高效液相色谱-库仑电化学法在维生素E检测中的应用

高效液相色谱法在多种维生素药物检测中的应用摘要目的：采用高效液相色谱法测定药物中多种维生素的含量。

方法：利用迪马C18色谱柱（250mm*4.6mm），以乙腈-甲醇-水（16:4:80）为流动相测定软胶囊药物中多种维生素的含量。

结论：该方法简便、准确、灵敏、重复性好，可作为该药质量控制方法。

关键词：高效液相色谱法，多种维生素，含量测定高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。

高效液相色谱法是目前在国外使用最普遍的测定维生素的方法，应用范围很广，灵敏度也高，具有样品前处理简单，样品用量少，分离速度快，可一次性分析多种维生素等优点。

1材料与试药1.1仪器分析天平（型号BP211D），由Sartorius生产高效液相色谱仪（型号LC-10ATvp），由日本岛津生产紫外-可见检测器（型号SPD-10A），由日本岛津生产色谱工作站（CS-Light），由日本岛津生产。

1.2试药多种维生素软胶囊样品，自制烟酰胺对照品试剂，由中国食品药品检定研究院生产维生素B1对照品试剂，由中国食品药品检定研究院生产维生素B2对照品试剂，由中国食品药品检定研究院生产维生素B6对照品试剂，由中国食品药品检定研究院生产。

2试验方法2.1色谱条件的优化①高效液相色谱法同时测定配方乳粉中7种脂溶性维生素，建立了高效液相色谱法（HPLC）同时测定配方乳粉中7种脂溶性维生素A、D2、E、K、叶黄素和胡萝卜素的方法，方法采用Poroshelll20SB-C18柱（150×4.6mm，2.7μm），以甲醇、乙腈、氯仿为流动相进行梯度洗脱，流速0.6Ml/min，25min内可对上述7种组分进行基线分离[1]；②利用高效液相色谱法同时测定食品中9种水溶性维生素，采用C18色谱柱进行分离，以pH2.5、25mmol/LKH2PO4-乙腈二元体系为流动相进行梯度洗脱，最后用高效液相色谱二极管阵列检测器对9种维生素进行测定[2]；③利用反相高效液相色谱法同时测定食品和多维片中8种水溶性维生素，建立了以0.05mol/LKH2PO4-甲醇为流动相的梯度洗脱反相高效液相色谱同时测定水溶性维生素C、B1、B2、B6、B12、烟酸、烟酰胺和叶酸的分析方法[3]；④复方卵磷脂多种维生素胶丸中烟酰胺、维生素B1、维生素B2、维生素B6、采用反相高效液相色谱法，色谱柱为汉邦C18色谱柱（250mm*4.6mm），流动相为：乙腈-甲醇-水（16:4:80），水中含2.5mmol/L庚烷磺酸钠和0.12%三乙胺（磷酸调节至pH2.5），流速1.5ml/min，柱温20℃，检测波长为273nm[4]。

高效液相色谱法测定蛋白粉中维生素E含量的不确定度评定薛红玮1，罗伟敏2，沈　棚3（1.上海营家生物科技有限公司，上海 201703；2.营家健康科技（广东）有限公司，广东东莞 523808；3.上海康诺执信食品有限公司，上海 201703）摘　要：为评定高效液相色谱法测定蛋白粉中维生素E含量结果的不确定度，本文按照《食品安全国家标准食品中维生素A、D、E的测定》（GB 5009.82—2016）测定功能型蛋白粉中维生素E的含量，从标准溶液配制、试样的处理过程、测量重复性等方面分析和量化各不确定度分量，并计算合成标准不确定度和扩展不确定度。

结果表明，该功能型蛋白粉中维生素E含量为8.22 mg/100 g，扩展不确定度为0.22 mg/100 g，其中k=2，P=95%。

结果表述为（8.22±0.22）mg/100 g。

关键词：不确定度；维生素E；功能型蛋白粉；高效液相色谱Evaluation of Uncertainty in the Determination of Vitamin E in Protein Powder by High Performance LiquidChromatographyXUE Hongwei1, LUO Weimin2, SHEN Peng3(1.Shanghai Yingjia Biotechnology Co., Ltd., Shanghai 201703, China; 2.Inkea Health Technology (Guangdong) Co., Ltd., Dongguan 523808, China; 3.Shanghai Kangnuo Zhixin Food Co., Ltd., Shanghai201703, China)Abstract: In order to evaluate the uncertainty of the results of the determination of vitamin E content in protein powder by HPLC, the content of vitamin E in functional protein powder was determined according to GB 5009.82—2016, the uncertainty components were analyzed and quantified from the aspects of standard solution preparation, sample treatment process and measurement repeatability, and the synthetic standard uncertainty and expanded uncertainty were calculated. Results show that the content of vitamin E in the functional protein powder was 8.22 mg/100 g, and the expanded uncertainty was 0.22 mg/100 g, where k=2, P=95%. The result was expressed as (8.22±0.22) mg/100 g.Keywords: uncertainty; vitamin E; functional protein powder; high performance liquid chromatography本试验选用的功能型蛋白粉是一种具有增强免疫力作用的保健食品，主要在原有蛋白质组分的基础上增加了维生素、膳食纤维等功能型原料，以提升蛋白粉的综合功效。

高效液相色谱法快速检测复合维生素中维生素E
汪忠艳;刘晓敏;张鲁晋
【期刊名称】《广东饲料》
【年(卷),期】2009(018)006
【摘要】饲料用维生素E有合成和天然两种,通常市面出售的VE为合成VE。

VE 为白色或淡黄色粉末或颗粒,作为生物抗氧化剂具有维护生物膜的完整性,增强机体免疫机能,提高抗应激的能力和生殖机能。

【总页数】2页(P33-34)
【作者】汪忠艳;刘晓敏;张鲁晋
【作者单位】广东爱保农科技有限公司,广州,510310;国家饲料质量监督检验中心,湖北武汉,430079;广东爱保农科技有限公司,广州,510310
【正文语种】中文
【中图分类】S816.79
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定白芷维生素E乳膏中维生素E 的含量 [J], 何荣芬
2.反相高效液相色谱法测定维生素E乳膏中维生素E的含量 [J], 李旭梅;涂厉标;王真
3.高效液相色谱法测定白芷维生素E乳膏中维生素E含量 [J], 何荣芬
4.反相高效液相色谱法测定维生素E霜中维生素E的含量 [J], 陈琳
5.高效液相色谱法测定维生素E霜中维生素E的含量 [J], 陈亮;何凤慈;宁桂琴
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前美国药典24版大部分采用细菌内毒素检查法,两年后,基本上不再利用热原检查法。

英国、意大利、德国药典、欧洲药典以及日本药局方都已收载细菌内毒素法,我国2000年版药典对细菌内毒素检查法已作了更进一步的修订,使之更合理,更与国际标准接轨。

3.2　通过对浙江三九邦而康药业有限公司生产的注射用盐酸普鲁卡因连续三个批号分别用三个厂家生产的鲎试剂进行干扰试验,结果表明注射用盐酸普鲁卡因无干扰作用。

认为可用细菌内毒素检查法代替家兔热原检查法。

细菌内毒素检查法具有快速、简便、费用低且灵敏度高、重现性好的优点,尤其是在药品生产过程中可快速准确地检测出中间体热源,缩短检验时间,节约成本,值得推广应用。

3.3　根据实验结果,确定注射用盐酸普鲁卡因细菌内毒素检查方法如下:取本品,依法检查(中国药典2000年版二部附录XIE ),每1mg 注射用盐酸普鲁卡因中含细菌内毒素不得超过0.6EU 。

收稿日期:2003205227高效液相色谱法测定复方维胺酯维E 乳膏中维生素E 的含量基金项目:国家药典会地标升国标课题郑国钢1,王一微2(1.浙江省药品检验所,浙江　杭州310004;2.台州医药有限公司,浙江　台州318000)摘要:目的　采用HPLC 测定复方维胺酯维E 乳膏中维生素E 的含量。

方法　以Symmetry C 18为分析柱,甲醇为流动相,检测波长为285nm 。

结果　平均回收率分别为99.8%。

结论　方法简便,结果准确,可用于该制剂质量控制。

关键词:维胺酯;维生素E ;高效液相色谱法中图分类号:R286;R917.01 文献标识码:B 文章编号:100727693(2004)0420321202Determination of vitamin E in compound viaminate and vitamin E creamZHEN G Guo 2gang 1,WAN G Y i 2wei 2(1.Zhengjiang Institute f or Drug Cont rol ,Hangz hou 310004,China )ABSTRACT :OB JECTIVE To establish a method for the determination of vitamin E in compound viaminate and vitamin E cream by HPLC.METH OD The Symmetry C 18column was used.The mobile phase was methanol.The detection wavelength was set at 285nm.RESU LTS The average recovery was 99.82%.CONC L USION Results obtained showed that it ’s a reliable and accurate method for the quality control of compound viaminate and vitamin E cream .KE Y WOR DS :viaminate and vitamin E cream ;vitamin E ;HPLC 复方维胺酯维E 乳膏用于痤疮,颜面播散性粟粒狼疮,毛发红糠疹,毛囊角化症等皮肤病。

保健食品中维生素E类成分的检测与质量评价研究发布时间：2022-11-10T03:25:11.326Z 来源：《科学与技术》2022年第14期作者：刘蕊[导读] 由于维生素E本身存在着较为复杂的结构，并且存在多种同系物刘蕊谱尼测试科技（天津）有限公司 300000摘要：由于维生素E本身存在着较为复杂的结构，并且存在多种同系物，所以，在进行该成分的测定时，存在着多种方法，例如液相色谱-串联质谱法、高效液相色谱法以及气相色谱法等等。

本文首先研究了采用高效液相色谱法对保健食品中维生素E类成分的进行检测的实验，包括实验材料、实验试剂、实验设备以及具体实验方法，其次对此次维生素E类成分检测试验的结果进行了分析与评价。

关键词：保健食品；维生素E类成分；检测；质量评价引言：不同个体在饮食结构上的差异将会致使机体受到较为直接的影响，不合理的饮食结构很可能会引发一些疾病。

基于此，越来越多的人选择食用保健食品，以此延缓自身疾病的进一步发展或改善身体健康。

作为一种具备较强抗氧化能力、延缓衰老能力、提升人体免疫能力等多种功能的物质，近些年来，维生素E类物质已经成为保健食品中较为常见的添加剂，对保健食品中此类物质的具体含量进行测定有着重要意义。

1保健食品中维生素E类成分的检测实验1.1实验材料与实验试剂本次实验的检测样品共有两种，分别是胶原蛋白天然维生素E片和葡萄籽维生素E软胶囊。

本次试验所使用到的实验试剂包含多种，每一种试剂的规格均选择分析纯或者是以上的类型，所使用到的水均为超纯水。

第一，α-淀粉酶，该试剂中的酶活力至少超过1.5U/mg；第二，无水硫酸钠；第三，石油醚，其沸腾温度区间为30°C～60°C；第四，强氧化钾水溶液；第五，维生素C的乙醇溶液；第六，无水乙醇；第七，100mg的对照品DL-α-维生素E生育酚。

1.2实验所用仪器设备第一，本次保健食品中维生素E类成分的检测实验选取的试验方法为高效液相色谱法，所以，实验中必不可少的一种仪器即为高效液相色谱仪，同时配有相应的DAD检测器；第二，紫外分光光度计；第三，超纯水器；第四，氮吹仪；第五，恒温磁力搅拌器；第六，旋转蒸发器；第七，恒温培养箱；第八，电子天平。

高效液相色谱法测定VE胶囊中α-VE的含量一、目的要求1．了解高效液相色谱仪的基本构造和工作原理。

2．掌握高效液相色谱仪的正确操作方法。

3．学习维生素E的定量分析方法。

二、实验原理色谱法的分离原理是：溶于流动相中的各组分经过固定相时，由于与固定相发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号被检测。

高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)。

按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。

液液色谱法按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。

RPC一般用非极性固定相（如C18、C8），在现代液相色谱中应用最为广泛，约占整个HPLC应用的80%左右。

维生素E又称生育酚，目前已经确认的有8种异构体，αβγδ生育酚和αβγδ生育三烯酚，天然存在的α-生育酚的维生素E活性最强。

α-生育酚醋酸酯是α-生育酚的酯化产品，常用在维生素胶囊中，具有很强的氧化稳定性。

样品以乙醇溶解，采用RPC法，以乙醇为流动相，C18色谱柱分离，紫外检测器284 nm 波长检测，外标法定量，测定维生素E胶囊中α-生育酚醋酸酯的含量。

三、仪器和试剂维生素E醋酸酯标准品、色谱纯乙醇、分析纯四氢呋喃、无水乙醇。

HPLC高效液相色谱仪（日本岛津，LC-10A 泵，SPD-20A 紫外双波长检测器）、KQ5002B型超声波清洗器、、紫外可见分光光度计。

四、实验条件色谱柱为Eclipse XDB-C18柱( 150 mm × 4. 6 mm，5 μm i. d. ) ; 流动相为乙醇，流速0.5 mL /min; 进样量20 μL; UV 检测器，检测波长为284 nm(通过紫外分光光度计扫描确定)。

饲料中维生素E的测定高效液相色谱法1范围本文件描述了饲料中维生素E的高效液相色谱测定方法。

本文件中“第一法皂化提取法”适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、复合预混合饲料和维生素预混合饲料中维生素E（dl-α-生育酚）的测定，“第二法直接提取法”适用于维生素预混合饲料、复合预混合饲料中维生素E（dl-α-生育酚乙酸酯）的测定。

本文件“第一法皂化提取法”的定量限为1mg/kg，“第二法直接提取法”的定量限为20mg/kg。

2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。

其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T20195动物饲料试样的制备3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。

4第一法皂化提取法注意：使用的器皿不含有氧化性物质；分液漏斗活塞玻璃表面不涂油，处理过程在避光下操作；提取过程在通风柜中操作。

4.1原理试样用碱溶液皂化后，经液液萃取或固相萃取净化后，用高效液相色谱仪分离测定，外标法定量。

4.2试剂或材料除非另有规定，仅使用分析纯试剂。

4.2.1水：GB/T6682，一级。

4.2.2无水乙醇：色谱纯。

4.2.3无水乙醇。

4.2.4石油醚（沸程30℃-60℃）。

4.2.5甲醇：色谱纯。

4.2.6乙腈：色谱纯。

4.2.7甲酸。

4.2.8L-抗坏血酸。

4.2.9二丁基羟基甲苯（BHT）。

4.2.10无水硫酸钠。

4.2.11氢氧化钾溶液（500g/L）：称取500g氢氧化钾，加水溶解，冷却后用水定容至1000mL，混匀。

4.2.1270%乙醇溶液：取无水乙醇70mL，用水稀释，定容至100mL，混匀。

4.2.1310%甲醇溶液：取甲醇10mL，用水稀释，定容至100mL，混匀。

4.2.140.1%甲酸溶液：取甲酸1mL，用水稀释，定容至1000mL，混匀。

高效液相色谱法测定维生素E原料含量
商军;潘娟;华贤辉
【期刊名称】《饲料工业》
【年(卷),期】2009(30)14
【摘要】用高效液相色谱法测定饲料添加剂维生素E原料中维生素E含量。

采用ODSC18柱(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(98+2,V+V)为流动相,流速为
1.2ml/min,检测波长为285nm,柱温为(30±2)℃,在此色谱条件下,维生素E在0.104～0.828mg/ml浓度范围内呈良好线性关系(r=0.99994),经方法评估函数的评价表明,方法不存在恒定系统误差和相关性系统误差,方法准确性较好,且方法操作简便易行,系统适用性良好,适用于饲料添加剂维生素E原料中维生素E含量测定。

【总页数】4页(P51-54)
【关键词】高效液相色谱法;VE;饲料添加剂
【作者】商军;潘娟;华贤辉
【作者单位】上海市兽药饲料检测所
【正文语种】中文
【中图分类】S816.17
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中
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实验六高效液相色谱法分离和测定α-ＶE一、实验目的1. 了解高效液相色谱仪的基本结构，掌握液相色谱仪的基本操作方法。

2. 掌握液相色谱分析的定性及外标定量方法。

二、原理1. 高效液相色谱的特点高压泵输送流动相，梯度洗脱，可在柱后直接检测流出液成分，通过改变溶剂极性或强度进而改变色谱柱效能，分离选择性和组分的容量因子，实现改善色谱系统分离度的目的。

2. 高效液相色谱仪(1) 高压输液系统，是提供足够恒定的高压，使流动相以稳定的流量快速渗透通过固定相。

(2) 进样系统，一般采用旋转式六通阀在高压下进样。

(3) 分离系统，在液相色谱柱中完成。

(4) 检测系统，液相色谱常见检测器有：紫外光度检测器，示差折光检测器、荧光检测器电化学检测器。

3. 高效液相色谱的类型根据固定相和分离机理的不同，高效液相色谱如下几种类型(1) 液—固吸附色谱：基于各组分在固体吸附剂表面上具有不同吸附能力而进行分离。

(2) 液—液分配色谱：组分在两相间经过反复多次分配各组分间产生差速迁移，从而实现分离。

(3) 化学键合相色谱：通过共价键将有机固定液结合到硅胶载体表面得到各种性能的固定相。

(4) 离子交换色谱：离子交换树脂上可电离的离子与流动相中带相同电荷的组分离子进行可逆交换，由于亲和力的不同彼此分离。

(5) 离子色谱：用离交换树酯作为固定相，电解质溶液为流动相，用电导检测器检测。

(6) 凝胶色谱：基于试样中各组分分子的大小和形状不同来实现分离。

4. 实验原理反向色谱与正相色谱组成相反，是以非极性或弱极性的固定液制成的固定相，以极性或相对强的极性溶剂作为流动相组成的液—液分配色谱。

但目前多是采用化学反应的方法将非极性或弱极性的有机物分子键合到载体表面，制成键合相的固定相，所以也称键合相色谱。

这种色谱的分离机理比较复杂，一般认为是液—固吸附和液—液分配并存。

在反向HPLC 中常用的键合相有十八烷基硅烷（Ｃ18）、辛基硅烷（Ｃ8）氰基硅烷、氨基硅烷等。

高效液相色谱法测定各种植物油中维生素E含量
王瑞英;汤静;张丽静;王强
【期刊名称】《新疆大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2003(020)004
【摘要】利用高效液相色谱法(HPLC)测定植物油中的维生素E(VE)含量.以甲醇:水=98:2为流动相,流速为0.8mL/min.用荧光检测仪在λexc=295nm,λem=325nm 处检测,VE浓度在12.10～96.80 ng/μL范围内线性关系良好(r=0.9998,n=3),此方法操简便,分离效果满意,重现性好.
【总页数】3页(P393-395)
【作者】王瑞英;汤静;张丽静;王强
【作者单位】新疆大学,理化测试中心,新疆,乌鲁术齐,830046;新疆大学,理化测试中心,新疆,乌鲁术齐,830046;新疆大学,理化测试中心,新疆,乌鲁术齐,830046;新疆大学,理化测试中心,新疆,乌鲁术齐,830046
【正文语种】中文
【中图分类】O652.63
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实验四高效液相色谱法测定V E含量1 实验目的1.1了解高效液相色谱仪的基本操作；1.2了解高效液相色谱仪测定V E的原理。

2 实验原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。

储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附—解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。

V E（维生素E）又名生育酚或产妊酚，在食油、水果、蔬菜及粮食中均存在。

有抗氧化作用，能增强皮肤毛细血管抵抗力，并维持正常通透性；有改善血液循环及调整生育功能、抗衰老作用等。

V E通过高效液相色谱柱进行分离，PDA检测器检测，外标法定量。

3实验器材3.1 实验样品V E样品溶液3.2 实验试剂浓度为50µg/ml的V E标样3.3 实验仪器高效液相色谱仪附PDA检测器4 色谱条件色谱柱：C18柱；流动相速度：0.3ml/min；进样量：5µl；柱温：30℃。

5 实验结果与讨论5.1实验结果本次实验采用的是单点法测定。

实验结果见表1。

表1. 液相色谱仪测定苹果的VE含量样品中VE的浓度=乙烯标样的总量×苹果的峰面积/乙烯标样的峰面积=5µl×50μg/mL×17369/（5µl×42217）=20.57μg/mL5.2实验讨论本次实验中，测定标样溶液V E含量时，在指定的保留时间内并未出峰。

讨论分析原因：样品溶液在上周实验后，一直置于离心管中，未避光低温保存，导致样品中V E氧化，液相测定时没有在相应的时间出峰。

本次实验时间较短，且主要目的是了解高效液相色谱仪的基本操作，以及液相色谱仪测定V E的原理，故结合前组同学对V E含量的测定数据进行讨论与分析。

高效液相色谱法测定维生素E霜中维生素E的含量
陈亮;何凤慈;宁桂琴
【期刊名称】《中国药业》
【年(卷),期】2001(010)009
【摘要】采用HPIC法,建立了维生素E霜中维生素E的含量测定方法.样品用甲醇溶解后,用0.45μm滤膜滤过.采用贝克曼高效液相色谱仪,甲醇为流动相,285nm波长处检测,样品中维生素E的保留时间为1 5 75min,标准曲线浓度范围在0.05～0.4mg/ml内线性关系良好(r=0 999 7),方法的平均回收率为98.57%(n=6),RSD 为2.7%.日内RSD为1.1%,日间RSD为0 85%,测定三比样品,平均百分含量为99.1 8%.
【总页数】1页(P42-42)
【作者】陈亮;何凤慈;宁桂琴
【作者单位】第三军医大学大坪医院野战外科研究所药剂科，重庆，400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所药剂科，重庆，400042;78379部队门诊部检验科，重庆，400042
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
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高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量一、实验目的本实验旨在采用高效液相色谱法（HPLC）测定维生素E胶囊中α-生育酚（α-VE）的含量，为药品质量控制提供依据。

二、实验原理高效液相色谱法是一种分离和分析技术，利用色谱柱将样品中的各组分进行分离，然后通过检测器对分离后的组分进行检测和定量。

本实验采用C18色谱柱，以甲醇-水为流动相，荧光检测器检测维生素E。

维生素E在流动相中的分配系数不同，因此各组分在色谱柱上的保留时间也不同，从而实现分离。

三、实验步骤1.试剂与仪器准备：甲醇（色谱纯）、维生素E标准品、维生素E胶囊样品、C18色谱柱、荧光检测器、高效液相色谱仪。

2.标准溶液制备：精确称取适量维生素E标准品，用甲醇溶解并定容至刻度，制成一定浓度的标准溶液。

3.样品溶液制备：取适量维生素E胶囊样品，破碎后混合均匀，精确称取适量样品，用甲醇溶解并定容至刻度，制成一定浓度的样品溶液。

4.色谱条件：色谱柱为C18柱，流动相为甲醇-水（90:10，v/v），流速为1.0mL/min，荧光检测器激发波长为295nm，发射波长为330nm。

柱温为室温。

5.标准曲线绘制：分别精密吸取不同浓度的标准溶液，按上述色谱条件进样测定，记录峰面积。

以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

6.样品测定：精密吸取样品溶液，按上述色谱条件进样测定，记录峰面积。

根据标准曲线计算样品中α-VE的含量。

7.数据处理与分析：将实验数据录入表格，进行数据处理与分析，得出实验结果。

四、实验结果与讨论1.实验结果：通过高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量，得到如下数据：标准曲线方程：y = ax + b相关系数：r样品中α-VE的含量：X μg/粒回收率：Y%相对标准偏差（RSD）：Z%2.实验讨论：本实验采用高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量，方法简便、准确、重现性好。

高效液相色谱法测定维生素E乳中维生素E的含量目的建立测定维生素E乳中维生素E含量测定的方法。

方法采用SHISEIDO CAPCELL PAK MGⅡC18色谱柱，以甲醇为流动相；流速：1.0 ml/min；检测波长：285 nm。

结果维生素E在浓度在0.133～0.931 mg/ml内与峰面积具有良好的线性关系，平均回收率为100.5%，RSD = 1.0%。

结论本方法测定维生素E乳中维生素E含量简便、快速、准确。

标签：维生素E乳；高效液相色谱法；含量测定市售的维生素E乳由维生素E和其他基质组成，具有治疗皮肤干燥及因季节变化所引起的皮肤瘙痒的作用。

原标准中维生素E的含量测定分别采用紫外分光光度法和气相色谱的方法。

为了更有效地控制该药品的质量，本研究采用了反相高效液相色谱法测定维生素E乳中維生素E的含量，方法准确、简便。

1 仪器与试药1.1 仪器岛津高效液相色谱仪（SPD-10Avp检测器，岛津LC-10ATvp泵，LC-Solution 色谱数据工作站）；XS105型电子分析天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）。

1.2 试药维生素 E 标准品（中国药品生物制品检定所，批号：100062-201008），维生素E乳（北京吉康利通医药科技有限公司自制，批号：20110302，20110303，20110304）。

甲醇为色谱纯，水为纯化水，无水乙醇为分析纯。

2 方法与结果2.1 色谱条件与系统适用性试验色谱柱：SHISEIDO CAPCELL PAK MGⅡC18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；柱温：室温；流动相：甲醇；流速：1.0 ml/min；检测波长：285 nm；进样量：20.0 μl。

理论塔板数按维生素E峰计算应大于2400。

2.2 供试品溶液的制备精密量取本品5 ml（样品标示量为10 mg/ml），置100 ml量瓶中，加入无水乙醇至刻度，振摇使充分溶解后过0.45 μm有机滤膜滤过，作为供试品溶液。

维生素中生育酚的检查原理生育酚，也称为维生素E，是一种脂溶性维生素，具有很多重要的生物学功能，如抗氧化、抗炎、免疫调节、血管扩张等。

它存在于多种食物中，如植物油、坚果、鳕鱼、绿叶蔬菜等。

为了了解人体内的生育酚水平，医学实验室通常使用一些检查原理来测量其浓度。

生育酚检查的原理之一是液相色谱-质谱法（LC-MS）。

该方法基于生育酚分子的特征性质，通过对样品进行化学分离和质谱分析来确定生育酚的含量。

首先，将样品进行提取，以使生育酚从样品中转移到溶液中。

然后，使用液相色谱将生育酚与其他成分分离开来。

分离完成后，将样品注入质谱仪，利用质谱仪的高分辨率和灵敏度来检测并定量生育酚分子。

另一种常用的生育酚检查原理是高效液相色谱法（HPLC）。

该方法基于样品中生育酚分子与其他成分的不同化学性质，通过在特定条件下的流动相和静态相的相互作用，实现生育酚与其他成分的分离和定量。

首先，将样品通过样品制备处理，如固相萃取、脂质提取或气相色谱前处理等。

然后，将样品注入高效液相色谱仪的进样口，使用柱色谱分离技术将生育酚与其他成分分离开来。

分离完成后，使用具有适当检测器的色谱系统来检测生育酚的峰高度和面积，并与已知浓度的标准品进行比较，进而确定样品中生育酚的浓度。

除了上述提到的方法，生育酚的检查还可以使用氧自由基吸收能力（Oxygen Radical Absorbance Capacity，ORAC）测定法。

该方法是通过检测生育酚与主要自由基（如过氧化氢、自由基阳离子等）发生反应形成稳定产物的能力来间接测量生育酚的含量。

ORAC测定中，使用化学氧化剂使样品发生氧自由基的产生，并与生育酚发生反应。

通过比较生育酚与其他样品的相对能力来确定生育酚的含量。

此外，还可以使用人体组织或体液中生育酚和其代谢物的浓度来间接评估生育酚水平。

例如，通过测量血清或尿液中生育酚的代谢物（如α-生育醇、β-生育醇）浓度来评估生育酚的水平。

这些代谢产物是生育酚在体内代谢过程中的产物，通过测量其浓度可以了解生育酚的代谢状况。

饲料中维生素E的高效液相测定一、简介近期，随着经济的复苏，维生素类饲料添加剂销售量大大增加，尤其是维生素E饲料添加剂，所以饲料中维生素E的检测就显得尤为紧急和重要。

南京科捷应用检测部参考国标（GB/T 17812-2008），利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪经实践检测可提供饲料中维生素E的HPLC检测方案，得出的结果准确可靠，检出限好，适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混合饲料、维生素预混合饲料中维生素E（dl-α-生育酚）的测定，仅供广大用户参考。

二、上海LC-10Tvp梯度高效液相色谱仪配置:LC-10Tvp高压恒流泵：2台SPD-10Tvp紫外检测器：1台SCL-10Tvp 系统控制器：1台7725i手动进样阀：1套色谱工作站：1套（VI2010、N2000、N3000选用）液相色谱柱：1支（C18 4.6*250mn,5um）微量进样器：1支（50ul/100ul）进样支架：1只（进样阀用）三、上海LC-10Tvp梯度高效液相色谱仪特点：LC-10Tvp梯度高效液相色谱仪是南京科捷分析仪器有限公司为了快速地满足多样化的客户需求，在原有的STI501液相色谱仪的基础上经过优化，利用美国先进技术开发设计，国内加工生产的的一款新型的液相色谱仪。

LC-10Tvp等度高效液相色谱仪实现了人机对话，可实时对仪器的运行状态进行监控，并可对潜在和已出现的故障做出判断，同时提供在线解决方案。

该仪器也全面实现了远程的准无人操作，大大提高了仪器的使用效率，同时通过高精度的AS1000自动进样系统，实现自动化进样，最大程度抑制了样品的交叉污染，提供样品分析精度。

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高效液相色谱法测定人血清中维生素E实验目的：1.了解高效液相色谱的结构、原理及其应用范围。

2. 掌握仪器分析的研究方法和基本操作实验耗材与仪器：实验仪器：Agilent高效液相色谱仪1260系列实验设备：MX-F漩涡混合器、TGL-16G高速离心机，BF2000氮气吹干仪实验试剂：无水乙醇（分析纯）、正己烷（色谱纯）、甲醇（色谱纯）超净水、异丙醇（分析纯）实验步骤：一、样品前处理：1. 准确吸取血清0.1mL于2mL朔料离心管中，加入1μg/mL内标液（δ-VE）0.2mL。

2. 加入无水乙醇0.3mL，盖塞，用漩涡混合器充分混匀2min。

3. 加入正己烷0.6mL，盖塞，用漩涡混合器充分混匀2min。

4. 样品取出后立即离心（3000r/min，5mim），去上层（正己烷层）于另外的朔料管中（一定不要取下层）。

5. 对下层溶液重复提取2次。

6. 氮气吹干正己烷7. 立刻加入200μL无水乙醇，用漩涡器充分混合，使提取物完全溶解于无水乙醇中。

取溶解物100μL至带内衬管的进样瓶中待测。

二、标准曲线配置1.分别取γ-VE10μg/mL、α-VE20μg/mL、和内标δ-VE10μg/mL的标准工作液，用无水乙醇配置成1μg/mL的单标工作液。

2. 用α、γ-VE标准工作液配制工作曲线，使每个混合标准液中含有内标（δ-VE）1μg/mL，并用无水乙醇补足至1mL。

见下表1标准曲线配置工作表（直接配置于进样瓶）表1 标准曲线配置浓度与取样量三、用高效液相色谱法测定vit-E1. 过滤流动相2. 上机测定a)测定δ、γ、α-VE、和内标单标，保留时间定性b）测定α、γ-VE标准曲线，用他们与δ-VE内标的峰高比或面积比定量。

c）测定未知样品3. 仪器分析条件色谱柱：ZORBAX SB-Aa 5μm250*4.6mm流动相：甲醇：水=90：10流速：1.0μg/mL紫外线检测波长：295nm荧光激发波长：295nm，发射波长350nm进样量：20μL柱温：35℃实验结果与数据分析1. 定性保留时间见表2。