间苯二酚碱性品红染色液操作步骤及染色结果

碱性品红水溶液(1%)操作步骤及注意事项
货号：G0031
规格：100mL
保存：室温，避光，12个月。

产品说明：
碱性品红(Fuchsin basic)，分子量为337.85，分子式为C20H20ClN3，CAS号为632-99-5。

碱性品红是非常强的细胞核染料，易使弹性组织、嗜品红颗粒染色，亦可以用于神经细胞核和抗酸杆菌的染色，常与其他染色剂合用对细胞核染色。

操作说明：（仅供参考）
1、样品处理
a)对于石蜡切片：
二甲苯中脱蜡5~10min。

更换新鲜的二甲苯，再脱蜡5~10min。

无水乙醇5min。

90%乙醇2min。

70%乙醇2min。

蒸馏水2min。

b)对于冰冻切片：
蒸馏水2min。

c)对于培养细胞：
用4%多聚甲醛固定10min以上。

蒸馏水洗涤2分钟。

换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2min。

2、碱性品红染色：
对于上述处理好的样品，碱性品红水溶液(1%)染色。

注：如果用于免疫组化等染色后的复染，参考上述步骤在其它染色完成后进行碱性品红染色。

3、脱水、透明、封片：
95%乙醇脱水2min。

更换新鲜的95%乙醇再脱水2min。

二甲苯透明5min。

更换新鲜的二甲苯，再透明5min。

用中性树胶或其它封片剂封片。

显微镜下观察，细胞核呈粉红色或红色。

注意事项：
1、如果需要脱水、透明和封片处理，需自备二甲苯、中性树胶或其它封片剂。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

弹力纤维染色检测及临床应用摘要】弹力纤维具一定的弹性，对酸、碱、沸水有抵抗性，但可被胃、胰酶消化。

在HE染色标本中，弹力纤维与其他纤维的区别，需用特殊染色方法确认，其中最重要的Weigert型技术为弹力纤维的特异性染色方法。

在病理过程中，很多疾病都可以引起弹性纤维的显著变化。

观察皮肤组织中弹力纤维的变化，有助于诊断皮肤组织病变。

显示与判断心血管疾病，如鉴别心内膜弹力纤维增生症与心内膜心肌纤维化，在动脉硬化、主动脉炎时，观察动脉壁破坏情况等。

显示组织内弹力纤维断裂、变性等病变，如慢性支气管炎、肺气肿等。

显示与鉴别肿瘤组织，如弹力纤维瘤、乳腺早期导管浸润癌等。

弹性纤维的破坏、增生、断裂与崩解，对于研究组织、器官的病变程度有一定的价值。

【关键词】弹力纤维染色;检测;临床应用【中图分类号】R44 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2015）22-0048-02弹力纤维多分布于皮肤、血管壁、肺泡壁、韧带、声带、气管、耳廓软骨及某些腺体导管。

弹力纤维由两种成分组成，即集合成束的弹力微原纤维(由糖蛋白形成)和均质状的弹力蛋白。

弹力纤维具一定的弹性，对酸、碱、沸水有抵抗性，但可被胃、胰酶消化。

在HE染色标本中，弹力纤维与其他纤维的区别，需用特殊染色方法确认，其中最重要的Weigert型技术为弹力纤维的特异性染色方法。

目前，此染色原理尚不明了，间苯二酚品红液(即碱性品红的铁间苯二酚色淀形成的复合物)与弹力纤维结合并将其染成蓝黑色。

现对间苯二酚品红法的实际操作分析如下。

1.材料与方法1.1 材料来自我院病理科手术后送检的血管组织。

1.2 试剂间苯二酚品红液：①碱性品红2.0g，②间苯二酚4.0g，③蒸馏水200mL，④30％三氯化铁25mL，⑤浓盐酸4mL；①+②+③加热溶解，玻棒搅拌煮沸后慢慢加入④，继续搅拌煮沸3～5min，冷却过滤；滤液倾去不用，将滤纸和沉淀物一起放回烧杯内，温箱中烘干；取出后加95％乙醇200mL，隔水煮至沉淀物完全溶解后取出滤纸，冷却后过滤；补足蒸发的乙醇，最后加入⑤，4℃冰箱保存。

字号：大中小第一节结缔组织和肌纤维染色Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法)用途：VG法用于区分胶原纤维和肌纤维。

原理：酸性复红和苦味酸对这两种纤维都具有较强的亲合力，结果胶原纤维被酸性复红染成红色，肌肉被苦味酸染成黄色。

此方法是一种优良的传统方法。

固定：10%福尔马林切片：4-6微米试剂：Weigert铁苏木精液：A液：苏木精1g，无水酒精100 ml。

一般配制后需要数周或数月自然氧化，成熟后使用。

B液：29%三氯化铁水溶液4 ml，蒸馏水95 ml，盐酸1 ml。

两液分别配制，临用时A、B液等量混合，过滤后使用。

24h后失去染色能力。

Van Gieson液：1%酸性复红水溶液10 ml苦味酸饱和水溶液90 ml临用时1:9混合过虑后使用。

Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法)步骤：1．石蜡切片脱蜡至水。

2．Weigert苏木精液5-10 min。

3．充分水洗。

4．Van Gieson液1-5 min。

5．95%酒精迅速分化数秒。

6．无水酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。

结果：胶原纤维呈红色、肌肉、神经胶质、胞浆、红血球呈黄色、细胞核呈黑色或棕蓝色。

体会与说明：由于酸性复红退色较快，染色结果不能长期保存，一般只能保存3～6个月。

二Masson三色法试剂：Regaud 氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml。

将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。

Masson丽春红酸性复红液：丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml。

0.2%冰醋酸水溶液：冰醋酸0.2 ml，蒸馏水100 ml。

1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100 ml。

苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g，蒸馏水98 ml，冰醋酸2 ml。

1%光绿水溶液：光绿1g，蒸馏水100 ml。

Masson三色法步骤1．石蜡切片脱蜡至水。

2．铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。

改良苯酚品红溶液的染色原理苯酚品红溶液是一种常用的生物组织染色剂，它能够在生物组织中着色，并帮助科学家观察细胞结构和组织组织的形态。

准确而高效的染色方法对于研究生物组织的功能和病理变化非常重要。

苯酚品红溶液的染色原理主要是通过苯酚品红这种染色剂与细胞中的核酸和蛋白质发生相互作用，从而使细胞和组织组织呈现特定的颜色。

苯酚品红分子中含有两个吡啶环结构和一个季铵盐结构，在溶液中通过离子键与细胞内的质子化羧基、磷酸基团和氨基酸残基等离子基团之间发生静电相互作用，形成染色物质。

然而，传统的苯酚品红溶液在染色过程中常常存在一些问题，如颜色不均匀、染色效果不理想、染色时间长等。

这些问题可能会影响到染色结果的准确性和可靠性。

因此，有必要对苯酚品红溶液的染色原理进行改良，以提高染色效果和可靠性。

一种可能的改良方法是优化苯酚品红溶液的配方。

传统的配方中通常使用苯酚品红和一种碱性物质（如氢氧化钠）来调节溶液的pH值。

然而，在高碱性条件下，溶液中细胞核酸的去氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）会被降解，从而影响到染色效果。

因此，可以考虑使用缓冲剂来调节苯酚品红溶液的pH值，以提供适宜的染色环境。

常用的缓冲剂包括磷酸盐缓冲液、三氮唑盐缓冲液等。

另外，可以考虑改良苯酚品红溶液的渗透性。

细胞膜是一个半透膜结构，普通的苯酚品红溶液在渗透进入细胞后，会与细胞内的亲核酸结合，形成炫光染色物质。

然而，染色剂进入细胞的速度和程度往往会受到细胞膜的渗透性限制。

为了改善这一问题，可以考虑使用渗透剂来提高苯酚品红溶液的渗透性。

例如，可以添加一些带正电荷的渗透剂，如聚乙烯亚胺（Polyethylenimine），它可以与细胞内的DNA 结合，从而提高苯酚品红的渗透性和染色效果。

此外，还可以优化苯酚品红溶液的染色条件。

染色的时间和温度是影响染色效果和可靠性的重要因素。

传统的苯酚品红染色通常需要较长的时间（通常为数小时），并且在高温条件下进行（通常为60-70℃）。

Weigert氏间苯二酚品红染色法
弹力纤维染色法
组织固定：10%甲醛
试剂配制：
Weigert氏间苯二酚品红染液：盐基性品红2g，间苯二酚4g，蒸馏水200ml。

将上述染料和蒸馏水放入烧杯内加热煮沸后，再加入29％三氯化铁水溶液25ml，用玻璃棒搅拌混合2－5分钟。

室温冷却，然后过滤，倾去滤液，将滤纸和上面的沉淀物一同放回烧杯中，并置于干燥箱内烘干，烘干后取出并加入95%酒精液200ml，在水浴上加热至沉淀物完全溶解，取出滤纸，待液体冷却后过滤，再填补蒸发失去的酒精数量至200ml，最后加入4ml 浓盐酸，即可应用。

此液密封可保存数月，但其染色力能够逐渐减弱最终失效。

操作步骤：
1 石蜡切片3－5um，脱蜡至95％酒精液中。

2 用Weigert氏间苯二酚品红染液1－2小时或更
长时间，视染液的新旧而定。

3 切片从染液中取出直接用95％酒精液洗去多
余染液，并分化至无余色脱下为止。

此时可
在镜下观察，如果染色弥漫不清晰，可再用
1％盐酸酒精稍加分化。

4 充分水洗5′。

5 需复染胞核，可用明矾苏木素水溶液染色2－
5′。

6 水洗2－3′。

7 用Van Gieson氏液作对比染色。

8 95％酒精液急速分化。

9 无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封
固。

结果：
弹力纤维呈深蓝色至黑蓝色，胶原纤维呈红色，肌纤维和红血球呈黄色，胞核呈黑蓝色。

细菌、霉菌和病毒细菌Gram碱性复红结晶紫法试剂配制：(1) 苯胺油石炭酸复红液：碱性品红0.5g，苯胺油1ml，石炭酸1g，30%酒精70ml。

碱性品红溶于70ml酒精中，隔水加热至90℃，冷却后加入石炭酸和苯胺油。

（2）碘液：碘片1g，碘化钾2g，蒸馏水300ml（3）结晶紫染液：结晶紫 2g，95%酒精20ml，草酸胺1g，蒸馏水80ml。

结晶紫溶于酒精，，草酸胺溶于蒸馏水。

二液混合，此液置冰箱可保存数月。

操作方法：1、组织固定于10%甲醛液，按常规脱水包埋。

2、切片脱蜡至水。

3、苯胺油石炭酸复红液5分钟。

4、自来水冲洗，蒸馏水洗。

5、 4%甲醛1分钟，蒸馏水洗2次。

6、苦味酸饱和水溶液处理2分钟。

7、经过95%酒精速洗后，放入自来水中立即变红色。

8、自来水冲洗，蒸馏水洗。

9、碘液作用2分钟，自来水洗，用滤纸直接吸干。

10、二甲苯苯胺油等份混合，进行分化苯。

11、二甲苯透明、中性树胶封固。

结果：革兰氏阳性细菌呈蓝色，阴性细菌呈红色，细胞核呈红色。

抗酸杆菌苯酚碱性品红法：碱性品红酒精液：碱性品红 5克无水酒精 100毫升5%苯酚水溶液: 苯酚 5毫升(略加温,使其溶解) 蒸馏水 95毫升苯酚碱性品红液: 碱性品红酒精液 1毫升5%苯酚水溶液 9毫升染色步骤:1. 切片二甲苯脱蜡,95%酒精速洗2. 蒸馏水洗3. 苯酚碱性品红液染15～30分钟4. 蒸馏水洗5. 2 %硫酸水溶液分化至适当为止6. 水洗7. 烘干,透明,封固结果:抗酸杆菌(结核杆菌和麻风杆菌)呈红色。

真菌（一）高碘酸法复红法亮绿液：亮绿 0.2g 蒸馏水 100 ml 冰醋酸 0.2 ml Schiff试剂配制:碱性品红 1 g ，活性炭 2 g ，当量盐酸 20 ml ，偏重亚硫酸钠 1.5 g1. 碱性品红1g，放入200毫升蒸馏水中，煮沸，搅拌，充分溶解。

2. 冷却至50℃时过滤，滤液中加入当量盐酸20毫升。

3. 加偏重亚硫酸钠 1.5 g，置于暗处过夜。

北京华越洋生物QQ:1733351176碱性品红水溶液(1%)
北京华越洋生物QQ:1733351176
2、碱性品红染色：
对于上述处理好的样品，碱性品红水溶液(1%)染色。

注：如果用于免疫组化等染色后的复染，参考上述步骤在其它染色完成后进行碱性品红染色。

3、脱水、透明、封片：
95%乙醇脱水2min。

更换新鲜的95%乙醇再脱水2min。

二甲苯透明5min 。

更换新鲜的二甲苯，再透明 5min。

用中性树胶或其它封片剂封片。

显微镜下观察，细胞核呈粉红色或红色。

注意事项：
1、如果需要脱水、透明和封片处理，需自备二甲苯、中性树胶或其它封片剂。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产地：国产
提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。

有效期：室温,避光, 6个月
关键词：碱性品红水溶液(1%),Fuchsin basic stain
碱性品红水溶液(1%)相关染色产品:
北京华越洋生物QQ:1733351176
北京华越洋生物QQ:1733351176。

（一）改良苯酚品红染液配法
原液A：取3克碱性品红溶于100毫升70%酒精中，此液可以长期保存。

原液B：取A液10毫升加入90毫升5%苯酚(即石炭酸)水溶液中(2周内使用)。

原液C：取B液55毫升加入6毫升的冰醋酸和6毫升38%的甲醛(可长期保存)。

染色液：取C液10-20毫升，加入90-80毫升45%醋酸和1.5克山梨醇。

放置2周后使用，染色效果显著，可普遍用于植物组织的压片法和涂片法，使用2-3年不变质。

山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用。

如果没有山梨醇，也能染色，但效果稍差。

改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋红染色液的染色效果是相同的。

而且用改良苯酚品红染色液还能提高工效，简易节约的优点。

（二）龙胆紫
龙胆紫，其1～2％溶液俗称紫药水，是人们所熟悉的外用药。

龙胆紫为一种碱性阳离子染料，因其阳离子能与细菌蛋白质的羧基结合，影响其代谢而产生抑菌作用。

它能抑制革兰氏阳性菌，特别是葡萄球菌、白喉杆菌，对白色念珠菌也有较好的抗菌作用。

它杀菌力强，对组织没有刺激性，也没有毒性和副作用。

（三）醋酸洋红
醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。

在“观察植物细胞有丝分裂”（即“观察根尖分生区组织细胞”）时，对染色体进行染色，需要用碱性染液，此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。

改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋红染色液的染色效
果是相同的。

而且用改良苯酚品红染色液还能提高工效，简易节约的优点。

弹力纤维染色液(改良Gomori 醛品红法)简介：弹力纤维(Elastic Fiber)主要分布于人体的动脉壁、肺泡壁、皮肤，新鲜时呈黄色，折光性强。

常用的弹力纤维染色法有Gomori 醛品红法、间苯二酚碱性品红法、地衣红法、维多利亚蓝法、铁碘苏木素法等。

弹力纤维染色液(改良Gomori 醛品红法)染色原理在于成熟的醛品红对特殊的蛋白质及含有硫酸根的黏多糖具有很强的亲和力，与弹力纤维结合的很好，该染液亦显示肥大细胞颗粒，脂褐素、嗜酸性细胞等。

组成：操作步骤(仅供参考)：1、 固定于10%中性福尔马林，常规脱水包埋。

2、 石蜡切片厚度4μl ，常规脱蜡至水。

3、 切片入配制好的酸性氧化液内。

4、 自来水稍洗。

5、 用酸性漂白液漂白。

6、 自来水冲洗。

7、 70%乙醇稍洗。

8、 入醛品红染色液加盖浸染。

9、 入70%乙醇浸洗2次，至切片无紫色液体脱出为止。

10、 自来水稍洗。

11、 橙黄G 染色液滴染。

12、 自来水稍洗。

13、 无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

编号 名称DC00674×50mlStorage试剂(A): 酸性氧化液A1: 氧化液 25ml 4℃ 避光 A2: 酸化液25ml4℃临用前，按A1:A2=1:1混合即为酸性氧化液，不宜提前配制。

试剂(B): 酸性漂白液 50ml RT 试剂(C): 醛品红染色液 50ml 4℃ 避光 试剂(D): 橙黄G 染色液 50mlRT 避光 使用说明书1份染色结果：弹力纤维紫色至深紫色肥大细胞颗粒、粘液物质紫色至深紫色背景不同程度的黄色注意事项：1、该法可显示弹力纤维、前弹力纤维、耐酸纤维，但需要切片稍厚一些，以7μm为宜。

2、氧化液和酸化液不宜提前混合，最好即配即用。

3、醛品红染色时，应加盖，防止溶液挥发。

4、橙黄G染色应淡染，否则会掩盖弹力纤维的颜色。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

目的：为检验间苯二酚辅料规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。

范围：适用于间苯二酚的检验。

职责：检验员，检验室主任。

规程：1．性状本品为白色或类白色的针状结晶或粉末；微有特臭；在日光或空气中即缓缓变成粉红色；水溶液显弱酸性反应。

本品在水或乙醇中极易溶解，在乙醚或甘油中易溶，在氯仿中微溶。

1.1 熔点：本品按熔点测定法（SOP-QC-307-00）第一法测定，本品的熔点为109～111℃为符合规定。

2．鉴别2.1 试剂与仪器2.1.1 三氯化铁试液 2.1.2 氨试液2.1.3 氢氧化钠试液 2.1.4 氯仿2.1.5 盐酸 2.1.6 烧杯2.1.7 刻度移液管，滴定 2.1.8 电子天平(万分之一克)2.1.9 电炉 2.1.10 IR-470型红外光谱仪2.2 项目与步骤2.2.1 称取本品约25mg，置烧杯中，加水5ml溶解后，加三氯化铁试液2滴，即显紫蓝色；再加氨试液数滴，变为棕黄色为符合规定。

2.2.2 称取本品0.1g，置烧杯中，加氢氧化钠试液2ml，使溶解，加氯仿1滴，加热即显深红色，再加微过量的盐酸，变为淡黄色为符合规定。

2.2.3 红外分光光度法：取本品，按红外分光光度法（SOP-QC-302-00）压片法测定，本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致为符合规定。

3．检查3.1 试剂与仪器3.1.1 稀醋酸 3.1.2 醋酸铅试液3.1.3 试管 3.1.4 刻度移液管3.1.5 电炉 3.1.6 恒温干燥箱3.1.7 硫酸干燥器 3.1.8 坩埚3.1.9 茂福炉 3.1.10 电子天平(万分之一克)3.2 项目与步骤3.2.1 苯酚：称取本品0.25g，置试管中，加水5ml溶解后，缓缓加热，不得发生苯酚臭为符合规定。

3.2.2 邻苯二酚：称取本品0.5g，置试管中，加水10ml溶解后，加稀醋酸2滴与醋酸铝试液0.5ml，应不得发生浑浊为符合规定。

3.2.3 干燥失重：精密称取本品约1g，置硫酸干燥器中干燥至恒重，按干燥失重测定法（SOP-QC-325-00）测定，减失重量不得过1.0% 为符合规定。

弹力纤维染色试剂盒（地衣红法）使用说明书货号：G1589规格：3×50ml保存：4℃避光，6个月产品内容：名称3×50ml Storage试剂(A):地衣红染色液50ml4℃试剂(B):Mayer苏木素50ml RT试剂(C):Scott蓝化液50ml RT产品说明：弹力纤维(Elastic Fiber)主要分布于人体的动脉壁、肺泡壁、皮肤，新鲜时呈黄色，折光性强。

常用的弹力纤维染色法有Gomori醛品红法、间苯二酚碱性品红法、地衣红法、维多利亚蓝法、铁碘苏木素法等。

弹力纤维染色可以显示皮肤组织中弹力纤维的变化，如弹力纤维痣、皮肤环状肉芽肿、硬度病等。

弹力纤维染色试剂盒（地衣红法）操作简单、特异性高，但染色效果可能受到不同批次原料而有差异，有时会染色肝细胞内的脂褐素。

操作步骤(仅供参考)：1、组织固定于10%的中性福尔马林固定液，常规脱水包埋。

2、切片厚4-5µm，常规脱蜡至水。

3、入70%乙醇2min。

4、入地衣红染色液染色15-30min（56℃温箱）或室温过夜染色。

9、70%酒精分化，至无多余染液脱下为止。

4、稍水洗1-2min。

5、入Mayer苏木素染色液复染3-5min。

6、流水冲洗2-3min。

若染色过深可用盐酸酒精适当分化。

7、蒸馏水稍洗。

7、入Scott蓝化液返蓝2min，蒸馏水洗。

8、系列酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

染色结果：弹力纤维棕红色至深棕色背景不同程度的灰棕色或淡红色注意事项：1、酸性地衣红染色液临用前应恢复至室温，染液可重复使用数次。

2、弹力纤维着色较深，不形成颗粒状。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

皮肤光老化小鼠模型的构建陈旭;王莹;鞠梅;陈崑;顾恒【摘要】目的:构建昆明鼠皮肤光老化小鼠模型.方法:采用模拟日光组分的紫外线照射昆明小鼠,初始照射剂量为最小红斑量,剂量周递增.然后进行照射组和对照组小鼠皮肤大体形态参数和组织学特征比较,进而从分子水平比较丙二醛产物水平和p53表达水平.结果:照射小鼠皮肤厚度为0.0507±0.0082 cm较对照小鼠皮肤0.0397±0.0063 cm厚(P<0.05);照射组皮肤皱纹评分较对照组增高(P<0.05);组织学特征分析发现照射组小鼠皮肤出现显著的胶原纤维和弹力纤维光老化组织学特征.照射组小鼠皮肤丙二醛水平和p53表达显著升高.结论:皮肤光老化小鼠模型的建立为皮肤光老化的研究提供了可用的模型.【期刊名称】《中国麻风皮肤病杂志》【年(卷),期】2014(030)003【总页数】6页(P131-136)【关键词】光老化;紫外线;小鼠【作者】陈旭;王莹;鞠梅;陈崑;顾恒【作者单位】中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室,南京,210042;天津市儿童医院皮肤科,天津,300074;中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室,南京,210042;中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室,南京,210042;中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室,南京,210042【正文语种】中文慢性反复的紫外线(ultraviolet，UV)辐射可导致皮肤慢性损伤，进而产生皮肤光老化、光致癌以及免疫抑制等。

1－3近年来，皮肤光老化得到了广大研究者的重视。

皮肤光老化模型对于光老化的分子机制和临床防治研究是非常重要的核心因素。

皮肤光老化模型主要包括体外志愿者、动物模型的在体研究模型以及单层培养细胞和3D混合培养的体外模型，2，4－6其中动物模型在光老化的研究中具有很高的价值。

胶原纤维染色一、胶原纤维的分布和组成成分胶原纤维是结缔组织中的三种纤维之一，分布最为广泛，含量最多。

主要分布于真皮、腱、韧带、骨、透明软骨、动脉、肠壁、子宫和基底膜等。

胶原纤维具有韧性大，抗拉力强的特点。

胶原纤维单位主要由纤维母细胞合成。

二、胶原纤维染色的应用胶原纤维染色在病理诊断上主要用于鉴定梭形、纤维形细胞肿瘤的组织来源；常常要在纤维、平滑肌和神经三者之中作出选择。

还能使用于其他的情况下，如观察动脉硬化的心脏，在HＥ切片中，心肌内散在的小疤痕灶和心肌均被染作红色，而作胶原纤维染色可将胶原组织和上肌明显地区分开来。

早期肝硬化用胶原纤维染色，也可使小叶之间少量增生的胶原纤维突出地显示出来。

三、胶原纤维染色的方法1.Van Gieson苦味酸酸性复红法2.Siriured染色法3.Lillie改良Van Gieson法4.Clark改良Van Gieson法5.Biebric猩红染色法6.显示胶原纤维、细胞和肌肉的新染法四、胶原纤维的常用染色：胶原纤维在HE染色法被染成粉红色，除此之外，它还可以用一些阴离子的染料来进行染色，如用淡绿可把它们染为绿色，用甲苯胺蓝可将其染为蓝色，在网状纤维染色中，如不加以处理，它又可被染为棕黄色。

常用的特殊染色法有Van Gieson.Masson和Mallary等方法。

在免疫细胞化学染色中，胶原纤维由于含的负电荷过多，常导致某些非特异性的染色，应特别注意。

Van Gieson（V.G）染色法I. 试剂的配制：weigert氏苏木素A液：苏木素 1g （haematoxylin）无水酒精100mlB液：30%三氯化铁4ml （ferric chloride）蒸馏水95ml盐酸1mlII．Van Gieson氏液A液：酸性品红1g（acid fuchsin）蒸馏水100mlB液：苦味酸饱和水溶液，（1.22%）（picric acid）注意事项：1、Weigert氏苏木素临用前取A液和B液等份混合，几个小时内用完，最长不得超过一天。

碱性品红的工艺流程碱性品红是一种常用的染料，常用于细胞组织切片的染色工作。

下面是碱性品红的工艺流程。

1. 组织处理：首先需要获取需要染色的组织样本，可以是细胞培养物或者生物组织切片。

对于切片样本，需要进行固定处理，如使用福尔马林固定液将样本进行固定，以保持组织的形态结构和细胞的染色性。

2. 脱水处理：固定后的组织样本需要进行脱水处理，将样本中的水分逐渐去除。

常用的脱水方法是使用一系列浓度递增的乙醇溶液进行脱水，在每个乙醇浓度中浸泡一段时间，使组织逐渐脱水。

3. 渗透处理：脱水后的组织样本需要进行渗透处理，使其逐渐吸入溶液中，以便后续染色反应的进行。

常用的渗透剂是苯骈喹啉(二乙基吡咯啉)。

4. 固定处理：渗透处理后，组织样本需要进行固定处理，以使其保持形态结构。

常用的固定剂是牛血清白蛋白乳液。

5. 染色处理：在碱性品红染色中，常用的染色剂是碱性品红染料。

将染色剂加入染色液中，并将固定处理过的组织样本放入染色液中浸泡一段时间，使染料与组织结合。

6. 清洗处理：染色后，需要对组织样本进行清洗，除去多余的染料。

常用的清洗液是蒸馏水或乙醇溶液。

将组织样本放入清洗液中轻轻晃动，使多余的染料被清洗掉。

7. 脱水处理：清洗后的组织样本需要进行脱水处理，将样本中的水分去除。

与脱水处理相似，使用一系列浓度递增的乙醇溶液进行脱水。

8. 透明处理：脱水后的组织样本需要进行透明处理，使其透明，便于观察。

常用的透明剂是二甲苯。

9. 封片处理：透明处理后，将组织样本放入适用的封片剂中，并覆盖玻片，使其固定在玻片上。

10. 干燥处理：封片后，需要将玻片中的溶剂蒸发干燥，使组织样本固定在玻片上。

以上就是碱性品红的工艺流程。

通过这些步骤，可以得到色素沉积在细胞核的染色效果，以便后续的观察和分析。

值得注意的是，实际操作中可能存在小的差异，因此需要根据具体实验来进行相应的调整。

间苯二酚碱性品红染色液操作步骤及染色结果间苯二酚碱性品红染色液操作步骤及染色结果货号：G1592规格：50ml/100ml保存：4℃避光保存，有效期6个月。

产品说明：弹力纤维（Elastic Fiber）主要分布于人体的动脉壁、肺泡壁、皮肤，新鲜时呈黄色，折光性强。

常用的弹力纤维染色法有Gomori醛品红法、间苯二酚碱性品红法、地衣红法、维多利亚蓝法、铁碘苏木素法等。

间苯二酚碱性品红染色液主要用于weigert弹力纤维染色，又称Weigert树脂酚复红染色液。

weigert弹力纤维染色液的染色原理是间苯二酚碱性品红与铁离子形成Lake复合物，其游离的氨基与弹力纤维内的氢键牢固结合呈黑色。

Weigert弹力纤维染色尤其适用于显示成熟的弹力纤维。

操作步骤（仅供参考）：1、石蜡切片脱蜡至水。

2、用配制好的weigert氧化剂氧化3min。

稍水洗。

3、用weigert漂白剂漂白3min，流水冲洗5-10min。

4、切片入weigert间苯二酚品红染色液，加盖浸染1~3h或56℃下染色1h。

5、用酸性分化液分化至无染液脱下。

6、充分水洗5~10min。

7、用配制好的VG染色液复染30s，快速水洗。

8、用95%乙醇迅速分化。

9、无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

染色结果：弹力纤维深蓝色至蓝黑色胶原纤维红色肌纤维、红细胞黄色注意事项：1、大多数固定液均可，但含有铬盐的固定液固定后，染色较浅且容易弥散。

2、若仅显示成熟的弹性纤维，可省上述去氧化和漂白步骤，石蜡切片脱蜡至95%乙醇即可入weigert间苯二酚品红染色液染色。

3、酸性分化液主要使切片背景清晰，分化稍长一些对染色无损害。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。