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虎杖中羟基蒽醌的提取分离实验报告好吧，今天咱们来聊聊虎杖，没错，就是那种听起来有点陌生但又不乏神秘的植物。
虎杖可不是普通的草，它的根部可是大有来头，里面藏着不少对身体有益的东西，尤其是羟基蒽醌。
这玩意儿可是一种化合物，听起来高大上，但实际上咱们提取它的过程就像做一道简单的家常菜，过程简单而有趣，今天就给大家讲讲我是如何“做”这道菜的。
咱们得找点虎杖，哈哈，别误会，不是要你去山里找。
超市或者中药店都有卖，价格还不贵。
把虎杖买回来，拿到厨房，得先把它们清洗干净。
想想这过程，就像给小朋友洗手一样，洗得干干净净，才能开始接下来的步骤。
洗完之后，把虎杖切成小段，切的时候别心急，慢慢来，免得切得一团乱，手指也被划伤，那可就得不偿失了。
咱们就要用水煮这些虎杖段。
记得水要多放点，不然煮得时候容易糊底。
把切好的虎杖段放进锅里，火开到中火，别忘了搅搅。
这个时候，你可以边等边想象下羟基蒽醌的样子，心里盘算着等会提取出来要做什么，真是令人期待呢。
水开了之后，咱们就要让它煮一段时间，差不多四五十分钟吧。
时间一到，整个厨房都是虎杖那种独特的香味，简直让人垂涎欲滴，忍不住想尝一口。
煮好了之后，得把液体和固体分开。
用个滤网把液体过滤出来，哎呀，那个过程可真有意思，就像在做科学实验。
看着清澈的液体流出来，心里那个成就感呀，简直像小孩儿拿到了糖果一样。
这个液体就是咱们的提取物了，里面就有羟基蒽醌。
咱们得让这个液体蒸发掉一部分水分，浓缩一下，让羟基蒽醌的含量更高。
你可以把液体倒进小锅里，开小火慢慢蒸发，记得时不时去看看，不然一不小心就焦了，那可就糟了。
水分蒸发到一定程度后，咱们的提取物就变得稠稠的，像是蜜糖一样。
别急，这时候可以把它放到一个小瓶子里，晾凉。
等它完全凉了之后，就能看到一些沉淀物，那就是咱们的羟基蒽醌了。
想想这个过程，真是让人心潮澎湃，仿佛自己成了个小小科学家，做出了伟大的发现。
可以想象，有一天，你把这个提取物拿给朋友们，说：“看，我自己提取的羟基蒽醌，厉害吧？”他们肯定目瞪口呆，羡慕得不行。
第1篇一、实验目的1. 学习和掌握虎杖蒽醌的提取和鉴定方法。
2. 了解虎杖蒽醌的药理作用及其在中药中的应用。
3. 提高实验室操作技能和实验数据分析能力。
二、实验原理虎杖（Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.）是蓼科蓼属植物，其根茎和茎叶中含有丰富的蒽醌类化合物，其中以虎杖蒽醌为主。
虎杖蒽醌具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药理作用。
本实验采用溶剂提取法提取虎杖中的蒽醌类化合物，并通过薄层色谱法进行鉴定。
三、实验材料与仪器材料：1. 虎杖根茎（干燥）2. 乙醇3. 氯仿4. 硅胶薄层板5. 香草醛6. 浓硫酸7. 氢氧化钠溶液8. 水合氯醛9. 无水硫酸钠10. 氢氧化钠乙醇溶液仪器：1. 水浴锅2. 热风干燥箱3. 薄层色谱仪4. 分析天平5. 离心机6. 电子显微镜7. 滴定管四、实验方法与步骤1. 提取（1）称取干燥的虎杖根茎10g，用乙醇浸泡过夜。
（2）将浸泡后的虎杖根茎放入索氏提取器中，用乙醇回流提取4小时。
（3）提取液过滤，滤液浓缩至近干，加入氯仿溶解。
（4）将氯仿溶液转移至分液漏斗中，用氢氧化钠溶液萃取，分取有机层。
（5）有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩至近干。
（6）残渣用乙醇溶解，定容至10ml，得到虎杖蒽醌提取液。
2. 鉴定（1）薄层色谱法① 点样：取虎杖蒽醌提取液、香草醛溶液和对照品溶液，分别点于硅胶薄层板上。
② 展开：将薄层板置于展开缸中，用氯仿-甲醇-醋酸（体积比8:1:1）为展开剂，展开至前沿。
③ 显色：取出薄层板，晾干，喷以浓硫酸-水合氯醛（体积比1:1）溶液，加热至斑点显色。
④ 比较鉴定：将展开后的薄层板与对照品进行比移值（Rf值）比较，鉴定虎杖蒽醌的存在。
五、实验结果与分析1. 通过薄层色谱法，在展开后的薄层板上观察到与对照品相同的斑点，说明虎杖中存在蒽醌类化合物。
2. 通过实验，成功提取并鉴定了虎杖中的蒽醌类化合物，为虎杖的药理作用研究提供了实验依据。
虎杖中蒽醌类物质的提取、分离及鉴定（吕培银）【药物简介】虎杖，又名阴阳莲、斑杖、苦杖、酸汤杆等。
可在春、秋两个季节采挖，除去须根，洗净后，趁鲜切短段或厚片，晒干。
微苦，微寒。
归肝、胆、肺经。
利湿退黄，清热解毒散瘀止痛，止咳化痰。
用于湿热黄疸，淋浊，带下，风湿痹痛，痈肿疮毒，水火烫伤，经闭，癥瘕，跌打损伤，肺热咳嗽。
虎杖中主要含有蒽醌类、二苯乙烯类、黄酮类、香豆素类以及一些脂肪酸类化合物。
药理作用包括抗炎、抗病毒、抗菌、调血脂、抗血栓、改变血流变、扩张血管、保护心肌、抗氧化、抗肿瘤，改善阿尔茨海默症及预防艾滋病等。
【实验目的】一、学会撰写实验方案。
二、掌握中药材有效成分回流提取的方法和操作。
三、掌握pH梯度萃取法分离不同酸度游离羟基蒽醌的原理和操作。
四、掌握硅胶柱层析的操作方法。
五、掌握羟基蒽醌的理化检识和薄层检识方法。
【实验原理】羟基蒽醌类化合物及二苯乙烯类成分均可溶于乙醇，所以可以采用乙醇回流提取法，利用羟基蒽醌类苷元与苷的溶解度差异可以用乙醚捏溶的方法分离游离的蒽醌衍生物苷元和蒽醌苷类。
根据游离羟基蒽醌类化合物含有酚羟基数目和位置不同，不同表现出酸性强弱不同，利用梯度pH萃取法分离不同酸性强弱的有蒽醌衍生物。
硅胶吸附柱色谱法的原理是物质的吸附性具有差别，属于物理吸附。
碱梯度萃取虎杖中主要蒽醌的方法，优点是简单快捷，但很难提取到单一的蒽醌，往往夹带有酸性接近的蒽醌，要通过多次重结晶或色谱再分离，才能获得单一蒽醌，收率低。
柱色谱法虽然能分离到单一蒽醌，但是该法耗时间费溶剂，难以形成规模生产。
【1】化学检识的原理是羟基蒽醌类在碱性溶液中发生颜色改变，会使颜色加深，多呈橙、红、紫红色以及蓝色。
该显色反应与形成共轭体系的酚羟基和羰基有关。
【实验用品】实验材料：虎杖（100g）、95%的乙醇、乙醚、5%NaHCO3溶液、5%Na2CO3溶液、2%NaOH溶液、硅胶、石油醚、乙酸乙酯、MgAc2乙醇溶液。
天然药物化学题库+答案一、单选题（共50题，每题1分，共50分）1、苷类化合物是指（）A、含有氨基酸的化合物B、多元醇C、含有羟基的羧酸D、酸和碱形成的化合物E、糖与非糖物质形成的化合物正确答案：E2、在“虎杖中蒽醌成分的提取分离”实验里，5%Na2CO3液萃取酸化后得到的沉淀颜色是（）。
A、黄色B、黄棕色C、橙黄色D、橙红色E、棕褐色正确答案：A3、总游离蒽醌的醚溶液，用5%Na2CO3水溶液萃取可得到（）。
A、带1个α- 羟基蒽醌B、有1个β-羟基蒽醌C、有2个α- 羟基蒽醌D、1，8二羟基蒽醌E、含有醇羟基蒽醌正确答案：B4、中药丹参中治疗冠心病的醌类成分属于（）。
A、二蒽醌类；B、萘醌类C、菲醌类D、苯醌类E、蒽醌类正确答案：C5、香豆素类化合物进行TLC检识时，最常用的吸附剂是（）A、活性炭B、氧化铝C、硅胶D、纤维素E、硅藻土正确答案：C6、下列皂苷中具有抗溶血作用的是（）。
A、薯蓣皂苷B、甘草皂苷C、A型人参皂苷D、B型人参皂苷E、C型人参皂苷正确答案：C7、去氧糖常见于（）中A、甾体皂苷B、黄酮苷C、三萜皂苷D、蒽醌苷E、强心苷正确答案：E8、乙醇提取生物碱是利用（）性质。
A、生物碱盐易溶于水B、生物碱有挥发性C、生物碱和其盐均溶于醇D、生物碱碱性强E、游离生物碱亲脂性强正确答案：C9、以下哪个不是常用的苷键裂解法（）A、醇催化水解法B、酶催化水解法C、氧化开裂法D、碱催化水解法E、酸催化水解法正确答案：A10、有关人参皂苷叙述错误的是（）。
A、C型是齐墩果烷型的衍生物B、人参总皂苷可按皂苷提取通法提取C、A型、B型苷元是达玛烷型衍生物D、A型、B型有溶血作用，C型有抗溶血作用E、人参总皂苷无溶血作用正确答案：D11、”渗漉法提取黄柏中小檗碱“实验里，药材浸泡液应（）。
A、倒出留用B、倒弃C、滤纸滤出倒弃D、滤布滤出倒弃E、滤布滤出留用正确答案：E12、为了排除干扰，证明生物碱的存在，沉淀反应至少要进行（）。
天然药物化学模拟习题与参考答案一、单选题（共70题，每题1分，共70分）1、秦皮中的药效成分主要为( )A、生物碱B、黄酮C、蒽醌D、香豆素E、以上都不对正确答案：D2、可将天然药物水提液中的亲水性成分萃取出来的溶剂是( )A、乙醚B、丙酮C、正丁醇D、醋酸乙脂E、乙醇正确答案：C3、液-固吸附色谱的固定相是( )A、固体B、液体C、流体D、气体E、以上都可以正确答案：A4、香豆素类化合物进行吸附薄层色谱检识时，常用硅胶为吸附剂，展开剂常用( )A、偏酸性混合溶剂或中等极性混合溶剂B、偏碱性混合溶剂或中等极性混合溶剂C、偏碱性混合溶剂D、偏酸性混合溶剂E、中性混合溶剂正确答案：A5、在“绞股兰总皂苷的分离纯化”实验中，碱洗后用水洗目的为( )。
A、提高树脂吸附力B、去除碱液C、洗脱成分D、溶解杂质E、调节酸碱度正确答案：B6、A型人参皂苷的苷元是 ( )。
A、20(S)-原人参二醇B、20(S)-原人参三醇C、人参二醇D、人参三醇E、齐墩果酸正确答案：A7、分离游离蒽醌衍生物最常用的方法是( )。
A、碱溶酸沉法B、重结晶法C、pH梯度萃取法D、简单萃取法E、色谱法正确答案：C8、区别6，7-呋喃香豆素与7，8-呋喃香豆素可分别加碱水后，采用( )显色区别之A、异羟肟酸铁反应B、Gibb's反应C、FeCl3反应D、Molisch反应E、醋酐-浓硫酸正确答案：B9、为了排除干扰，证明生物碱的存在，沉淀反应至少要进行( )。
A、一个B、三个C、五个D、四个E、二个正确答案：B10、异羟肟酸铁反应的基团是( )A、甲氧基B、酚羟基C、羧基D、内酯环E、芳环正确答案：D11、区别油脂和挥发油,一般可采用( )A、挥发性试验B、色谱检识C、泡沫试验D、升华试验E、溶血试验正确答案：A12、用下列何法水解可以得到原生苷元 ( )A、0.02~0.05mol/LB、3%~5%C、2%NaOH水溶液D、NaHCO3，水溶液E、2%KOH醇溶液正确答案：A13、单萜类化合物分子中的碳原子数为( )A、15个B、25个C、5个D、20个E、10个正确答案：E14、在“绞股兰总皂苷的分离纯化”实验中，95%乙醇的洗脱速度应控制为( )。
<实验> 虎杖中游离羟基蒽醌成分的提取和分离
虎杖为蓼科植物虎杖（Polygonumcus pidatum siedet Zucc）的根及根茎。
别名阴阳莲，花斑竹。
味苦、性微寒。
能清热解毒、祛风利湿、利尿通淋、祛痰、止咳、通经等。
主要用于湿热黄疸、风湿痹痛、淋浊带下、经闭、烫伤。
虎杖中含有较多的羟基蒽醌类成分及二苯乙烯类成分。
其中主要有大黄素、大黄、大黄素-6-甲醚、大黄素3-D-葡萄糖苷及β-谷甾醇、鞣质等。
虎杖得主要药理作用有抗菌、抗病毒及镇咳平喘、常用来治疗急性炎症、烧烫伤、肝炎、气管炎等。
一、虎杖中主要成分的结构与性质
1．大黄素（Emodin）：橙黄色长针晶（丙酮中结晶为橙色，甲醇中结晶为黄色），
mp256-257℃。
几不溶于水，对于下列溶剂的溶介度分别为：四氯化碳0.01%，氯仿0.0718%，二硫化碳0.009%，乙醚0.14%，苯0.0415。
易溶于乙醇，可溶于氨水，碳酸钠和氢氧化钠水溶液。
OH HO
OH
CH3 O
O
2．大黄酚（Chrysophanol）:金黄色六角型片状结晶（丙酮中结晶）或针状结晶（乙醇中结晶）。
mp 196℃，能升华。
易溶于乙醚、氯仿、苯、冰乙酸、乙醇, 稍溶于甲醇，难溶于石油醚，不溶于水、碳酸氢钠和碳酸钠水溶液。
可溶氢氧化钠水溶液及热碳酸钠水溶液。
OH OH
CH3
O
O
3．大黄素6-甲醚，（Emodinmonomethl ether）:金黄色针晶，mp207℃，能升华。
可溶于氢氧化钠水溶液，溶解度与大黄酚相似。
OH OH
CH 3O
CH O O 3
4．大黄素6-甲醚6-D-葡萄糖苷（Anthraglycosibe A ）：黄色针晶（稀甲醇中结晶）mp230-232℃。
O CH 3O
OH
O O CH 3glu
5．大黄素3-D-葡萄糖苷（Anthraglycoside B ）:浅黄色针晶（稀乙醇中结晶含1分子水mp190-191℃。
O HO
CH glu O O OH
3
6．白藜芦醇（Resveratrol ）：无色针状结晶，mp256-257℃，216℃升华，易溶于乙醚、氯仿、甲醇、乙醇、丙酮等。
CH CH
OH
OH HO
7．白藜芦醇葡萄糖苷（polydotinpeceid ）：无色颗粒状结晶，双熔点分别为130-140℃225～226℃，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、热水，可溶于乙酸乙酯、可溶于碳酸钠和氢氧化钠水溶液中，稍溶于冷水，难溶于乙醚。
CH CH
OH
O HO glu
8．β-谷甾醇
9．鞣质：属缩合鞣质，可溶于醇及水，不溶于苯、乙醚、氯仿等。
另外，虎杖叶、茎中含少量羟基蒽醌类化合物、有机酸、槲皮苷、异槲皮苷、虎杖黄酮苷、扁蓄苷、金丝桃苷及芸苷、Vtio等。
二、实验原理：
羟基醌类化合物及二苯乙烯类成分，均可溶于乙醇中，故可用乙醇将它们取出来。
羟基蒽醌类易溶于乙醚等弱极性溶剂，白藜芦醇苷在乙醚中溶解度很小，利用它们对乙醚的溶解性差异使羟基蒽醌类与白藜芦醇苷分离，再利用各羟基蒽醌类结构上的不同所表现酸性不同，用PH梯度萃取法分离它们。
三、实验方法：
（一）提取
乙醇总提取物的制备：取虎杖粗粉200g，于1000ml圆底烧瓶中回流，第一次加500ml 乙醇回流一小时，第二次加300ml乙醇回流30分钟，第三次加250ml乙醇回流30分钟，合并三次乙醇提取液，放置，如有沉淀可过滤一次，滤液减压回收乙醇至干，得膏状物。
（二）分离
1．亲脂性成分与亲水性成分的分离：
将上述膏状物加水10ml，乙醚100ml充分振摇后放置，将乙醚液倾于500ml三角瓶中（水层不可倒出），再于烧瓶中加50ml乙醚振摇，放置，倾出乙醚液，同法操作六次，合并乙醚液即为亲脂性成分——总游离蒽醌，乙醚提取过的剩余物中含水溶性成分。
2．游离蒽醌分离：
（1）强酸性成分的分高：将上述含总游离蒽醌的乙醚液置100ml分液漏斗中，加5%碳酸氢钠水溶液40ml萃取（测5%碳酸氢钠PH值），放置使充分分层，若提取过程中乙醚挥发可补充，分出碱水溶液同法提取二次，合并碱水提取液，在搅拌下缓缓滴加6N盐酸调至pH=2，注意观察颜色变化，稍放置即可析出沉淀，抽滤，用水洗涤沉淀中性，将沉淀置蒸发皿上干燥，得强酸性成分。
（2）中等酸性成分——大黄素的分离：碳酸氢钠萃取过的乙醚液用5%碳酸钠溶液（测5%碳酸钠水溶液的pH值）萃取5～9次，每次40ml，直至萃取液较浅为止。
合并碳酸钠提取液，小心加盐酸调pH3，放置，抽滤，水洗沉淀至中性，抽干，干燥称重。
以甲醇一氯仿
或苯一氯仿（1：1）重结晶，得大黄酚和大黄素6-甲醚混合物。
注：大黄酚和大黄素6-甲醚二者相互分离比较困难，在本实验薄层条件下为同一斑点，可用层析用磷酸氢钙进行柱层析，以石油醚洗脱，下层黄色带洗脱后，以甲醇重结晶可得大黄酚，上层黄色带洗脱后以甲醇重结晶可得大黄素6-甲醚。
（3）中性成分——甾醇类化合物分离：氢氧化钠萃取过的乙醚液，用水洗至中性，以无水硫酸钠脱水，回收乙醚得残留物，以甲醇热溶二次（10ml，5ml）过滤合并甲醇液，浓缩，放置结晶，滤取沉淀并用少量石油醚洗涤，再用甲醇重结晶，得β-谷甾醇，mp136～137℃，取少许结晶，做醋酐——浓硫酸反应，观察现象。
（三）鉴定
化学检识：分别取大黄素、大黄酚等少许，用乙醚溶解，做如下反应：
A：碱液试验：取试液1ml，加20%NaOH数滴，观察颜色。
B．醋酸镁反应：取试样1ml，加醋酸镁试剂数滴，观察现袋。
2．薄层鉴定：
吸附剂：硅胶—CMC
展开剂：C6H6—EtoAc(3:2或97：9)。
显色剂：（1）氨蒸气熏。
（2）5%KOH喷雾。
