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核糖核酸酶抑制剂使用说明RNasin Ribonuclease Inhibitor货号：R8060规格：1000U/2000U/10000U保存：-20ºC保存，避免反复冻融。
产品简介：RNasin是从人胎盘中提取的一种广谱的核糖核酸酶抑制剂，分子量约50KDa。
它在分子生物学的实验中有着十分广泛的应用。
例如：RT-PCR，cDNA合成中mRNA的保护，体外转录和体外翻译，制备RNase-free的抗体，原位杂交和mRNA定位等，它是一个在任何应用中对付潜在RNase污染的十分有用处的试剂。
单位定义：抑制5ng核糖核酸酶A50％的活性所需的核糖核酸酶抑制剂的量为一个单位即1U。
储存缓冲液：20mM Hepes-KOH，pH7.6；50mM KCl；8mM DTT和50%甘油。
质量控制：1．浓度为40U/µl。
2．未检出核酸酶活性。
3．用200U核糖核酸酶抑制剂未检出核糖核酸酶活性(未经处理及预热)。
4．用200U核糖核酸酶抑制剂未检出蛋白酶活性。
注意事项：长期储存(非频繁使用;每月1-2次):-70ºC；每天或每周使用:-20ºC。
尽量避免多次冻融。
切勿暴露在温度波动较大之处。
这些波动对产品的稳定性有极大影响。
相关试剂：RP1100通用RT-PCR试剂盒(M-MLV)RP1200通用RT-PCR试剂盒(AMV)R1100Triquick Resgent总RNA提取试剂R1600DEPC处理水（无酶无菌水）PC11202×Taq PCR MasterMix(含染料）。
核糖核酸酶抑制因子(RI)的融合表达与复性张海涛;舒晓宏;田余祥;李瑞华;崔秀云【期刊名称】《中国生物化学与分子生物学报》【年(卷),期】2004(20)1【摘要】应用PCR技术从核糖核酸酶抑制因子 (ribonucleaseinhibitor ,RI)的克隆载体pT7 ri中扩增出ri片段 (1 5kb) ,亚克隆到融合表达载体pGEX 2T中 ,并转化感受态大肠杆菌BL2 1.异丙基半乳糖苷 (IPTG)诱导表达的GST RI经SDS PAGE 证明分子量约 76kD ,表达量约占菌体蛋白总量 2 0 % .以包涵体形式表达的目的蛋白经尿素变性 ,透析复性得到的产物具有较高的抑制RNaseA的活性(15 0U ml) .复性的融合蛋白于2 4℃经凝血酶作用 16h ,可被切割成 5 0kD的RI和 2 6kD的GST .【总页数】5页(P50-54)【关键词】核糖核酸酶抑制因子;融合表达;复性;克隆载体【作者】张海涛;舒晓宏;田余祥;李瑞华;崔秀云【作者单位】大连医科大学生物化学与分子生物学教研室;大连医科大学附属第二临床学院检验科【正文语种】中文【中图分类】Q786【相关文献】1.增强型绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子包装细胞系的建立及鉴定 [J], 丁宁;李坤;常明2.绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子病毒感染NIH3T3细胞的研究 [J], 李坤;丁宁3.DNA 甲基化抑制剂对肿瘤细胞中核糖核酸酶抑制因子表达下调的影响 [J], 陈俊霞;傅攀峰;王艇;崔秀云4.荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子基因在人肝癌细胞中的表达 [J], 李琳;李坤;王福强;丁宁;常明5.绿色荧光蛋白融合人核糖核酸酶抑制因子表达载体pEGFP-C1-hri的构建及鉴定[J], 李坤;田余祥;于丽华;樊建慧;杨帆;崔秀云因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
基础医学与临床Basic & Clinical MedicineMay 2021Vol.41 No.52021年5月 第41卷第5期文章编号：1001-6325(2021)05-0653-08 研究论文RNA 靶向的CRISPR/CasRx 系统在小鼠精原细胞系GCl-spg 中的应用李梦真，柳 俊，邹定峰，缪时英，王琳芳，宋伟，李凯**收稿日期：2021-01-26 修回日期：2021-03-20基金项目：国家自然科学基金(31970794,32000586)* 通信作者(corresponding author) ：likai@ (中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室，北京100005) 摘要：目的探究CRISPR/CasRx 介导的RNA 水平的基因敲降在小鼠精原细胞系GCl-spg 的应用。
方法利用同源重组的方法构建 EFla core promoter. CasRx. SV40. U6. DRs 表达质粒(CasRx-gRNA)和 EFla. EGFP,EFla. mCherry 、EFla. tdToamto 3种荧光蛋白表达质粒。
在人胚肾细胞系HEK-293T 内瞬时转染3种荧光蛋白表达质粒和CasRx-gRNA 表达质粒，通过荧光强度、Western blot 检测外源基因(荧光蛋白、EGFP 和mCherry)的敲降情况。
在HEK-293T细胞内转染CasRx-gRNA,通过q-PCR 检测内源基因mRNA 和IncRNA 干扰后的表达水平。
在小鼠精原细胞系GC1 内瞬时转染外源基因eg 加、mCherry 和CasRx-gRNA 表达质粒并通过以上方法检测外源基因(荧光蛋白)沉默效率。
结 果 成功构建了 CasRx-gRNA 和3种荧光蛋白表达质粒。
在HEK-293T 细胞内CRISPR/CasRx 介导的RNA 干扰外源基因(e 曲、mCherry )和内源基因(mRNA 、lncRNA )后，表达水平均显著下调(P<0.01)o 在小鼠精原细胞系GC1内验 证CRISPR/CasRx 系统,可有效和特异敲降外源基因e 加、mCherry 。
重组的脱氧核糖核酸酶 i
重组的脱氧核糖核酸酶I（Recombinant Deoxyribonuclease I）是一种由人工合成基因产生的脱氧核糖核酸酶I（DNase I）。
DNase I是一种内切酶，可以切割DNA链上的磷酸二酯键，使DNA分子断裂。
重组的DNase I与天然源的DNase I在结构和酶活性方面相似。
重组的DNase I广泛用于分子生物学实验中的DNA样品的净化和处理。
它可以通过降解外源DNA的方式，防止DNA污染和交叉污染，在PCR、基因克隆、酶切、核酸杂交、测序等实验中起到重要作用。
此外，重组的DNase I还可以用于细胞培养中的DNA消化，帮助提取高质量的RNA。
重组的DNase I具有高纯度、高特异性和高稳定性的优点，可以根据需要调节浓度和反应条件。
它被广泛应用于基因工程、生物医学研究和临床诊断等领域。
Ribonuclease A(核糖核酸酶A)是一种具有重要生物学功能的酶。
它是一种双链RNA裂解酶，能够水解RNA分子，并在细胞内发挥重要的生物学作用。
Ribonuclease A对生物体内核酸的降解具有重要的生理和生物学功能，因此在医学和生物领域具有广泛的应用价值。
等电点是Ribonuclease A这种酶的一个重要性质，等电点则是指在溶液中，蛋白质或酶带有零净电荷的pH值。
在等电点时，Ribonuclease A通常会失去其催化活性。
让我们来了解一下Ribonuclease A的基本性质和生物学功能。
Ribonuclease A是由胰脏中分泌的一种酶，在细胞内起到水解RNA分子的作用。
在细胞内，RNA是一种非常重要的核酸分子，参与了蛋白质的合成和调控等重要生物学过程。
而Ribonuclease A作为一种能够水解RNA的酶，对细胞内RNA的代谢具有重要的调控作用。
Ribonuclease A也在抗菌和免疫反应等生理过程中发挥着重要作用。
对Ribonuclease A的研究不仅有助于深入了解细胞代谢和免疫机制，还具有重要的生物医学价值。
让我们来探讨Ribonuclease A的等电点及其意义。
等电点是指在溶液中，蛋白质或酶带有零净电荷的pH值。
对于具有生物活性的蛋白质或酶而言，等电点是一个非常重要的性质。
在等电点时，蛋白质或酶的分子表面带有零净电荷，因此在溶液中呈电中性。
而对于Ribonuclease A而言，等电点通常位于pH值约为2.5的位置。
Ribonuclease A在等电点时失去了其催化活性，这意味着在pH值等于其等电点时，Ribonuclease A无法对RNA分子进行水解。
这一性质在实际应用中具有重要的意义。
在生物工程和生物医学领域，科学家们常常需要定向地改变蛋白质或酶的活性，以实现特定的生物学或医学目的。
对Ribonuclease A等电点的准确理解可以帮助科学家们更好地设计和构建特定功能的蛋白质或酶，从而推动生物医学和生物工程的发展。
Ribonuclease Inhibitor
重组核糖核酸酶抑制剂
货号：c10777000
浓度：40 U/µl (参见下面的储存注意事项)规格：5,000 Units 储存于 -20℃
产品描述
该重组核糖核酸酶 (RNase) 抑制剂是胰型核糖核酸酶 (如 RN ase A) 的强效非竞争性抑制剂，该产品为猪肝脏核糖核酸酶抑制剂基因在重组大肠杆菌中的表达产物，经亲和层析纯化后得到。
与其他胰型核糖核酸酶抑制剂类似，该产品为酸性蛋白质，分子量约为 52 kDa ，与 RNase A 等胰型核糖核酸酶具有极高的亲和结合力。
该产品是胰型核糖核酸的非竞争性抑制剂，通过与牛胰腺 RNase A 形成 1:1 的复合物来实现其抑制作用。
该产品能够抑制 RNase A 、RNase B 和 RNase C 的活性，但对 RNase 1、RNase T1、RNase T2、S1 核酸酶和 RNase H 的活性没有抑制作用。
储存缓冲液
20 mM Tris-HCl (pH 8.0)、50 mM KCl 、0.5 mM EDTA 、8 mM DTT 及 50% (v/v) 甘油。
储存注意事项
避免将产品放置于温度剧烈变化的环境中，使用时建议将该产品放置于冰盒内或冰浴上，使用完毕后应立即放置于 -20℃ 冰箱内保存。
此核糖核酸酶抑制剂需要 1 mM DTT ，以维持活性。
该产品仅适用于实验室研究使用。
注意：不适用于诊断用途。
该产品在诊断或者其他临床应用上的安全性和有效性方面尚未经过验证。
质量控制单位定义：一个活性单位为抑制5 ng RNase A 50%活性所需的核糖核酸酶抑制剂的量。
此活性是通过检测该产品抑制RNase A 水解胞嘧啶 2’, 3’-环单磷酸的效率来测定的 (1)。
纯度：经12.5%SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定，该核糖核酸酶抑制剂的纯度高于90%。
比活性 80,000 units/mg 。
核酸内切酶 (切口) 分析：分别将50、100 和200 单位的该核糖核酸酶抑制剂与1 µg φX174 RF DNA 混合，37℃ 孵育60 分钟，与对照组 (未加入任何核糖核酸酶抑制剂) 相比，未观察到 DNA 被切为开放环状 (II 型) 或线性 (III 型)。
RT-PCR ：与对照批号组相比，该核糖核酸酶抑制剂对PCR 产物确无抑制作用。
应用cDNA 合成：在加入到反应混合液体系 (40 units/20 µl 反应混合液) 中时，该核糖核酸酶抑制剂能够保护mRNA 不被降解，从而提高总cDNA 产量，包括全长cDNA 在总cDNA 中的百分比。
RT-PCR ：该核糖核酸酶抑制剂与RT-PCR 中所使用的所有酶能够兼容。
例如，该产品曾应用于基于Elongase ®酶反应混合物的长时间RT-PCR 反应中 (40 units/20 µl 反应混合液)。
体外转录：研究表明，在使用T3、T7 和SP6 RNA 聚合酶进行全RNA 体外转录实验中，该核糖核酸酶抑制剂可有助于获得更多完整的RNA 分子 (20-40 units/10 µl 反应混合液)。
Blackburn, P. (1979) J. Biol. Chem . 254, 12484-12487.
企业名称：上海立菲生物技术有限公司 (原上海英骏生物技术有限公司)
工厂地址：北京经济技术开发区荣昌东街7号隆盛工业园203
邮编：100176
技术支持热线：800 820 8982 或 400 820 8982
技术支持邮箱：cntechsupport@ 参考文献
仅限于科研使用，请勿用于动物或人类的疾病诊断及治疗。
