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环境生物技术实验一 活性污泥和土壤脱氢酶活性的测定一、实验目的了解活性污泥脱氢酶活性的测定原理及方法二、实验原理活性污泥和土壤中的微生物对于有机物的降解，实质上是微生物经过一系列的酶的催化作用下的生物氧化还原反应。
参加生物氧化的重要酶为氧化酶和脱氢酶二大类，参加生物氧化的重要酶为氧化酶和脱氢酶二大类，其中脱氢酶类尤为重要。
其中脱氢酶类尤为重要。
其中脱氢酶类尤为重要。
其中脱氢其中脱氢酶能使氧化有机物的氢原子活化并传递给特定的受氢体实现有机物的氧化和转化。
如果脱氢酶活化的氢原子被人为受氢体接受，就可以通过直接测定人为受氢体浓度的变化间接测定脱氢酶的活性，就可以通过直接测定人为受氢体浓度的变化间接测定脱氢酶的活性，表征生物表征生物降解过程中微生物的活性。
因此，脱氢酶的活性可以反映处理体系内活性微生物量以及其对有机物的降解活性，以评价降解性能。
解活性，以评价降解性能。
脱氢酶活性测定方法有MB.2H 定性分析法和TTC 比色法，目前用得较多的为氯化三苯基四氮唑（TTC ）比色法。
利用TTC 作为人为受氢体，其还原反应方程式如下：作为人为受氢体，其还原反应方程式如下：无色的TTC 受氢后变成红色的TF （三苯基甲月替），根据红色的深浅，测出相应的光密度（OD 值），从而计算TF 的生成量，求出脱氢酶的活性。
的生成量，求出脱氢酶的活性。
三、实验设备及药品1．紫外-可见光分光光度计、分析天平、50mL 离心管、50mL 具塞三角瓶、50mL 比色管、甲醛、丙酮、4mg/mL 的TTC 溶液（2，3，5-氯化三苯基四氮唑，分析纯）、10 %硫化钠（Na 2S 分析纯）、无氧水（0.36% 亚硫酸钠，分析纯）、连二亚硫酸钠( Na 2S 2O 4 ，分析纯)、Tris （三羟甲基氨基甲烷，分析纯） 2．活性污泥悬浮液或土壤悬浮液。
．活性污泥悬浮液或土壤悬浮液。
要点：(1) 所有操作应当尽量在避光条件下进行。
脱氢酶最适反应条件, 温度温度 30～37℃ , pH 值7.4～8.5。
耗氧速率测定
1.实验材料与药剂
具有搅拌功能的10L左右圆柱型封闭式反应器一个，曝气设备一套，温度计一个，pH测定仪一台，DO测定仪一台，计时器一个。
2.方法
（1）取8L活性污泥倒入反应器内；
（2）对活性污泥进行曝气，待其DO达到饱和状态（7-9mg/L）；
（3）反应器停止曝气，只进行搅拌，同时开始每隔30s记录一次活性污泥中DO的浓度，绘制DO变化曲线图，再根据测得的反应器中的污泥浓度计算污泥耗氧速率。
3.数据记录
3.1 DO浓度
表1-1耗氧速率数据记录表
3.2 试验参数
表1-2反硝化反应试验参数记录表
4.数据分析
以时间为横坐标(单位为h)，DO浓度为纵坐标(单位mg/L)，作图，根据不同试验情况，得到1-3条直线，则
耗氧速率=斜率/MLVSS
单位为mg O2/(g VSS·h)
图1-1耗氧速率曲线。
《环工综合实验（2）》（好氧活性污泥培养综合实验）实验报告专业环境工程班级环工1301姓名指导教师余阳成绩东华大学环境科学与工程学院实验中心二0一六年5月高碑店污水处理厂的工艺流程图四、实验步骤1、活性污泥指标的测定：取城市生活污水处理厂曝气池的活性污泥，测定MLSS,SV30,SVI并镜检；2、小型间歇式活性污泥反应器的准备：3L反应器1个，曝气系统一套，葡萄糖或乙酸钠模拟废水（自配）；3、接种：向反应器中加入适量的活性污泥菌种（MLSS为3g/L）；4、培养：配制污泥培养营养液，COD值自选，加入到活性污泥菌种中，反应器中加水至体积为3L。
计算负荷，溶解氧值自定（第一天）；5、测定活性污泥指标及有机物去除率，沉淀，排水1.5L（或排泥维持MLSS稳定），加入营养液1.5L （COD值自选），曝气，溶解氧自定（第二天）；6、测定活性污泥指标及有机物去除率（第三天）；要求：维持MLSS稳定(3g/L)，不发生污泥膨胀，测定实际污泥增长量，计算污泥泥龄；五、实验记录及原始数据取样体积为100ml第一天原水（添加营养液后）COD（经测定）为406.7mg/L烘干滤纸的质量为0.504g 污泥及滤纸的总重量1.03g时间 1 3 5 10 15 20 30V 98.0 72.4 62.9 49.3 41.5 38.0 31.5坩埚14.3325g 坩埚及残余物14.5318g污泥均匀分散视野范围内，污泥之间相互粘结，呈现菌胶团状，活性污泥在菌胶团之间摆动鞭毛游动，游动之时吃有机物，游动速度较快，体积变大，改变观察区域，不同形状的微生物都在进食。
第二天烘干滤纸的质量为0.49g 污泥及滤纸的总重量0.76g硫酸亚铁铵浓度测定序号 1 2 3 平均值用量（硫酸亚铁铵）18.68 18.65 18.70 18.677C硫酸亚铁铵=0.0535MCOD的测定项目空白空白水样水样用量18.53 18.70 17.70 17.30时间 1 3 5 10 15 20 30V 85.6 39.8 31.2 24.9 21.5 19.9 18.7原水（经过一天碳化）为95.87mg/L原水（添加营养液后）COD （经测定）为432.3mg/L第三天烘干滤纸的质量为0.49g 污泥及滤纸的总重量0.78gC 硫酸亚铁铵=0.0578M COD 的测定项目 空白 空白 水样 水样 用量 17.2517.316.716.7所以空白用量为17.28ml;水样16.7ml累枝虫（第三天） 盖纤虫（第三天）时间 1 3 5 10 15 20 30 V78.047.538.529.024.521.518.5微生物在菌胶团之间游动，但是上图左边的微生物体积巨大，体内的两个核（形如液泡）也在运动，前进进食六、数据处理及结论第一天MLSS和MLVSS代表的是污泥浓度的宏观指标，不能完全代表污泥中具有活性的微生物的浓度；但其测定方便，且可以满足评价污泥量的工程要求,作为设计参数。
实验六厌氧污泥活性的测试水处理教案实验六：厌氧污泥活性的测试教学目标：1.了解厌氧处理工艺及其在污水处理中的应用；2.掌握厌氧污泥活性的测试方法；3.进一步理解厌氧污泥的性质、成分及其对废水的净化作用。
实验器材和试剂：1.厌氧滗水池；2.厌氧活性污泥样品；3.BOD检测仪或生化需氧量测定仪；4.厌氧滤水器或滤纸；5.恒温水浴槽；6.玻璃量筒、烧杯等实验器材；7.酚硫酸试剂、硫酸试剂、硫酸亚铁试剂等。
实验步骤：1.准备活性污泥样品：将厌氧活性污泥样品放置在密封容器中，采用氮气进行排空，并在常温下保存备用。
2.预处理：将活性污泥样品与废水按一定比例混合，将混合液倒入厌氧滗水池中，并加盖，控制环境为无氧状态。
3.检测厌氧污泥的生化需氧量（BOD）：a.取一定量的滗水池内样液，放入BOD检测仪中，设定检测时间并测出BOD5值。
b.将检测得到的BOD值除以废水的混合液的体积，得到单位体积废水在厌氧污泥中耗氧量。
4.测试厌氧污泥中的硫酸还原菌活性：a.取一定量的活性污泥样品，加入恒温水浴槽中，控制温度为35℃。
b.取一定量的恒温活性污泥样品，加入酚硫酸试剂，振荡混匀，置于恒温水浴槽中培养1小时，并定时振荡。
c.培养完毕后，取适量培养液与硫酸亚铁试剂混合，产生黑色沉淀。
d.等沉淀沉淀后，过滤液体，将沉淀重量除以活性污泥样品的干重得到单位干重中的硫酸还原菌数量。
5.分析实验结果：根据实验结果，分析厌氧污泥的活性、废水的净化效果等。
注意事项：1.实验中应密封容器，尽量避免气泡进入样品；2.检测厌氧污泥中的硫酸还原菌活性时，应控制恒温水浴槽的温度为常温；3.实验操作过程中要注意安全，涉及有毒试剂时需佩戴防护手套和眼镜。
实验结果分析：通过测试厌氧污泥的生化需氧量（BOD）和硫酸还原菌活性，可以评估厌氧污泥的活性及其在废水净化中的效果。
BOD值反映了厌氧污泥中微生物对废水中有机物质的降解能力。
而硫酸还原菌活性则反映了厌氧污泥中硫酸还原菌的数量和活性，硫酸还原菌是厌氧处理过程中起到重要作用的微生物。
活性污泥质量好坏的判断标准！污水中呈胶体状态的有机物首先被吸附到活性污泥絮提上，并进一步被吸附到细菌表面附近才能被分解代谢；活性污泥的生物活性是指污泥絮体内的微生物分解代谢有机污染物质的能力；只有沉降性能较好的活性污泥才能在二陈池进行有效的泥水分离。
只有活性污泥具有良好的浓缩性能，才能在二沉池得到较高的排泥浓度和回流污泥浓度。
高质量的活性污泥主要体现在以下四个方面：良好的吸附性、沉降性、浓缩性和较高的生物活性。
具体标准如下七个（颜色、气味、SOUR、SV30 、SVI、沉降速度、生物相）1、颜色和气味正常的活性污泥外观为黄褐色，可闻到土腥味。
微生物分解能力越强，土腥味越浓。
具备以上特点的不一定正常，但不具备的也不一定是不正常的。
进水颜色与气味和水质关系很大，尤其是工业废水或者参有工业与生活污水混合的废水中，进水颜色和气味主要是进水工业废水来决定的！2、SOUR活性污泥的耗氧速率SOUR活性污泥的耗氧速率是指单位重量的活性污泥在单位时间内所能消耗的溶解氧量，一般用SOUR表示，单位常采用mgO2/（gMLVSS•h）。
SOUR也称为活性污泥的呼吸速率或消化速率，它是衡量活性污泥的生物活性的一个重要指标。
如果F/M较高，或SRT较小，则活性污泥的生物活性也较高，其SOUR值也较大。
反之，F/M较低，SRT 太大，其SOUR值也较低。
SOUR在运行管理中的重要作用在于指示入流污水是否有太多难降解物质，以及活性污泥是否中毒。
一般说，污水中难降解物质增多，或者活性污泥由于污水中的有毒物质而中毒时，SOUR值会急剧降低，应立即分析原因并采取措施，否则出水会超标。
活性污泥工艺的SOUR一般为8～20 mgO2/（gMLVSS•h）之间。
SOUR测定时注意事项：应注意保持测定时活性污泥的温度。
温度对SOUR值影响很大，不同温度下测得的SOUR是没有可比性的，也就不能利用SOUR值的变化有效地指示活性污泥的生物活性。
专业经营各类实验仪器、科研仪器设备
活性污泥耗氧速率测定仪
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活性污泥分析仪器是实时活性污泥分析仪器，安全等级符合EN61010-1，实时显示细菌的真实健康状况，在数分钟内测出活性污泥的耗氧速率、DO，临界氧浓度、温度和沉淀特性，因此，利用活性污泥分析仪器能随时监控，调节生物处理状态。
下面南京欧熙就来给大家介绍一下专业的仪器设备有哪些?
美国Challenge公司的AER-208 活性污泥呼吸仪/有氧/厌氧呼吸仪/微生物降解呼吸仪
产品概述
美国Challenge公司的AER-208活性污泥呼吸仪/有氧/厌氧呼吸仪适用于环境及微生物领域，同时也适用于土壤或固体废弃物的评估、堆肥和生物降解物质的研究。
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专业经营各类实验仪器、科研仪器设备全球数以百计的环境及微生物研究的实验室中已经成为主要的研究工具。
Challenge公司
时刻与技术人员保持着密切的沟通，听取研究者的实验需求，以使我们的技术更能从根本
上满足用户的需求。
应用领域
1、耗氧速率(OUR)
2、活性污泥处理过程中耗氧速率设置点的控制
3、快速BOD5
4、毒性的评估
5、评估治疗急性毒性的植物
6、废水样品的生物降解试验
7、评估营养
8、混合废水生物降解动力学
9、化学制品固有的生物降解动力学
10、土壤及堆肥样品的耗氧量
详细资料
AER-208活性污泥呼吸仪/有氧/厌氧呼吸仪由控制主机，反应器，多通道Flow Cell
组成。
在做有氧/厌氧试验时，反应器产生的气体流入Flow Cell,在Flow Cell中形成气泡，这些气泡在流过Flow Cell中的毛细管时，激活红外计数器，气泡的数量被记录在与之相
连的计算机中，从而得到气体的实时体积曲线和速率。
美国Challenge公司的Flow Cell，采用专利技术，每个Flow Cell均经过标定，使
得每个气泡的体积为标准体积，通常为0.05ml左右。
毛细管每秒最多允许通过2-3个气泡，速率可达500ml/Hr
技术参数
有氧厌氧
专业经营各类实验仪器、科研仪器设备精度： 0.06mg 0.05 ml
速率: 650 mg/Hr500 ml/Hr
通道数量: 8个，可以扩展到16个或24个
电源： 110/240V,50/60HZ
南京欧熙科贸有限公司专业经营各类实验仪器、科研仪器设备，代理各大国际知名品牌仪器，如日本PREDE全自动太阳光度计、天空成像仪、太阳跟踪系统、德国Lambrecht气象站、风速风向传感器、光照传感器、辐射传感器、美国RSA有氧厌氧呼吸仪/活性污泥呼吸仪/微生物降解呼吸仪/海水淡化呼吸仪、德国HS ENGINEERS电磁海流计、保加利亚milkscope牛奶分析仪、德国Avisoft Bioacoustics动物声谱分析仪、声波录制仪、西班牙Marine InstrumentsMLi卫星追踪表层漂流浮标、法国THALOS渔用浮标、澳大利亚 Next Instruments 近红外谷物分析仪、法国GBX水分活度仪、美国FTC 质构仪、美国National揉混仪/和面仪/酵母活性产气率测定仪、意大利ALVIM生物膜系统等，服务于环境，气象、交通、海洋、食品，生命科学、工业、制药以及商业实验室等众多领域。
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