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HPLC测定土霉素片中主药及有关物质的含量
苑华;高燕霞;张素平
【期刊名称】《华西药学杂志》
【年(卷),期】2005(20)5
【摘要】目的建立土霉素片主药及有关物质的含量测定方法.方法采用HPLC法,样品片粉用0.1 mol·L-1盐酸溶解,过滤后,取续滤液作为供试品溶液.采用Luna-C18柱,以0.05 mol·L-1草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2 mol·L-1磷酸氢二铵溶液(75∶20∶5)、用氨试液调pH 8.0为流动相,检测波长280 nm.结果土霉素浓度在0.01～0.50 mg·ml-1的范围内有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为100.6%. 结论所用方法准确、快速、稳定.
【总页数】2页(P444-445)
【关键词】土霉素片;高效液相色谱法;有关物质
【作者】苑华;高燕霞;张素平
【作者单位】河北省药品检验所
【正文语种】中文
【中图分类】R917
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艳艳;张露
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[作者简介] 刘丽(1970-),女,本科,副主任技师,主要从事理化检验工作。
【化学测定方法】高效液相色谱法测定水产品中土霉素、四环素、金霉素刘丽,蔡志斌,张英(广东省深圳市龙岗区疾病预防控制中心,广东深圳 518172)[摘要] 目的:建立高效液相色谱法测定水产品中土霉素、四环素、金霉素。
方法:选择乙腈-0101mol/L柠檬酸溶液为流动相体系,采用梯度洗脱,流速0～6m in为014m l/m in;6～7m in为014～018m l/m in;7～12m in为018m l/m in。
结果:当检测波长为355n m时,土霉素检出限为01010mg/kg,四环素为01008mg/kg,金霉素为01035mg/kg,线性范围为0104～110mg/kg,相关系数为01999,相对标准偏差为1135%,加标回收率为85%～120%。
结论:此测定方法简便,结果可靠,灵敏度高。
[关键词] 土霉素;四环素;金霉素;高效液相色谱[中图分类号] O65717+2 [文献标识码] A [文章编号] 1004-8685(2007)08-1405-02D etecti on of three an ti b i oti cs i n aqua ti c products by HPLCL iu L i,Cai Zhi2bin,Zhang Ying(Longgang Center for D isease Contr ol and Preventi on,Shenzhen518172,China)[Abstract] O bjecti ve:To esteblish a si m p le method f or si m ultaneous detecti on of oxytetracycline,tetracycline,chl ortetracycline in aquatic p r oducts by HP LC1M ethods:A gradient eluti on method of citric acid with0101mol/L acet onitrile was used1The fl ow rate was014m l/m in in0～6m in,then ascent t o018m l/m in in the next2m in and kep t invariable t o the end1The detecting wavelength was355n m1Results:The li m it of detecti on was01010mg/kg for oxytetracycline,01008mg/kg for tetracycline, 01035mg/kg for chl ortetracycline,and the linear range was0104～110mg/kg(r=01999)1The relative standard deviati on was 1135%and the recovery was85%～120%1Conclusi on:The method is si m p le,sensitive and accurate,and it can be used t o de2 tect the three antibi otics in aquatic p r oducts1[Key words] Oxytetracycline;Tetracycline;Chl ortetracycline;HP LC 对畜、禽肉类中土霉素、四环素、金霉素的测定,有国家标准方法G B/T50091116-2003[1],但该方法用于水产品(包括其干制品)的处理效果不太理想。
高效液相色谱法测定土霉素片的含量乔晓芳【摘要】目的：建立土霉素片的含量测定方法。
方法高效液相色谱法。
采用Luna-C18色谱柱，以0.05 mol/L草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2 mol/L磷酸氢二铵（70∶25∶5）为流动相，用紫外检测器在282 nm波长处检测。
结果土霉素片浓度在0.01～1 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好（r＝0.9990），平均回收率为100.1%。
结论高效液相色谱法快速、简便、准确，可用于土霉素片的含量测定。
%Objective To establish a method for determination of the content of Oxytetracycline tablets. Methods High performance liquid chromatography. The WH-C18 column, with 0.05 mol/L ammonium oxalate solution-two methyl formamide-0.2 mol/L diammonium hydrogen phosphate (70∶25∶5)as mobile phase, using a UV detector at 282 nm wavelength. Results Oxytetracycline Tablets concentration relationship in 0.01-1 mg/mL scope with the peak area of linear(r=0.9990), the average recovery rate was 100.1%. Conclusion The HPLC method is rapid, simple and accurate, can be used for the content determination of Oxytetracycline tablets.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2014(000)021【总页数】2页(P80-81)【关键词】土霉素片;含量测定;高效液相色谱法;抗生素微生物检定法【作者】乔晓芳【作者单位】河南省安阳市食品药品检验所，河南安阳455000【正文语种】中文【中图分类】R927.2土霉素为四环素类抗生素。
ICS 67.050 X 04水产品中土霉素、四环素、金霉素和强力霉素残留量的测定 高效液相色谱荧光检测法Determination of Oxytetracycline, Tetracycline,Chlortetracycline and Doxycycline residues in aquatic product —HPLC with fluorescence detector浙江省质量技术监督局 发布DB33DB33/T 691—2008II前言本标准附录A为资料性附录。
本标准由浙江省水产标准化技术委员会提出并归口。
本标准起草单位：浙江省海洋水产品质量检验中心、舟山市富丹旅游食品有限责任公司。
本标准主要起草人：王萍亚、周勇、张薇英、黄鹂、戴意飞、王维洁、江旭华。
DB33/T 691—2008水产品中土霉素、四环素、金霉素和强力霉素残留量的测定-高效液相色谱荧光检测法1 范围本标准规定了水产品中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素残留量的高效液相色谱荧光测定方法。
本标准适用于水产品中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素残留量的测定。
2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 原理样品经柠檬酸缓冲液提取，正己烷脱脂，固相萃取柱净化，用高效液相色谱荧光检测器检测，外标法定量。
4 试剂与材料4.1 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T 6682中一级水标准。
4.2 甲醇：色谱纯。
4.3 正己烷。
4.4柠檬酸。
4.5磷酸氢二钠（Na2HPO4）。
4.6乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）。
4.7磷酸二氢钠（NaH2PO4•2H2O）。
第1篇一、实验目的1. 学习并掌握高效液相色谱法测定盐酸土霉素含量的原理和方法。
2. 熟悉高效液相色谱仪的使用和操作。
3. 培养实验操作规范，提高实验技能。
二、实验原理盐酸土霉素（Oxytetracycline Hydrochloride）是一种广谱抗生素，本实验采用高效液相色谱法测定盐酸土霉素的含量。
该方法利用高效液相色谱仪对盐酸土霉素进行分离和检测，通过比较供试品溶液和对照品溶液的峰面积，计算供试品中盐酸土霉素的含量。
三、实验用品1. 仪器：高效液相色谱仪、色谱柱、紫外吸收检测器、分析天平、移液管、容量瓶、玻璃棒、滴定管、锥形瓶等。
2. 试剂：盐酸土霉素对照品、0.05mol/L草酸铵溶液、二甲基甲酰胺、0.2mol/L 磷酸二氢铵溶液（用磷酸调pH值至2.50.05）、0.1mol/L盐酸溶液、0.01mol/L 盐酸溶液等。
四、实验步骤1. 色谱条件a. 流动相：0.05mol/L草酸铵溶液：二甲基甲酰胺：0.2mol/L磷酸二氢铵溶液（用磷酸调pH值至8.00.2）=75:20:5。
b. 检测波长：280nm。
c. 柱温：室温。
2. 对照品溶液的制备a. 精密称取25mg盐酸土霉素对照品，置于50mL量瓶中。
b. 加入0.01mol/L盐酸溶液溶解，并定容至刻度，摇匀。
c. 制得每1mL含2.5mg盐酸土霉素的对照品溶液。
3. 供试品溶液的制备a. 精密称取25mg供试品，置于50mL量瓶中。
b. 加入0.1mol/L盐酸溶液5mL，使供试品溶解。
c. 加水稀释至刻度，摇匀。
d. 精密量取10mL，置于50mL量瓶中，加入0.01mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。
e. 制得每1mL含0.5mg盐酸土霉素的供试品溶液。
4. 高效液相色谱法测定a. 将对照品溶液和供试品溶液分别注入高效液相色谱仪。
b. 根据色谱条件进行测定，记录峰面积。
c. 比较供试品溶液和对照品溶液的峰面积，计算供试品中盐酸土霉素的含量。
应对中华人民共和国国务院令第609号《饲料和饲料添加剂管理条例》液相色谱仪检测举例用LC-5500液相色谱仪检测土霉素、四环素、金霉素1.1.1仪器LC5500高效液相色谱仪；溶剂过滤器；回旋振荡器；离心机。
1.1仪器条件检测器：紫外可见检测器；检测波长：355nm；色谱柱：C18柱 4.6mm*250mm；流动相：乙腈＋0.01mol/L磷酸二氢钠溶液（用30％硝酸调节pH值为2.5）=25＋75；流速：1mL/min；柱温：室温；进样量：20μL。
根据GB/T5009.116-2003畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定（高效液相色谱法）的要求，色谱柱应为ODS-C18（5μm）6.2mm*150mm，流动相乙腈＋0.01mol/L磷酸二氢钠溶液（用30％硝酸调节pH值为2.5）＝35＋65，由于我们试验所用色谱柱为4.6mm*250mm，所以经过试验得出最好用乙腈＋0.01mol/L磷酸二氢钠溶液（用30％硝酸调节pH值为2.5）＝25＋75的流动相，这样既可以在较短的时间内完成一次检测，又可以得到很好的分离，如图1所示。
图1混合标样色谱图高效液相色谱法检测饲料中的氨基酸1.1仪器及试剂1.1.1试剂及试剂的配制1.1.1.1乙腈（色谱纯）；1.1.1.2水（超纯水）；1.1.1.3醋酸钠（分析纯）；1.1.1.4冰乙酸（分析纯）；1.1.1.5叠氮化钠（分析纯）；1.1.1.6N，N-二甲基甲酰胺（分析纯）；1.1.1.7碳酸氢钠（优级纯）；1.1.1.8磷酸二氢钾（优级纯）；1.1.1.9氢氧化钠（优级纯）；1.1.1.10色氨酸标样（中国标准物质中心）；1.1.1.1117种氨基酸混合标样（中国标准物质中心，混合标样中17种氨基酸的浓度见表一）；表一十七种氨基酸标样中各氨基酸浓度中文名称简称分子量浓度（μmol/mL）浓度（mg/100mL）天冬氨酸Asp133.1226.62谷氨酸Glu147.1229.42丝氨酸Ser105.1221.02精氨酸Arg174.2234.84甘氨酸Gly75.1215.01苏氨酸Thr119.1223.82脯氨酸Pro115.1446.05丙氨酸Ala89.1217.82缬氨酸Val117.1223.44蛋氨酸Met149.2229.84半胱氨酸Cys121.2224.24异亮氨酸Ile131.2226.24亮氨酸Leu131.2226.24苯丙氨酸Phe165.2233.04组氨酸His155.2231.04赖氨酸Lys146.2229.24酪氨酸Tyr181.2236.241.1.1.12饲料参比（中国标准物质中心，饲料参比的百分含量见表二）；表二饲料参比的百分含量序号中文名称简称百分含量（%）1天冬氨酸Asp 1.562谷氨酸Glu 3.243丝氨酸Ser0.944精氨酸Arg 1.255甘氨酸Gly 1.286苏氨酸Thr0.747脯氨酸Pro 1.408丙氨酸Ala 1.189缬氨酸Val0.9210蛋氨酸Met0.5411半胱氨酸Cys0.3412异亮氨酸Ile0.7613亮氨酸Leu 1.6814苯丙氨酸Phe 1.0015组氨酸His0.5016赖氨酸Lys 1.0817酪氨酸Tyr0.65合计19.061.1.1.13色氨酸标样配制：称取适量色氨酸标准品，用氢氧化钠溶液溶解配制成浓度为2μmol/mL溶液，即20.42mg/100mL；1.1.1.146mol/L盐酸配制：用浓盐酸和水1：1配置即可；1.1.1.155mol/L氢氧化钠的配制：称取200g氢氧化钠配成1L水溶液；1.1.1.160.1mol/L氢氧化钠溶液：称取0.4g氢氧化钠配成100mL水溶液；1.1.1.17衍生缓冲液：4%碳酸氢钠水溶液；1.1.1.18衍生试剂：适量衍生试剂用乙腈定容为100mL；1.1.1.19平衡缓冲液：0.68%磷酸二氢钾水溶液。
