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HPLC法快速测定甜叶菊中瑞鲍迪苷A张友财;俞坚;董雪瑞;朱军林;娄泽楠【摘要】建立以甜叶菊叶片为原料，采用超声萃取法用体积浓度70%的乙醇对瑞鲍迪苷A进行提取，使用高效液相色谱仪检测甜叶菊样品液中瑞鲍迪苷A含量的方法。
采用-NH2基柱（250 mm×4.6 mm，5μm），流动相为乙腈与水体积比80∶20，流速1.2 mL/min，紫外检测波长210 nm，进样量15μL。
甜叶菊中瑞鲍迪苷A分别在纯水、体积浓度70%乙醇、80%乙腈中提取得率为10.25 mg/g、11.52 mg/g、13.49 mg/g，范围内线性关系良好相关系数R2=0.9999。
采用体积浓度70%乙醇对瑞鲍迪苷A进行提取，此方法安全有效、操作简单、定量准确。
%With Stevia as the raw material, the extraction of rebandiodside A (RA) by ultrasonic extraction with70%ethanol was researched;A HPLC method for determination of rebandiodside A(RA) in stevia was developed. NH2 col-umn (250 mm×4.6 mm,5μm)was used. The mobile phase was composed of acetonitrile and water (80∶20, v/v), at a flow rate of 1.2mL/min;The detection wavelength was 210 nm. injection volume was 15μL. The extraction rates were 10.25 mg/g,11.52 mg/g,13.49 mg/g in pure water, 70%ethanol, and 80%acetonitrile separately. The calibra-tion curves had good linearity. Correlative coefficient R2=0.999 9. The method which was characterized by simplicity, higher accuracy, provided a good method for the determination of rebandiodside A in stevia.【期刊名称】《食品工程》【年(卷),期】2014(000)004【总页数】3页(P60-62)【关键词】甜叶菊;瑞鲍迪苷A;超声萃取;高效液相色谱【作者】张友财;俞坚;董雪瑞;朱军林;娄泽楠【作者单位】杭州职业技术学院，浙江杭州 310018;杭州职业技术学院，浙江杭州 310018;杭州职业技术学院，浙江杭州 310018;杭州职业技术学院，浙江杭州310018;杭州职业技术学院，浙江杭州 310018【正文语种】中文【中图分类】TS207.3甜菊糖是天然低热量高倍甜味剂，被誉为“世界第三糖”。
甜菊糖甙的测定方法于聪敏，石岩【摘要】摘要：对目前甜菊糖甙测定方法进行了综述，并比较了容量法、重量法、流动注射化学发光法、分光光度法、毛细管电泳法、高效液相色谱法、薄层色谱法之间的差异性和优缺点。
目前应用最广泛的测定方法是高效液相色谱法。
【期刊名称】中国糖料【年(卷),期】2009(000)001【总页数】3【关键词】甜叶菊；甜菊糖甙；测定方法综述甜菊糖甙是一种具有甜味的萜烯类配糖体，分子式为C38H60O18，分子量为803，其纯度在90%以上为白色粉末，纯度在80%～90%之间为微黄色粉末。
目前，从甜叶菊中分离出来的甜菊糖甙共有8种[1]，其中占最主要的是Stevioside成分[1，2]，约占总量的60%～70%，甜度约为蔗糖的300倍，余味长而微苦如青草。
其次是Rebaudioside A，约15%～20%，甜度为蔗糖的450倍，甜味最接近蔗糖。
其他组分含量都较少。
甜菊糖甙在人体内不参与代谢，不产生热量，作为一种非糖、非营养型的甜味剂，不仅符合现代健康饮食的要求，还具有清热、利尿、调节胃酸的功效，为糖尿病、肥胖症、高血压、心脏病等患者提供了不诱发病情的甜味代糖品，因此近年来在食品和医学中得到广泛应用。
甜菊糖有着广阔的发展前景，但目前准确而又简单易行检测方法尚未建立，现阶段用于分析甜菊糖甙含量的方法主要有容量法、重量法、流动注射化学发光法、分光光度法、毛细管电泳法、高效液相色谱法、薄层色谱法，现将这些方法的基本情况综述如下。
1 测定方法1.1 高效液相色谱法高效液相色谱法是以液体作为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。
高效液相色谱对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，因而弥补了气相色谱法的不足。
在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱分析的约占20%，而80%则需用高效液相色谱来分析。
国标8270-1999中规定高效液相色谱仪的条件选择为：色谱柱：-NH2基柱；流动相：乙腈∶水=80∶20；流速：1.2 mL/min；检测：紫外检测器、波长210 nm；进样量：15µL。
高效液相色谱法检测运动饮料中甜菊糖苷周文清【摘要】建立一种用高效液相色谱-PDA检测法测定运动饮料中甜菊糖苷的检测方法。
样品前处理采用硅胶固相萃取小柱进行富集和净化，氮气吹干后用流动相复溶上机检测。
采用Waters RP C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5μm）分离，以乙腈∶水=30∶70（体积比）作为流动相，用PDA检测器检测，外标法峰面积定量。
结果表明，9种甜菊糖苷组分在20.0μg/mL~200.00μg/mL浓度范围内线性良好，相关系数r2为0.991~0.999，检出限在1.0μg/mL~3.0μg/mL，定量限为3.0μg/mL~9.0μg/mL，加标回收率达到81.4%~90.5%。
%A rapid and effective method was established for the determination of steviol glycosides in sports drink by high performance liquid chromatography-PDA detection method. The samples were concentrated and purified by silica gel solid phase extraction column.The elution liquid was dried under nitrogen, and detected af-ter re-dissolution with mobile phase. The separation of targeted compound was performed on a Waters RP C 18 chromatographic column (4.6 mm×250 mm, 5μm) usingacetonitrile∶water (30∶70) as mobile phase, with PDA detector and external standard method peak area quantification. The linear range of nine kinds stevioside components was in the range of 20.0μg/mL-200.0μg/mL with a correlation coefficient of 0.991-0.999. The de-tection limit was 1.0μg/mL-3.0μg/mL and the quantitative limit was 3.0μg/mL-9.0μg/mL. The recovery rate w as 81.4%-90.5%.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2017(038)001【总页数】4页(P161-164)【关键词】高效液相色谱;运动饮料;甜菊糖苷【作者】周文清【作者单位】景德镇陶瓷大学，江西景德镇333000【正文语种】中文甜菊糖苷是从甜菊叶中提取的天然甜味剂，其在人体内不参与代谢，热值仅为蔗糖的1/300，且具有清热、利尿、调节胃酸的功效，试验证明其无致癌性、遗传毒性、生殖/发育毒性，近年来在食品和医学中得到广泛应用，目前已被我国及美国、日本等20多个国家批准为食品添加剂使用，世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会建立甜菊糖苷ADI（每日允许摄入量）值为4mg/（kg体重·d）。
吉林省食品安全地方标准《食品安全地方标准食品中甜菊糖苷的测定高效液相色谱法》编制说明(征求意见稿)吉林省疾病预防控制中心2012年5月24日目录一、研究背景……………………………………………………二、任务来源…………………………………………………三、制定标准的必要性和意义………………………………四、标准制定的主要过程………………………………………五、制定标准的原则和依据……………………………………六、标准方法建立的依据………………………………………1、标准的名称…………………………………………………2、标准的范围……………………………………………………3、方法原理……………………………………………………4、前处理条件…………………………………………………5、仪器分析条件…………………………………………………6、线性范围…………………………………………………7、检出限…………………………………………………8、精密度和准确度………………………………………………七、方法验证……………………………………………………八、验证结论……………………………………………………九、本标准作为强制性地方标准的建议……………………………十、贯彻标准要求和措施建议…………………………………十一、参考文献……………………………………………………《食品安全地方标准食品中甜菊糖苷的测定高效液相色谱法》编制说明一、研究背景甜菊糖，俗称甜菊糖甙（Stevioside）, 是从菊科草本植物甜叶菊中精提而得，原产于南美洲的巴拉圭、巴西、阿根廷等地。
甜菊糖甜度为蔗糖的200~350 倍，而热量只有蔗糖的1/300，是一种高甜度、低热量、新型、保健、天然甜味剂。
甜菊糖具有热量低、甜度高、味质好、耐高温、稳定性好等特点，在人体内无残留、安全无毒，有利于调节血糖，促进脑力活动，对心脑血管病、肥胖病、糖尿病患者有辅助治疗功能，更有助于防治龋齿，并可作为苯丙尿酮症（PKU）病人的糖类替代物。
一种同时鉴定多种甜菊糖苷的薄层色谱分析方法周莹婷1，张涛俊2，王巧宇1，张诗馨1，徐晨露1，王志胜1，魏渊1，*（1.江苏大学药学院，江苏 212013；2.江苏华泰重工装备有限公司，江苏 212300）摘要：目的：在工业大规模的生产中，实现对甜菊糖苷产品简易和高效检测；方法：分为单向展开与二维垂直展开两种方法。
均以GF254硅板为固定相，展开剂分别是展1-［氯仿∶甲醇∶水=65∶35∶10下层液，1mL甲酸］，展2-［正丁醇∶醋酸∶水=4∶1∶5上层液］。
结果：试验结果表明所建立的单维薄层色谱方法能快速地实现四种甜菊糖苷的有效分离，色谱斑点清晰。
且在此基础上，二维薄层色谱法可用于收集四种甜菊糖苷单体。
结论：所建立检测方法具备显著的优势，通过方法学考察，其专一性、重复性、杂质耐受性和实用性都非常理想，适用于工业生产流程中的甜菊糖苷产品检测。
关键词：甜叶菊；甜菊糖苷；薄层色谱法；二维垂直展开法；检验方法中图分类号：TS202.3/TS207.3 文献标识码：A 文章编号：1006-2513（2021）03-0076-09 doi：10.19804/j.issn1006-2513.2021.03.013A TLC method for simultaneous identification of multiple steviaglycosidesZHOU Ying-ting1，ZHANG Tao-jun2，WANG Qiao-yu1，ZHANG Shi-xin1，XU Chen-lu1，WANG Zhi-sheng1，WEI Yuan1，*（1. School of Pharmacy，Jiangsu University，Jiangsu 212013；2. Jiangsu Huatai HeavyIndustry Equipment Co.，Ltd.，Jiangsu 212300）Abstract：Objective：To apply a simple and efficient detection of steviol glycosides in large-scale industrial production. Methods：It can be divided into one-way expansion and two-dimensional vertical expansion. GF254 silicon plate was used as the stationary phase，and the developing agents were 1 -［chloroform∶methanol∶water = 65∶35∶10 lower liquid，1mL formic acid］ and developing solvent 2 -［n-butanol∶acetic acid∶water = 4∶1∶5 upper liquid］ . Results：The results showed that the established method could quickly separate four steviol glycosides and chromatography spots were clear. Based on the previous test，two-dimensional thin layer chromatography was used to collect four stevioside components. Conclusion：The advantage of the established detection method was obvious，its specificity，repeatability，impurity tolerance and usefulness are all highly desirable and suitable for testing of stevioside products in industrial manufacturing.Key words：stevia rebaudiana；steviol glycosides；TLC；two-dimensional vertical development method；test method.收稿日期：2020-11-10基金项目：横向课题，基于甜菊糖苷工艺的全自动连续动态逆流提取机组的研发（2020003）。
甜叶菊(Steviarebaudiana)糖甙的提取纯化及分离检测方法的研究滕祥金摘要:随着人民生活水平的提高，现在吃得更营养，吃得更健康逐渐成为消费者关心的重点。
甜叶菊糖甙的生产不但能补充我国食糖的不足，更可替代糖精等不利于人体的化学合成甜味剂，因此，低热量的甜味剂甜叶菊糖营也随之热起来，长期食用甜叶菊糖普不会使人发胖，特别适宜肥胖病、糖尿病、高血压、动脉硬化、龋齿病患者使用，而且物理、化学性能稳定、无发酵性。
本论文以本实验室栽种甜叶菊叶片为原料，研究并探讨了甜叶菊糖甙的提取、纯化、分离、检测的方法。
蒸煮浸提法的最佳条件:以水为溶剂、温度100℃、时间6h、料液比1:10，浸提物中甜叶菊糖甙含量为9.28%。
甜叶菊糖甙的提纯通过比较选择了沉淀效果比较好的FeSO4；和Ca(0H)2，加入条件为80℃恒温水浴40min，静止4h抽滤，在通过大孔吸附树脂和阴阳离子交换吸附精制甜叶菊糖甙，冷冻干燥后得到甜叶菊糖甙结晶粉末。
甜叶菊糖甙组分的分离方法主要有重结晶法、层析法。
重结晶法利用甜叶菊糖甙各主要组分在乙醇溶液中溶解度的不同进行结晶将主要组分分离;层析法是利用甜叶菊糖甙主要组分在装有硅胶的层析柱中被吸附和解吸速度的不同将甜叶菊糖普主要组分分离。
检测甜叶菊糖甙含量的主要方法有重量测定法、液相色谱法、薄板层析法、分光光度法(蒽酮为显色剂)、分光光度法(DNS试剂为显色剂)、化学发光法等。
采用硅胶G薄板层析法，展开体系:正丁醇:乙酸:乙醚:水(9:6:3:l)，能十分清晰将甜叶菊糖甙、葡萄糖、麦芽糖分开，可以定性检测甜叶菊糖甙的两种主要单体组分。
分光光度法(蒽酮为显色剂)和分光光度法(DNs试剂为显色剂)都可以测定甜叶菊糖甙的主要组分，方法简便，对实验设备要求不高，但准确度不高、误差大。
流动注射化学发光法测定甜叶菊糖甙是我们最近研究出来的一种新的测定方法，能够准确测定出甜叶菊糖甙的含量，与其他测定甜叶菊糖甙的测定方法相比，其准确度、灵敏度都很高，这一测定方法在国内外尚属空白。
