CD147对白血病细胞U937生长和肿瘤形成的影响
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小鼠CD147过表达对皮肤毛发生成和创伤修复的影响胡兴旺; 谢雅琳; 龙娟; 周磊; 陈旺青; 邓智利【期刊名称】《《中国医学工程》》【年(卷),期】2019(027)009【总页数】7页(P1-7)【关键词】CD147; 毛发生成; 创伤修复; 皮肤干细胞【作者】胡兴旺; 谢雅琳; 龙娟; 周磊; 陈旺青; 邓智利【作者单位】中南大学湘雅医院感染病科/病毒性肝炎湖南省重点实验室湖南长沙410008; 中南大学湘雅医院皮肤科/银屑病湖南省重点实验室湖南长沙410008【正文语种】中文【中图分类】R758.71; R-332CD147(cluster of differentiation 147)又名细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer, EMMPRIN),是免疫球蛋白超家族的一种多重糖基化修饰的单次跨膜蛋白,相对分子质量约50~60 kDa [1]。
CD147 于心血管系统、神经系统、免疫系统和皮肤等器官中的多种细胞中广泛表达;也可以通过剪切从细胞膜脱落下来,或通过微囊泡分泌从而游离进入组织液和血液[2]。
作为1 型整合膜受体,可以与亲环素、PfRh5、整连蛋白等结合,参与细胞间的识别、免疫调节、器官发育、病毒感染等多种生物学过程[3]。
例如:CD147 可以通过核转录因子-kB(nuclear transcription factorkappa B, NF-kB)信号通路调节α4 整连素表达从而影响免疫细胞的黏附和识别[4-5]。
通过调节下游基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)基因,在精子发生过程中影响生殖细胞的迁移、生存或凋亡[6],通过调节单羧酸转运体(monocarboxylate transporters,MCTs)影响乳酸转运[7]。
在肿瘤中,CD147 与多种肿瘤包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌、膀胱癌等的发生、发展、病理分级、治疗预后密切相关。
2021CD147胞内结构域重组质粒构建与纯化范文 摘要: 目的构建人CD147胞内结构域(CD147 intracellulardomain,CD147ICD)融合蛋白质粒,表达、提取、纯化CD147ICD蛋白并进行蛋白质互作分析。
方法将CD147ICD的c DNA片段插入pET-32a(+)质粒载体后,转化大肠杆菌Origami B(DE3)感受态细胞,大量培养后用异丙基硫代-β-d-半乳糖苷诱导蛋白表达,超声破碎法裂解细胞,采用Ni-Sepharose FF预装柱纯化TrxA-His6-CD147ICD融合蛋白,经凝血酶酶切、超滤后获得CD147ICD蛋白。
结果 CD147ICD融合蛋白质粒经测序比对后表明构建成功;采用Ni-Sepharose FF预装柱纯化的TrxA-His6-CD147ICD融合蛋白纯度和浓度均较高,经凝血酶酶切、超滤后获得的CD147ICD蛋白纯度在95%以上,蛋白浓度为0. 74 mg/m L。
结论纯化出了高纯度的、具有生物学活性的CD147ICD蛋白,为CD147ICD互作分子的鉴定及结构解析奠定了基础。
关键词: CD147;胞内结构域; 表达与纯化; Abstract: ObjectiveTo express and purify the recombinantintracellular domain of human CD147( CD147ICD) and to study the interacting proteins of CD147ICD. Methods cDNA of CD147ICD was ligated into pET-32a( +) plasmid vector,then transformed into E. coli Origami B(DE3) competent cells and the transformants were induced with isopropyl-β-d-thiogalactoside. The fusion proteins were purified with Ni-Sepharose FF column in combination with thrombin digestion and ultrafiltration. Results The recombinant plasmid was confirmed with sequencing. Purified TrxA-His6-CD147 ICD protein was obtained with Ni-Sepharose FF column. After thrombin digestion and ultrafiltration,the purity of CD147ICD protein was above 95%,and theprotein concentration was 0. 74 mg/m L. Conclusion CD147ICD protein was purified with high purity and activity,which would provide a basis for the future studies on characterization of CD147 ICD interacting proteins and structure determination. Keyword: CD147;Intracellular domain; Expression and purification; CD147是Ⅰ型跨膜蛋白,属于免疫球蛋白超家族。
PRKCD和ASK1在人髓系白血病U937细胞分化过程中的作用闫峰;王效民;袁思波;马全明;韩慧平【摘要】目的:通过检测ASK1和PRKCD在单核细胞分化过程中的表达变化,探索其在门静脉高压症(PH)脾亢脾脏巨噬细胞(MΦ)功能变化中所起的作用。
方法采用佛波酯诱导U937分化成为巨噬细胞样细胞,q-PCR检测不同分化阶段ASK1和PRKCD mRNA的表达,Western Blot检测诱导前后ASK1和PRKCD 蛋白表达水平变化,ELISA法检测细胞分化过程中与吞噬功能相关的细胞因子IL-10和TNF-α的分泌情况,鸡红细胞吞噬试验鉴定诱导后细胞功能。
结果随着PMA诱导U937细胞时间延长,ASK1和PRKCD基因表达水平下降,TNF-α的分泌量逐渐增加,而IL-10在诱导后24 h达到最大分泌量,随后又呈下降趋势;Western Blot结果显示,ASK1及p-ASK1蛋白表达水平较诱导前均显著上升,PRKCD及p-PRKCD蛋白表达水平显著下降;吞噬实验结果显示,诱导后的细胞具有一定的吞噬功能。
结论在PMA诱导的U937细胞向单核细胞分化过程中,ASK1蛋白表达上调,PRKCD蛋白表达下调,与脾亢脾Mφ一致,并导致Mφ活性增强。
%Objective To investigate the expression of ASK1 and PRKCD in the process of monocyte differentiation, and explore their role in functional changes of hypersplenism spleen macr ophages (MΦ) in portal hypertension (PH). Methods U937 cells were stimulated to differentiate into monocyte/macrophage-like cells by cultivation in PMA and the mRNA expressions of ASK1 and PRKCD were detected by q-PCR and the changes of protein expression were identified by western blot analysis. The secretion of phagocytose related cytokines such as IL-10 and TNF-a weretested by ELISA, and the function of the macrophage-like cells were studied by chicken red blood cell phagocytose test. Results The expressions of PRKCD and ASK1 mRNA were gradually decreased along with the cell differentiation, while the secretion of TNF-αwas increased, IL-10 secretion reached a maximum at 24 h after PAM stimulation, and then gradually fell. The expression of ASK1 and p-ASK1 were rapidly increased compared with the non-stimulated U937 cells, while the expression of PRKCD and p-PRKCD were sightly declined. The phagocytose test show that U937 cells induced with PMA were able to swallow the chicken red blood cell.Conclusion Up-regulated protein expression of ASK1 and p-ASK1 and down-regulated protein expression of PRKCD and p-PRKCD in the process of PMA induced monocyte differentiation, are consist with the expression changes of splenic macrophage phagocytosis in hypersplenism, which leads to increased activity of MΦ.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2015(000)001【总页数】6页(P17-22)【关键词】单核细胞分化;U937;PRKCD;ASK1;门静脉高压症脾亢【作者】闫峰;王效民;袁思波;马全明;韩慧平【作者单位】厦门大学附属中山医院胃肠外科//厦门市消化疾病诊治中心//厦门大学消化病研究所;厦门大学附属中山医院肝胆外科,福建厦门361004;厦门大学附属中山医院胃肠外科//厦门市消化疾病诊治中心//厦门大学消化病研究所;厦门大学附属中山医院胃肠外科//厦门市消化疾病诊治中心//厦门大学消化病研究所;杭州赫贝科技有限公司,浙江杭州 311111【正文语种】中文基因芯片研究表明,同正常脾巨噬细胞相比,门静脉高压症(PHT)脾亢患者脾巨噬细胞(Mφ)呈现21个表达上调的已知基因以及73个表达下调的基因[1]。
CD147、MCT1及MCT4在宫颈病变中的表达及临床意义张宝月;瞿全新;顾安康【摘要】目的:探讨CD147、单羧酸转运蛋白1(MCT1)、MCT4在宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及宫颈癌中的表达及其临床意义.方法:选择宫颈病变患者92例,其中宫颈癌43例(宫颈癌组),CIN 34例(CIN组,CIN Ⅰ 12例、CINⅡ11例、CINⅢ11例),15例正常宫颈作为对照(对照组).采用免疫组化SP法检测CD147、MCT1、MCT4表达情况并进行分析.结果:CD147 、MCT1、MCT4阳性表达率,宫颈癌组高于CIN组(均P<0.05)和对照组(均P<0.05),CIN组高于对照组(均P<0.05),CINⅡ~Ⅲ组高于CIN Ⅰ组(均P<0.05).在宫颈癌组中,CD147、MCT1阳性表达率,年龄≤35岁组低于年龄>35岁组,Ⅰ~Ⅱ期组低于Ⅲ~Ⅳ期组,高分化组低于中低分化组(均P<0.05);MCT4阳性表达率,年龄≤35岁组低于年龄>35岁组,高分化组低于中低分化组(均P<0.05),Ⅰ~Ⅱ期组与Ⅲ~Ⅳ期组差异无统计学意义.在宫颈病变组织中,MCT1和CD147的表达一致性有统计学意义(加权的Kappa=0.774,Z=10.126,P<0.001).MCT4和CD147的表达一致性有统计学意义(加权的Kappa=0.909,Z=1 1.628,P<0.001).MCT1和MCT4的表达一致性有统计学意义(加权的Kappa=0.797,Z=10.383,P<0.001).结论:CD147、MCT1、MCT4的表达在宫颈病变中具有较高的一致性,在CIN及宫颈癌发生发展中发挥重要作用,同时可作为判断低级别CIN进展为高级别CIN及宫颈癌的高危客观指标,对于有CD147、MCT1、MCT4高表达的高级别或低级别CIN患者均应予以积极治疗及密切随访.【期刊名称】《国际妇产科学杂志》【年(卷),期】2015(042)002【总页数】3页(P194-196)【关键词】宫颈肿瘤;宫颈上皮内瘤样病变;免疫组织化学;抗原,CD147;单羧酸转运蛋白【作者】张宝月;瞿全新;顾安康【作者单位】300452 天津,海洋石油总医院;天津市第一中心医院;天津市中医药研究院附属医院病理科【正文语种】中文宫颈病变包括宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈癌。
CD14与肿瘤的相互关系及研究进展李康【摘要】CD14为白细胞表面分化抗原,在介导机体免疫应答及炎性反应中具有重要作用.近年来研究发现CD14的基因多态性能够影响多种肿瘤的易患性,同时其免疫调节功能与肿瘤的发生、发展密切相关,但其详细的作用机制仍未明确.该文针对CD14多态性与肿瘤、CD14与肿瘤免疫逃逸、CD14与肿瘤发生、发展的关系研究现状展开综述,期望为CD14在抗肿瘤中的作用研究提供理论支持.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2014(020)015【总页数】3页(P2726-2728)【关键词】CD14;肿瘤;基因多态性;免疫逃逸【作者】李康【作者单位】西藏自治区人民医院消化内科,拉萨850000【正文语种】中文【中图分类】R34分化抗原群(cluster of differentiation antigen 14,CD14)为细胞表面糖蛋白家族成员之一,最初被发现为白细胞表面分化抗原,是单核细胞、中性粒细胞和巨噬细胞的特异性表面标志物[1]。
哺乳细胞中CD14为革兰染色阴性菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的高亲和受体,能够参与机体对革兰染色阴性菌的吞噬与消化,在介导机体的免疫应答以及炎性反应中均发挥着重要作用[2-3]。
近年来,多项研究指出CD14的基因多态性与肿瘤的易患性密切相关。
随着研究的深入,CD14与肿瘤免疫逃逸以及肿瘤发生、发展的关系也逐渐受到关注。
基于CD14对免疫应答及细胞因子的调控作用,深入探讨CD14的功能及作用机制对于抗肿瘤研究具有非常重要的意义。
1 CD14的结构人CD14基因位于第5号染色体长臂5q23~31区,长约3900 bp,包含2个外显子和较长的5′端以及3′端非编码序列。
CD14蛋白包含375个氨基酸残基,其成熟肽长356个氨基酸,其中包含19个氨基酸长度的信号肽,4个N型糖链黏部位,约占整个相对分子质量的20%。
此外,CD14的氨基酸序列中还包含一个重复10次的富含亮氨酸的特异性序列,可能与CD14分子的膜结合以及与其他蛋白质的结合有关。
白血病CD系列检测报告背景白血病是一种由于骨髓中的恶性细胞异常增殖而引起的血液系统恶性肿瘤。
白血病CD系列检测是通过检测患者血液中特定细胞表面标记物的表达水平,来确定白血病的亚型和预后,以指导治疗方案的选择。
分析在本次检测中,我们对患者进行了白血病CD系列标记物的检测,包括CD34、CD117、CD13、CD33、CD14和CD64等。
通过分析这些标记物的表达情况,可以帮助确定白血病的亚型和预后。
CD34CD34是一种干细胞标记物,在正常情况下主要存在于造血干细胞和内皮前体细胞中。
在白血病中,如果CD34阳性细胞比例较高,则可能表示患者存在干细胞增殖异常。
根据本次检测结果,患者的CD34阳性细胞比例为XX%,超过了正常范围。
这可能暗示着患者存在干细胞异常增殖,进一步提示白血病的存在。
CD117CD117是一种造血干细胞和肥大细胞的标记物。
在某些白血病亚型中,CD117的表达水平可以提供预后信息。
根据本次检测结果,患者的CD117阳性细胞比例为XX%,超过了正常范围。
这可能暗示着患者存在某些特定白血病亚型,并且可能提示预后较差。
CD13、CD33、CD14和CD64CD13、CD33、CD14和CD64是粒细胞系标记物,在白血病中常用于鉴别不同亚型。
根据本次检测结果,患者的CD13、CD33、CD14和CD64阳性细胞比例分别为XX%、XX%、XX%和XX%,超过了正常范围。
这可能暗示着患者存在粒细胞系异常增殖,并且可能进一步确定白血病的亚型。
结果根据本次检测结果分析,患者表达了多个白血病相关标记物,包括高表达的CD34、CD117、CD13、CD33、CD14和CD64等。
这提示患者可能患有一种白血病,并且可能需要进一步的检查和治疗。
建议根据本次检测结果,我们建议患者进行以下进一步的检查和治疗:1.骨髓穿刺检查:通过骨髓穿刺检查,可以确定白血病的亚型和细胞学特征,以指导后续治疗方案的选择。
2.分子遗传学检测:通过分子遗传学检测,可以进一步确定白血病的基因突变情况,并为靶向治疗提供依据。
cd医学名词解释
CD医学名词解释
CD是Clinically Diagnosed(临床诊断)的缩写,常用于医学领域中。
下面是一些与CD相关的医学名词解释。
1. CD指数:CD4+T淋巴细胞计数,是评估艾滋病患者免疫状态的重要指标。
2. CDH1基因:是肿瘤抑制基因,突变可导致胃癌和乳腺癌等恶性肿瘤的发生。
3. CD19抗原:是一种在B细胞表面上表达的膜糖蛋白,是B细胞恶性肿瘤的治疗靶点。
4. CD147蛋白:是一种膜糖蛋白,在肿瘤细胞侵袭和转移过程中发挥重要作用。
5. CDK4/6抑制剂:是一类治疗乳腺癌的新型药物,通过抑制细胞周期蛋白依赖性激酶4/6的活性来阻止癌细胞增殖。
以上仅是CD相关医学名词的几个例子,CD在医学领域中还有更多的
应用。
对于医学从业者来说,了解这些名词的意义和作用,可以更好地理解疾病的发生和治疗方法的选择。
白细胞介素-27对白血病细胞株U937细胞生物学行为的影响郭小燕;翟凤仙;刘彬彬;范蕊芳;林东军【摘要】目的:探讨白细胞介素-27(IL-27)对人单核细胞白血病细胞株U937细胞的影响及其机制.方法:用不同剂量的重组人IL-27和U937细胞分别共培养24 h和48 h,用荧光定量PCR测定细胞中促凋亡基因p53、bax及caspase-3、主要组织相容性复合物Ⅰ(MHCⅠ)类分子、协同刺激分子CD86和黏附分子CD54的表达,流式细胞仪检测U937细胞表面CD86和CD54的表达,并用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定IL-27对细胞增殖的影响.结果:PCR结果显示经过不同剂量IL-27刺激后,U937细胞中促凋亡基因p53和bax表达增加,同时,U937细胞中凋亡相关蛋白caspase-3的表达及活性也有相应增加;MTT结果显示,IL-27可以抑制U937细胞增殖并和抗肿瘤药物阿糖胞苷产生协同作用;IL-27可以诱导U937细胞中的MHCⅠ类分子(HLA-A,B,C)、表面的协同刺激分子CD86和黏附分子CD54的表达增加.结论:IL-27可以诱导U937细胞中促凋亡基因的表达,直接抑制细胞增殖,对细胞中MHCⅠ、CD86和CD54的表达有诱导作用.这可能是IL-27抗肿瘤作用的重要机制.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2011(027)005【总页数】6页(P869-874)【关键词】白细胞介素27;U937细胞;白血病;单核细胞【作者】郭小燕;翟凤仙;刘彬彬;范蕊芳;林东军【作者单位】中山大学附属第三医院血液科,广州,510630;中山大学血液病研究所,广东,广州,510630;中山大学附属第三医院血液科,广州,510630;中山大学血液病研究所,广东,广州,510630;中山大学附属第三医院血液科,广州,510630;中山大学血液病研究所,广东,广州,510630;中山大学附属第三医院血液科,广州,510630;中山大学血液病研究所,广东,广州,510630;中山大学附属第三医院血液科,广州,510630;中山大学血液病研究所,广东,广州,510630【正文语种】中文【中图分类】R557+2白细胞介素-27(interleukin-27,IL-27)是新发现的IL-12家族细胞因子,由EBI3(EBV-induced gene 3)和P28表达产物组成的异二聚体,其受体也是由2个亚基IL-27Ra(又名WSX-1或T-CCR)和gp130构成,共同表达于很多免疫细胞,如:CD4+T/CD8+T、B细胞、NK细胞、单核细胞、树突状细胞等[1]。
CD47结构、功能、生物大分子药物开发“ CD 47是一种整合素相关蛋白,表达在肿瘤细胞表面,通过与吞噬细胞上蛋白SIRPα结合,抑制巨噬细胞吞噬功能。
CD 47免疫检查点是肿瘤免疫治疗的一个潜在有效和广泛应用的靶点,因此许多抑制剂已经被开发出来,可以特异性地阻断CD 47-SIRPα信号通路。
目前正在进行多项临床前和临床试验,涉及针对晚期实体肿瘤或血液病患者的,包含CD 47的抗体,anti-SIRPα融合蛋白,双特异性抗体等”01—CD47分子结构和表达CD47最初被认为是整合素相关蛋白,首先在干细胞发现,后发现几乎所有正常组织中都有不同的表达模式,作为一种天然免疫检查点受体来控制体内的吞噬功能。
CD47是一个52 kDa糖蛋白,具有免疫球蛋白可变的N端结构域、5个跨膜结构域和一个短的C端胞内尾,胞内尾部有四种可变不同剪接异构体,从而形成4个亚型。
CD47亚型2主要在造血细胞、血管内皮细胞和上皮细胞中表达,1亚型在角质形成细胞中表达,3和4亚型在神经元细胞、肠粘膜细胞和睾丸细胞中均有表达。
02—CD47分子功能CD47与其相应受体相互作用,包括血小板反应蛋白1(TSP1)和SIRPα,参与一系列生理过程中:细胞增殖、细胞凋亡、迁移和先天免疫应答。
TSP1是一种主要通过与VEGF直接相互作用,来抑制血管生成的粘合剂糖蛋白。
VEGFR2是通过VEGF信号传导,调节血管生成的重要调节因子,TSP1与CD47在内皮细胞上结合,抑制VEGFR2活化,从而破坏血管生成反应。
CD47通过抑制VEGFR2的下游靶-一氧化氮信号,也负调控T细胞表达VEGF和VEGFR2,影响血管生成。
肺动脉高压TSP1- CD47信号被上调,和促进肺动脉血管病变,引起功能障碍。
但TSP1-CD47信号通路在人类癌症中的作用仍不确定,有待探索。
CD47-SIRPa相互作用,是刺激细胞融合的关键过程及T细胞活化,特别是抑制巨噬细胞吞噬靶细胞。