胶体金是一种常用的标记技术
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胶体金法和胶体金免疫层析法的区别摘要:一、胶体金法和胶体金免疫层析法的概念与原理二、胶体金法和胶体金免疫层析法的应用领域三、胶体金法和胶体金免疫层析法的优缺点四、总结:胶体金法和胶体金免疫层析法的区别与选择正文:胶体金法和胶体金免疫层析法都是常见的免疫分析技术,广泛应用于医学、生物学等领域。
然而,这两种方法在原理、应用、优缺点等方面存在一定的差异,下面我们将逐一进行分析。
一、胶体金法和胶体金免疫层析法的概念与原理胶体金法:胶体金法是一种免疫标记技术,利用胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体检测。
它通过胶体金颗粒与抗原或抗体的特异性结合,实现对目标物质的检测。
胶体金法具有较高的灵敏度和特异性,且检测结果直观可见。
胶体金免疫层析法:胶体金免疫层析法是一种免疫分析方式,利用特异性抗原抗体免疫结合反应的原理,加上试纸条层析技术进行检测。
它将胶体金作为标记物,通过层析技术将结合后的抗原抗体分离,从而实现对目标物质的快速诊断。
二、胶体金法和胶体金免疫层析法的应用领域胶体金法:胶体金法广泛应用于免疫学、病理学、组织学等领域。
例如,在医学检测中,胶体金法可以用于病原体检测、抗体检测、肿瘤标志物检测等。
胶体金免疫层析法:胶体金免疫层析法主要用于快速诊断技术,如传染病、肿瘤、生育健康等领域。
它具有快速、灵敏、特异性的特点,适用于临床、Point-of-Care 和家庭检测。
三、胶体金法和胶体金免疫层析法的优缺点胶体金法:优点:1.灵敏度高,特异性强;2.检测结果直观,易于判读;3.应用领域广泛,适应性强;缺点:1.胶体金颗粒尺寸较大,可能导致分辨率降低;2.实验条件较严格,操作复杂;胶体金免疫层析法:优点:1.快速检测,结果准确;2.操作简便,适用于基层医疗和家庭检测;3.成本较低,普及度高;缺点:1.相对于胶体金法,灵敏度和特异性略低;2.设备和技术要求较高;四、总结:胶体金法和胶体金免疫层析法的区别与选择胶体金法和胶体金免疫层析法在原理和应用上具有一定的区别。
bbi的胶体金使用说明书一、产品介绍BBi的胶体金是由BBi公司生产的纳米胶体金标记技术,广泛应用于各种生物医学领域。
它是一种安全、可靠、快速且具有高灵敏度的检测技术,常用于免疫分析、组织切片和细胞培养等。
二、产品特点1. 高灵敏度:BBi的胶体金具有极高的灵敏度,可以检测出低浓度的目标物质。
2. 快速:BBi的胶体金操作简便,反应速度快,可实现即时检测。
3. 稳定性好:胶体金标记具有出色的稳定性和耐久性,可在常温下保存。
4. 适用范围广:BBi的胶体金适用于各种生物医学应用,如免疫分析、组织切片和细胞培养等。
三、使用范围1. 免疫分析:用于检测生物样品中的蛋白质、激素、病毒等目标物质。
2. 组织切片:用于检测组织切片中的细胞类型和病变情况。
3. 细胞培养:用于监测细胞生长和分化情况。
四、使用方法1. 按照说明书准备试剂和设备。
2. 根据实验需求,将胶体金标记的抗体或抗原加入到样品中。
3. 观察颜色变化,记录结果。
4. 根据需要清洗和保存实验设备。
五、使用注意事项1. 请在专业人士指导下使用本产品。
2. 请勿将本产品用于非医学或非科研用途。
3. 使用本产品时请注意安全,避免直接接触皮肤和眼睛。
4. 请勿将本产品置于高温、潮湿、阳光直射或极端温度环境中。
5. 使用后的废液和废弃物应按照相关规定妥善处理。
六、储存方式1. 本产品应存放在阴凉、干燥、避光的地方。
2. 请勿将本产品与不相容的物质一起存放或使用。
3. 请勿将本产品置于高温环境中,以免影响产品质量。
4. 若长期不使用,请放在冰箱中冷藏保存。
5. 使用前请检查包装是否完好,如有破损或过期请勿使用。
七、清洁与保养1. 实验设备在使用前后均需清洗,以防止交叉污染。
2. 清洗时请使用适当的洗涤剂和消毒剂,并按照说明书进行操作。
3. 保养时请检查设备的完整性、清洁度和功能是否正常。
如有问题请及时联系厂家维修或更换。
八、故障排除在使用过程中遇到问题或故障时请先检查以下方面:1. 是否按照说明书正确操作?2. 使用的试剂是否过期或被污染?3. 设备是否正常工作?如有问题请及时联系厂家维修或更换九、技术支持如在使用过程中遇到技术问题请联系我们的技术支持团队他们将为您提供专业的咨询和技术支持十、售后服务我们提供全面的售后服务包括产品咨询订单跟踪问题解决以及产品维护等如果您有任何问题或需要帮助请随时联系我们的客户服务我们将竭诚为您服务。
胶体金是一种什么实验方法胶体金是指由纳米级金粒子组成的胶体溶液。
胶体是一种介于溶液和固体之间的物质状态,由一种或多种物质在另一种物质中形成的微粒子分散体系。
金是一种非常重要的贵金属,具有良好的热导性、电导性和化学稳定性,因此广泛应用于光学、电子学、生物医学等领域。
胶体金的实验方法主要包括物理还原法、化学还原法、光化学法等多种方法。
其中,物理还原法是最常用的制备胶体金的方法之一。
该方法的原理是通过外加还原剂来还原金离子,使其形成金原子,然后金原子自行聚集形成纳米粒子。
这种方法一般利用某些常见的还原剂如氢气、亚硫酸钠等将金盐还原成金纳米颗粒。
例如,可以将金盐(如氯金酸)加入溶剂中,然后逐滴加入还原剂,在适当的温度和pH条件下,金离子得到还原成金纳米颗粒,形成胶体金溶液。
化学还原法是另一种制备胶体金的方法。
这种方法的原理是将金离子与某些还原剂(如多肽、某些有机物)反应,使金离子还原成金原子并形成纳米颗粒。
这种方法一般需要控制反应条件如温度、pH值等,以得到所需的粒子尺寸和分散度。
光化学法是利用光化学反应原理制备胶体金的方法。
这种方法一般采用可见光、紫外光等光源来激发金离子,产生电子和空穴,然后通过还原剂将金离子还原成金原子,并形成纳米颗粒。
这种方法具有选择性、快速和可控性的优点。
制备胶体金的实验方法一般需要精确控制反应条件,如温度、pH值、反应时间等,以控制金纳米颗粒的粒径和分散度。
同时,还需要选择合适的还原剂、溶剂和金盐等试剂,以确保高效、可重复的制备过程。
胶体金的应用非常广泛,主要包括生物医学领域、光学传感、催化剂等。
在生物医学领域中,胶体金被用作生物标记物或药物载体,通过对其表面进行功能修饰,可以实现对生物分子的检测、分离和治疗。
在光学传感领域,胶体金具有强烈的表面等离子共振吸收和散射性质,可用于制备表面增强拉曼散射(SERS)基底,实现对低浓度分子的检测,并被应用于环境监测、食品安全等方面。
在催化剂领域,胶体金纳米颗粒具有良好的催化性能,可用于催化剂的制备和催化反应的促进。
免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)文章来源: 文章作者: 发布时间:2007-04-24 字体: [大 中 小](一) 原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。
胶体金是由氯金酸(HAuCl 4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。
胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。
胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大分子结合,如SPA 、PHA 、ConA 等。
根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特性,因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。
(二) 胶体金的制备根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。
常用来制备胶体金颗粒的方法如下。
1.枸橼酸三钠还原法(1)10nm 胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl 4水溶液100ml ,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml ,加热煮沸30min ,冷却至4℃,溶液呈红色。
(2)15nm 胶体金颗粒的制备:取0.01%HAuCl 4水溶液100ml ,加入1%枸橼酸三钠水溶液2ml ,加热煮沸15min ~30min ,直至颜色变红。
冷却后加入0.1Mol/L K 2CO 30.5ml ,混匀即可。
(3)15nm 、18nm ~20nm 、30nm 或50nm 胶体金颗粒的制备:取0.01%HAuCl 4水溶液100ml ,加热煮沸。
根据需要迅速加入1%枸橼酸三钠水溶液4ml 、2.5ml 、1ml 或0.75ml ,继续煮沸约5min ,出现橙红色。
这样制成的胶体金颗粒则分别为15nm 、18~20nm 、30nm 和50nm 。
免疫层析法胶体金法免疫层析法(Immunoassays)是一种常用的生物化学分析方法,可以用来检测和测量样品中的特定分子。
它基于抗体和抗原之间的特异性相互作用,利用这种相互作用来检测和量化感兴趣的分子。
胶体金法(Colloidal Gold)是一种常用的免疫层析法的检测方法。
它利用胶体金颗粒的特殊性质,结合抗体和抗原的特异性相互作用,实现对目标物质的定性和定量分析。
免疫层析法的原理是利用抗体与抗原的特异性结合,从而实现对目标物质的检测。
在胶体金法中,胶体金颗粒被偶联上特异性的抗体,形成胶体金标记物。
当样品中存在目标物质时,胶体金标记物会与目标物质结合形成免疫复合物。
这个免疫复合物可以通过免疫层析膜迁移,最终形成可见的条纹或颜色变化。
胶体金法的优势在于其操作简便、结果直观、灵敏度高和特异性好。
它可以应用于多种领域,如临床医学、食品安全、环境监测等。
在临床医学中,胶体金法常用于检测生物标志物,如肿瘤标志物、感染性疾病的病原体等。
在食品安全领域,胶体金法可以用来检测食品中的有害物质,如农药残留、重金属等。
在环境监测中,胶体金法可以用于检测水体、土壤等环境样品中的污染物。
使用胶体金法进行免疫层析分析的步骤一般包括样品预处理、胶体金标记物的制备、样品与标记物的反应、免疫层析膜的制备以及结果的读取和分析等。
首先,需要对样品进行预处理,如提取、纯化或稀释等,以获得适合分析的样品。
然后,制备胶体金标记物,将特异性抗体与胶体金颗粒偶联。
接下来,将样品与标记物反应,使目标物质与胶体金标记物结合形成免疫复合物。
然后,将反应混合物加载到免疫层析膜上,免疫复合物会随着溶液的迁移在膜上形成条纹。
最后,通过肉眼或专用的读取设备对条纹进行观察和分析,根据条纹的颜色、强度和位置等来判断目标物质的存在与浓度。
虽然胶体金法在免疫层析分析中具有许多优点,但也存在一些局限性。
首先,胶体金颗粒的稳定性较差,容易聚集和沉积,影响结果的准确性和可重复性。
胶体金免疫层析法实验报告胶体金免疫层析法实验报告胶体金免疫层析法是一种常用的生物化学实验技术,广泛应用于生物医学研究、临床诊断和药物研发等领域。
本实验旨在通过胶体金免疫层析法检测目标蛋白质的存在与浓度。
1. 实验原理胶体金免疫层析法基于抗原与抗体的特异性结合原理,利用胶体金颗粒的特殊性质进行检测。
胶体金颗粒具有较大的比表面积和表面增强效应,能够与抗体发生特异性结合。
当抗原与抗体结合形成免疫复合物时,会导致胶体金颗粒的聚集或分散,从而产生可见的颜色变化。
2. 实验步骤2.1 样品制备:将待检测的目标蛋白质样品进行提取和纯化,获取高纯度的目标蛋白质溶液。
2.2 胶体金标记:将胶体金颗粒与特异性抗体进行结合,形成胶体金-抗体复合物。
这一步需要注意控制反应条件,使得胶体金颗粒均匀分散,避免团聚。
2.3 免疫层析:将样品和胶体金-抗体复合物混合,使其发生特异性结合。
然后将混合物加载到层析柱中,通过重力或离心作用,将未结合的物质流出。
2.4 结果分析:观察层析柱中的颜色变化,根据颜色深浅判断目标蛋白质的存在与浓度。
3. 实验结果实验结果显示,当目标蛋白质存在于样品中时,胶体金颗粒会与其特异性抗体结合,导致胶体金颗粒聚集,层析柱呈现深色。
而当目标蛋白质不存在或浓度较低时,胶体金颗粒不会聚集,层析柱呈现浅色或无色。
4. 实验优势与应用胶体金免疫层析法具有以下几个优势:4.1 灵敏度高:胶体金颗粒具有较大的比表面积和表面增强效应,能够增强目标物的检测信号,提高灵敏度。
4.2 特异性强:通过特异性抗体与目标蛋白质结合,可以准确检测目标物,避免干扰物的干扰。
4.3 操作简便:实验步骤简单,无需复杂的仪器设备,适用于实验室和临床现场。
4.4 多样性应用:胶体金免疫层析法可用于检测血清中的生物标志物、药物残留、病原微生物等,广泛应用于临床诊断、食品安全和环境监测等领域。
5. 实验注意事项5.1 样品处理:样品的提取和纯化过程需要严格控制,以避免杂质的干扰。
荧光胶体金法1.抗体的荧光标记法荧光抗体标记技术是将荧光素以化学方法与特异性抗体共价结合,形成荧光素-蛋白质结合物(即荧光标记抗体),此结合物仍保留着抗体活性,同时具有荧光素的示踪作用。
当它与相应的抗原特异结合后,借助于荧光显微镜观察呈现明亮的特异荧光。
实验中常用异硫氰基荧光黄(fluorescein isothiocyanate, FITC)作为标记物,在碱性溶液中,FITC上的化学基团异硫氰基(-N=C=S)与抗体蛋白自由氨基(主要是赖氨酸的ε-氨基)结合,形成荧光抗体,以测定细胞相应抗原的存在。
FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0 .85),而且形成的偶联物的稳定性很好。
FITC是应用最广的荧光染料,流式细胞仪就按FITC 的特性,设计了激光波长为488 nm,很接近于FITC的最大激发波长492nm)。
作为标记的荧光素应符合以下要求:应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除。
荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率。
荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明。
与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫性质,与蛋白质的结合物稳定,易于保存。
标记方法简单、安全无毒。
操作步骤:用碳酸氢钠缓冲液pH9.8稀释抗体为1-5mg/ml,或抗体对该缓冲液充分透析,以足以使赖氨酸不解离(去其正电荷),但注意保持大部分蛋白质仍未变性;将透析袋放入100ml 含0 .1 mg/ml 的pH9.8碳酸氢钠缓冲液(新配制)的烧杯中,用铝铂包烧杯以避光,4℃搅拌过夜;上述抗体液对PBS在4℃透析以终止反应。
其间至少更换PBS液三次,直致480nm 的吸收为零;加入0.5g/L 的叠氮钠。
此后,结合物在4℃避光保存,或分装后在-20℃冻存。
荧光偶联质量的检测:用标准免疫荧光染色试验以测定偶联率。
或用F/P值测定对其FITC标记质量进行鉴定。
免疫胶体金技术的基本原理:胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。
胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。
胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大分子结合,如SPA、PHA、ConA等。
根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特性,因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。
胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。
吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。
用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。
这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。
免疫金标记技术(Immunogold labelling technique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中,这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。
2功能编辑本段常用的免疫胶体金检测技术:(1)免疫胶体金光镜染色法细胞悬液涂片或组织切片,可用胶体金标记的抗体进行染色,也可在胶体金标记的基础上,以银显影液增强标记,使被还原的银原子沉积于已标记的金颗粒表面,可明显增强胶体金标记的敏感性。
(2)免疫胶体金电镜染色法可用胶体金标记的抗体或抗抗体与负染病毒样本或组织超薄切片结合,然后进行负染。
胶体金免疫层析法原理胶体金免疫层析法是一种常用的生物化学分离技术,它利用胶体金颗粒与抗原或抗体的特异性结合来实现对生物分子的快速、准确检测和分离。
胶体金颗粒具有良好的生物相容性、分散性和表面活性,因此在生物医学领域得到了广泛的应用。
该方法的原理是利用抗原与抗体的特异性结合,将胶体金颗粒标记在抗原或抗体上,形成胶体金-抗原/抗体复合物,然后通过免疫层析技术将目标分子与其他非特异性结合的物质分离开来。
这种方法具有操作简便、灵敏度高、特异性强的特点,因此在临床诊断、生物学研究和生物制药等领域得到了广泛的应用。
胶体金免疫层析法的操作步骤主要包括样品处理、制备试剂、样品加载、洗涤和检测等几个步骤。
首先,需要对样品进行预处理,将目标分子从样品中提取出来。
然后,制备胶体金-抗原/抗体复合物,并将其加载到固相载体上。
接下来进行洗涤步骤,将非特异性结合的物质去除,最后通过检测手段对目标分子进行定量或定性分析。
胶体金免疫层析法的优势在于其操作简便、快速高效、具有较高的特异性和灵敏度。
同时,由于胶体金颗粒的小尺寸和良好的生物相容性,使得该方法在生物医学领域具有广泛的应用前景。
例如,在临床诊断中,可以利用该技术对各种疾病标志物进行检测,实现快速、准确的诊断;在生物学研究中,可以用于蛋白质、核酸等生物分子的检测和分离;在生物制药领域,可以用于药物的质量控制和疫苗的研发等方面。
总之,胶体金免疫层析法作为一种快速、准确、灵敏的生物化学分离技术,具有广泛的应用前景。
随着生物医学技术的不断发展和完善,相信胶体金免疫层析法将在临床诊断、生物学研究和生物制药等领域发挥越来越重要的作用,为人类健康事业做出更大的贡献。
胶体金和免疫层析法区别胶体金和免疫层析法是生物医学领域常用的两种技术手段,它们在生物分析、临床诊断、生命科学研究等方面都有着重要的应用价值。
这两种方法都是利用抗体与抗原的特异性相互作用来进行生物分析的技术手段,但在原理和应用方面有着一些显著的区别。
首先,我们先来介绍一下胶体金技术。
胶体金是一种在纳米尺度下的金颗粒悬浮液,其具有良好的生物相容性和生物相互作用性,在生物医学领域被广泛应用于生物探针和生物标记物的检测。
胶体金技术主要是利用了胶体金颗粒的表面等离子共振(Surface Plasmon Resonance, SPR)效应来进行分析,当在特定条件下,胶体金颗粒与抗体–抗原复合物结合后,会发生表面等离子共振现象,从而产生可见光的吸收峰值转移,通过测量吸光度的变化来进行生物分析。
相比之下,免疫层析法则是一种传统的生物分析方法,该方法主要原理是利用抗体与抗原的特异结合,通过与被测样品中的抗原相互作用,形成免疫复合物,然后通过免疫扩散或免疫沉淀的方式来进行分离和检测。
免疫层析法在临床诊断和生物医学研究中有着广泛的应用,尤其在血清标志物检测、肿瘤标志物检测、感染病原体检测等方面有着重要的价值。
在原理方面,胶体金技术主要通过测定胶体金颗粒的表面等离子共振效应来进行生物分析,所以其具有较高的灵敏度和特异性,能够检测到非常低浓度的抗原分子。
而免疫层析法则主要通过抗原-抗体的非共价结合来进行分析,所以其检测灵敏度相对较低,一般只能检测到中等浓度的抗原。
此外,胶体金技术还具有颜色可视化的优势,当胶体金与抗原结合后,会出现颜色变化,通过肉眼观察就可以判断结果,这在一些简单快速的生物分析中有着很大的应用潜力。
而免疫层析法通常需要通过测定免疫复合物的位置和密度来进行定量分析,相对来说操作要求比较严格。
在应用方面,由于胶体金技术具有灵敏度高、特异性好、操作简单、颜色可视化等优势,因此在临床诊断、环境监测、生命科学研究等领域都有着广泛的应用。
胶体金是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免
疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印
迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例
用到。
1971年Faulk 和Taytor将胶体金引入免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的
免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免
疫层析法( immunochromatogra-phy)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay
DIGFA),用于检测 HBsAg、HCG 和抗双链DNA抗体等,具有简单、快速、准确和无污染
等优点。
免疫胶体金技术的基本原理
胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,
可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水
胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,
可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白
质的生物特性。
胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大分子结合,如SPA、PHA、
ConA等。根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上
结合物的免疫和生物学特性,因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生
物学等领域。
胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附
机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用
还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的
粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、
抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为
非常有用的工具。
免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度
的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大
量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中,这
一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。
常用的免疫胶体金检测技术
(1)免疫胶体金光镜染色法
细胞悬液涂片或组织切片,可用胶体金标记的抗体进行染色,也可在胶体金标记的
基础上,以银显影液增强标记,使被还原的银原子沉积于已标记的金颗粒表面,可明显增强
胶体金标记的敏感性。
免疫胶体金电镜染色法
可用胶体金标记的抗体或抗抗体与负染病毒样本或组织超薄切片结合,然后进行负
染。可用于病毒形态的观察和病毒检测。
(2)斑点免疫金渗滤法
应用微孔滤膜(如膜)作载体,先将抗原或抗体点于膜上,封闭后加待检样本,洗
涤后用胶体金标记的抗体检测相应的抗原或抗体。
(3)胶体金免疫层析法
将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上,胶体金标记试剂(抗体或单克隆抗体)
吸附在结合垫上,当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,通过毛细作用向前移动,溶解
结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应,再移动至固定的抗原或抗体的区域时,待检物与金
标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察到显色
结果。该法现已发展成为诊断试纸条,使用十分方便。