1.薄血膜疟原虫形态讲义
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1 目 录
第一章 疟原虫生活史
一、概述
二、人体内发育
三、蚊体内的发育
第二章 疟原虫镜下形态
一、薄血膜中疟原虫形态
二、厚血膜中疟原虫形态
第三章 显微镜使用及维护
一、显微镜的构造
二、显微镜使用
三、使用注意事项
四、显微镜的维护保养
第四章 血片制作与染色
一、血片制作
二、血膜的染色
第五章 疟原虫镜检技术
一、血液
二、血液中各种正常细胞形态
三、薄血膜镜检
四、厚血膜镜检
五、杂质与疟原虫的鉴别
六、疟原虫计数
附录:疟原虫图谱 2 第一章 疟原虫生活史
一、概述
疟原虫是疟疾的病原体。疟原虫为单细胞真核生物,属原生动物亚界顶端复合物门、孢子纲、真球虫目、疟原虫科、疟原虫属。人体疟原虫有4种:间日疟原虫(Plasmodium vivax)、恶性疟原虫(P.falciparum)、三日疟原虫(P.malariae)和卵形疟原虫(P.ovale),依次引起间日疟、恶性疟、三日疟和卵形疟。在我国间日疟较常见,恶性疟次之,但对人体危害较间日疟严重,三日疟偶尔发现,卵形疟已无病例报告。4种人体疟原虫的生物学特征见表1-1。
疟原虫的发育和繁殖,必须通过脊椎动物与昆虫媒介两个宿主,人体疟原虫的宿主是人和按蚊。疟原虫在人体分别寄生于肝实质细胞和血液中的红细胞内,在蚊体内则寄生于蚊胃,最后积聚于唾腺。4种人体疟原虫的生活史基本相同,包括在人体内的红细胞外期和红细胞内期以及在蚊体内的配子生殖和孢子增殖两个阶段。
二、人体内发育
疟原虫在人体内的发育分成肝细胞内的发育和红细胞内的发育两个阶段。
(一) 红细胞外期
按蚊吸人血时,按蚊唾腺中的子孢子随唾液进入人体的末梢血液中,在30分钟内,随血流进入肝脏,在肝实质细胞内发育,进行裂体增殖,此时期称红细胞外期(简称红外期)或肝细胞期(简称肝期),此时期的疟原虫称肝期裂殖体。成熟肝期裂殖体直径为45~60m,内含数以万计的肝期裂殖子。肝期裂殖体成熟致使肝细胞破裂,肝期裂殖子释入血液。不同种疟原虫的此期所需时间不同,从6~12天不等。
薄血膜中4种疟原虫的形态比较
间日疟原虫 恶性疟原虫 三日疟原虫 卵形疟原虫
被寄生红细胞的变化 除环状体外,其余各期均胀大,色淡;滋养体期开始出现较多鲜红色、细小的薛氏小点 正常或略小,可有数颗粗大紫红色的茂氏点 正常或略小;偶见少量、淡紫色、微细的齐氏小点 略胀大、色淡、多数卵圆形,边缘不整齐;常见较多红色、粗大的薛氏小点,且环状体期已出现
环状体
(早期滋养体) 胞质淡蓝色,环较大,约为红细胞直径的1/3;核1个,偶有2个;红细胞内只含1个原虫,偶有2个 环纤细,约为红细胞直径的1/5;核1~2个;红细胞内可含2个以上原虫;虫体常位于红细胞边缘 胞质深蓝色,环较粗壮,约为红细胞直径的1/3;核1个;红细胞内很少含有2个原虫 似三日疟原虫
大滋养体
(晚期滋养体) 核1个;胞质增多,形状不规则,有伪足伸出,空泡明显;疟色素棕黄色,细小杆状,分散在胞质内 一般不出现在外周血液,主要集中在内脏毛细血管。体小,圆形,胞质深蓝色;疟色素黑褐色,集中 体小,圆形或带状,空泡小或无,亦可呈大环状;核1个;疟色素深褐、色粗大、颗粒状,常分布于虫体边缘 体较三日疟原虫大,圆形,空泡不显著;核1个;疟色素似间日疟原虫,但较少、粗大
未成熟裂殖体 核开始分裂,胞质随着核的分裂渐呈圆形,空泡消失;疟色素开始集中 外周血不易见到。虫体仍似大滋养体,但核开始分裂;疟色素集中 体小,圆形,空泡消失;核开始分裂;疟色素集中较迟 体小,圆形或卵圆形,空泡消失;核开始分裂;疟色素集中较迟
成熟裂殖体 虫体充满胀大的红细胞,裂殖子12~24个,排列不规则;疟色素集中 外周血不易见到。裂殖子8~36个,排列不规则;疟色素集中成团 裂殖子6~12个,常为8个,排成一环;疟色素常集中在中央 裂殖子6~12个,通常8个,排成一环;疟色素集中在中央或一侧
雌配子体 虫体圆形或卵圆形,占满胀大的红细胞,胞质蓝色;核小致密,深红色,偏向一侧;疟色素分散 新月形,两端较尖,胞质蓝色;核结实,深红色,位于中央;疟色素黑褐色,分布于核周围 如正常红细胞大,圆形;胞质深蓝色;核较小致密,深红色,偏于一侧;疟色素多而分散 虫体似三日疟;疟色素似间日疟原虫
1 薄血膜中四种人体疟原虫主要要鉴别特征表1
(吉氏染色剂染色)
疟原虫种别
区别特点 间日疟原虫 三日疟原虫 恶性疟原虫 卵形疟原虫
受感染的红细胞 大小及式样 胀大 正常,有时可缩小 正常或缩小 一般略胀大,也可胀得很大。部分红细胞呈卵形,一端园,另一端呈扫帚状或其它不规则状
颜色 常较淡 正常 较深 较淡
斑点 常有细小鲜红分布均匀的薛氏点,出现较晚;一般有晚期滋养体的红细胞始有薛氏点 可有极微小红色的齐氏点 可有褐红色、较大,形状不规则数目少的毛氏点 60-100%的有早期滋养体的红细胞已有较粗较多的薛氏点
重复感染 少见 极少见 常见 少见
早期滋养体(环状体) 体积 较大,约为红细胞直径的1/3 较大,约为红细胞直径的1/3 一般较小,约为红细胞直径的1/6;也可较大 较大,约为红细胞直径的1/3
细胞质 环状、较薄,色深兰 环状、较厚,色深兰 环状、细薄,常有有位于红细胞边缘的倾向 环状、较厚,色深兰
细胞核 通常只一个 一个较粗大 常具二个 一个,较粗大
晚期滋养体(阿米巴滋养体) 体积 很大 较小 较小 较小
细胞质 阿米巴状、含数个空泡颇不规则,变化很大 较圆的阿米巴状,坚实,有时呈带状 较圆的阿米巴状,有时呈细线或网状 较圆的阿米巴状,坚实
色素颗粒 呈微小的短杆杆状,色棕黄分布四散 呈粗的颗粒状,色黄绿,很早出现,分布四散 呈细的颗粒状多数集中凝成团。色黑褐,出现很早 呈细的短杆状,色棕黄,分布四散
裂
殖
体 体积 很大 较小 较小 较小
细胞质 比较不规则松散 较圆,坚实 较圆,坚实 较圆,坚实
成熟裂殖体和殖子裂 数目 12-24平均16个 6-12平均8个 8-36平均18-24个 6-12平均8个
排列 一般不规则 不规则、或呈花朵状 不规则,或排列成一或二圈 不规则,或成一圈
色素颗粒 色棕黄,常集聚于一侧 色黄绿,集于中央 色黑褐,集于中央或一侧 色棕黄,集于中央或一侧
薄血膜4种疟原虫的形态(吉氏染色)
间日疟 恶性疟 三日疟 卵形疟
被寄生的RBC 大小
形状
颜色
斑点 胀大
褪色
薛氏点,红色,细小数多 正常
正常或稍紫
茂氏点,红色,粗大数少 正常或缩小
正常
齐氏点,淡红色,微细 正常或稍大
卵圆形或边缘呈伞矢状
褪色
薛氏点,粗大数多
早期滋养体(环状体) 大小
核
胞质
色素 较大,约占RBC直径的1/3
1个
较薄
无 较小,约占RBC直径的1/6
1个或2个
纤细
无 中等
1个
较粗厚
偶见细小褐色颗粒 中等
1个
较粗厚
无
大滋养体 大小
核
胞质
色素 较大
1个
阿米巴样,常含空泡
黄褐色,细小,杆状,散在分布 较小
1个或2个
圆形,空泡不显著
黄褐色,细小,结成团块后呈黑褐色 较小
1个
带状,空泡不显著
深褐色,粗大,沿边缘分布 较小
1个
圆形,空泡不显著
棕黄色,较粗大
未成熟裂殖体 大小
核
胞质
色素 较大
2个以上
圆形或不规则,空泡消失
黄褐色,分布不均匀 较小
2个以上
圆形,空泡消失
黑褐色团块状 较小
2个以上
圆形,空泡消失
深褐色,分布不匀
较小
2个以上
圆形或卵圆形,空泡消失
棕黄色,分布不匀
成熟裂殖体 大小
裂殖子
色素 大于正常RBC
12-24个,常为16-18个,排列不规则,较大
黄褐色,常聚集一侧 小于正常RBC
8-32个,常为8-18个,排列不规则,较小
黑褐色团块状 小于正常RBC
6-12个,常为8个,排列如菊花状,较大
深褐色,常聚集中央 小于正常RBC
6-12个,常8个,排列不规则,较大
棕黄色,常聚集中央或一侧
雌配子体 大小
形状
核
胞质
色素 大于正常RBC
圆形
1个,较小,致密,深红色,位于一侧
深蓝色
黄褐色,均匀散在 较大
新月形,两端尖锐
1个,较小,深红色,位于中央
深蓝色
黑褐色,紧密分布于核周围 小于正常RBC
圆形
1个,较小,深红色,位于一侧