发酵罐溶氧速率测定实验

发酵罐接种和取样的实验操作流程-回复【发酵罐接种和取样的实验操作流程】在微生物发酵工程中，接种与取样是两个至关重要的环节，它们直接影响到发酵过程的效率、产物质量以及对发酵过程的控制。

以下将详细阐述发酵罐接种和取样的实验操作流程，确保实验的精确性和安全性。

一、发酵罐接种操作流程1. 前期准备：- 菌种活化：首先，需从冷冻保藏库中取出待接种的菌株，在适宜的培养基上进行复苏及活化，确认菌种活性良好。

- 设备消毒：彻底清洗并灭菌发酵罐及相关管道、接种枪等器材，确保无菌环境，防止杂菌污染。

2. 菌液制备：- 扩大培养：将活化的菌种接种于小规模液体培养基中进行扩大培养，至对数生长期或稳定期，保证菌体数量足够且活力旺盛。

- 浓度调整：通过离心浓缩或稀释等方式，将菌液浓度调整至适合接种的浓度，一般根据发酵工艺要求设定。

3. 接种操作：- 连接系统：确保发酵罐与无菌空气过滤系统、冷却水循环系统等正常连接，并开启搅拌装置预热发酵罐内环境至合适温度。

- 无菌接种：在严格的无菌条件下，使用无菌接种枪或设备将菌液注入已灭菌的发酵罐中，操作过程中尽量避免接触非无菌部位。

- 启动发酵：接种完毕后，立即开始调控发酵参数（如温度、pH值、溶解氧、搅拌速度等），正式进入发酵阶段。

二、发酵罐取样操作流程1. 取样前准备：- 工具消毒：取样瓶、移液器、试管等所有接触样品的器具均需经过高温高压灭菌处理，确保无菌状态。

- 确定取样时间点：按照实验方案或发酵进程设计，选择合适的取样时间点，以便观察和分析发酵过程中的生理变化和代谢产物积累情况。

2. 取样操作：- 停止搅拌：为防止取样瞬间造成菌体分布不均，通常在取样前短暂停止搅拌，但具体是否停止应视发酵工艺特点而定。

- 无菌取样：迅速打开取样口，用预先准备好的无菌取样瓶或管插入发酵液中抽取一定体积的样品，整个过程应在无菌罩下进行。

- 样品转移：立即将取样瓶内的样品分装至其他无菌容器中，用于后续的生化指标检测、细胞计数或其他分析实验。

发酵工程实验报告年级专业姓名学号实验题目微生物工程实验（一组）一、实验目的1.熟练掌握无菌操作技术，了解生物发酵过程中种子的扩培过程；2.掌握小型发酵罐管路消毒、空消、实消、菌种培养等技术；3.学习掌握小型发酵罐接种、取样操作系统；4.学习使用糖度仪，掌握血球计数板法；5.掌握两种生长曲线的测定方法：干重法和血球计数板法，绘制生物基质的相关曲线。

二、实验原理发酵罐，是进行液体发酵的专用设备。

发酵罐配备控制系统，它主要是对发酵过程中的各种参数如温度、pH、溶解氧、搅拌速度、空气流量、补料、泡沫水平等进行设定、显示、记录以及对这些参数进行反馈调节控制。

为了解发酵过程中菌体的生长及对培养基的利用情况，需在发酵过程中定时地取样测定，包括对菌体进行计数、测定不同时期的干重以及糖度的变化。

干重，是指细胞除去全部自由水后的重量，为80℃下烘干一定时间后的恒重，即失水后的质量。

可用离心或过滤法测定。

一般干重为湿重的10-20%。

在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1-5次，进行干燥。

干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80℃或40℃下真空干燥，干燥后称重。

血球计数板法，血球计数板是一种有特别结构刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，中央有一短横沟和两个平台，两嵴的表比两平台的表面高0.1mm，每个平台上刻有不同规格的格网，中央0.1mm面积上刻有400个小方格。

通过显微镜观察，统计一定大格内微生物的数量，即可算出1毫升菌液中所含的菌体数。

微生物生长曲线，是以微生物数量(活细菌个数或细菌重量)为纵坐标，培养时间为横坐标画得的曲线。

一般说，微生物(细菌)重量的变化比个数的变化更能在本质上反应出生长的过程。

曲线可分为三个阶段即生长率上升阶段(对数生长阶段)、生长率下降阶段及内源呼吸阶段。

三、实验材料及器材1.菌种酵母菌（saccharomyces）2.药品蛋白胨、葡萄糖NH4Cl、酵母浸粉、蒸馏水、种子液、无菌蒸馏水、泡敌3.培养基种子培养基发酵培养基4.仪器设备摇床1台；超净工作台6台；电炉2个；在位机械搅拌式发酵罐4台；三角烧瓶；小试管；酒精棉球若干；工业用酒精一瓶；离心机1台；振荡器6台；烘箱1台；显微镜3台玻璃棒12个；50ml量筒6个；500ml量筒6个；100ml烧杯6个；500ml烧杯6个；250ml三角烧瓶2个；500ml三角烧瓶 6个；接种环6个；酒精灯6个；棉线、纱布、报纸若干；天平6个；蒸馏水瓶6个；擦镜纸若干；滤纸若干；离心管若干；血球计数板 6个；试管架12；棉线手套4双等四、实验步骤(一)菌种的扩培1.菌种的活化（已准备）（1）将酵母菌接种于种子培养液中，摇瓶培养，180rpm，28℃，48h 。

微生物工程工艺原理实验大型综合实验实验题目：小型发酵罐的使用、微生物发酵过程及其条件控制一、实验目的1 了解小型发酵罐的基本结构。

2 掌握发酵罐的使用及其大规模培养微生物的方法。

3 掌握工业种子培养基、发酵培养制备过程4 巩固2种培养基的作用与要求。

5 巩固微生物发酵生产目的产物的工艺流程与基本操作。

二、实验原理种子培养基是用于使孢子萌发，菌体生长繁殖的培养基。

培养基营养要求速效C源，如葡萄糖；速效N源，铵盐、尿素、玉米浆、酵母膏、蛋白胨等，培养基应即应使孢子萌发与菌丝迅速生长，具有强的生活力，也应注意培养基的原料廉价。

最后一级培养基的成分应接近于发酵培养基，培养的种子在接种至生产罐后可缩短新条件下的适应期。

生物反应器是生物技术开发中的关键性设备，一个微生物技术产品从实验室到工业生产的开发过程中，需要逐级放大培养（依次进行小试，中试，生产），使得大型发酵罐的性能与小型发酵罐接近，以使大型发酵罐的生产效率与小型发酵罐的相似。

因为在不同大小的发酵罐中进行的生物反应过程虽然是相同的，但在质量、热量和动量的传递上却会有明显的差别，从而导致生物速率的差别。

再用压缩空气控干。

反应器的系统组成分为蒸汽系统、温度系统、空气系统。

发酵培养基是生产上应用培养微生物、直接生产目的产物的培养基，要求培养基的原料应价格低廉、易得、性能稳定。

便于采购运输，适合大规模储藏，能保证生产的需求。

培养基能够满足产物最经济的合成。

对微生物的生长繁殖和代谢无抑制作用的物质。

微生物的代谢产物无有害物质。

所选用的培养基应能满足总体工艺的要求。

如不应该影响通气、提取、纯化及废物处理等；发酵后所形成的副产物尽可能的少。

生产上杂菌污染使生物反应的基质或产物，因杂菌的消耗而损失，造成生产能力的下降；杂菌会产生代谢产物，这就使产物的提取更加困难，造成得率降低，产品质量下降。

有些杂菌会分解产物，使生产失败。

杂菌大量繁殖后，会改变反应液的pH值，使反应异常；如果发生噬菌体污染，生产菌细胞将被裂解，使生产失败。

生物工程设备中溶氧系数的测定方法在生物工程的世界里，有一个东西可以说是“生命之水”，那就是氧气。

没错，就是我们日常生活中习以为常的空气中的氧气。

在各种生物反应中，氧气可是个不可或缺的角色，尤其是在那些需要氧气的微生物和细胞培养中。

今天，我们就来聊聊在生物工程设备中，如何测定这个“生命之水”的溶氧系数。

相信我，这可是门大学问啊！1. 什么是溶氧系数？溶氧系数，简单来说，就是水中溶解氧的含量。

这就像你喝的水，水里如果没氧气，那就有点“死水一潭”的感觉了。

溶氧系数的高低直接影响着生物的生存和生长，就像我们人类需要呼吸新鲜空气，水里的小生物也需要氧气。

溶氧系数一般用毫克每升（mg/L）来表示，通常来说，110 mg/L的氧气含量适合大多数的细菌和细胞培养，而对于一些要求更高的生物，可能需要更多的氧气。

1.1 溶氧系数的重要性哎呀，说到重要性，那真是无处不在。

试想一下，如果在一个发酵罐里，溶氧系数过低，细菌们就会“憋屈”，生长缓慢，甚至出现死亡，整场“派对”就会变得无趣极了。

而如果溶氧系数太高，又可能导致一些有害物质的产生，让反应变得不稳定。

所以，掌握好这个溶氧系数，就像掌握了“命门”，至关重要呀！1.2 溶氧测定的基本方法那么，如何测定这个溶氧系数呢？这就要提到几种常用的方法了。

首先最传统的就是“溶氧电极法”，也叫做极谱法。

这种方法通过电极在水中测量氧气的浓度，过程简单直接，精度也不错。

其次还有“化学滴定法”，不过这个方法需要一些化学试剂，对实验者的操作要求比较高，有点“难度系数”。

2. 溶氧测定的步骤2.1 准备工作首先，你得准备好实验设备，像是溶氧电极、培养液、以及一些必要的试剂。

别忘了，安全第一，做好实验室的安全措施，保护好自己！然后，你得把溶氧电极插入到培养液中，等待一会儿，让电极和液体的反应达成平衡。

这就像是给电极一点时间，去“感受”水中的氧气。

2.2 测量过程接下来就是正式的测量啦！当电极与培养液达到平衡后，仪器就会显示出一个溶氧值。

发酵罐溶氧电极校准方法1. 引言嘿，朋友们！今天咱们聊聊发酵罐里的“溶氧电极校准”，听起来是不是有点高大上？但别担心，咱们用简单易懂的方式来捋一捋这个事儿。

你可能会想，这溶氧电极跟我有什么关系？实际上，如果你有发酵的项目，比如酿酒、做酸奶，甚至是一些生物制药，这个东西可就跟你息息相关了。

首先，溶氧电极就像发酵罐里的“呼吸器”，它负责监测发酵液里的氧气含量。

要知道，氧气对微生物的生长可重要了，缺氧的环境就像是在煮水时没放盐，味儿就差很多。

所以，保持电极的准确度就显得尤为关键。

那么，校准这个动作就必不可少啦！2. 校准的重要性2.1 为什么要校准？好啦，咱们先来聊聊为什么要校准这个电极。

想象一下，你正在进行一次精心的酿酒过程，结果电极的读数总是跟你的预期差得远，那可真是让人心塞。

校准就好比给电极“打个鸡血”，让它在关键时刻表现得像个超人，确保你能在发酵的过程中把控每一个细节。

2.2 校准的频率那么，校准到底多久做一次呢？就像我们定期体检一样，电极也需要“复查”。

一般来说，建议每个月校准一次，尤其是在温度、压力变化大的情况下，你更要关注哦。

记住，养成习惯是最重要的，别等到出问题了才想着补救。

3. 校准的方法3.1 准备工作行，咱们终于要进入正题了。

首先，准备工作少不了，得确保你有一个新鲜的氧气饱和液体，通常可以用蒸馏水加点饱和氧气，别问我这怎么做，网上教程一大堆，手到擒来！还有，别忘了清洁你的电极，像给爱车洗澡一样，保持清爽，才能让它在关键时刻“出彩”。

3.2 校准步骤接下来，就让咱们开始校准的流程吧！首先，把电极放进准备好的饱和氧气液体里，等一会儿，让它适应环境。

接着，拿出你的校准仪器，按照说明书上的步骤，慢慢调节，直到显示的数值跟你知道的氧气饱和值一致。

简单吧？这就像把鸡蛋煮熟一样，时间到了就完美。

再提醒一下，电极在校准过程中，要时不时摇一摇，别让它“沉睡”。

校准完成后，别忘了记录数据，这可是你日后查阅的宝贵资料哦！有时候，发酵过程就像打麻将，牌局瞬息万变，记录好能帮你下次赢得胜利！4. 结语好啦，朋友们，校准溶氧电极的步骤就到这里了。