素抗病毒作用机制及作用特点。
抗病毒机理:IFN不直接作用于病毒,其抗病毒作用是通过与邻近正常细胞的干扰素受体结合,激活胞内相关信号传导通路。
上调多种抗病毒蛋白(AVP)编码基因表达水平而发挥抗病毒效应。
医学微生物简答题1.简述革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁的区别。
革兰阳性菌革兰阴性菌强度较坚韧较疏松厚度厚薄肽聚糖层数与含量多少糖类含量多少脂类含量少多磷壁酸+ —外膜—+2.简述细菌的特殊结构及其作用。
(1)荚膜:某些细菌细胞壁外的一层粘液性物质。
作用:①抗吞噬作用②粘附作用③抗有害物质的损伤作用(2)鞭毛:某些细菌菌体上细长并呈波状弯曲的丝状物。
作用:①运动器官②鉴别细菌③抗原性④与致病性有关(3)菌毛:菌体表面存在的一种较鞭毛更细、更短、直硬的丝状物。
作用:①黏附作用②致病性③传递遗传物质(4)芽孢:圆形或卵圆形小体,为细菌的休眠形式。
作用:对热力、干燥、辐射、化学消毒剂等理化因素均有强大的抵抗力。
3.细菌的生长周期包括哪几期?各期有何特点?(1)迟缓期菌体增大、代谢活跃,分裂迟缓、繁殖极少(2)对数期数量对数增长,对外界环境因素的作用敏感,生物学形状最为明显(3)稳定期细菌芽孢及外毒素、抗生素等代谢产物产生(4)衰亡期繁殖速度越慢,死亡越多4.细菌培养基按其用途分哪几类?各类的主要用途是什么?(1)基础培养基(2)增菌培养基有利于目的菌的生长繁殖(3)选择培养基分离选择细菌(4)鉴别培养基鉴别细菌(5)厌氧培养基5.细菌生长繁殖的条件。
(1)充足的营养物质(2)合适的PH(3)适宜的温度(4)气体环境(5)渗透压6.紫外线的杀菌机理是什么?杀菌的有效波长是多少?适用于哪些物品的消毒?(1)杀菌机理:使一条DNA链上两个相邻的胸腺嘧啶以共价键结合,形成二聚体,干扰DNA的复制与转录,导致细菌变异或死亡。
(2)有效波长:240~300nm(3)适合物品:手术室、传染病房、无菌实验室的空气消毒、不耐热物品的表面消毒7.简述噬菌体生物学特点。
(1)形态与结构蝌蚪形、微球形与细杆形由头部和尾部组成(2)化学组成由核酸和蛋白质组成(3)抗菌性(4)抵抗力抵抗力比一般细菌繁殖体强8.细菌遗传与变异的物质有哪些?基因遗传重组是通过哪些方式来实现的?(1)染色体、质粒、转位基因、整合子、噬菌体(2)转化、接合、转导、溶原性转化9.什么是细菌的侵袭力?哪些因素决定细菌侵袭力的大小?(1)细菌的侵袭力:致病菌能突破宿主皮肤、粘膜生理屏障,进入机体并在体内定植、繁殖扩散的能力因素:①粘附素②荚膜③侵袭性物质④细菌生物被摸10.简述细菌内外毒素的区别。
什么是微生物?习惯上它包括哪几大类群?微生物:一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。
类群:①非细胞型。
小、无典型细胞结构,包括病毒亚病毒②原核细胞型。
无成形细胞核及完整的细胞器,包括三菌三体③真核细胞型。
有完整的细胞结构,细胞核分化程度高,细胞器完善,包括酵母菌、霉菌、蕈菌等。
微生物发展史如何分期?各期的时间、实质、创始人和特点是什么?我国人民在微生物发展史上占有什么地位?有什么值得反思?分期:史前期、初创期、奠基期、发展期、成熟期奠基期?G+细菌和G-细菌都含有肽聚糖和磷壁酸,区别在于含量的不同。
试图示肽聚糖单体的模式构造,并指出G+细菌和G-细菌在肽聚糖的成分和结构上的差别。
G+细菌肽聚糖单体结构与G-细菌基本相同,差别仅在于:①四肽尾的第三个氨基酸分子不是L-Lys,而是被一种只存在于原核生物细胞壁上的特殊氨基酸—内消旋二氨基庚二酸(m-DAF)所代替;②没有特殊的肽桥,故前后两单体间的连接仅通过甲四肽尾的第四个氨基酸(D-Ala)的羧基与乙四肽尾的第三个氨基酸(m-DAP)的氨基直接相连,因而只形成较稀疏、机械强度较差的肽聚糖网套。
在G-细菌细胞壁外膜和细胞壁(内膜)上各有那些蛋白?其功能如何?外膜:?细胞膜:?试简述革兰氏染色的机制。
通过结晶紫液初染和碘液媒染后,在细菌的细胞壁以内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。
G+细菌由于其细胞壁较厚,肽聚糖网层次多和交联致密,故遇脱色剂乙醇(或丙酮)处理时因失水而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇的处理不会溶出缝隙,因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内,使其保持紫色。
反之,G-细菌因其细胞壁薄,外膜层类脂含量高,肽聚糖层薄和交联度差,遇脱色乙醇后,以类脂为主的外膜迅速溶解,这时薄而松的肽聚糖网不能阻止结晶紫与碘复合物的溶出,因此细胞退成无色。
这时再经沙黄等红色染料复染,就使G-细菌呈现红色,而G+细菌则保留最初的紫色(实为紫加红色)了。
【涂片固定→初染→结晶紫→媒染→碘液→脱色→95%酒精→稀释复染→复红】什么是缺壁细胞?试列表比较四类缺壁细胞细菌的形成、特点和实践意义。
296. 从微生物的角度分析,酸奶生产的关键点有哪些?为什么?答:制酸奶过程:牛奶+6-8%的糖→90-95℃下杀菌15min→冷却(42-45℃)→接种(乳酸菌)→培养(40-42℃)(4-6h)→冷藏(24h或48h)。
关键:①牛奶原料要取材新鲜,无污染,杂菌含量不多,无致病微生物等;②菌种:选用保加利亚乳酸菌(产香),嗜热链球菌(产酸);比例要合适,才能产生风味、质地较好的酸奶,接种量要合适;③尽量缩短延滞期,接种处于指数期后期的菌,培养温度为最适合产酸的温度;④控制冷藏时间、温度(过高适合于各种菌生长,过低破坏蛋白质)。
297. 试从微生物的角度分析,在酸奶的生产过程中如何将牛奶的PH迅速将到4.5。
答:要使牛奶PH下降只要依靠嗜热链球菌产酸,应保证灭菌后接种的该菌活力高,取得生长优势,抑制杂菌。
缩短延滞期,以对数期接种的龄的“种子”接种(接种龄),接种量较大,牛奶作为培养基,营养丰富。
严格注意环境卫生,防止杂菌污染,用的容器设备要消毒。
298. 在以消毒奶为原料生产酸奶的过程中,为什么要在尽可能短的时间内达到酸凝?可采取那些措施?答:消毒奶还残留部分耐热菌和腐败菌,若培养时间过长,这些菌也可以大量生长。
尽可能地缩短时间,牛奶凝后仍产酸,抑制腐败菌生长。
可以采取的措施:①选用优质的菌种;②接种龄处于指数期后期的菌种;③有一定的接种量3-5%;④培养基都是牛奶。
引起下列食品变质的微生物主要是什么类群?为什么?①消毒牛奶(室温);答:原料是消毒牛奶,经巴氏灭菌后,酵母菌和霉菌灭得差不多了,细菌营养体也应灭了,最有可能的是细菌芽孢的萌发,牛奶属非酸性食品,室温下适于芽孢的萌发。
可以通过低温保藏的方法防止。
②真空包装的蜜饯产品;答:原料是蜜饯,含有高糖粉,渗透压高,水分活度低,不适于细菌生长,而且是真空包装,霉菌多属好氧菌,也不易生长。
最可能的是喜糖的耐高渗透压酵母。
③面粉;答:面粉中水分活度很低,不适于酵母和细菌的生长(细菌的适宜水活度为0.94-0.99,酵母菌0.88-0.94,霉菌0.8-0.94,甚至0.65都可生长)。
简答1:病原微生物的生物学特性一葡萄球菌属(Staphylococcus)是一类接触酶阳性革兰氏阳性球菌,广泛分布在空气、水域、地面。
人及动物体表、呼吸道、肠道等部位。
本属细菌分为32个种。
常见动物致病菌有金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌厌氧亚种、及猪葡萄球菌金黄色葡萄球菌1、生物学特征革兰氏阳性。
圆形,直径0.5-1.5μm,排列成葡萄串状。
脓汁、乳汁、液体培养常见双球或短链排列的球菌,易误认为链球菌。
无芽孢,无鞭毛,有的形成荚膜或黏液层。
第二节链球菌属(Streptococcus)一类接触酶阴性,链状排列革兰氏阳性球菌,自然界分布甚广,水、动物体表、消化道、呼吸道等都有存在,有些可致人或动物各种化脓性疾病、肺炎、乳腺炎、败血症等。
1、生物学特征呈圆形或卵圆形,直径小于2.0 μm ,常排列成链状或成双。
有些种有荚膜。
普通培养基中生长不良。
血液琼脂平板:菌落灰白色,表面光滑,边缘整齐的小菌落。
多数致病菌株具有溶血能力。
第三节埃希氏菌属本属现有5个种,其中最重要的种是大肠埃希菌(E.coli),俗称大肠杆菌,下分血清型。
1、生物学特征G-的杆菌,散在或成对营养要求不严格麦康凯琼脂:红色菌落伊红美蓝琼脂:黑色带金属闪光的菌落SS琼脂:一般不生长,生长者呈红色一些致病性菌株在绵羊鲜血平板上呈β溶血。
发酵多种碳水化合物产酸产气,IMViC + + - -第四节沙门氏菌属是一群寄生于人和动物肠道内的革兰氏阴性菌。
本属菌现可分为:肠道沙门氏菌和邦戈尔沙门氏菌两个种,肠道沙门氏菌又分为6个亚种。
1、生物学特征呈直杆状,革兰氏阴性。
除雏沙门氏菌和鸡沙门氏菌无鞭毛不运动外,其余各菌均以周生鞭毛运动。
本属大多数细菌的培养特性与埃希氏菌属相似。
只有鸡白痢、鸡伤寒、羊流产和甲型副伤寒等沙门氏菌在肉汤琼脂上生长贫瘠,形成较小的菌落。
在肠道杆菌鉴别或选择性培养基上,大多数菌株因不发酵乳糖而形成无色菌落。
第五节巴氏杆菌属及相关属一、巴氏杆菌属已报道有20多种,多杀性巴氏杆菌是本属中最重要的畜禽致病菌,本菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病(亦称出血性败血症)的病原体,主要使动物发生出血性败血病或传染性肺炎。
医学微生物学名词解释1.微生物:是存在于自然界的一大群体型微小、结构简单、肉眼直接看不见,必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍数千倍甚至数万倍才能观察到的微小生物的总称.2.非细胞型微生物:无典型的细胞结构,是最微小的一类微生物.无产生能量的酶系统,只能在活细胞内生长增殖.核酸只有一种类型RNA或DNA,如病毒.3.原核细胞型微生物:细胞核分化程度较低,具备原始细胞核,呈裸露环状结构,无核膜、核仁.细胞器很不完善,只有核糖体.4.真核细胞型微生物:细胞核分化程度较高,有核膜和核仁,细胞器完整.5.致病微生物(病原微生物):能够引起人类和动植物发生疾病的微生物.6.条件致病微生物:在正常情况下不致病,只有在特定情况下导致疾病的一类微生物.7.菌落:菌落是细菌在固体培养基上生长,由单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见的细菌集团.8.质粒:质粒是染色体外的遗传物质,存在于细胞质中,为闭合环状的双链DNA,带有遗传信息.控制细菌的某些遗传性状,可独立复制,不是细菌生长必不可少的,失去质粒的细菌仍然能正常生活.9.芽胞:芽胞是某些细菌在一定条件下,在菌体内部形成一个圆形或椭圆形小体,是细菌的休眠形式.10.细菌L型:细菌的细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制,这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者,称细菌细胞壁缺陷型或细菌L型.11.中介体:中介体是细菌部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物,多见于革兰阳性菌.它能有效的扩大细胞膜的面积,相应的增加了呼吸酶的含量,可为细菌提供大量的能量.功能类似于真核细胞线粒体,又称为拟线粒体.12.普通菌毛:普通菌毛是遍布于某些细菌表面的很细、很短、直而硬的丝状物,每菌可达数百根,为细菌粘附结构,能与宿主细胞表面的特异性受体结合.与细菌的致病性密切相关.13.性菌毛:性菌毛比普通菌毛长而粗,呈中空管状结构.由致育因子F质粒编码.14.菌毛:菌毛是某些细菌表面存在着的一种直的、比鞭毛更细、更短的丝状物.与细菌的运动无关.由菌毛蛋白组成,具有抗原性.15.鞭毛:鞭毛是在许多细菌的菌体上附有的细长并呈波状弯曲的丝状物,为细菌的运动器官.16.荚膜:荚膜是某些细菌在细胞壁外包绕一层粘液性物质,为多糖或蛋白质的多聚体,用理化方法去除后并不影响菌细胞的生命活动.凡粘液性物质牢固地狱细胞壁结合,厚度≥0.2μm,边界明显者为荚膜.17.微荚膜:微荚膜是某些细菌在一定的环境条件下其细胞壁外包绕的一层粘液性物质,厚度<0.2μm者为微荚膜.18.异养菌:异养菌必须以多种有机物为原料,如蛋白质、糖类等,才能合成菌体成分并获得能量.包括腐生菌和寄生菌.所有病原菌都是异养菌,大部分属于寄生菌.19.热原质:热原质是细菌合成的一种极微量的注入人体或动物体内能引起发热反应的物质.为细胞壁的脂多糖结构,故大多源于革兰阴性菌.20.细菌素:细菌素是某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质.其作用范围窄,仅对有近缘关系的细菌有杀伤作用.可用于细菌分型和流行病学调查.21.培养基:培养基是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养制品.22.消毒:消毒是指杀死物体上病原微生物的方法,并不一定杀死芽胞和非病原微生物.23.灭菌:灭菌是指杀灭物体上所有微生物的方法,包括病原微生物的繁殖体,芽胞和非病原微生物.24.无菌和无菌操作:无菌是指不存在活菌.无菌操作指防止细菌进入人体或其他物品的操作技术.25.防腐:防腐是防止或抑制细菌生长繁殖的方法.26.滤过除菌法:滤过除菌法是用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去,而达到无菌的目的.此法主要用于一些不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌.27.变异:在一定条件下,若子代与亲代之间以及子代与子代之间的生物学性状出现差异称变异.28.转座子:转座子是一类在细菌的染色体、质粒或噬菌体之间自行移动的遗传成分,是基因组中一段特异的具有转位特性的独立的序列.29.基因转移:基因转移是外源性的遗传物质由供体菌转入某些受体菌细胞内的过程.30.转化:转化是供体菌裂解游离的基因片段被受体菌直接摄取,使受体菌获得新的性状.31.接合:接合是细菌通过性菌毛互相沟通,将遗传物质(主要是质粒DNA)从供体菌转移给受体菌的方式.32.普遍性转导:普遍性转导是以温和噬菌体为载体,将供体菌的一段转移到受体菌内,使受体菌获得新的性状,如转移的是供体菌染色体上的任何部分,则称为普遍性转导.33.局限性转导:在转导过程中,如所转导的只限于供体菌染色体上特定的基因,则称为局限性或特异性转导.34.溶原性转换:溶原性转换是当噬菌体感染细菌时,宿主菌染色体中获得了噬菌体的片段,使其成为溶原状态时而使细菌获得新的性状.35.原生质体融合:原生质体融合是将两种不同的细菌经溶菌酶或青霉素等处理,失去细胞壁成为原生质体后进行相互融合的过程.36.噬菌体:噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒.37.毒性噬菌体:毒性噬菌体是能在宿主细胞内复制增殖,产生许多子代噬菌体,并最终裂解细菌的噬菌体.38.温和噬菌体:噬菌体感染细菌后,噬菌体基因与宿主菌染色体整合,不产生子代噬菌体,其随细菌复制,并随细菌传至子代的噬菌体是温和噬菌体.39.前噬菌体:前噬菌体是整合在细菌基因组中的噬菌体基因组.40.溶原性细菌:溶原性细菌是带有前噬菌体基因组的细菌.41.侵袭力:侵袭力是指致病菌能突破宿主皮肤\黏膜生理屏障,进入机体并在体内定植、繁殖和扩散的能力.包括荚膜、粘附素和侵袭性物质等.42.内毒素:内毒素是革兰阴性菌细胞壁中的脂多糖组分,当细菌死亡裂解或用人工方法破坏后才能释放出来.43.类毒素:类毒素是具有良好抗原性的外毒素,在0.3%-0.4%甲醛作用下,经一定时间,可以脱去毒性,但仍然保留有免疫原性.可用于人工主动免疫,诱发机体产生抗毒素抗体.44.外毒素:外毒素是某些细菌在代谢过程中产生并分泌到细胞外的毒性物质,也有少数存在于菌体内,待菌体溶解后释放出来.外毒素具有良好的抗原性.45.急性感染:急性感染是指疾病发病急,病程短,痊愈后病原体从机体中消失.46.慢性感染:慢性感染是指病情缓慢,病程长,可持续数月至数年.47.半数致死量(LD50)或半数感染量(ID50): 半数致死量或半数感染量是指在规定时间内,通过制定的感染途径,能使一定体重或年龄的某种动物半数死亡或感染需要的最小细菌数或毒素量.作为判断细菌毒力的参考.48.毒血症:致病菌侵入机体后,只在机体局部生长繁殖,并均不进行血循环,其产生的外毒素进入血循环,引起特殊的毒性症状.49.内毒素血症:内毒素血症是当血液中细菌或病灶内细菌释放大量内毒素入血时引起的症状.50.菌血症:菌血症是致病菌由局部侵入血流,但未在其中生长繁殖,只是通过血循环,并且无明显中毒症状.51.败血症:败血症是致病菌侵入血流后,在其中大量繁殖并产生毒性产物,引起全身中毒症状.52.外源性感染:感染来源于宿主体外称外源性感染.53.内源性感染:感染来源于患者自身体内或体表的感染称为内源性感染.54.隐性感染:隐性感染是指当机体抗感染免疫力较强,或侵入病原菌数量不多、毒力较弱,感染后对机体损害较轻,不出现或出现不明显临床症状者.55.菌群失调:由于长期大量应用广谱抗菌素,宿主某部位正常菌群中各菌种间的比例发生较大幅度的变化而产生的病症,机体出现一系列临床表现,称菌群失调.56.条件致病菌:正常菌群中的细菌,正常情况下不致病,在特殊条件下引起疾病称条件致病菌或机会致病菌.57.胞外菌:指寄居在宿主细胞外的细菌.胞外菌主要停留在细胞外的体液(血液、淋巴液、组织液)中.人类的多数致病菌属胞外菌,如葡萄球菌、链球菌等化脓性细菌以及霍乱弧菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等.58.胞内菌:少数致病菌主要寄生于细胞内,称为胞内菌(又称兼性胞内菌).对人类致病的兼性胞内菌有结合分歧杆菌、麻风分枝杆菌、伤寒沙门菌、布氏杆菌、肺炎军团菌和李斯特菌等.59.化脓性球菌:是一类能够引起人类化脓性炎症的病原性球菌,主要包括革兰阳性的葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌和革兰阴性的脑膜炎球菌、淋球菌.60.SPA:葡萄球菌A蛋白,是葡萄球菌细胞壁的一种表面蛋白(单链多肽),能与人及某些哺乳动物的IgG分子的Fc 段发生非特异性结合,SPA与IgG结合后的复合物具有抗吞噬、促细胞分裂、致超敏反应和损伤血小板等活性.61.假膜性肠炎:长期使用广谱抗生素后,肠道内正常菌群被抑制或杀灭,耐药的葡萄球菌趁机繁殖并产生肠毒素,引起以腹泻为主的临床症状,其本质是菌群失调性肠炎.病理特点是肠黏膜被一层炎性假膜所覆盖,由肠黏膜坏死块、炎性渗出物和细菌组成.62.血浆凝固酶:是能使含有枸橼酸钠或肝素等抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质,大多数致病性葡萄球菌能产生,是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标.63.链激酶(SK):又称链球菌溶纤维蛋白酶,能使血液中的纤维蛋白酶原转化成纤维蛋白酶,故可溶解血块或阻止血浆凝固,有利于细菌在组织中扩散.64.链道酶(SD):又称链球菌酶,能降解脓液中具有高度粘稠性的DNA,使脓液变稀薄,促进细胞扩散.65.致热外毒素:又称红疹毒素或猩红热毒素,是引起猩红热的主要毒性物质,为蛋白质,可引起机体发热和皮疹.66.抗“O”实验:是抗链球菌溶血素O试验的简称,是一项测定患者血清中抗链球菌溶血素O抗体含量的中和试验,用以作为链球菌新近感染指标之一和对风湿热及其活动性的辅助诊断.67.毒性休克综合征毒素1(TSST-1):又称制热性外毒素C.能引起机体发热,增加宿主对内毒素的敏感性,引起多个组织、器官功能紊乱或毒性休克综合征(TSS),使毛细血管通透性增加.68.外斐试验:普通变形杆菌X19、X2和Xk菌株的菌体O抗原与斑疹伤寒立克次体和恙虫病立克次体有共同抗原,故可用X19、X2和Xk代替立克次体作为抗原与相应患者血清进行交叉凝集反应,即为外斐试验,以协助诊断相关的立克次体病.69.肥达试验:用已知伤寒沙门菌O抗原和H抗原,以及甲、乙、丙型副伤寒沙门菌的H抗原的诊断菌液与受检血清作试管凝集实验,测定受检血清中有无相应抗体及其效价,辅助诊断肠热症.70.IMViC:是指吲哚实验,甲基红试验,V-P试验和枸橼酸盐利用试验等,是卫生细菌学常用的检测指标.71.迁徙生长现象:变形杆菌在固体培养基上呈扩散性生长,形成以菌接种部位为中心的厚薄交替、同心圆型的层层波状菌苔,这种现象称为迁徙生长现象.72.志贺毒素:是痢疾志贺菌的外毒素,具有三种生物学活性,即可引起水样腹泻的肠毒性、对人肝细胞有毒害作用的细胞毒性和可作用于中枢神经系统的神经毒性.73.霍乱肠毒素:目前已知的致泻毒素中最为强烈的毒素,由霍乱弧菌分泌由一个A亚单位和五个相同的B亚单位构成的一个热不稳定性多聚体蛋白,作用于小肠粘膜上皮细胞上相应受体,使细胞内cAMP水平升高,主动分泌Na+、K+、HCO3-和水,导致严重的腹泻和呕吐。
微生物学试题(一)答案:一,1,革兰氏阳性菌:细菌经革兰氏染色染色后最终染成紫色的菌2,伴胞晶体:少数芽孢杆菌,在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形,方形,或不规则形的碱溶性蛋白质晶体称为半胞晶体3,菌落:当单个细菌细胞或者一小堆同种细胞接种到固体培养基表面,当它占有一定的发展空间并处于适宜的培养条件下时,该细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆,此即菌落。
4,生命周期:指的是上一代生物个体经过一系列的生长,发育阶段而产生下一代个体的全部过程。
5,荚膜:包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质6,芽孢:某些细菌在其生长发育的后期,在细胞内形成的一个圆形或椭圆形,厚壁,含水量低,抗逆性强的休眠构造。
二,1,①在微生物与工业发展的关系上,通过食品罐藏防腐,酿造技术的改造,纯种厌氧发酵的建立,液体深层通气搅拌大规模培养技术的创建以及代谢调控发酵技术的发明,使得古老的酿造技术迅速发展成工业发酵新技术;②微生物在当代农业生产中具有十分显著的作用,例如,以菌治害虫和以菌治植病的生物防治技术;以菌增肥效和以菌促生长的微生物增产技术;以菌做饲料和以菌当蔬菜的单细胞蛋白和食用菌生产技术;以及以菌产沼气等生物能源技术。
③微生物与环境保护的关系越来越受到当代全人类广泛的重视。
微生物是占地球面积70%以上的海洋和其他水体中光合生产力的基础;是一切食物链的重要环节;是污水处理中的关键角色;是生态农业中最重要的一环;是自然界重要元素循环的首要推动者;以及是环境污染和监测的重要指示生物;等等。
④微生物与在食品上的应用。
调味品,发酵食品,酸乳,蔬菜加工。
⑤微生物在医药方面的应用。
抗菌素,维生素。
⑥微生物在能源生产方面也有重要的作用。
2,G+细菌由于其细胞壁较厚,肽聚糖网层次多和交联致密,故遇脱色剂乙醇处理时,因失水而使得网孔缩小再加上它不含类脂,故乙醇的处理不会溶出缝隙,因此能把结晶紫和碘的复合物牢牢留在壁内,使得其保持紫色。
微生物考试题目及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1. 微生物是指()。
A. 肉眼可见的生物B. 个体微小的生物C. 单细胞生物D. 所有细菌和真菌答案:B2. 微生物学之父是()。
A. 李斯特B. 巴斯德C. 科赫D. 弗莱明答案:B3. 微生物的细胞壁主要由()组成。
A. 纤维素B. 几丁质C. 肽聚糖D. 蛋白质答案:C4. 细菌的繁殖方式是()。
A. 有性生殖B. 无性生殖C. 孢子生殖D. 出芽生殖答案:B5. 病毒没有()。
A. 细胞结构B. 遗传物质C. 蛋白质外壳D. 代谢系统答案:D6. 酵母菌属于()。
A. 细菌B. 真菌C. 病毒D. 原生动物答案:B7. 微生物的培养基中通常不含有()。
A. 碳源B. 氮源C. 无机盐D. 抗生素答案:D8. 微生物的菌落特征不包括()。
A. 形状B. 颜色C. 气味D. 菌落大小答案:C9. 微生物的分类依据不包括()。
A. 形态特征B. 生理特征C. 生长环境D. 遗传信息答案:C10. 微生物在食品工业中的主要作用不包括()。
A. 发酵B. 腐败C. 产生毒素D. 食品添加剂答案:C二、多项选择题(每题3分,共15分)1. 以下哪些属于微生物的范畴()。
A. 细菌B. 真菌C. 病毒D. 原生动物答案:ABCD2. 微生物的分类依据包括()。
A. 形态特征B. 生理特征C. 生长环境D. 遗传信息答案:ABD3. 微生物的培养基类型包括()。
A. 液体培养基B. 固体培养基C. 半固体培养基D. 气体培养基答案:ABC4. 微生物在医学领域中的应用包括()。
A. 疫苗制备B. 抗生素生产C. 疾病治疗D. 疾病诊断答案:ABCD5. 微生物在环境保护中的作用包括()。
A. 污水处理B. 废气处理C. 土壤修复D. 废物回收答案:ABCD三、填空题(每题2分,共20分)1. 微生物的分类单位从大到小依次是:_______、_______、_______、_______、_______。
微生物学第二章简答题1.原核微生物主要有哪几类?与真核微生物相比,其细胞结构最主要的特点是什么?答:原核微生物主要有6类:细菌、放线菌、蓝细菌、立克次氏体、支原体和衣原体。
它与真核微生物在细胞结构上的主要区别是:细胞核为核质体、即没有核膜、没有核仁、没有有丝分裂器。
2.何谓细菌?试写出其细胞结构的名称。
答:细菌是一类细胞细而短(一般0.5×0.5~5.0μm)、结构简单、细胞壁坚韧、以裂殖方式繁殖、水生性较强的原核微生物。
细胞结构分为:基本结构:为全部细菌细胞所共有。
如细胞壁(支原体例外)、细胞膜、核质体、细胞质等。
特殊结构:部分细菌细胞所具有。
如鞭毛、菌毛、荚膜、芽孢及伴孢晶体等。
3.在没有显微镜的情况下,一般可通过哪些方式初步判断在我们日常生活环境中到处有细菌的存在?答:通过嗅觉:凡微生物大量聚集的地方,往往发出特殊的臭味或酸败气味;用手触摸:凡微生物大量生长的表面,往往有粘、滑的感觉;在固体食物表面,大量生长的结果,会出现水珠状、鼻涕状、浆糊状以及颜色多样的菌落或菌苔;若用小棒挑取会拉出丝状物来;在液体(含营养)中,生长的结果,会出现混浊、沉淀或飘出一片片白花(菌醭或菌膜),并伴有气泡冒出。
4.列出真细菌目细菌的形态类型(包括基本形态、其它正常形态和异常形态)。
答:基本形态:球状、杆状和螺旋状;其他正常形态:柄状、三角形、方形、圆盘形和肾形;异常形态:畸形和衰退形。
5.用光学显微镜观察细菌的形态和结构时,为何一般都要对它们进行染色?常用的方法有几类?首创细菌染色方法的学者是谁?答:由于细菌细胞极其微小而又十分透明,加之活体细胞内含大量水分,对光线的吸收和折射与水溶液差不多,在光学显微镜下很难看清楚。
经染色后,使菌体表面及内部结构着色,与背景形成鲜明对比而能较清楚地被看见。
常用的方法有死菌法和活菌法两大类;死菌法又分正染色法和负染色法两大类别,正染色法种类较多,又分简单染色法和鉴别染色法,鉴别染色法包括革兰氏染色法、抗酸性染色法、芽孢染色法等。
活菌染色法常用美蓝或氯化三苯基四氮唑(TTC)等首创细菌染色法的是德国学者科赫(R.Koch)6.对细菌进行染色的方法种类很多,请用表解形式分别列出死菌的染色方法的类别及其各自所包括的主要染色方法的名称。
7.何谓革兰氏染色法?它在理论与实践方面有何重要意义?答:丹麦学者C.Gram1884年发明的一种重要的细菌染色法。
其简要操作步骤:结晶紫初染,碘液媒染,乙醇脱色和沙黄复染。
其中乙醇脱色是实验成败的关键。
经染色后菌体呈蓝紫色者为G+菌,红色者为G-菌。
此法可将几乎所有的细菌分为G+和G-两大类,因此是菌种分类鉴定的重要指标;同时可在一定程度上反映出这两大类细菌之间某些重要的生物学特性方面的明显差异,如细菌的结构、组成成分、生态和对药物敏感性等。
8.何谓革兰氏染色法?主要操作步骤各有何作用?其中哪一步是成败的关键?为什么?答:此法由丹麦医生C.Gram于1884年发明的一种重要的细菌鉴别染色法而得名。
主要步骤:结晶紫初染,碘液媒染,乙醇脱色和沙黄复染。
初染使菌体染上紫色;媒染使结晶紫与碘分子结合成一个分子量大且染色较牢固的复合物;乙醇脱色是使已染上的蓝紫色脱去而又成为无色(若是G+菌则仍为蓝紫色);复染是使已脱色的细菌再染上复染液的颜色。
此法成败的关键是脱色。
如果脱色时间过长,G+菌则可被误染为G-菌,反之,G-菌可被误染为G+菌。
9.何谓革兰氏染色法?影响革兰氏染色法着色稳定性的因素有哪些?请以枯草芽孢杆菌为例予以说明。
答:此法由丹麦医生C.Gram于1884年创立的一种重要的细菌鉴别染色法而得名。
其主要步骤:结晶紫初染,碘液媒染,乙醇脱色和沙黄复染。
菌体最后呈蓝紫色者为G+菌,呈红色者为G-菌。
研究表明,枯草芽孢杆菌是G+菌。
但是,如果培养时间过长或者已死亡,部分菌体自溶,涂片厚薄,尤其脱色时间过长等,都会影响其着色稳定性,使G+菌误染为G-菌。
10.分别以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌为例,简述革兰氏染色的机制。
答:经染色后,大肠杆菌为阴性反应,枯草杆菌呈阳性反应。
此结果与两者细胞壁的化学组成和结构密切相关。
枯草杆菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成,且多层紧密牢固,厚约20~80nm;肽聚糖的含量约占细胞壁干重的40%~90%,脂多糖含量仅0.1%~0.4%。
当染色过程中用乙醇脱色时,由于脱水而引起肽聚糖层网状结构中的孔径变小,通透性降低,结晶紫-碘的复合物保留于细胞中而不易脱色,因此菌体呈紫色。
而大肠杆菌细胞壁中肽聚糖层厚约2~3nm,结构疏松且单层或双层;肽聚糖含量仅5%-10%,而脂多糖含量却高达11%~22%。
当染色过程中用乙醇脱色时,脂类物质溶解,细胞壁通透性增加,结晶紫-碘复合物被抽出而脱色,再用复染液染色,于是菌体染上了复染液的颜色而呈红色。
11.试以枯草芽孢杆菌为例,简述采用革兰氏染色法染色的结果、原理及其主要操作步骤。
答:结果:G+,菌体呈蓝紫色。
原理:G+细菌细胞壁中肽聚糖含量高,而脂类物质含量低,且肽聚糖层网状结构紧密、牢固、多层。
当用乙醇处理时,脂类物质溶解而使得肽聚糖层网状结构中的孔径变小,细胞壁通透性降低,结晶紫-碘的复合物保留于细胞中而不易脱色,故菌体仍呈结晶紫-碘复合物的颜色(蓝紫色)。
主要操作步骤:涂片:将培养一定时间的菌种均匀涂布于载玻片上,干燥、固定。
染色:结晶紫碘液95%乙醇沙黄。
(初染)-(媒染)-(脱色)-(复染)-油镜观察。
12.试以大肠杆菌为例,简述采用革兰氏染色法染色的结果、原理及主要操作步骤。
答:结果:G-,菌体呈复染液颜色(红色)原理:G-菌细胞壁中肽聚糖含量低,而脂类物质含量高。
当用乙醇处理时,脂类物质溶解,细胞壁通透性增加,致使结晶紫-碘的复合物被抽出,最后被染上了复染液(沙黄或番红)的颜色(红色)。
主要操作步骤:涂片:培养一定时间的菌种均匀涂布于载玻片上,干燥、固定;染色:结晶紫初染碘液媒染95%乙醇脱色沙黄或番红复染;油镜观察。
13.何谓原生质体和球状体?两者有何共同特点?答:原生质体一般由G+菌在人为条件下用溶菌酶除尽原有的壁或加入青霉素抑制其壁的合成后所剩下的生活体部分。
球状体一般由G-细菌采用与制备原生质体相同的方法除去细胞内壁层但仍残留外壁层后的生活体部分。
两者共同点主要有:无细胞壁,均呈球状;对渗透压等外界条件十分敏感;即使有鞭毛的细菌也失去了运动性;对某些噬菌体不敏感等等。
总之,它们几乎失去了原有细胞壁所具备的生理功能,但仍能正常生活。
14.何谓原生质体?如何获得原生质体?答:G+细菌人为彻底去壁后仅由细胞膜包围的细胞生活体部分即为原生质体。
获得的方法:用某选择性溶菌酶(如溶菌酶)以适当浓度处理G+细菌,经一定时间后,便可彻底去掉细胞壁;或者让G+细菌在一种特殊的环境中生长。
例如将其培养在含一定浓度青霉素的培养基中,便可抑制细胞壁肽聚糖的合成而获得。
15.何谓细胞壁缺陷细菌?答:细胞壁是细菌细胞的基本结构之一。
在某些情况下:如受鸡蛋清溶菌酶或青霉素的作用,细胞壁中的肽聚糖层被破坏或其合成被抑制,或者通过自发突变,或者在自然进化过程中丧失,均可形成缺壁的细菌。
例如原生质体、球状体、L型细菌和支原体等,都是在不同条件下所形成的缺壁细菌。
16.试比较支原体、L型细菌、原生质体和球状体之间的主要异同。
答:相同:均为细胞壁缺陷的原核微生物;对外界环境因素较敏感;一般均为球形(支原体有时呈丝状)。
不同:主要表现为形成缺壁的方式不同。
支原体:在自然界长期进化过程中形成;L型细菌:在实验室条件下自发突变形成;原生质体:G+菌在人为条件下用鸡蛋清溶菌酶彻底除去原有的壁或加入青霉素于培养基中培养以抑制其壁的合成;球状体:一般为G-细菌通过与制备原生质体相同的方法处理后形成。
17.何谓细胞壁缺陷细菌?按其形成方式共分为哪几种?答:细胞壁是细菌的基本结构之一,但在某些情况下可导致细胞壁缺损以致无壁,这类无壁或壁部分缺损的菌株统称为细胞壁缺陷细菌。
按其形成方式,缺壁菌株大致分为四种:支原体:在自然界长期进化中形成L型细菌:实验室条件下自发突变形成原生质体:实验室条件下,以人工方法彻底去壁球状体:实验室条件下,经人工方法除去部分细胞壁18.何谓细菌细胞壁?证明其存在的方法有哪些?答:位于细胞表面,内侧紧贴细胞膜、较为坚韧的一层较厚实的外被。
主要由肽聚糖组成,具有固定细胞外形和保护细胞等多种生理功能,是细菌的基本结构之一。
①证明其存在的方法有:光学显微镜观察;细胞壁染色:A.单宁酸(媒染),后加结晶紫染色,壁呈紫色;B.磷钼酸(媒染),甲基绿染色,壁为绿色;质壁分离(大型细菌采用);制备原生质体。
②电子显微镜观察19.何谓细菌细胞壁?其主要生理功能有哪些?答:细胞壁位于细胞外层的一层厚实、坚韧、略具弹性的外被,主要由肽聚糖组成,是细菌细胞的基本结构之一。
生理功能:维持细胞一定外形;保护细胞免受外力损伤(如渗透压等);具有一定屏障作用,阻拦有害物质进入细胞;与细菌的抗原性、致病性和对噬菌体的敏感性密切相关;可能是鞭毛运动支点;为正常细胞分裂所必需等。
20.何谓细胞膜?何谓间体?两者各有何生理功能?答:细胞膜又名原生质膜或质膜,是外侧紧贴细胞壁、内侧包围细胞质的一层柔软、富于弹性的半渗透性薄膜,是细菌细胞的基本结构之一。
生理功能:代谢活动的重要中心;控制细胞内外物质运送、交换;维持细胞正常渗透压;合成细胞的各种大分子物质;产能基地;鞭志着生点并提供其运动能量等。
间体:可能由细胞膜内褶而形成的管状、囊状或层状结构,属内膜系统,主要分布于细胞分裂或邻近细胞分裂部位,G+菌较为明显。
生理功能:促进细胞间隔的形成;与遗传物质的复制及其分离有关。
21.何谓细胞膜?如何证明其存在?试简述细胞膜结构。
答:细胞膜是内侧包围细胞质,外侧紧贴细胞壁的一层由磷脂和蛋白质组成的柔软且富于弹性的半渗透性薄膜,是细菌的基本构造之一。
可通过选择性染色、原生质体破裂和电子显微镜观察等方法证明其存在,较大的细菌还可用质壁分离法证明。
它的结构与其化学组成密切相关。
尤其是极性类脂,它有一个带正电荷且溶于水的极性头部(磷酸端)和一个不带电荷不溶于水的非极性尾部(烃端),在水溶液中很易形成高度定向排列的双分子层,相互平行排列于膜内。
头部朝向膜外表面呈亲水性,尾部埋藏于膜的内侧,呈疏水性;不同的内嵌蛋白和外周蛋白可在磷脂分子层的液体中作侧向“漂浮”运动。
22.试述Singer和Nicolson 1972年提出的细胞膜液态镶嵌模式的基本内容。
答:细胞膜主要由磷脂和蛋白质组成。
电子显微镜下呈明显双层结构,由磷脂分子两层整齐排列而成。
磷脂的组成:主要为极性类脂——甘油磷脂,由甘油、脂肪酸、磷酸及含氮碱组成。