苦玄参40个株系表型性状遗传多样性分析_谢阳姣

应用SCoT标记分析玄参种质资源的遗传多样性［摘要］目的：研究玄参种质资源的遗传多样性及亲缘关系。

方法：应用目标起始密码子多态性（SCoT）技术对来源于全国各地的48份玄参种质进行遗传多态性分析。

遗传距离采用TREECONW软件计算，UPGMA方法构建亲缘关系树状图。

结果：28条引物共检测到279个位点，其中214个为多态位点，占76.7%。

遗传距离变化范围在0.1507～0.4933。

聚类结果显示栽培玄参亲缘关系较为复杂：有的种质具明显的地理相关性；有的种质聚类混杂，与地理分布无明显相关性；也有来源于同一地区的种质仅部分聚在一起，呈现出一定的地域性分布规律。

结论：栽培玄参的遗传多样性水平较高，为优良品种的培育提供了丰富的遗传基础。

［关键词］玄参；SCoT；种质资源；遗传多样性1材料玄参采自四川、重庆、陕西、湖北、浙江等主产地，共48份材料（表１）。

根据均匀分布、随机取样的原则，在每个栽培群体中选取10个单株，尽量覆盖该群体的分布范围。

在每一单株上采集新鲜幼嫩的叶片，洗净、晾干后，放入装有硅胶的自封袋，快速干燥。

Gel Doc XR凝胶成像系统（BIORAD）、S1000TM Thermal Cycler热循环仪（BIORAD）、Smart SpeeTM3000型分光光度计（BIORAD）、DYCP34A 琼脂糖水平电泳槽（北京市六一仪器厂）、DYY6C型电泳仪（北京市六一仪器厂）。

SCoT引物（由上海生工合成）、Trans2K Plus DNA Marker（北京全式金）、DNA提取试剂盒（北京天根）、Taq酶（TOYOBO）、dNTPs（北京鼎国）、SYBR Green核酸染料（北京鼎国代理）、琼脂糖（进口分装）、其余为国产分析纯试剂。

2方法2.1玄参基因组DNA提取每个产地玄参材料等量混合，用天根植物基因组DNA提取试剂盒提取基因组DNA。

1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA的样品的完整性，并用紫外分光光度计测定其浓度和纯度，将样品稀释标定到40mg·L-1，置于-20℃条件下保存备用。

玄参有效成分及药理和种质资源指纹图谱研究进展
钟晓明;黄真;李兆翌;张春椿
【期刊名称】《中国保健营养》
【年(卷),期】2010(000)011
【摘要】玄参的主要有效成分分为环烯醚萜类及苯丙素苷类，具有对心血管系统的影响和镇痛、抗炎、抑茵、增强免疫等药理作用。

玄参种质指纹图谱的研究主要分为HPLC指纹图谱和DNA指纹图谱。

前者在反映玄参内在化学信息，评价玄参内在质量方面更为完整、全面；后者主要应用于玄参种质资源遗传多样性研究。

本文从玄参的主要成分及药理、种质资源指纹图谱研究进展方面进行综述。

【总页数】3页(P5-7)
【作者】钟晓明;黄真;李兆翌;张春椿
【作者单位】浙江中医药大学药学院,310053
【正文语种】中文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.玄参药理作用及栽培加工技术研究进展 [J], 魏斌;蒋笑丽;章建红;洪春桃;沈登锋
2.玄参化学成分及药理活性研究进展 [J], 许福泉;许旭东;陈士林
3.玄参保护心血管系统的药理作用研究进展 [J], 卢芳;于卉;张宁;高鑫;李自辉;董婉茹;赵洪伟;刘树民
4.玄参属植物的化学成分和药理活性研究进展 [J], 王博
5.玄参化学成分、药理活性研究进展及其质量标志物分析预测 [J], 李翎熙;陈迪路;周小江
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不同品种类型玄参的产量比较研究作者：钱齐妮来源：《现代农业科技》2012年第14期摘要比较不同品种类型玄参的产量，结果表明：大长椭圆状披针形叶玄参产量最高，干重6 818.95 kg/hm2，较卵圆状披针叶玄参增产58.36%；较长卵圆形叶玄参增产115.14%。

重庆市南川区宜选择大长椭圆状披针形叶或卵圆状披针叶玄参种植，不宜选长卵圆形叶玄参作种。

关键词玄参；品种类型；产量中图分类号 S567.23+9 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2012）14-0073-01玄参（Scrophularia ningpoensis Hems1.）又称元参、黑参，为玄参科多年生草本植物，以根入药，具有滋阴、降火、生津、解毒功效[1-2]。

玄参不但是中药处方用药，还是多种中成药的重要原料，是大宗药材品种，近年来重庆市南川区生产面积较大，年种植达666.67 hm2以上。

据调查，当地种植的玄参是多个类型的混合群体，其各类型植株性状、生育期、经济产量和商品规格参差不一，对正常的田间管理、商品产量和质量影响较大[3]。

为了解决生产中存在的问题，必须选择种植优质品种。

为此，在玄参种植基地筛选出多个品种类型，开展不同玄参品种的产量比较研究。

1 材料与方法1.1 试验地概况试验地设在重庆市南川区金佛山片区的头渡镇前星村，年均温11.1 ℃，极端最高气温27 ℃（7月），极端最低气温-8 ℃（1月），年均降雨量1 400 mm，日照时数1 103 h，无霜期215 d，海拔1 100 m左右。

试验地土壤为灰色壤土，地势较向阳，无大气、土壤、水质等方面的污染，前作为青椒。

供试土壤为砂质壤土，含有机质20.6%，速效磷13.89 mg/kg、速效钾120.32 mg/kg、碱解氮90.28 mg/kg，pH值6.8。

1.2 试验材料种子来源于重庆市南川区头渡镇前星村玄参种植基地，在玄参大田混合群体中，分别挂牌、选择的不同玄参品种，收获时分别贮藏子芽，栽种时子芽新鲜，质量较好。

玄参（中草药详解）玄参玄参【药名】：玄参【拼音】：XUANSHEN【英文名】：Figwort Root【来源】：为双子叶植物药玄参科植物玄参的根。

【功效】：清热解毒，滋阴降火，散结消痈。

【主治】：治热病烦渴，发斑，骨蒸劳热，夜寐不宁，自汗盗汗，津伤便秘，吐血衄血，咽喉肿痛，痈肿，瘰疬。

【性味归经】：苦咸，凉。

①《本经》:“味苦，微寒。

”②《吴普本草》:“神农、桐君、雷公、扁鹊：苦，无毒。

歧伯：咸。

李氏：寒。

”③《药品化义》：“味微苦微咸略甘，性凉。

”入肺、肾经。

①《药类法象》：“足少阴肾经。

”②《雷公炮制药性解》：“入心、肺、肾三经。

”③《本草新编》：“入脾、肾、胃三经。

”【用法用量】：内服：煎汤，3～5钱；或入丸，散。

外用：捣敷或研末调敷。

【用药忌宜】：脾胃有湿及脾虚便溏者忌服。

①《雷公炮炙论》：“使用时勿令犯铜，饵之噎人喉，丧人目。

”②《本草经集注》：“恶黄耆、干姜、大枣、山茱萸。

反黎芦。

”③《本草经疏》：“血少目昏，停饮寒热，支满，血虚腹痛，脾虚泄泻，并不宜服。

”④《医林纂要》：“虚寒则忌。

”【药物配伍】：配麦冬，养阴润肺，生津止渴；配马勃，清热利咽，滋阴止痛；配牡蛎，滋阴泻火，软坚散结，解毒消散之力增强；配板兰根，一清一滋，清热利咽作用加强；配贝母，清热解毒，化痰散结；配苍术，健脾滋肾；配生地，凉血清热，二药相须为用；配牛蒡子，解毒利咽之力倍强；配丹皮，二药均能凉血，化斑。

但玄参又能滋阴，丹皮又能祛瘀，相配治疗温病阳明热盛发斑。

【别名】：重台(《本经》)、鬼藏、正马、鹿肠、端、玄台(《吴普本草》)、咸(《别录》)、逐马(《药性论》)、馥草(《开宝本草》)、黑参(《孙天仁集效方》)、野脂麻(《纲目》)、元参(《本草通玄》)【处方名】：玄参、元参、黑参【商品名】：玄参、元参，以根条粗壮、皮细、质坚实、干燥、断面黑色者为佳。

【动植物资源分布】：分布安徽、江苏、浙江、福建、江西、湖南、湖北、贵州、陕西等地。

重庆南川区道地药材玄参遗传多样性ISSR分析马腾蛟;陈杰;丁显平;陈泓翰;包善飞【摘要】本研究利用ISSR-PCR分子标记技术分析研究了重庆市南川区五个地方人工种植玄参的遗传多样性,利用7条UBC引物共扩增出了61条DNA片段,其中多态性片段为48条.片段长度约为250～2000 bp,每条引物扩增出的DNA片段数为4～14条.同时采用NTSYS-pc2.1软件计算出五个区域之间和区域内部子区域的玄参的Nei's遗传距离,并用UPGMA法分别构建了系统树.结果表明五个地方人工种植玄参存在一定的遗传多态性,但其地方之间差异并不明显,其遗传多样性主要在同一地方内的子区域间被观察到.【期刊名称】《四川大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(053)005【总页数】6页(P1119-1124)【关键词】玄参;种植中药材;ISSR;遗传多样性【作者】马腾蛟;陈杰;丁显平;陈泓翰;包善飞【作者单位】四川大学生命科学学院遗传医学研究所,特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室,成都610064;四川大学生命科学学院遗传医学研究所,特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室,成都610064;四川大学生命科学学院遗传医学研究所,特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室,成都610064;重庆市南川生物技术研究院,南川408400;四川大学生命科学学院遗传医学研究所,特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室,成都610064;四川大学生命科学学院遗传医学研究所,特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室,成都610064;重庆市南川生物技术研究院,南川408400【正文语种】中文【中图分类】Q346玄参(Scrophularia ningpoensis Hemsl.)为玄参科(Scrophulariaceae)草本植物，应用历史悠久，是我国传统常见中药材之一. 其主要功效为清热凉血、滋阴降火、解毒散结[1]. 目前我国玄参大多为人工种植，主要分布在浙江，四川，重庆，湖北，贵州等地[2]. 种植范围广泛，类型多样，经过长期的相互引种交流，造成了地方之间玄参类型的混杂[3].ISSR(Inter-simple sequence repeat)是由Zietkeiwitcz等[4]于1994年发展起来以分子扩增为基础的分子标记技术. ISSR分子标记技术不但利用了RAPD技术的优点和基因组中丰富的SSR序列信息，而且它的重复性比RAPD高，在引物设计上又比SSR简单得多，且克服了RFLP和RAPD的技术限制，具有无需预知基因组背景信息、DNA模板用量少、信息量大、重复性好、操作简单和多态性高等优点 [5-7].近年来，ISSR分子标记由于其优越性 [8,9]已被广泛用于很多物种亲缘关系，品种鉴定和遗传多样性等研究[10-13]. 比如被用于研究芒果[14]，木耳[15]，茶树[16]和鸢尾属植物[17]等. 重庆金佛山得天独厚的生态环境孕育了南川玄参产业的发展，据统计，2013年南川区玄参种植面积达到2006.67 m2[18]，玄参也是南川区主要的中药材品种[19]. 目前南川地区各地方种植的玄参种质资源状况尚不清楚，尽管已有ISSR分子标记技术被用于研究玄参遗传多样性的相关报道，但尚未有专门针对重庆市南川区的道地药材玄参的遗传多样性进行研究的报道. 本实验采用ISSR-PCR技术在分子水平上对重庆市南川区的5个玄参人工种植区地方间和地方内子区域玄参资源遗传多样性和遗传结构进行分析和探讨.2.1 实验材料本实验中玄参样品于2014年11月6日在重庆市南川地区玄参的主要种植区内部随机选择了五个均匀分布的地方进行采集，其中仅杨家沟的样品采自大面积的统一种植区域，其余4份样品均为采集自较分散的小面积人工种植玄参. 五个地方分别为：杨家沟(YJG)、白果树(BGS)、青林(QGL)、银盘河沟(YPHG)和三河坝(SHB)(表1).共采集112份玄参叶片样本. 采样根据均匀分布、随机取样原则，尽量覆盖该类型的整个栽培范围，所采个体之间至少间隔10 m. 采集植株上的健康成熟叶片，放入装有变色硅胶的自封袋. 低温下带回实验室保存在-20℃的冰箱备用.Eppendorf Research® plus 移液器(Eppendorf)；LongGene®A200 Gradient Thermal cycle(杭州朗基科学仪器有限公司)；TG16-WS台式高速离心机(长沙湘仪离心机有限公司)；GSG-2000核酸/蛋白凝胶图像分析管理系统(珠海黑马医学仪器有限公司)；JY600C电泳槽(北京君意东方电泳设备有限公司)；DYCP-31DN 型电泳仪(北京市六一仪器厂)；AL204电子秤(上海银铎称重设备有限公司)；420-A电热恒温水浴箱(江苏新康医疗器械有限公司)；QL-901涡旋振荡器(海门市其林贝尔仪器制造有限公司).ISSR引物(生工生物(上海)生物工程股份有限公司)；植物基因组DNA提取试剂盒(TIANGEN)；DL2000 DNA marker(TIANGEN)；Taq 酶(Thermo)；β-巯基乙醇(Sigma)；氯仿(KESHI)；琼脂糖(进口分装)；其余试剂均为国产或进口分析纯试剂.2.2 方法2.2.1玄参基因组DNA的提取与检测取玄参健康成熟叶片100 mg，置于研钵中加液氮研磨，用天根生化科技(北京)有限公司提供的植物基因组DNA提取试剂盒方法，提取基因组DNA，以1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA的质量，经检测，可见较亮、较清晰的基因组DNA条带，可用于随后的ISSR-PCR实验，并用紫外分光光度计测定其浓度，将样品稀释为50 ng/μL，置于-20℃冰箱中贮存备用.2.2.2 ISSR-PCR扩增与检测实验中借鉴赵志新等人于《玄参ISSR-PCR反应体系的建立与优化》[20]一文中所选用的7条哥伦比亚大学公布的均可扩增出多条特异性的条带的ISSR引物，引物详见表2.20 μL ISSR-PCR反应体系包括：DNA模板量为4 μL(50 ng/μL)，2.4 μL dNTPs(0.3 mmol/L)，2 μL 10×Buffer，1 μL Taq DNA聚合酶(1.0 U)，1.6 μL MgCl2(2.0 mmol/L)，0.4 μL引物，加ddH2O至20 μL. PCR扩增程序为：94℃预变性5 min；94℃变性30 s，50～61℃退火(退火温度随引物不同变化)45 s，72℃延伸1 min，共35个循环；72℃延伸7 min.PCR反应后的扩增产物用1.8%脂糖凝胶进行电泳检测，电泳采用TAE缓冲液，6×loading buffer:样品为1∶5混匀后，点样5 μL，其中引物UBC890的PCR产物电泳1.5 h，电压80 V. 其余引物的PCR产物电泳1 h，电压为100 V. 通过凝胶成像系统观察结果并记录.2.2.3 数据处理与分析ISSR是显性标记，同一引物不同物种的扩增产物中电泳迁移率一致的条带被认为具有同源性，在相同的迁移位置上，有扩增条带的记为1，无扩增条带的记为0，用该方法记录7条引物的电泳图谱上的DNA条带，组成“0”和“1”组成的原始矩阵并建立数据库. 用NTSYS-pc2.1软件计算物种间的Nei’s遗传距离(GD)和遗传相似系数GS(1-GD)，并根据GS值或GD值按不加权成对群算术平均法(UPGMA)进行遗传相似性聚类构建系统树.3.1 ISSR多态性分析借鉴赵志新等人于《玄参ISSR-PCR反应体系的建立与优化》[20]文中所选用的7条哥伦比亚大学公布的ISSR均可扩增出多条特异性的条带，扩增结果见表2. 结果显示扩增条带清晰，每条引物的扩增片段集中在250～2000 bp，以250～1500bp居多. 7条引物共扩增出61条DNA片段，其中多态性片段有48条，占扩增总片段数的78.69%. 每条引物的多态百分率变幅66.67%～100%. 每个引物扩增出的DNA片段数为4～14条，平均每个引物扩增DNA片段8.71条. 其中UBC807扩增出的条带数最少只有4条，而UBC890扩增出的条带数最多为14条. 值得注意的是，在同一个地方内个体间存在差异的现象可在电泳结果检测中被观察到(图1).(Y=C,T;V=A,C,G;H=A,C,T)3.2 遗传距离与遗传相似性分析3.2.1 地方间遗传距离与遗传相似性分析根据ISSR扩增出的61条DNA片段，采用NTSYS-pc2.1软件计算出南川五个地方的玄参样品Nei’s遗传距离和遗传相似性，获得Nei’s遗传距离和遗传相似性矩阵(表3). 从结果可以看出，五个地方的玄参样本的遗传距离变化范围为0.0417～0.2524. 遗传相似性的变化范围为0.7476～0.9583. 其中，青林与杨家沟的遗传距离最远为0.2524，而亲缘关系最近的是银盘河沟玄参和白果树玄参，遗传距离仅为0.0417. 表明五个地方玄参样品间存在一定的差异性，但地方之间的差异并不显著.根据所记录的0、1矩阵用NTSYS-pc2.1软件进行UPGMA(类平均)聚类分析，构建聚类图(图2). 由图2可以看出，5个地方的玄参明显被分为2簇，杨家沟单独为一簇，三河坝，银盘河沟，青林与白果树为一簇.3.2.2 地方内遗传距离与遗传相似性分析为了更具体的分析南川五个区域的人工种植玄参的遗传多样性，也因前述的在ISSR-PCR电泳检测中可观察到的同一区域中个体间也有一定的差异的情况，本实验对采样的五个地方之间的子区域间的遗传距离和差异性做了分析. 根据ISSR扩增出的15个子区域的DNA片段，采用NTSYS-pc2.1软件计算出15个子区域玄参的Nei’s遗传距离和遗传相似系数，获得子区域遗传距离和遗传相似系数矩阵见表4. 用NTSYS pc 2.1软件进行UPGMA聚类分析构建聚类图(图3).将5个区域的不同子区域进行聚类分析，其结果显示，各子区域间的亲缘关系与之前的大区域建树结果并不完全一致，且在部分分支上还有较大差异. 表4的结果表明，BGS区的5个子区域间均有一定的遗传距离，而其中BGS-3区与其它4个子区域的遗传距离均大于其与QGL区的部分子区域(QGL-1、QGL-4)以及YPHG区两个子区域间的遗传距离. 另外，可以很容易地从所得系统发育树中看出，同一地方的子区域间的遗传距离甚至超过了该地方同其他地方之间的遗传距离. 这个结果，与本实验中观察到的同一地方子区域内个体的扩增条带有明显差异的现象相一致. 该现象可能与当地将不同品种混种的种植方法有关.重庆市南川区有较大面积的人工种植玄参，其中有相当一部分为当地种植户自行种植，而非统一种植. 据了解，当地种植户将不同品种的玄参共同混种的方式提高其产量. 本实验所采集的5个区域样本中，其中，仅杨家沟的样品采自大面积的统一种植区域，其余4份样品均为采集自较分散的小面积人工种植玄参. 由于人工种植玄参品种多样，且将不同品种混合种植，在经过长时间的相互引种交流后，造成了地方之间以及相同地方内的玄参遗传类型的混杂. 如结果所示，本实验中5个地方的玄参被分为两个簇，杨家沟大面积统一种植的玄参单独为一簇，而三河坝、银盘河沟、青林与白果树四个区域的玄参样本被分为一簇. 该结果与采样中所观察到的种植情况相一致.从相关结果中不难看出，五个地方的玄参样本，尤其是后四个地方的小面积分散种植的玄参样品间的遗传差异较已报道的相关实验结果偏小[21-23]. 这个结果这与ISSR扩增出的多态性条带的数量和比例的结果(7条引物共扩增出61条DNA片段，其中多态性片段有48条，占扩增总片段数的78.69%)不一致. 根据子区域的遗传距离分析即进化树构建结果(表4，图3)，也再次验证了这种不一致，即部分地方子区域间的遗传距离超过了该地方同其他地方之间的遗传距离，如QGL-1与QGL-2的距离为0.1823，而YPHG与BGS间的距离仅为0.0417. 且子区域进化树的分支情况也与之前构建的5个大区域的进化树的情况不完全一致. 即在本实验中所得的结果显示，每个地方内部的子区域间的遗传差异反而大于5个地方之间玄参样本间的差异.在此，我们可以提出假设：该地方玄参的差异性，由于当地种子来源及种植方法等因素，造成了玄参的多态性或者遗传差异主要体现在地方内部，甚至是同一种植田内，而非通常出现在大多数研究中的的不同地区间. 即虽然在一个大区域内的子区域间有一定的遗传差异，但由于这些子区域可能与相隔较远的另一大区中部分子区域有着较高的遗传相似性，因而掩盖了这些大区域之间的遗传差异，使地方之间的遗传距离看起来相对偏小，甚至小于部分子区域间的遗传距离. 这也正是通过系统发育树构建可观察到的情况，如在QGL有5个子区域，这5个子区域之间有一定的遗传差距，尤其是QGL-2，QGL-3，QGL-5和QGL-1，QGL-4之间. 但是由于QGL-1和YPHG-2有较高的遗传相似性，QGL-2和YPHG-1有较高遗传相似性，所以使得QGL和YPHG两个地方之间的遗传距离相对较小. 而出现在条带数量上的情况，也应该与此是相同的解释，甚至可以说，这种情况在个体间更为明显. 在对实验的电泳结果(图1)进行统计时，同一区域内不同玄参个体间的遗传差异可被较为频繁的观察到，但部分个体所携带的与所处区域内其它个体具有不同特征，即多态性条带，却又在另一个大区域被再次观察到，这可能就是本实验中得出这样看似相互矛盾的结果的原因. 当然，造成这种结果的主要因素应该就是前文所述的当地人将不同品种的玄参进行混种. 另外，单独成为一簇的杨家沟的统一种植的玄参的实验结果也与这种推测相符.综上所述，南川地方种植的玄参种类较多，也具有一定的遗传多态性. 但由于大部分为较分散的种植户自行种植，而统一的大面积种植相对较少，另外由于且多为混合种植，故造成了小区域内种植品种较为混杂的情况. 该实验对重庆市南川区目前的种植玄参遗传多样性情况进行了初步的研究，获得的结果为该地方种植玄参的进一步管理与开发提供了初步的理论依据.【相关文献】[1] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典 (一部) [M]. 北京: 化学工业出版社, 2005: 77.[2] 陈大霞, 张雪, 王钰, 等. 应用SCoT标记分析玄参种质资源的遗传多样性 [J]. 中国中药杂志, 2012, 37(16): 2368.[3] 陈大霞, 李隆云, 彭锐, 等. 玄参3种栽培类型遗传关系和遗传多样性的SRAP研究 [J]. 中国中药杂志, 2009, 34(2): 138.[4] Zietkiewicz E, Rafalski A, Labuda D. 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苦玄参药材中苦玄参苷ⅠA和ⅠB的含量分析方宏;梁小燕;宁德生;陈海珊【期刊名称】《广西植物》【年(卷),期】2008(28)5【摘要】采用HPLC法对不同产地的苦玄参药材主成分苦玄参苷ⅠA和ⅠB的含量进行分析,发现苦玄参苷ⅠB含量高于苦玄参苷ⅠA;色谱条件:Waters C18 (4.6 mm i.d.×250 mm,5 μm) 色谱柱,流动相∶乙睛∶水=36:64(体积比),流速为0.8 mL/min,检测波长为264 nm.苦玄参苷ⅠA、ⅠB分别在0.05～0.50 mg/mL和0.072～0.720 mg/mL与峰面积有良好的线性关系.苦玄参苷ⅠA的线性回归方程Y=13 658X-92 72(r=0.999 3),平均回收率为100.58%(n=5),相对标准偏差(RSD)为1.86%;苦玄参苷ⅠB的线性回归方程Y=5 258.9X-41.01(r=0.999 4),平均回收率为101.15%(n=5),相对标准偏差(RSD)为1 31%.该研究为制定苦玄参药材质量检测标准提供了简便、快速、准确的方法.【总页数】3页(P708-710)【作者】方宏;梁小燕;宁德生;陈海珊【作者单位】广西壮族自治区中国科学院,广西植物研究所,广西,桂林,541006;广西壮族自治区中国科学院,广西植物研究所,广西,桂林,541006;广西壮族自治区中国科学院,广西植物研究所,广西,桂林,541006;广西壮族自治区中国科学院,广西植物研究所,广西,桂林,541006【正文语种】中文【中图分类】Q946.83【相关文献】1.HPLC法测定苦玄参中苦玄参苷IA的含量 [J], 陈勇;甄汉深;刘婧;李耀华;叶乐2.高效液相色谱法测定不同产地苦玄参中苦玄参苷IA含量 [J], 郑成远;钟宏3.高效液相色谱法测定苦玄参药材中的苦玄参苷ⅠA含量 [J], 甄汉深;何翠薇;陈勇;周吴萍;苏春妹;陆晖4.HPLC法同时测定民族习用药材猫眼草中金丝桃苷、槲皮素苷的含量分析 [J], 高敏;白音夫;周雪梅;杜鹃5.TLCS 法测定苦玄参中苦玄参苷 I_A 和 I_B 的含量 [J], 邹节明;王力生;严海;尹文清;郭亚健因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

广西苦玄参不同药用部位的薄层鉴别与含量测定
陈君; 甄汉深; 韦建华
【期刊名称】《《华夏医学》》
【年(卷),期】2007(20)6
【摘要】目的：对苦玄参的根、茎、叶、花进行薄层鉴别和含量测定研究，为进一步的应用研究提供科学依据。

方法：采用薄层层析法对中苦玄参不同部位进行定性鉴别；采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）对其不同部位进行含量测定。

结果：TLC鉴别均表明：茎、叶、花的乙酸乙酯：甲醇（5：1）提取物的主斑点一致，提示根、茎、叶、花中所含部分成分有可能相同。

含量测定结果显示苦玄参苷IA在0．0242-0．1694μg／μl范围内线性良好。

结论：广西龙州县苦玄参药材中苦玄参苷IA在根、茎、叶花中的平均含量分别为0％，0．11％，1．63％，1．12％。

【总页数】3页(P1179-1181)
【作者】陈君; 甄汉深; 韦建华
【作者单位】柳州医学高等专科学校广西柳州 545006; 广西中医学院药学院广西南宁 530001
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2; R282.5
【相关文献】
1.兴仁金线莲中槲皮素、异鼠李素的薄层鉴别及不同部位的含量测定 [J], 刘志海;范红梅;金昭;隆林;余兰
2.傣药锅拢良(腊肠树)不同药用部位的薄层色谱鉴别 [J], 肖丽香
3.炎肿化毒片的薄层鉴别及苦玄参甙IA的含量测定 [J], 陈勇;罗翠娥
4.广西产罗汉松不同药用部位的紫外-可见光谱鉴别研究 [J], 潘翠柳;甄汉深;丘琴;杨连;温淑娟
5.广西产罗汉松不同药用部位的紫外-可见光谱鉴别研究 [J], 潘翠柳;甄汉深;丘琴;杨连;温淑娟;
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·76·玄参XuanshenRADIX SCROPHULARIAE本品为玄参科植物玄参Scrophularia ningpoensis Hemsl.的干燥根。

冬季茎叶枯萎时采挖，除去根茎、幼芽、须根及泥沙，晒或烘至半干，堆放3～6天，反复数次至干燥。

【性状】本品呈类圆柱形，中间略粗或上粗下细，有的微弯曲；长6～20cm，直径1～3cm。

表面灰黄色或灰褐色，有不规则的纵沟、横长皮孔样突起及稀疏的横裂纹和须根痕。

质坚实，不易折断，断面黑色，微有光泽。

气特异似焦糖，味甘、微苦。

【鉴别】(1)本品横切面：皮层较宽，石细胞单个散在或2～5个成群，多角形、类圆形或类方形，壁较厚，层纹明显；韧皮射线多裂隙。

形成层成环。

木质部射线宽广，亦多裂隙；导管少数，类多角形，直径约至113µm，伴有木纤维。

薄壁细胞含核状物。

(2)取本品粉末2g，加甲醇10ml，浸泡1小时后，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。

取哈巴苷对照品、哈巴俄苷对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各3µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-醋酸-水(7：1：2)为展开剂，用展开剂预饱和15分钟，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸试液，热风吹至斑点清晰。

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

【检查】水分照水分测定法(附录Ⅸ H第一法)测定，不得过12.0％。

总灰分不得过5.0％(附录Ⅸ K)。

酸不溶性灰分不得过1.8％(附录Ⅸ K)。

【浸出物】照水溶性浸出物测定法项下的热浸法(附录X A)测定，不得少于60.0％。

【含量测定】照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以1％醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为278nm。

基于ISSR的重楼种质资源遗传多样性研究作者：刘胜坤胡剑民朱红军尹晓蛟杨旭来源：《湖北林业科技》2020年第05期摘要：采用ISSR分子标记方法，对13份重楼属种质资源间的遗传多样性进行了分析。

结果显示，12条引物扩增出181条清晰条带，其中174条多态性带，平均多态性比率为96.13%;Nei's基因多样性指数范围为0.214～0.327，香农指数范围为0.351～0.500，样品间的遗传相似系数范围为0.293～0.624;通过聚类分析将重楼种质分为3类。

结果表明，重楼属种质具有丰富的遗传多样性，ISSR是研究重楼种质资源遗传多态性及亲缘关系的重要手段之一。

关键词：重楼;种质资源;ISSR;遗传多样性中图分类号：Q94文献标识码：A文章编号：1004-3020（2020）05-0020-04Abstract：Genetic diversity in 13 Paris species resources collected was evaluated by ISSR markers.The results showed that 181 bands was amplified by 12 primers，174 of which were polymorphic，with an average polymorphism rate of 96.13%. Nei's diversity indicates ranged from 0.214 to 0.327，Shannon's information index ranged from 0.351 to 0.500 and the genetic similarity coefficients among the tested cultivates ranged from 0.293 to 0.624.Paris germplasms was divided into 3 types by cluster analysis AFLP markers were suitable to analyze genetic diversities and genetic relationships of Camellia japonica Germplasms.The results showed that there was abundant genetic diversity in the Paris germplasms and ISSR was one of the important methods to study genetic polymorphism and genetic relationship of the Paris species resources.Key words：Paris;species resources;ISSR;genetic diversity重樓隶属于百合科重楼属Paris L.，为多年生草本植物，又名蚤休、七叶一枝花、草河车、海螺七等[1]。

苦玄参生药学与质量分析的研究进展∗潘翠柳;韦一飞;甄汉深;杜喜枚【摘要】The resource distribution, pharmacognosy characteristics, traits herbs, seeds biological characteristics, identification research, chemical constituents and determination methods of Picria fle-terrae Lour. were reviewed. Picria fle-terrae Lour. was mainly produced in the southern region of our country, and it was widely distributed, resource-rich, with a variety of chemical constituents, such as saponins, flavonoids and triterpenoids ( tetracyclic triterpenoid glycosides) compound. There are many determination methods of Picria fle-terrae Lour. , such as high performance liquid chromatography, thin-layer dual-wavelength scanning, gas chromatography-mass spectrometry, and so on. Picria fle-terrae Lour. folk medicine has a long history, and it has important clinical value and development value applications.%从苦玄参的资源分布、生药学特征、药材的性状、种子生物学特性、鉴定的研究、化学成分的研究和含量测定方法等方面进行综述。