补体溶血反应实验报告

溶血反应的实验报告
溶血反应实验报告
实验目的：通过溶血反应实验，观察不同浓度的溶液对红细胞的溶解作用，了
解溶血现象的产生原因和影响因素。

实验材料：新鲜离心血液、生理盐水、不同浓度的溶液（如高渗溶液、低渗溶
液等）、离心管、试管、显微镜等。

实验步骤：
1. 取适量的新鲜离心血液置于离心管中；
2. 分别将不同浓度的溶液加入试管中，如高渗溶液、低渗溶液等；
3. 将试管中的溶液与离心管中的血液混合均匀；
4. 放置一段时间后，观察溶液与血液的反应情况；
5. 使用显微镜观察红细胞的形态变化。

实验结果：
1. 高渗溶液会导致红细胞内部的水分流失，红细胞收缩变形，最终溶解；
2. 低渗溶液则会导致水分进入红细胞，使红细胞膨胀破裂；
3. 生理盐水对红细胞没有明显的溶解作用。

实验结论：
1. 高渗溶液和低渗溶液都会对红细胞产生溶解作用，导致红细胞的破裂和溶解；
2. 溶血反应的产生与溶液的渗透压有关，高渗溶液会导致红细胞失水而溶解，
低渗溶液则会导致红细胞吸水而溶解；
3. 生理盐水对红细胞没有溶解作用，可作为溶液的对照组。

通过这次实验，我们深入了解了溶血反应的原理和影响因素，为进一步研究红
细胞的生理功能和疾病诊断提供了重要的实验基础。

希望通过这次实验，我们能够更好地理解溶血现象，并为医学研究和临床诊断提供更多的参考依据。

补体结合实验原理：补体无特异性，可与任何抗原抗体复合物结合而被激活，但不能与单独的抗原或抗体结合。

补体结合试验是一种有补体参与，以绵羊红细胞和溶血素作为指示系统的抗原抗体反应体系。

绵羊红细胞与溶血素结合后可激活补体，导致红细胞破坏，出现溶血现象。

参与补体结合反应的五种成分可分为两个系统：(1)检测系统，已知抗原（或抗体）、待测抗体（或抗原）；（2）指示系统，SRBC、溶血素。

待检测系统与补体作用后，加入指示系统，若不出现溶血，表示待测系统中的抗原抗体相对应；两者特异性结合形成抗原抗体复合物结合并消耗了补体，无游离的补体与指示系统结合，故不溶血，为补体结合试验阳性。

反之，若出现溶血，则为补体结合试验阴性。

方法：1.取五支试管，依次做好标记，放在试管架中。

2.按照下表加样。

结果：结果分析：1.羊血用前轻轻摇匀，避免剧烈正当引起溶血。

2.各种试剂的吸管不要混用。

3.补体的性质较不稳定，低温保存，加样时再从冰箱里取出。

4.水浴时避免水滴滴进试管。

5.本实验影响因素很多，对照组的反应情况是否正常是判断实验可信度的参照。

人外周血单个核细胞分离原理：常用来分离人外周血单个核细胞的分离液是由聚蔗糖和泛影葡胺按一定比例混合制成。

它分子量大又无化学活性，20摄氏度时比重约为1.077kg/L，淋巴细胞和单核细胞比重略小于分层液，为1.070kg/L左右。

而粒细胞和红细胞比重大，为1.092 kg/L左右。

通过离心，使一定比重的细胞按相应密度梯度分布，淋巴细胞和单核细胞位于分离液的上层，而粒细胞和红细胞沉于离心管的管底，从而将淋巴细胞和单核细胞等单个核细胞分离出来。

方法：1.抽取1.5ml静脉血至肝素抗凝管，加入1.5ml Hank’s液2.混匀后取3ml稀释液，沿试管壁缓慢加入到2ml分离液中。

2000rpm,离心20min。

3.小心吸取淋巴细胞层，加入2ml Hank’s液，2000rpm,离心10min。

4.弃上清，加入2ml Hank’s液。

溶血试验的实验报告实验目的：通过溶血试验，评估红细胞的溶血情况，了解红细胞的稳定性和膜的完整性，为血液学研究和临床诊断提供参考。

实验原理：溶血试验是通过观察红细胞在不同浓度的盐水中溶解的情况，来评估红细胞膜的完整性和红细胞的稳定性。

正常情况下，红细胞在等渗盐水中不会溶解，而在低渗盐水中会发生溶血。

实验材料：1. 新鲜抗凝血（EDTA或肝素）2. 0.9%生理盐水3. 低渗盐水（0.5% NaCl溶液）4. 试管若干5. 离心机6. 显微镜7. 计数板实验步骤：1. 取新鲜抗凝血1ml，加入试管中。

2. 将试管放入离心机中，以3000转/分钟的速度离心5分钟。

3. 离心后，取出试管，弃去上层血浆，保留红细胞层。

4. 向红细胞层中加入0.9%生理盐水1ml，轻轻摇匀，使红细胞充分悬浮。

5. 将混合液再次离心，离心条件同上。

6. 离心后，弃去上层液体，保留红细胞层。

7. 分别取两个新的试管，标记为“等渗盐水组”和“低渗盐水组”。

8. 向等渗盐水组试管中加入0.9%生理盐水1ml，向低渗盐水组试管中加入0.5% NaCl溶液1ml。

9. 将离心后的红细胞分别加入等渗盐水组和低渗盐水组试管中，各0.5ml。

10. 轻轻摇匀，使红细胞与盐水充分混合。

11. 将试管置于室温下静置30分钟。

12. 观察并记录红细胞的溶血情况。

13. 如有必要，使用显微镜和计数板进行更详细的观察和计数。

实验结果：1. 在0.9%生理盐水中，红细胞保持完整，未见明显溶血现象。

2. 在0.5% NaCl溶液中，红细胞发生溶血，可见红细胞膜破裂，细胞内容物释放。

实验结论：实验结果表明，红细胞在等渗环境下保持稳定，而在低渗环境下发生溶血。

这与红细胞膜的完整性和渗透压调节机制有关。

溶血试验是一种简单有效的评估红细胞稳定性的方法，对于血液学研究和临床诊断具有重要意义。

注意事项：1. 抗凝血的选择应根据实验要求和条件进行，避免溶血。

2. 离心过程中要确保离心机的稳定性，避免因操作不当导致红细胞损伤。

第1篇一、实验目的通过本实验，了解抗原抗体反应的基本原理，掌握溶血实验的操作方法，验证特定抗原与抗体之间的反应，观察溶血现象，并分析实验结果。

二、实验原理抗原抗体反应是指抗原与相应的抗体结合所发生的特异性反应。

在溶血实验中，当抗原与抗体结合后，会形成抗原抗体复合物，进而激活补体系统，导致红细胞膜破坏，出现溶血现象。

本实验采用间接溶血试验，通过观察红细胞是否发生溶血来判断抗原与抗体之间的特异性结合。

三、实验材料1. 抗原：已知抗原（如红细胞、细菌、病毒等）2. 抗体：特异性抗体3. 红细胞悬液：O型红细胞4. 补体5. 生理盐水6. 试管、移液器、显微镜等四、实验方法1. 准备抗原抗体混合液：取适量抗原和抗体，加入生理盐水中，充分混合。

2. 添加红细胞悬液：向混合液中加入O型红细胞悬液，轻轻振荡。

3. 设置对照组：另取一组抗原抗体混合液，不加入红细胞悬液，作为对照组。

4. 加入补体：向实验组和对照组中分别加入等量的补体。

5. 观察溶血现象：将试管置于37℃水浴中孵育一段时间，观察红细胞是否发生溶血。

6. 溶血判断：根据红细胞溶血程度进行判断，分为完全溶血、部分溶血和不溶血。

五、实验结果1. 实验组：红细胞发生溶血现象，溶血程度为完全溶血。

2. 对照组：红细胞未发生溶血现象。

六、实验分析根据实验结果，抗原与抗体结合后，激活补体系统，导致红细胞膜破坏，出现溶血现象。

这表明抗原与抗体之间存在特异性结合，符合抗原抗体反应的基本原理。

七、实验讨论1. 实验过程中，应注意控制实验条件，如温度、时间等，以保证实验结果的准确性。

2. 实验中使用的抗体和补体质量对实验结果有较大影响，应选用质量可靠的试剂。

3. 实验结果受多种因素影响，如抗原抗体浓度、pH值、离子强度等，应综合考虑。

八、实验结论通过本实验，成功验证了抗原抗体之间的特异性结合，并观察到了溶血现象。

实验结果符合抗原抗体反应的基本原理，为后续相关研究提供了实验依据。

一、实验目的1. 了解血清总补体活性的检测原理和方法。

2. 掌握血清总补体活性（CH50）测定的操作步骤。

3. 通过实验结果，分析血清总补体活性的临床意义。

二、实验原理血清总补体活性（CH50）是指补体在经典途径中活化的程度。

在CH50测定中，补体通过激活C1～C9等补体成分，使红细胞发生溶血。

通过测定溶血程度，可以评估血清总补体活性。

三、实验材料1. 试剂：溶血素、兔抗羊红细胞抗体、生理盐水、5%羊红细胞悬液、2.5%巴比妥缓冲液、CH50标准品。

2. 仪器：恒温水浴箱、分光光度计、移液器、试管、试管架等。

四、实验方法1. 标准曲线绘制：将CH50标准品用生理盐水稀释成一系列浓度，分别加入5%羊红细胞悬液，37℃水浴30分钟，测定吸光度（A542nm）。

以CH50浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 样品测定：取待测血清样本，用生理盐水稀释成一定浓度。

按照标准曲线绘制的方法，测定吸光度（A542nm）。

3. 结果计算：根据标准曲线，计算出待测血清样本的CH50活性。

五、实验结果1. 标准曲线绘制：根据实验数据，绘制标准曲线。

2. 样品测定：待测血清样本的吸光度为X。

3. 结果计算：根据标准曲线，计算出待测血清样本的CH50活性为Y。

六、讨论与分析1. 血清总补体活性（CH50）测定原理及方法：CH50测定是一种常用的检测补体活性的方法，通过测定红细胞溶血程度，评估血清总补体活性。

2. 实验结果分析：本次实验中，待测血清样本的CH50活性为Y。

与正常值50-100UL相比，该样本的CH50活性处于正常范围内。

3. 血清总补体活性（CH50）的临床意义：血清总补体活性（CH50）在临床上具有重要的诊断意义。

增高见于急性炎症感染、组织损伤、风湿热急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗死、伤寒、多发性关节炎、癌肿等。

降低见于急性肾小球肾炎、膜增殖性肾小球肾炎、系统性红斑狼疮（SLE）活动期、类风湿关节炎、病毒性肝炎、慢性肝病、亚急性细菌性心内膜炎、遗传性血管神经性水肿等。

补体在溶血反应中的作用实验讨论
补体在溶血反应中起着重要的作用。

在溶血反应中，当红细胞与抗原相结合后，抗原与抗体结合的复合物会激活免疫系统中的补体系统。

补体系统的激活会引发一系列的反应，最终导致红细胞溶解。

具体来说，补体系统的激活分为经典途径和替代途径。

在经典途径中，抗体与抗原结合，形成免疫复合物后，一种叫做C1酶的补体蛋白会结合到免疫复合物上，激活后续的补体反应。

在替代途径中，补体蛋白C3通过蛋白质水解产生C3b，C3b结合至免疫复合物或直接与细菌表面结合，并进一步激活补体系统。

激活后的补体系统会形成膜攻击复合物（MAC），这些复合物能够插入到细菌或抗原溶血性红细胞的细胞膜上，破坏细胞膜完整性，导致细胞溶解。

此外，激活的补体还能激发炎症反应和吞噬细菌的过程。

在实验中，可以通过添加补体试剂来观察红细胞的溶解情况。

通过不同浓度的补体试剂与抗原结合形成免疫复合物，然后通过观察特定的溶血指标（如红细胞溶解度、血红蛋白释放量等）来评估补体的作用效果。

同时，还可以利用不同的实验条件探究补体系统的激活途径和对不同免疫复合物的作用差异。

总结来说，补体在溶血反应中的作用是通过激活补体系统，形成膜攻击复合物，破坏细胞膜完整性，导致红细胞的溶解。

实验报告4. 补体结合反应实验原理补体结合反应是一种有补体参与，并以绵羊红细胞和溶血素作为指示系统的抗原抗体反应。

参与本反应的五种成分可分为两个系统：一为待检系统，即为已知抗原（或抗体）和待检抗体（或抗原）；另一个为指示系统，即绵羊红细胞和其相应的溶血素。

待检抗原、抗体和补体作用后，再加入指示系统。

若待检系统中的抗原和抗体相对应，两者特异性结合后激活补体，补体被消耗。

再加入的指示系统无补体结合，不出现溶血；若待检系统中的抗原与抗体不对应或缺少一方，补体不被激活，当指示系统加入后，绵羊红细胞和溶血素复合物激活补体，产生溶血现象。

5. 空斑形成实验是一种体外检测IgM、IgG类型抗体产生细胞的实验方法，又称空斑形成细胞（PFC)测定。

可作为评估药物影响抗体产生水平以及临床筛选抗肿瘤新药的重要依据。

经绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞与一定量的绵羊红细胞混合后，抗体形成细胞产生的抗体与绵羊红细胞结合；在补体参与下，绵羊红细胞溶解，形成肉眼可见的溶血空斑。

一个空斑即代表一个抗体形成细胞。

一、SRBC的制备（一）无菌抽取绵羊血1.手术剪减去绵羊颈部毛发备皮，止血带扎住颈部，碘酒消毒，酒精棉球再擦拭。

2.抽取一定量的绵羊血，注入无菌玻璃瓶，轻轻摇晃获得抗凝绵羊血，摇晃时不能用力过猛，防止SRBC破裂。

（二）绵羊红细胞的制备1.在无菌实验室中，用移液枪吸取5ml抗凝绵羊血于试管中，共4支试管。

2.配平后对称放入离心机中2000rpm离心10分钟。

3.4支试管，胶头滴管吸去上清液，加入适量的灭菌生理盐水后轻轻摇晃混匀。

4.再次配平后，2000rpm离心10分钟，2-3次。

5.吸去上清液，获得绵羊红细胞。

（三）绵羊红细胞悬液制备1.20%绵羊红细胞悬液制备在无菌实验室中，用移液枪吸取2ml绵羊红细胞于锥形瓶中，用移液管再加入8ml灭菌生理盐水，混合均匀。

2.2%绵羊红细胞悬液制备在无菌实验室中，用移液枪吸取1ml绵羊红细胞于锥形瓶中，量筒量取49ml无菌生理盐水加入锥形瓶，混合均匀。

补体活性检测、补体参与的溶血试验理解：1.补体的概念和性质2.补体的三条活化途径基本原理掌握：1.血清补体总活性测定的实验原理、实验方法2.补体结合实验的实验原理、实验方法3.各种补体检测方法的临床应用一、补体性质与活化途径（一）二、补体的概念补体（Complement，C）：是一组存在于血液和组织液中，具有级联酶促反应特征、不耐热的糖蛋白，是抗体发挥溶细胞作用的必要补充成分（二）补体系统的组成补体固有成分：如C1(q、r、s)、C2、C3……C9补体调节蛋白：如B因子、D因子、P因子、H因子补体受体：C3R，CR1，CR2等（三）补体的激活途径经典激活途径、旁路活化途径（四）补体的生物学功能1.细胞毒溶菌作用2.调理作用：C3b、iC3b、C4b3.炎症介质作用：C3a、C5a、C567生物学检测：总补体活性检测、单个补体活性检测免疫学检测：单个补体成分检测、补体受体成分检测二、血清补体总活性测定1.补体总活性测定原理反应系统的组成：抗原+Antibody->活化补体↓↓↓绵羊红细胞+溶血素+待检测补体↓溶血反应(1)溶血反应：通过经典途径或旁路途径激活的补体，作用于致敏红细胞，使红细胞表面形成若干孔，水分等进入红细胞，引起红细胞的肿胀破裂而溶血(2)CH50检测原理在溶血反应中，补体溶血程度与补体的活性相关，但非直线关系以溶血百分率为纵坐标，相应补体含量为横坐标，溶血程度对补体含量依赖呈特殊的S型曲线以50％溶血作为终点指标，比100％溶血更为敏感，这一方法称为补体50％溶血试验（CH50）(3)CH50（50% complement hemolysis）：补体总活性测定方法，以红细胞的溶解为指示，以50%溶血为判断终点，故称补体50％溶血试验（CH50）2.实验材料(1)绵羊红细胞①使用等量或两倍的阿氏保存液混合，便于抗凝和储存②临用前生理盐水洗涤红细胞③使用浓度一般为2~5％(2)配制50％溶血标准管①2％SRBC悬液0.5ml+2.0ml蒸馏水使其溶解②加入2.0ml1.8％NaCl溶液校正为等渗溶液③加入2％SRBC溶液0.5ml，即为50％溶血状态(3)溶血素（抗SRBC Ab）①用SRBC免疫家兔得到兔抗SRBC血清②试验前应预先加热（56℃，30min），灭活补体③滴定溶血素的效价：产生完全溶血的最高稀释度为溶血素的效价(4)缓冲液①磷酸盐缓冲液或巴比妥缓冲液②pH应调至7.2-7.4之间③适量氯化钠保持等渗④并适量加入一些Ca2+和Mg2+(5)补体①作为待检对象：标本必须新鲜②作为主要试剂（单个补体检测）：多采用豚鼠血清，必须新鲜-70℃可保存数月，避免反复冻融存在个体差异, 三只以上血清混合使用3.CH50检测方法判定标准与计算标准：选择溶血程度与50％溶血的标准管相近的两管，以溶血程度最接近标准管的那一管定为终点管计算：CH50(U/ml）＝(1/血清用量）×稀释倍数参考范围：50-100 U/ml4.临床意义CH50主要检测的是经典途径的补体溶血活性，所反映的主要是补体9种成分的综合水平测定值过低或完全无活性，首先考虑补体缺陷，可分别检测血清中C4、C2、C3、C5等单个成份的含量三、单个补体成分的测定1.单个补体成分的检测对象主要包括：C3、C4、 C1q、B因子等2.测定方法：溶血法（检测单个补体的溶血活性）免疫化学法（测定补体含量）3.试验方法致敏SRBC+反应系统补体（缺待检成分）→不溶血致敏SRBC+反应系统补体（缺待检成分）+待检血清→溶血4.溶血法(1)原理：抗原与其特异性抗体（IgG、IgM型）结合后，可激活补体导致细胞溶解(2)组成：①试剂指示系统（致敏SRBC）②试剂补体系统（待检补体缺失）③待检血清（是否含待检补体？）(3)试剂补体系统选用先天或人为导致的缺乏某单一补体成分的动物或人血清作为试剂，如人缺C2血清、豚鼠缺C4血清、小鼠缺C5血清、兔缺C6血清等(4)应用与评价①诊断补体某单个成分缺失或其含量正常但无溶血活性的先天性补体缺陷②定性方法，检测单个补体成分③无需特殊仪器，快速，但灵敏度低，影响因素多四、补体结合试验（complement fixation test，CFT）1.反应系统的组成：抗原+Antibody->活化补体→溶血反应2.概念补体结合试验（complement fixation test，CFT）：将免疫溶血作为指示系统，用以检测另一反应系统中抗原或抗体的传统方法3.原理(1)三个系统（包括5个成分）：①反应系统：已知的抗原（或抗体）与待测的抗体（或抗原）②补体系统：C1-9及其缓冲液③指示系统：SRBC与相应溶血素（SRBC抗体）常预先混合形成致敏红细胞(2)补体作用无特异性，既可与反应体系中的抗原抗体复合物结合，也能与SRBCs结合(3)两个阶段：第一步：反应系统与补体系统作用第二步：指示系统（SRBCs）与剩余补体反应4.试验方法结果判定：(1)补体对照管 2U全溶，1U为全溶或略带少许RBC，0.5U应不溶(2)若0.5U补体对照管出现明显溶血，表示补体用量过多；如2U不出现溶血，表示补体用量不够(3)受检血清不溶血为阳性，溶血为阴性5.试验试剂(1)抗原和抗体的效价方法：方阵法进行滴定选择抗原与抗体二者都呈强阳性反应的最高稀释度作为抗原和抗体的效价（1单位）在正式试验中，抗原一般采用2－4单位，抗体为4个单位(2)补体效价的滴定①一般用豚鼠补体②每次试验前均应滴定③温育后，能产生完全溶血的补体最少用量确定为1个单位，正式试验中使用2个单位(3)血清标本的处理①采集血液标本后应及时分离血清，及时检验，或将血清保存在-20℃②血清在试验前应先加热56℃ 30min以破坏补体6.应用和评价(1)优点：①补体活化过程有放大效应，灵敏度较高②可用于定性或半定量检测未知抗原或抗体③试验条件要求低易于普及、结果易判断(2)缺点：①影响因素复杂，操作步骤繁琐②抗体必须为IgM或IgG五、补体测定的临床意义1.检测补体的单个成分及补体的活性测定对于机体免疫系统的功能评价，疾病的诊断与治疗等有重要意义(1)免疫性疾病①C1、C2、C3和Hf等缺陷②Ⅲ型超敏反应中C3aC5a等过敏毒素检测(2)遗传性疾病①C3缺陷导致的感染②C1抑制物缺陷与遗传性血管性水肿③I因子、H因子缺陷与肾小球肾炎等2.补体含量继发性降低的疾病(1)补体消耗增多：SLE、自身免疫性溶血性贫血、类风湿性关节炎、移植排斥反应等(2)细菌性感染，激活补体替代途径导致补体水平降低(3)大面积烧伤、大出血和肾病综合征等导致体液大量丧失(4)补体合成不足：急慢性肝炎、肝硬化、肝癌及营养不良等小结1.CH50试验的原理及方法学评价2.补体结合试验的原理及结果解释复习思考题：1.名词概念：Complement、CH50 test、CFT（Complement Fixation Test）2.思考题：请例举其他有补体参与的免疫学检测技术或方法。

溶血实验实验报告（范文2篇）以下是网友分享的关于溶血实验实验报告的资料2篇，希望对您有所帮助，就爱阅读感谢您的支持。

溶血实验实验报告（1）溶血实验报告溶血试验实验报告补体溶血反应实验分析篇一:细胞渗透性实验姓名系年级组别同组者科目细胞生物学实验题目细胞渗透性实验学号一、实验目的1.了解溶血现象及其发生机制2. 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。

3.掌握估测、比较各类物质进入细胞速度的方法。

二、实验原理细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障，是一种半透膜，可选择性地控制物质进出细胞。

将红细胞放在低渗溶液中，水分子大量渗透到细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中，溶液由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。

由于溶质渗透入细胞的速度不同，溶血的时间也不同，因此，发生溶血现象所用的时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。

影响物质穿膜能力大小的因素主要有三个:一是物质脂 1溶性的大小，因为膜骨架是有脂双层分子构成的，所以脂溶性物质易于穿过细胞膜;二是分子体积大小，较小的分子易穿过细胞膜;三是物质带电状况，因为细胞表面一般带电，不带电的物质易进入细胞。

判定细胞溶血不溶血的方法:溶血的溶液红的程度更高，且溶液发亮，透明度也更高。

二是可以在显微镜下观察细胞的形态。

细胞破裂后细胞形态并没有发生很大的变化，而是膜结构上有一个小口，膜还是有结构的，只不过体积变小了。

需要说明的等渗溶液中细胞也会是破裂的，因为生活状态下膜两侧不断交换物质，代谢产物的积累使细胞渗透压的平衡破坏，同时有些代谢物质对细胞是有毒性的，所以长时间放置会使细胞破裂，所以做等渗实验时间不宜超过1h。

本实验选用红细胞作为细胞膜渗透性的实验材料，将其放入不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。

三、实验材料试剂:鸡血，0.85%氯化钠溶液，0.0085%氯化钠溶液，0.8mol/L甲醇，0.8mol/L丙三醇，6%葡萄糖溶液，2%Triton X-1001姓名系年级组别同组者科目细胞生物学实验题目细胞渗透性实验学号用具:显微镜、粗天平、载破片、盖玻片、滴管2支、离 2心管2支、离心机、9试管、磁力搅拌器。

50%溶血试验（CH50）测定补体实验50%溶血试验即求得能使50%致敏羊红细胞发生溶血的最小量血清，然后计算出每毫升血清中补体含量。

以补体量作为横坐标，溶血百分数作为纵坐标，可得到一个清晰的“S”形曲线。

在50%溶血周围，线段近似一条直线。

因此当补体用量稍有变动，就可对溶血程度发生很大影响。

所以用50%溶血作为终点要比100%溶血更为敏感。

50%溶血试验定血清中补体含量用以下公式表示：每毫升血清中补体含量（单位）=（1/血清用量）×稀释倍数。

该公式可以从Von Krogh 方程式进一步加以论证：x=k[1/(1-y)]1/n。

假定X=加入的新鲜血清量，y= 溶血的百分率，以小数表示，V=斜率，k=常数，转变成对数，上述公式就变成：logx=logk+1/n log[y/(1-y)]，当以50%溶血作为终点时，y/(1-y)=0.5/(1-0.5)=1，代入上述公式，log x=log k+1/n log1，由于-log1=0，log x =log k，x=k，也即表示补体的50%溶血单位k就是加入的新鲜血清量。

材料及器材使用时取此原液50ml，加90ml蒸馏水，经高压灭菌后即可使用。

加入100%硫酸镁溶液1ml，可增强补体的效能；2、绵羊红细胞悬液（1×10g/ml）；3、溶血素（2U）；4、被检血清（新鲜豚鼠血清）；5、水平离心机；6、水浴箱；7、721型分光光度计。

方法1、浓度为1×10g/ml的绵羊红细胞配制取经稀释洗涤后的绵羊红细胞配成较5%稍浓的细胞悬液。

取50%细胞悬液1ml，加于14ml蒸馏水中测 O.D值为DI按下式求出于一定体积的5%细胞悬液中应加入稀释液的毫升数。

Vf=Vi(Di-Ds)/Ds，Vi为配制的50%细胞悬液体积，Vf为于一定量5%细胞悬液中应加入稀释的ml数Ds为已知标准化的1×100 个细胞/ml悬液的OD540值-0.385。

医学免疫学溶⾎实验实验报告溶⾎实验实验报告⼀．实验原理绵⽺红细胞SRBC为抗原，与相应的特异性抗体反应形成免疫复合物，通过经典途径激活补体，MAC在SRBC上打孔导致SRBC溶解⼆．实验器械⽆菌注射器酒精棉球碘酒⽆菌玻璃瓶⽌⾎带镊⼦⼿术剪⽆菌棉签移液枪移液管锥形瓶量筒离⼼机试管⽆菌⽣理盐⽔⽢油⽔浴锅冰箱记号笔酒精灯三．实验步骤1．在绵⽺颈静脉剪⽑备⽪，⽤⽌⾎带扎住颈部，⽤碘酒消毒，再⽤酒精棉球脱碘，⽆菌注射器抽⾎，去除⽌⾎带，⽤⽆菌棉签⽌⾎，把抽出的⾎液放⼊⽆菌玻璃瓶注意要拔去针头。

2．在⽆菌实验室内，打开⽆菌玻璃瓶在酒精灯前晃动⼏下防⽌细菌感染，取5毫升绵⽺⾎，配平离⼼，取出弃上清液，再加⼊⽣理盐⽔洗涤，配平离⼼2⾄3次，弃上清得到绵⽺红细胞。

3．制备20%绵⽺红细胞悬液，⽤移液枪取两毫升绵⽺红细胞到锥形瓶，在⽤移液管取⼋毫升⽆菌⽣理盐⽔⾄锥形瓶振荡混匀。

制备2%绵⽺红细胞悬液，⽤移液枪取⼀毫升绵⽺红细胞之锥形瓶，再往量筒中倒⼊四⼗九毫升⽆菌⽣理盐⽔，倒⼊锥形瓶中振荡混匀。

4．免疫接种。

第1天，家兔多点⽪内注射绵⽺全⾎0.5毫升。

第3天，家兔多点⽪内注射绵⽺全⾎1毫升。

第5天，家兔多点⽪内注射绵⽺全⾎1.5毫升。

第7天，家兔多点⽪内注射绵⽺全⾎2毫升。

第9天，家兔多点⽪内注射绵⽺全⾎2.5毫升。

第12天，家兔⽿缘静脉注射20%SRBC1毫升。

第15天，家兔⽿缘静脉注射20%SRBC1毫升。

5．18天后试⾎。

家兔⽿缘静脉处脱⽑，⽤⾎管夹夹住，⽤注射器抽⾎观察效价是否合适。

6．⼼脏取⾎。

⼿术剪剪⽑备⽪，胸⾻左缘34肋间搏动最强处垂直进针取⾎20毫升分别放⼊两试管内。

7．溶⾎素制备与保存。

配平离⼼，取上清放⼊另⼀个试管内⽔浴30分钟，加⼊等体积⽢油灭活补体，记号笔写上标签。

再放⼊零下⼆⼗度冰箱冷藏。

8．。

溶血实验报告分析引言溶血实验是一种常见的实验方法，用于评估溶血作用对生物体的影响。

通过观察红细胞在不同条件下的变化，可以了解溶血现象的发生机制以及相关疾病的发展情况。

本报告旨在对溶血实验结果进行分析和解读，以期加深对溶血作用的理解。

实验目的本次实验的目的是通过溶血实验研究不同溶解剂对红细胞的溶血作用，从而探究不同因素对细胞膜的稳定性产生的影响。

实验方法1.实验材料准备：–受试红细胞悬液–生理盐水–不同浓度的溶解剂2.实验步骤：–将受试红细胞悬液均匀分配到不同试管中–分别向各试管中加入相应浓度的溶解剂–在不同时间点，观察红细胞的变化情况–记录溶血程度3.数据处理：–统计各试验组的溶血程度数据–绘制溶血程度与浓度/时间的关系图–分析各组数据，得出结论实验结果根据实验数据统计和分析，我们得到以下结果：溶解剂浓度/时间0min 15min 30min 45min0% 0% 0% 0% 0%0.1% 0% 5% 20% 45%0.5% 0% 15% 60% 80%1% 0% 30% 90% 100%从上表中可以观察到，随着溶解剂浓度的增加和时间的延长，溶血程度逐渐增加。

当浓度为0%时，红细胞完全不发生溶血现象；而当浓度达到1%时，红细胞全部发生溶血。

结果分析通过实验结果可以得出以下结论：1.溶解剂浓度对溶血程度有明显影响：–随着溶解剂浓度的增加，红细胞发生溶血的几率增加。

–浓度较低时，溶血程度相对较低；而当浓度超过一定阈值时，溶血程度迅速增加。

2.溶解剂作用时间对溶血程度的影响：–随着时间的延长，红细胞溶血程度逐渐增大。

–在相同溶解剂浓度下，溶血程度随着时间的累积而增加。

3.不同溶解剂对红细胞的溶血作用存在差异：–溶解剂的性质会影响溶血程度以及溶血速度。

–部分溶解剂在较低浓度下就能引发明显的溶血反应，而另一些溶解剂则需要较高浓度才能引起明显的溶血。

结论通过本次实验的溶血实验结果分析可以得出以下结论：1.溶解剂浓度和作用时间都是影响红细胞溶血程度的重要因素。