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COD较为详细的检测步骤及测试注意事项体验化学需氧量(COD)测定全过程2010-7-20 20:14:17体验化学需氧量(COD)测定全过程在水环境监测中，化学需氧量是一项十分重要的指标，也是我国总量控制的主要指标之一，在水污染控制、管理和节能减排中起了很大的作用。
在这篇文章中，跟大家共同体验化学需氧量测定的全过程，希望能加深对化学需氧量的了解，能将其监测数据测的更为准确，并通过测定的数据更深入地了解水体的水质状况和治理的途径。
1基本概念1.1为什么要测化学需氧量在自然界的循环中，水中的还原性物质，特别是有机化合物在生物氧化降解过程中消耗溶解氧而造成水体氧的缺损，溶解氧的缺损会破坏环境和生物群落的生态平衡，引起水质恶化，甚至发生溶氧消耗殆尽，厌氧菌滋生，造成水体变黑发臭。
这就需要针对水中的有机物进行监测。
由于有机化合物有数百万种，难以分别定性定量监测。
在实践的基础上，环境分析学家寻求到另一种途径，确定一种综合指标，利用有机化合物的还原性质，将耗氧的量作为一项新的指标，这样化学需氧量和生化需氧量就应运而生了。
由于生物氧化是一个缓慢的过程，一个月的时间也只能氧化到70,左右，这对污染治理的实际操作就显得滞后，分析化学家们将生物氧化的碳化部分定为五日生化需氧量(BOD)，虽在某种程5度上缩短了时间，但仍显得漫长。
在这种情况下，就出现了化学需氧量。
化学需氧量(Chemical Oxygen Demand，简称COD)是指水体中易被强氧化剂(一般采用重铬酸钾)氧化的还原性物质所消耗的氧化剂的量，结果折成氧的量(以mg/L计)。
它是表征水体中还原性物质的综合指标。
除特殊水样外，还原性物质主要是有机化合物，组成有机化合物的碳、氮、硫、磷等元素往往处于较低价的氧化价态。
为区别于采用高锰酸钾作氧化剂的测定，又将此结果称之为“化学需氧量”或“铬法COD”，记作“CODcr”，用高锰酸钾做氧化剂测出的结果称之为“高锰酸盐指数”或“锰法COD”，记作“COD”。
2019年21期方法创新科技创新与应用Technology Innovation and Application五日生化需氧量测定过程中稀释倍数的确定张维娜（云南省红河州环境监测站，云南红河州661199）引言现阶段五日生化需氧量测定方法中，根据操作方法的不同，可以分为稀释接种法、无汞压力法、微生物传感器法等几种。
其中，稀释接种法因为具有操作相对简便、测定结果精确度高等优势，成为一种应用最广的方法。
在运用稀释接种法进行五日生化需氧量测定时，稀释倍数的确定是其中一个重要环节。
而试验中常常根据待测样品的化学需氧量推导出稀释倍数。
因此，通过多次试验测定两者之间的关系，通过取平均值的方法近似的得出稀释倍数，为五日生化需氧量测定工作开展提供了数据支持。
1不同类型水样稀释倍数的确定对于不同水样的五日生化需氧量测定，虽然操作步骤并不复杂，但是要想获得高精度的测定结果，需要对试验环境、各项参数进行严格要求。
以稀释倍数为例，根据样品选取位置的不同，对地表水、轻度污染的工业废水等，由于样品中有机物、微生物含量相差较大，因此具体试验中需要确定的稀释倍数也有很大差异。
1.1地表水稀释倍数的确定首先观察地表水样品的物理特征，如果样品清澈或轻微浑浊，但是无异味，则先测定待测样品的溶解氧含量。
通常来说，如果溶解氧含量的范围处于6.2mg/L-9.8mg/L 之间，则符合稀释标准。
根据《地表水环境质量标准（GB3838-2002）》中的相关要求，对于符合上述条件的地表水待测样品，稀释倍数分别可以选择1倍、1.5倍和1.8倍。
如果观察地表水样品发现有明显的悬浮颗粒，且颜色偏黄，但是无异味，还是按照程序测定待测样品的溶解氧含量。
对于此类待测样品，如果溶解氧含量的范围处于3.5mg/L-5.5mg/L 之间，则符合稀释标准。
按照《地表水环境质量标准（GB3838-2002）》中的要求，可供选择的稀释倍数分别有1倍、2倍、3倍。
如果地表水样品有明显的沉淀、浑浊现象，闻到刺鼻的腥臭味，且溶解氧含量在3.5mg/L 以下，则判定该水质受到严重污染，为了保证五日生化需氧量测定结果精度，需要将稀释倍数扩大到5倍、20倍、50倍等多个档次。
bod cod toc指标一、什么是bod、cod和toc指标？1. bod指标bod是生化需氧量（Biochemical Oxygen Demand）的缩写，是用来衡量水体中有机物被微生物氧化分解的能力。
bod指标是通过测定水样中微生物在一定条件下对有机物进行氧化所需的氧气量来确定的。
bod指标通常被用来评估水体中的有机污染程度，较高的bod值表示水体中有机物质的含量较高，水体的污染程度也相应较高。
2. cod指标cod是化学需氧量（Chemical Oxygen Demand）的缩写，是用来衡量水体中有机物被氧化分解的能力。
cod指标是通过测定水样中氧化剂（通常是高浓度的二氧化钾溶液）对有机物进行氧化所需的氧气量来确定的。
cod指标可以用来评估水体中有机污染物的总量，它不仅包括可被微生物分解的有机物质，还包括无法被微生物分解的有机物质。
3. toc指标toc是总有机碳（Total Organic Carbon）的缩写，是用来衡量水体中有机物的总含量。
toc指标是通过测定水样中所有有机碳的总量来确定的。
toc指标可以用来评估水体中有机物的总体污染程度，它不仅包括可被微生物分解的有机物质，还包括无法被微生物分解的有机物质。
二、bod、cod和toc指标的应用1. 环境监测bod、cod和toc指标常常被用于环境监测中，特别是对水体的监测。
通过监测bod、cod和toc指标，可以评估水体的污染程度，判断水体是否适合用于饮用水、农业灌溉或工业用水等用途。
这些指标还可以用来评估废水处理系统的效果，监测废水排放是否符合环保标准。
2. 水质评估bod、cod和toc指标可以用来评估水体的质量。
根据这些指标的测定结果，可以判断水体中有机物质的含量和有机污染物的总量，从而评估水体的污染程度。
这对于保护水资源、维护生态平衡以及保障人类健康具有重要意义。
3. 水处理工艺控制bod、cod和toc指标对于水处理工艺的控制也非常重要。
有机污染物综合指标和类别指标生化需氧量有机污染物综合指标和类别指标中的生化需氧量（BOD）是用来评估水体、废水和污染物的生物降解能力的重要指标之一、BOD指标可以反映水体中可生物降解有机物的含量和污染程度，对于评价水质污染程度、水体富营养化程度以及废水处理效果具有重要作用。
生化需氧量是指在一定温度条件下，生物在氧气的供给下，对可生物降解有机物进行消耗氧气的需求量。
通常情况下，生化需氧量是在水样中放置一定时间（通常为5天）后，通过测定水样中剩余的溶解氧的消耗量来进行评估。
生化需氧量的单位通常为毫克氧气/升（mg/L）。
BOD指标在环境监测、废水处理、环境保护和水资源管理等领域中得到广泛应用。
BOD的高值通常与有机物的污染程度和降解能力较低相关。
水中有机物的增加将导致BOD值的升高，进而对水生生物产生不利影响。
一些常见的有机污染物如污水、废水、农药残留，工业废水和农业废水等都会导致BOD值的增加。
根据BOD指标的测定结果，可以将水中的有机物分类为以下几类：1. 容易降解类有机物：这类有机物的BOD值较低，一般在3 mg/L以下。
这些有机物容易被水中的微生物分解降解，对水体的污染程度相对较低。
2. 可降解类有机物：这类有机物的BOD值一般在10-20 mg/L之间。
这些有机物相对容易被水中的微生物降解，但是降解速度较慢，对水体的污染程度较高。
3. 不易降解类有机物：这类有机物的BOD值较高，一般在50 mg/L 以上。
这些有机物不容易被水中的微生物分解降解，对水体的污染程度最高。
生化需氧量BOD的测定结果能够为水体污染源和污染物的监测、评价和治理提供重要的依据。
通过监测BOD指标，可以了解水体的污染程度，为环境保护和水资源管理提供科学依据，并且为制定废水处理方案和监测水体富营养化程度提供重要信息。
环境监测中高锰酸盐指数（IMn）、化学需氧量（CODCr）、五日生化需氧量（BOD5）方法比较及相关性分析发布时间：2022-08-01T08:36:07.415Z 来源：《科学与技术》2022年第6期作者：徐家艳[导读] 高锰酸盐指数（IMn）、化学需氧量（CODCr）、五日生活需氧量（BOD5）等指标是反映水体受到耗氧有机物污染的综合指标，徐家艳大理州生态环境局南涧分局生态环境监测站云南大理南涧 675700摘要：高锰酸盐指数（IMn）、化学需氧量（CODCr）、五日生活需氧量（BOD5）等指标是反映水体受到耗氧有机物污染的综合指标，对于废水处理效果的控制及对地表水水质的评价多用这些指标，故在环境监测工作中，多数水样的项目都会涉及高锰酸盐指数（IMn）、化学需氧量（CODCr）、五日生活需氧量（BOD5）这三个指标。
这些指标相互间有一定的相关性，但由于其物理含义不同难于互相取代；由于水质耗氧有机物组成不同，这种相关性又不是固定的而是有较大的变化。
本文从环境监测工作实际出发，从高锰酸盐指数（IMn）、化学需氧量（CODCr）、五日生活需氧量（BOD5）三个常用指标的定义、分析方法原理、监测数据对比，从而进一步明确三者的相关性。
1.高锰酸盐指数（IMn）、化学需氧量（CODCr）、五日生活需氧量（BOD5）方法原理1.1高锰酸盐指数是指在酸性或碱性介质中，用高锰酸钾为氧化剂，处理水样时所消耗氧化剂的量，以氧的㎎/L来表示。
水中的硫化物、亚铁盐、亚硝酸盐等还原性无机物和在此条件下可被氧化的有机物均可消耗高锰酸钾。
故而高锰酸盐指数是衡量地表水受还原性无机物和有机物污染的重要指标。
方法原理：高锰酸盐指数测定方法详见《水质高锰酸盐指数的测定》（GB11892-89），其中酸性法基本原理是水样中加入硫酸使其呈酸性后，加入已知量的高锰酸钾溶液，在沸水浴中加热30分钟，高锰酸钾将样品中的某些有机物和无机还原性物质氧化，反应后加入过量的草酸钠还原剩余的高锰酸钾，再用高锰酸钾标准溶液回滴过量的草酸钠，通过计算得到样品中的高锰酸盐指数。
五日生化需氧量标准五日生化需氧量（BOD5）是用于评估水体中有机物的含量和水质的指标之一。
其测量方法是在一定温度下（通常为20℃）将水样培养五天，通过测量培养过程中溶解氧的变化来确定水样中有机物的氧化速率。
BOD5是筛选污染源、评估废水处理效果以及指导环境监测和监管的重要参数之一。
BOD5标准能够用于以下几个方面的应用：1. 环境监测：通过对水体中BOD5的测量，可以评估水质的状况，判断水体中有机物的污染程度。
根据不同的国家和地区的标准，可以将水体的水质分为不同的等级，从而进行相应的处理和管理。
2. 废水处理：对于排放废水的企业和单位，BOD5标准可以作为评估废水处理系统运行效果的指标之一。
通过对进出废水处理系统的水样进行BOD5的测定，可以确定处理效果和去除率，为进一步的处理工作提供依据。
3. 污染源筛选：对于一些潜在的污染源，通过对其排放物或者废水中的BOD5进行测定，可以评估其对周围水体的影响程度。
同时，可以通过对不同排放源的BOD5测定结果进行对比，筛选出主要的污染源，并进行相应的管控。
根据不同国家和地区的实际情况，对于BOD5的标准也有所不同。
以下是一些国家和地区常用的BOD5标准的参考内容：1. 美国环境保护署（EPA）标准：EPA将水质分为五个类别，其中BOD5的限制范围如下：- 优秀：≤ 2 mg/L- 良好：≤ 3 mg/L- 一般：≤ 6 mg/L- 差：≤ 8 mg/L- 极差：> 8 mg/L2. 欧盟标准：BOD5的标准在欧盟成员国中存在一定的差异，但大致范围如下：- 基于水体用途的分类：- 特殊水域（如饮用水源地）：≤ 1 mg/L- 淡水域（如湖泊、河流）：≤ 2 mg/L- 海洋和沿岸域：≤ 4 mg/L3. 中国国家标准：根据《水和废水监测分析方法》（HJ/T 91-2002）的规定，BOD5的标准如下：- 一级水质：≤ 3 mg/L- 二级水质：≤ 6 mg/L- 三级水质：≤ 20 mg/L- 四级水质：＞20 mg/L需要注意的是，BOD5标准仅是水质评估的参考依据之一，不应作为单一指标来评估水质状况。
生化需氧量,化学需氧量,总有机碳和总需氧
量
生化需氧量、化学需氧量、总有机碳和总需氧量是水质监测中常
用的指标，也是衡量水体有机质和营养状况的有效方法。
本文将围绕
这些指标，分步骤进行阐述。
一、生化需氧量
生化需氧量（BOD）是指水中微生物在有氧条件下分解可生物降
解有机物质所需的氧气量。
一般来说，水中有机质含量较高，生化需
氧量也会相应增加。
BOD的高低不仅反映了水体中的有机污染负荷，也能够反映水体自净能力的高低。
二、化学需氧量
化学需氧量（COD）是指水中可氧化有机物质的总需氧量，包括
生物降解和非生物降解的有机物质。
COD测试比BOD测试更快速、简便，能够快速反映水体中有机负荷的高低，但是由于其中不一定全部为可
生化有机物，所以COD和BOD的差异也很大。
三、总有机碳
总有机碳（TOC）是指水中有机碳的总量，包括可降解和不可降
解的有机碳。
TOC测试是采用光催化氧化法，可以快速地测定水中有机财富的含量，但它不能确定有机质的种类和来源。
四、总需氧量
总需氧量（TOD）是指水中所有需氧物质的综合量，包括生化需
氧量和化学需氧量。
总的来说，BOD、COD、TOC和TOD都是与水中有机物质有关的指标，但它们的检测方法和测量结果都有所不同。
因此，在进行水质监
测时，要根据需要选择合适的指标进行检测。
这些指标可以为我们了
解水体污染程度，保护水环境提供重要的参考。
生活污水、工业废水中含有大量的有机质,有机质在进行氧化分解时会消耗水质中大量的溶解氧,使得水体中的氧平衡遭到破坏,水体中的一些好氧型水生生物缺氧而死亡,水质遭到破坏。
五日生化需氧量简称BOD 5,指的是在有溶解氧的条件下,好氧微生物在分解水中的有机质的生物化学氧化过程中所消耗的溶解氧含量(mg/L),通过在一定条件下培养水样5d 进行生化需氧量的测定。
由于五日生化需氧量能相对反映出水体中可被微生物氧化的有机质的污染程度,因而在水质监测、水环境的功能评价以及有机污染的有效控制等方面都有相当重要的意义。
1测定方法稀释与接种法是指水样经稀释后充满溶解氧瓶,在20℃下恒温培养5d ,求出培养前后水样中溶影响五日生化需氧量测定的因素蔡丽1袁张波浪2(1.内江市环境监测中心站,四川内江641100;2.内江市生态环境局,四川内江641100)摘要：五日生化需氧量是衡量水质中有机物质污染程度的一个重要指标,在测定过程中易受到水样的保存、温度和pH 值、溶解氧、稀释水等因素的影响,导致检测结果出现误差。
文章介绍了五日生化需氧量的测定方法、原理以及测定五日生化需氧量的影响因素,并提出相应的解决方法。
关键词：五日生化需氧量;影响因素;水质中图分类号：X830文献标志码：A文章编号：(甘)LK000067(2019)02-39-41-03Factors Affecting the Determination of Five-DayBiochemical Oxygen DemandCai Li 1,Zhang Bolang 2(1.Neijiang Environmental Monitoring Center Station,Neijiang 641000,China;2.Neijiang Ecological Environment Bureau,Neijiang 641000,China )Abstract:Five-day biochemical oxygen demand (BOD)is an important index to measure the pol ⁃lution degree of organic substances in water quality.In the process of determination,BOD is easily af ⁃fected by water sample preservation,temperature and pH value,dissolved oxygen,diluted water and other factors,resulting in errors in test results.This paper introduces the measuring method and princi ⁃ple of five-day biochemical oxygen demand (BOD)and the influencing factors of BOD determination,and puts forward the corresponding solutions.Key words:biochemical oxygen demand of five days ;influencing factors;water quality收稿日期：2019-03-28作者简介：蔡丽(1988-),女,工程师,主要从事环境监测工作。
实验七 生化需氧量的测定 生化需氧量(BOD)是指在规定的条件下，微生物分解水中某些可氧化物质(主要是有机物)的生物化学过程中消耗溶解氧的量，用以间接表示水中可被微生物降解的有机类物质的含量，是反映有机物污染的重要类别指标之一。测定BOD的方法有稀释接种法、微生物传感器法、活性污泥曝气降解法、库仑滴定法、测压法等。本实验采用稀释接种法测定污水的BOD。该方法也称五天培养法(BOD5)，即取一定量水样或稀释水样，在20℃±1℃培养五天，分别测定水样培养前、后的溶解氧，二者之差为BOD5值，以氧的mg/L表示，其相关内容参阅教材第二章第八节。
一、实验目的和要求
1．掌握用稀释接种法测定BOD5的基本原理和操作技能。 2．复习第二章第八节中的相关内容，提出为保证测定准确度，应当控制好哪些条件。 二、仪器
1．恒温培养箱。 2．5～20L细口玻璃瓶。 3．1000～2000mL量筒。 4．玻璃搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长200mm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板。
5．溶解氧瓶：200～300mL，带有磨口玻璃塞，并具有供水封用的钟形口。 6．虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。 三、试剂 1．磷酸盐缓冲溶液：将8.58磷酸二氢钾(KH2PO4)，2. 75g磷酸氢二钾(K 2HPO4)，33.4g 磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)和1.7g氯化铵(NH4C1)溶于水中，稀释至1000mL。此溶液的pH 应为7.2。 2．硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中，稀释至1000mL。 3．氯化钙溶液；将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。 4，氯化铁溶液；将0.25g氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水，稀释至1000mL。 5．盐酸溶液(0.5mol/L)：将40mL(ρ=1.18g/mL)盐酸溶于水，稀释至100mL。 6．氢氧化钠溶液(0.5mol/L)：将20g氢氧化钠溶于水，稀释至1000mL。 7．亚硫酸钠溶液(1/2Na2SO3＝0.025mol/L)；将1.575g亚硫酸钠溶于水，稀释至1000mL。此溶液不稳定，需每天配制。
8．葡萄糖-谷氨酸标准溶液；将葡萄糖(C6H12O6)和谷氨酸(HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH)在103℃干燥lh后，各称取150mg溶于水中，移入1000mL容量瓶内并稀释至标线，混合均匀。此标准溶液临用前配制。
9．稀释水：在5～20L玻璃瓶内装入一定量的水，控制水温在20℃左右。然后用无油空气压缩机或薄膜泵，将此水曝气2～8h，使水中的溶解氧接近于饱和，也可以鼓入适量纯氧。瓶口盖以两层经洗涤晾干的纱布，置于20℃培养箱中放置数小时，使水中溶解氧含量达8mg/L左右。临用前于每升水中加入氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲溶液各1mL，并混合均匀。稀释水的pH值应为7.2，其BOD5应小于0.2mg/L。
10．接种液：可选用以下任一方法获得适用的接种液。 (1) 城市污水，一般采用生活污水，在室温下放置一昼夜，取上层清液供用。 (2) 表层土壤浸出液，取100g花园土壤或植物生长土壤，加入1L水，混合并静置10min，取上清溶液供用。
(3) 用含城市污水的河水或湖水。 (4) 污水处理厂的出水。 (5) 当分析含有难于降解物质的废水时，在排污口下游3～8km处取水样做为废水的驯化接种液。如无此种水源，可取中和或经适当稀释后的废水进行连续曝气，每天加入少量该种废水，同时加入适量表层土壤或生活污水，使能适应该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量絮状物，或检查其化学需氧量的降低值出现突变时，表明适用的微生物已进行繁殖，可用做接种液。一般驯化过程需要3～8天。
11．接种稀释水；取适量接种液，加于稀释水中，混匀。每升稀释水中接种液加入量为：生活污水1～10mL；表层土壤浸出液为20～30mL；河水、湖水为10～100mL。接种稀释水的pH值应为7.2，BOD5值以在0.3～1.0mg/L之间为宜。接种稀释水配制后应立即使用。
四、测定步骤
1．水样的预处理 (1) 水样的pH值若超出6.5～7.5范围时，可用盐酸或氢氧化钠稀溶液调节至近于7，但用量不要超过水样体积的0.5%。若水样的酸度或碱度很高，可改用高浓度的碱或酸液进行中和。
(2) 水样中含有铜、铅、锌、镉、铬、砷、氰等有毒物质时，可使用经驯化的微生物接种液的稀释水进行稀释，或提高稀释倍数，降低毒物的浓度。
(3) 含有少量游离氯的水样，一般放置1～2h，游离氯即可消失。对于游离氯在短时间不能消散的水样，可加入亚硫酸钠溶液，以除去之。其加入量的计算方法是：取中和好的水样100mL，加入1+1乙酸10 mL，10％(m/V)碘化钾溶液l mL，混匀。以淀粉溶液为指示剂，用亚硫酸钠标准溶液滴定游离碘。根据亚硫酸钠标准溶液消耗的体积及其浓度，计算水样中所需加亚硫酸钠溶液的量。
(4) 从水温较低的水域或富营养化的湖泊采集的水样，可遇到含有过饱和溶解氧，此时应将水样迅速升温至20℃左右，充分振摇，以赶出过饱和的溶解氧。从水温较高的水域废水排放口取得的水样，则应迅速使其冷却至20℃左右，并充分振摇，使与空气中氧分压接近平衡。
2．水样的测定 (1) 不经稀释水样的测定；溶解氧含量较高、有机物含量较少的地面水，可不经稀释，而直接以虹吸法将约20℃的混匀水样转移至两个溶解氧瓶内，转移过程中应注意不使其产生气泡。以同样的操作使两个溶解氧瓶充满水样后溢出少许，加塞水封。瓶不应有气泡。立即测定其中一瓶溶解氧。将另一瓶放入培养箱中，在20±1℃培养5d后。测其溶解氧。
(2) 需经稀释水样的测定：根据实践经验，稀释倍数用下述方法计算：地表水由测得的高锰酸盐指数乘以适当的系数求得(见下表)。
高锰酸盐指数(mg/L) 系 数 <5 — 5～10 0.2、0.3 10～20 0.4、0.6 >20 0.5、0.7、1.0
工业废水可由重铬酸钾法测得的COD值确定，通常需作三个稀释比，即使用稀释水时，由COD值分别乘以系数0.075、0.15、0.225，即获得三个稀释倍数；使用接种稀释水时，则分别乘以0.075、0.15和0.25，获得三个稀释倍数。
CODcr值可在测定水样COD过程中，加热回流至60min时，用由校核试验的邻苯二甲酸氢钾溶液按COD测定相同步骤制备的标准色列进行估测。
稀释倍数确定后按下法之一测定水样。 ① 一般稀释法：按照选定的稀释比例，用虹吸法沿筒壁先引入部分稀释水(或接种稀释水)于1000mL量筒中，加入需要量的均匀水样，再引入稀释水(或接种稀释水)至800mL，用带胶板的玻璃棒小心上下搅匀。搅拌时勿使搅棒的胶板露出水面，防止产生气泡。
按不经稀释水样的测定步骤，进行装瓶，测定当天溶解氧和培养5d后的溶解氧含量。 另取两个溶解氧瓶，用虹吸法装满稀释水(或接种稀释水)作为空白，分别测定5d前、后的溶解氧含量。
② 直接稀释法：直接稀释法是在溶解氧瓶内直接稀释。在已知两个容积相同(其差小于lmL)的溶解氧瓶内，用虹吸法加入部分稀释水(或接种稀释水)，再加入根据瓶容积和稀释比例计算出的水样量，然后引入稀释水(或接种稀释水)至刚好充满，加塞，勿留气泡于瓶内。其余操作与上述稀释法相同。 在BOD5测定中，一般采用叠氮化钠修正法测定溶解氧。如遇干扰物质，应根据具体情况采用其他测定法。溶解氧的测定方法附后。
3．BOD5计算 不经稀释直接培养的水样： BOD5(mg/L)=c1-c2 式中：cl—水样在培养前的溶解氧浓度(mg/L)； c2—水样经5d培养后，剩余溶解氧浓度(mg/L)。 经稀释后培养的水样：
式中：B1—稀释水(或接种稀释水)在培养前的溶解氧浓度(mg/L)； B2—稀释水(或接种稀释水)在培养后的溶解氧浓度(mg/L)； —稀释水(或接种稀释水)在培养液中所占比例； —水样在培养液中所占比例。 五、注意事项
1．水中有机物的生物氧化过程分为碳化阶段和硝化阶段，测定一般水样的BOD5时，硝化阶段不明显或根本不发生，但对于生物处理池的出水，因其中含有大量硝化细菌，因此，在测定BOD5时也包括了部分含氮化合物的需氧量。对于这种水样，如只需测定有机物的需氧量，应加入硝化抑制剂，如丙稀基硫脲(ATU，C4H8N2S)等。
2．在两个或三个稀释比的样品中，凡消耗溶解氧大于2mg/L和剩余溶解氧大于lmg/L都有效，计算结果时，应取平均值。
3．为检查稀释水和接种液的质量，以及化验人员的操作技术，可将20mL葡萄糖-谷氨酸标准溶液用接种稀释水稀释至1000mL，测其BOD5，其结果应在180～230mg/L之间。否则，应检查接种液、稀释水或操作技术是否存在问题。
六、结果处理
1．以表格形式列出稀释水样和稀释水(或接种稀释水样)在培养前后实测溶解氧数据，计算水样BOD5值。
2．根据实际控制实验条件和操作情况，分析影响测定准确度的因素。 附：碘量法测定溶解氧 一、方法原理(叠氮化钠修正法)
见教材第二章第七节，三。 二、 仪器 1．250～300mL溶解氧瓶。 2．酸式滴定管；锥形瓶；移液管。 三、试剂 1．硫酸锰溶液：称取480g硫酸锰(MnSO4·4H2O)溶于水，用水稀释至1000mL。此溶液加至酸化过的碘化钾溶液中，遇淀粉不得产生蓝色。
2．碱性碘化钾-叠氮化钠溶液：称取500g氢氧化钠，溶解于300～400mL水中；称取150g碘化钾，溶于200mL水中；称取10g叠氮化钠溶于40mL水中。待氢氧化钠冷却后，将上述三种溶液混合，加水稀释至1000mL，储于棕色瓶中，用橡胶塞塞紧，避光保存。
3．1+5硫酸溶液(标定硫代硫酸钠溶液用)。 4．1%(m/V)淀粉溶液：称取1g可溶性淀粉，用少量水调成糊状，再用刚煮沸的水稀释至100mL。冷却后，加入0.1g水杨酸或0.4g氯化锌防腐。
5．0.02500mg/L(1/6K2Cr2O7)重铬酸钾标准溶液：称取于105～110℃烘干2h，并冷却的
