基础生物化学(1)
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一.单选题
1.制备聚丙烯酰胺凝胶不需要使用到的原料是( C )
A 丙烯酰胺
B 水
C G-250
D 甲叉双丙烯酰胺
2.考马斯亮蓝法测定蛋白质含量实验中,选用的波长是( C )
A 260nm
B 540nm
C 595nm
D 620nm
3.过氧化氢酶活力测定实验中,催化剂钼酸铵的颜色是( B )
A 蓝色B无色 C 绿色 D 黄色
4.在硫酸和催化剂NH4Mo7O24的作用下,H2O2与KI反应呈( B )
A 黄色
B 酒红色
C 紫色
D 蓝色
5琼脂糖凝胶电泳实验中,DNA与EB结合后在紫外灯下呈( A )
A 橙红色
B 亮绿色
C 粉红色
D 蓝紫色
6.以下氨基酸均可与茚三酮反应,产物颜色呈黄色的是( A )
A Pro
B Arg
C Lys
D Ile
7.在Vc含量测定中,可以用做原料中Vc提取剂的是( D )
A 盐酸
B 硝酸
C 硫酸
D 草酸
8.在测定过氧化氢酶活性实验中,以下试剂做催化剂的是( A )
A 钼酸铵
B 碘化钾
C 硫代硫酸钠
D 淀粉
9.聚丙烯酰胺凝胶电泳分离同工酶实验中,分离胶的聚合方式为( A )
A 化学聚合
B 光聚合
C 物理聚合
D 电聚合
10.我们在实验课程中学习了用( A )测定H2O2酶的活性
A 碘量法
B 纸层析法
C 分光光度法
D G-250法
11.以下试剂均在实验课程中出现过,其中没有毒性的是( B )
A 过硫酸铵
B 淀粉
C 丙烯酰胺
D 联苯胺
12.以下对光聚合方式所制备的浓缩胶的描述中,错误的是( D )
A 孔径大
B 不稳定
C 重复性差
D 重复性好
13聚丙烯酰胺凝胶电泳分离同工酶实验中没有出现的缓冲液是( C )
A Tris-Cl(pH6.7)
B Tris-Cl(pH8.9)
C Tris-Cl(pH8.3)
D Tris-Gly(pH8.3)
14.聚丙烯酰胺凝胶电泳分离同工酶实验中,不属于染色液组分的是( D )
A Vc
B 联苯胺
C 双氧水
D 醋酸
15.以下对考马斯亮蓝法测定蛋白质含量实验的描述中,错误的是( B )
A 在595nm波长下测定OD值
B 不存在无法避免的系统误差
C 需要让G-250与蛋白质反应2min
D 需要在1h内完成OD值的测定
二.判断题
16常见的蛋白质氨基酸均有与茚三酮反应显蓝紫色的特性。
(错误)
17.使用离心机时,只需将装有样品的两个离心管放在对角线上的离心机外套管中,即可开始离心。
(错误)
18.盘状凝胶电泳分离过氧化物同工酶实验中先灌分离胶。
(正确)
19.还原型2, 6-二氯酚靛酚在碱性环境下呈现蓝色(错误)
20.过氧化氢酶活性测定中,Na2S2O3应使用碱式滴定管盛装。
(正确)
21.盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳分离同工酶时,电泳槽的上槽接负极。
(正确)
22.盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳分离同工酶时,电泳槽的上槽缓冲液可以重复利用。
(正确)
23.琼脂糖凝胶电泳分离DNA实验中,凝胶中的点样孔放在电泳槽的近负极侧。
(正确)
24.Vc含量测定中,染料2,6-D主要是起催化剂的作用。
(错误)
25.氧化型2, 6-二氯酚靛酚在碱性环境下呈现红色。
(错误)
三.简述题
1.聚丙烯酰胺凝胶电泳实验中,“三种物理效应、四个不连续体系”是指什么?
三种物理效应:浓缩效应、分子筛效应、电荷效应;
四个不连续梯度:凝胶层的不连续性、缓冲液离子成分的不连续性、pH的不连续性、电位梯度的不连续性。
2.聚丙烯凝胶电泳实验中,制备分离胶的化学聚合的原理和特点是什么?
化学聚合多采用催化剂过硫酸铵(AP)和四甲基乙二胺(TEMED)分别作为催化引发剂与加速剂,在TEMED作用下AP形成氧的自由基,从而引发丙烯酰胺和甲叉双丙稀酰胺聚合反应。
分子氧和一些金属离子会阻碍聚合,低温会使聚合速度变慢。
化学聚合特点是:(1)凝胶的孔径较小;(2)凝聚制备的重复性好。
3.制备浓缩胶的光聚合的原理和特点是什么?
光聚合是催化剂核黄黄素(VB2)经光解形成无色基,无色基在被氧氧化形成自由基,从而引发丙烯酰胺和甲叉双丙稀酰胺聚合反应。
光聚合通常需要迹量氧存在,但过量氧会阻碍聚合。
光聚合特点是:(1)凝胶的孔径较大;(2)但孔径不太稳定,且随着时间推移会渐渐变小。
4.用碘量法测定过氧化氢酶活力,若在反应体系中加入碘化钾和催化剂钼酸铵后出现酒红色,且空白对照组明显深于样品测定组,该现象说明什么?
这说明样品测定组的存在过氧化氢酶活性,且活性较高力。
因为本实验利用了反滴定法,样品测定组和空白对照组体系中的H2O2量相等且远远过量,但由于空白对照组中的酶先被强酸作用而失活,H2O2没被分解;而在测定组中,样品中的过氧化氢酶分解了部分H2O2,未被分解的H2O2可将KI氧化为I2,生成的I2越多,溶液的酒红色就越深。
同时,若样品中的过氧化氢酶活力越大,分解的H2O2越多,剩余的H2O2越少,可产生的I2就越少,两组之间色差就越大。
5.我们学习的维生素C定量测定实验有什么优、缺点?
优点:简便易行
缺点:
(1)提取物中的VC有还原型VC、脱氢VC和结合型VC不同形式,后二者不能使氧化型2, 6-二氯酚靛酚(2, 6-D)还原脱色,而本实验只是测定还原型VC;(2)提取物中还含有其它还原性的物质,也能使氧化型2, 6-D还原脱色;(3)提取物中的色素会干扰终点判定。