紫外分光光度法测定维生素B1片含量以及方法验证-2

紫外分光光度法测定维生素B1片的含量李刚（四川大学华西药学院四川成都）摘要本试验采用紫外分光光度法对维生素B1片的含量进行测定，对此法进行方法验证，证明了此法具有专属性高，回收率高、精密度高，线性好、测定范围宽的特点，并对数据处理方法进行了比较，发现采用对照品比较法进行数据处理受仪器波动影响较小，测定结果可信度较高。

关键词维生素B1 紫外分光光度法含量测定方法验证对照品比较法维生素B1及其制剂及其制剂常采用的方法有非水滴定法，紫外分光光度法和硫色素荧光法。

中国药典用非水溶液滴定法测定原料药，片剂和注射剂采用紫外分光光度法，USP采用硫色素荧光法。

采用非水溶液滴定法可能受到氢卤酸盐的干扰，对操作人员要求较高，采用硫色素滴定法不受氧化破坏产物的干扰，测定准确但操作繁琐，且荧光测定受干扰因素较多，本实验采用紫外分光光度法进行含量测定。

1实验装置及试剂1.1 仪器 BS210S型天平，UV751GD型紫外/可见分光光度计。

1.2 实验材料维生素B1片（来源：成都第一制药，规格：1--00片*10mg，批号：061204），维生素B1标准品（分析纯），维生素B1对照品（200ug/ml，2.0mg/ml），维生素B1标准溶液（0.250mg/ml），空白辅料，盐酸溶液（9→1000）。

2 实验方法2.1 测定波长的选择：分别称取维生素B1标准品，维生素B1片粉，维生素B1空白辅料各10mg，平行配制：加盐酸溶液适量溶解后，用盐酸溶液定容至50ml，摇匀后精密量取1ml，盐酸溶液定容至25ml，摇匀后在紫外/可见光区进行全波长扫描，测得不同波长下的吸光度值。

2.2 线性与范围：取五个100ml的容量瓶，精密量取维生素B1对照品（200ug/ml）4.00、5.00、6.00、7.00、8.00ml，用盐酸溶液定容至刻度，摇匀，每瓶中对照液浓度分别为8.00、10.00、12.00、14.00、16.00ug/ml，在246nm波长处进行吸光度测定，以吸光度与维生素B1对照液浓度进行最小乘法回归分析，得到回归方程，此为标准曲线。

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摘要 ： 目的 ： 用 紫 外 分光 光 度 法测 定 维 生素 Ｂ 采 １片 中维 生 素 Ｂ 的 含 量 并 对 该 方 法进 行 验 证 。方 法 ： 紫 外 分 光 光 度 法 在 ２ ６ ｍ 处 测 定 吸 光 １ 用 ４ｎ 度 ， 用 百分 吸 收 系数 法和 对 照 品 比较 法 计 算 。结 果 ： 紫 外 分 光光 度 法测 定 维 生素 Ｂ 含 量的 方 法专 属 性 好 ； 并 用 当维 生 素 Ｂ 浓度 在 ７ ５ １． ｐ ／ １ ． ～ ７ ５ ｇ ｍｌ 范 围时 线 性 关 系 良好 ， 归 方程 为 Ｙ一０ ０ １ Ｘ＋０ ０ ９ ， 性 相 关 系数 ｒ ； 均 回 收 率 为 ９ ． ０ ， Ｄ＝０ ４ ； 密 度 为 ０ ７ ； 百 分吸 收 回 ．４Ｉ ．０４线 一１ 平 ９ ６ ＲＳ ．５ 精 ．６ 用 系数 法计 算 平 均 标 示量 为 １ １ ７ ， 对 照 品 比 较 法 计 算平 均 标 示 量 为 １４ ３ 。结 论 ： 紫外 分 光 光度 法测 定 维 生 素 Ｂｌ 中维 生 素 Ｂ ０ ． 用 ０ ． 用 片 ｌ的 含 量 操

紫外分光光度法测定维生素B1片的含量一、实验目的1、掌握紫外分光光度法的测定原理；2、了解维生素B1片的含量测定方法；3、掌握溶液制备、仪器操作及数据处理方法。

二、实验原理维生素B1 （Thiamine）是维生素B群中十分重要的一种，对人体神经系统、消化系统、心脏以及肝脏的功能有着重要的影响。

现代医学认为缺乏维生素B1易引起多种神经系统和消化系统疾病，如多发性神经炎、骨骼肌炎、胆汁淤积等。

因此，测定维生素B1 的含量对维生素B1 的药品质量控制及医学研究具有重要的意义。

紫外分光光度法是一种比较常用的药物质量控制方法。

维生素B1 的主要吸收峰位于紫外波长区域，适合进行紫外分光光度法测定。

维生素B1 的紫外吸收峰位于约265nm处（ε=7.5×10^3～7.9×10^3L·mol^-1·cm^-1），故以此为测定波长。

按维生素B1的相对分子质量和吸光系数计算，摩尔吸光系数ε较小，因此，采用长程比对测定法可以有效地提高测定的精度和准确性。

三、实验步骤(一) 试样的制备称取维生素B1片约0.15g（准确称量），将其放在25mL量瓶中，用0.1mol/L的盐酸溶液溶解，摇均并用0.1mol/L盐酸溶液定容至刻度。

(二) 光度计的操作开启UV-2550型紫外分光光度计的电源，按照使用说明将紫外探测器调至265nm，并进行光谱校验。

进入光度计工作界面，将石英比色皿放入样品室，调节光程，读取空白吸光度。

取紫外分光光度计检测轨道上的纯水作为空白，用0.1mol/L盐酸溶液调整到约pH1.5。

(三) 具体测定操作1、测定工作会进行自动计算，记录吸光度A1。

2、再取一组相同体积的样品溶液，重复第1步操作，记录吸光度A2。

3、若A1、A2之间差异大于0.1，则须重采样求数值，并重复第1、2步操作。

4、根据空白吸光度及上述测定步骤所得的吸光度，计算维生素B1 的含量。

四、实验结果及分析按照上述实验操作，测得A1=0.83，A2=0.85，需进行差异校正，先计算中和点pH：Kb=1.20×10^-6pKb=5.92pH=pKb-log([B]+[BH+])[OH-]=[B][OH-]^2/(C-B)=Kb代入数值得[B]=0.026 mol/LpOH=pKa+log([BH+]/[B])pH=14-pOH从而可得pH=1.5+4.72=6.22校正值：K=（εdA/dl）/X式中X系维生素B1 的摩尔质量，则需要通过水合物计算出来，其分子量为328.81。

维生素1B 片的含量测定一．实验目的1.掌握标准曲线法测定药物含量的方法；2.熟悉紫外—可见光光度计的原理和操作。

二、实验原理维生素B1结构中的嘧啶环为一芳香杂环，具有紫外吸收。

用维生素B1的标准品的稀释浓度梯度溶液测吸光度，得到标准曲线，再根据所测样品的吸光度求浓度， 求出标示量%=S*m W*n *V *Cx *100%三、实验药品及仪器实验药品：维生素1B 片10片，盐酸溶液，维生素B1标准品实验仪器：紫外—可见光光度计，50ml 容量瓶*10，玻璃棒，漏斗，烧杯 四、实验内容及步骤1. 用分析天平精密称取维生素B1标准品10mg ，于小烧杯中加适量稀盐酸溶解，振摇十分钟至完全溶解，转移至50ml 容量瓶用盐酸定容；2. 分别精密量取溶液1ml ，1.5ml, 2ml,2.5ml, 3ml 于50ml 容量瓶，加盐酸稀释至刻度，用紫外—可见光光度计测得其对应吸光度，得维生素B1标准曲线； 3取维生素B1药片10片，于分析天平称重，得平均片重`W=10m； 4.研细（用研钵），用分析天平精密称取约0.13g （相当于维生素1B 10mg ），于小烧杯中加适量稀盐酸溶解，振摇十分钟至完全溶解，转移至50ml 容量瓶用盐酸定容，摇匀。

5. 用干燥滤纸滤过，精密量取滤液2mL ，置另一50mL 量瓶中，再加盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。

再做平行溶液三份；6.分别测三组样品的吸光度，再依据标准曲线求得浓度，再依据公式求得标示量。

五、注意事项1. 仪器的准备（1）开启电源，使仪器预热20分钟；（2）开机前，先确认仪器样品室内是否有东西挡在光路上，以免影响仪器的自检； 2. 仪器的操作步骤（1）设置波长（246nm ）； （2）测定；（3）数据记录与处理。

3. 将比色皿洗净装盒，关机；4. 维生素1B 的紫外吸收峰随溶液pH 的变化而不同，因此要严格控制溶液的pH 值。

5. 本品含维生素1B （HCl OS ClN H C 41712）应为标示量的90.0%~110.0%。