细胞生物学实验技术(一)课件

数据显示：FCM的数据
显示方式包括单参数直 X轴：代表荧光信号或散射光信号的强度，用
方图、二维点图、二维 等高图、假三维图和列
“通道数”表示，可以与光强度之间线性关系 或对数关系
表模式等。
Y轴：代表该通道内所出现具有相同光信号特征 性细胞的频率
二 维 等 高 图
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
细胞生物学技术
—流式细胞仪 应 用： ❖ 目前流式细胞仪(FCM)已在各学科中获得应
用。
❖ 细胞生物学：定量分析细胞周期并分选不同 细胞周期时相的细胞；分析生物大分子如 DNA、RNA、抗原、癌基因表达产物等物质 与细胞增殖周期的关系，进行染色体核型分 析，并可纯化X或Y染色体,等等。
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细胞生物学技术
★流式细胞术 ★Western Blot ★蛋白质芯片
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FALS Sensor
Fluorescence detector
+
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细胞生物学技术
—流式细胞仪

在呼吸链上，通过一系列氧化还原反应将NADH和FADH2中的电子传递给氧， 同时产生ATP的过程。
ATP的生成
在氧化磷酸化过程中，通过底物水平磷酸化和氧化磷酸化两种方式生成ATP。
光合作用与化能合成
光合作用
绿色植物和某些细菌利用光能将二氧化碳和水转化为有机物 ，并释放出氧气的过程。
化能合成
某些细菌利用无机物氧化释放的能量将二氧化碳还原为有机 物的过程。
由DNA和蛋白质组成，是遗 传物质的载体。
染色体与基因关系
基因是具有遗传效应的DNA 片段，染色体上分布着许多基
因。
细胞核功能
遗传信息储存、复制和转录， 控制细胞代谢和遗传特性。
03
细胞的物质运输与信号转导
物质的跨膜运输方式
被动运输
包括简单扩散和易化扩散，不需 要消耗能量，物质顺浓度梯度转
运。
主动运输
研究对象
从单细胞生物到多细胞生物的各 类细胞，包括原核细胞、真核细 胞、动物细胞、植物细胞等。
细胞生物学的发展历史
01
02
03
早期研究
17世纪，列文虎克首次观 察到细胞；19世纪，施莱 登和施旺提出细胞学说。
20世纪中期
电子显微镜的发明，使得 细胞超微结构的研究成为 可能。
20世纪后期至今
分子生物学技术的发展， 推动了细胞生物学向分子 水平的研究深入。
05
细胞的增殖与遗传
细胞周期与有丝分裂
01
02
细胞周期的概念及阶段划分
有丝分裂的过程与特点
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04
纺锤丝的形成和作用
染色体行为与遗传物质均等分 配的关系
减数分裂与生殖细胞的产生
01
02

mmol／L氯化钾、0.5 mmol／L氯化镁、l mmol／L乙二醇双乙胺醚、0.1mmol／L乙二胺 四乙酸、1 mmol／L巯基乙醇，调至pH 7.2。 (4) 1％Tritan X-100：用M缓冲液配制。 (5) 3％戊二醛：用M缓冲液配制。 (6) 中性树胶。
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四、实验材料
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2、周皮： 取椴木茎或茶、桑、梨茎横切制片或马铃薯块茎制
片，从低倍到高倍进行观察。可见茎的外方有几层扁平砖 形，排列整齐而紧密的细胞，被染成红褐色，这是木栓层。 其内侧有一层细胞，着色较浅，细胞核明显可见，这是木 栓形成层。木栓形成层内侧有1至几层稍大，排列疏松的 同形细胞，是为栓内层。三者合称为周皮。木栓层、木栓 形成层和栓内层细胞的径向壁常在同一直线上，据皮可与 皮层细胞相区别。在周皮上还可观察到向外突起的皮孔， 有排列疏松的补充细胞存在。
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❖ （三）输导组织：
1、导管： 取南瓜茎（或向日葵茎）横切制片，先用肉眼观察，
在横切面上可见有5-7个分离的维管束，呈环状排列。然 后在低倍镜下观察其中一个维管束，中部红色的是木质部， 它的内外两边染成蓝色或绿色的是韧皮部（双韧维管束）
用铅笔的橡皮头垂直方向，轻轻敲打盖玻片，使材料 成云雾状，然后置显微镜下观察，可见到染成红色而分离 的导管分子，仔细观察其侧壁增厚和端壁穿孔的现象。
• 材料：洋葱鳞叶、双子叶植物叶、马铃薯块茎、 芹菜、梨果、南瓜茎、柑橘果皮、松针叶
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五、实验步骤（细胞骨架观察）
1．用镊子撕取洋葱鳞叶内侧的表皮若干片(约l cm2大 小若干片)，置于50 mL烧杯中，加入pH 6.8磷酸缓冲 液，使其下沉。

感染性疾病
如病毒感染、细菌感染等，细胞凋亡和自噬在宿主细胞防御病原体入 侵和清除感染源中发挥重要作用。
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THANKS
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细胞凋亡和自噬在疾病中的作用
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肿瘤
细胞凋亡和自噬在肿瘤发生、发展和治疗中具有重要作用。肿瘤细胞 通过逃避凋亡和自噬的监控，实现无限增殖和侵袭转移。
神经退行性疾病
如阿尔茨海默病、帕金森病等，神经元细胞的凋亡和自噬异常导致神 经元死亡和功能障碍。
心血管疾病
如心肌缺血再灌注损伤、动脉粥样硬化等，细胞凋亡和自噬参与血管 内皮细胞损伤和炎症反应。
包括前期、中期、后期和末期四个阶段，主要特点是DNA复制一次，细胞分裂一次，形成两个与母细胞相同的子 细胞。
减数分裂的过程
包括第一次减数分裂和第二次减数分裂两个阶段，主要特点是DNA复制一次，细胞连续分裂两次，形成四个与母 细胞不同的子细胞。减数分裂是生物体进行有性生殖的基础，对于维持物种的遗传多样性和适应性具有重要意义 。
细胞骨架由微管、微丝和中间纤维构 成，维持细胞形态，保持细胞内部结 构的有序性，参与细胞运动、分裂和 分化等过程。
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线粒体与能量转换
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线粒体的结构与功能
线粒体由外膜、内膜和基质组成，内膜上附有大量的酶，是有氧呼吸的主要场所，为细胞 提供能量。
ATP的合成与分解
在线粒体中，通过氧化磷酸化过程合成ATP，为细胞提供能量；同时，细胞也可以通过 ATP的分解来释放能量。
细胞生物学的定义
研究细胞结构、功能、生长、分 裂、分化、代谢、遗传与变异的 科学。

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镜普 通 复 氏 显 微
镜相 差 显 微
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镜暗 视 野 显 微
镜荧 光 显 微
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3、如何提高显微镜 分辨率
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1、数片孔径：孔径愈大，显微镜能力俞强。 2、分辨率：分辨率以分辨俩点之间的最小距离表示。 目镜与显微镜的分辨率无关，物镜的分辨率即为显微 镜的分辨率，照明光线波长越短，物镜的数值孔径越
大显微镜的分辨率的越大。 3、放大率：总放大率超过物镜数值孔径的1000倍时， 细微结构分辨不清，为空的放大， 低于500倍时由于放大率过低，肉眼难以分辨。 4、焦点深度：焦深加大，总放大率提高。
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三、实验器材
观察材料（草履虫，洋葱内表皮，紫鸭趾 草等花粉，菠菜叶），普通光学显微镜， 暗视野显微镜，相差显微镜，荧光显微镜， 载玻片，盖玻片，吸管，镊子，剪刀等。
观察。
3．紫鸭趾草花粉外形、表面突起的观察在载玻片
上滴一滴水，取紫鸭趾草雄蕊在其中沾几下，然后
盖片观察。
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实验一、几种光学显微镜的使用
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一、实验目的：
了解几种光学显微镜的结构、使用 方法、工作原理等。 掌握使用普通光学显微镜提高分辨 率的方法。
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二、实验原理ห้องสมุดไป่ตู้
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1、基本原理
一般光学显微镜主要是由目镜、物镜、 聚光器以及反光镜等构成。 各种光学显微镜的放大原理基本相同， 各种特殊用途的显微镜只是在主要器 件上进行了稍微改动而已。