百合花挥发油的提取方法及抗氧化活性研究方案
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合欢花挥发油化学成分及提取液抑菌作用研究作者:王一卓,罗慧,赵士贤来源:《湖北农业科学》 2012年第6期王一卓,罗慧,赵士贤(山东大学威海分校海洋学院,山东威海264209)摘要:采用水蒸气蒸馏法提取合欢(AlbizziajulibrissinDurazz.)花挥发油,并用气相色谱-质谱(GC-MS)法进行分析,利用滤纸片法进行抑菌试验。
结果表明,合欢花挥发油中共鉴定出16种成分,包括二十一烷(24.762%)、植酮(22.968%)、二十八烷(16.118%)、二十四烷(8.438%)和棕榈酸甲酯(6.689%)。
合欢花提取液对鳗弧菌、哈维氏弧菌、灿烂弧菌、高卢弧菌、巨大芽孢杆菌均有抑制作用,其作用随浓度升高而增强。
关键词:合欢(AlbizziajulibrissinDurazz.);挥发油;气相色谱-质谱联用;提取液;抑菌作用中图分类号:TS224.4文献标识码:A文章编号:0439-8114(2012)06-1245-03AnalysisofChemicalComponents in VolatileOilandtheAntibacterialActivityofExtractsfromFlowerofAlbizziajulibrissinWANGYi-zhuo,LUOHui,ZHAOShi-xian(MarineCollege,ShangdongUniversityatWeihai,Weihai264209,Shangdong,China)Abstract:ThevolatileoilfromflowerofAlbizziajulibrissinDurazz. wasextractedbysteamdistillationandanalyzedbygaschromatography-massspectrometry.Theantibacterialactivityofextractwasdeterminedbythefilterpapermethod.Theresultsshowedthat16compoundswereidentified,includingheneicosane(24.762%),2-pentadecanone,6,10,14-trimethyl(22.968%),octacosane(16.118%),tetracosane(8.438%)andhexadecanoicacid,methylester(6.689%);andtheextractsshowedinhibitionagainstVibrioanguillarum,V. harveyi,V. splendidus,V. gallicusandBacillusmegaterium.Theinhibitoryeffectswerestrengthenedwiththeincreasingconcentrationofextract.Keywords:AlbizziajulibrissinDurazz.;volatileoil;GC-MS;extractingsolution;antibacterialactivity合欢花为豆科合欢属植物合欢(AlbizziajulibrissinDurazz.)的干燥花序,是一种较为常见的中药,具有宁神作用,主要用于治疗心神不安、忧郁失眠[1]、郁结胸闷、活血消肿。
百合化学成分提取方法研究综述刘淑梅【摘要】百合中秋水仙碱的提取方法有水提取法、超临界二氧化碳流体萃取法和有机溶剂提取法;甾体皂苷的提取方法有色谱法、醇提-大孔树脂吸附法、醇提-正丁醇萃取法;多糖的提取方法有热水提取法、水提醇沉法、超声波法和复合酶法.【期刊名称】《中国食品工业》【年(卷),期】2015(000)009【总页数】4页(P54-57)【关键词】百合;成分;提取方法;综述【作者】刘淑梅【作者单位】定西师范高等专科学校生化系,甘肃定西743000【正文语种】中文我国自古以来,就有“药食同源”的说法。
提出“五谷为养、五果为助、五畜为益、五菜为充,气味合而极之,以补益精气的膳食营养原则。
”百合不仅是营养价值很高的蔬菜,也是一种有很高药用价值的药用价值。
古代医药家张仲景在金匮要略的《百合病篇》中记述了百合的药用价值:清热解毒、润肺等作用,故有“佳蔬良药”之誉。
《尔雅》载:“百合小者如蒜,大者如碗,数十片相累,状如白莲花,故名百合,言其片合成也。
”百合的主要药用成分:蛋白质、脂肪、多种生物碱,百合甙A、B、水仙碱、秋水仙氨及磷、铁、钙、锌、Vc、VB1、VB2、胡萝卜素等元素[1-7]。
甘肃省新医药研究所刘国权教授对兰州百合成分药理实验分析结果认为:兰州百合丰富的锌元素可调节人体机理平衡,增强人体免疫力,对肝癌、肺癌、等病都有一定的抑制作用。
(《甘肃日报》1988年3月5日)本文就百合成分的提取方法进行综述,旨在为其他中药有效成分的提取提供参考。
2.1 秋水仙碱的提取方法2.1.1 水提取法植物粉末经水提取法提取秋水仙碱,在浓缩的提取液中加碱碱化以后,再用与水不相混溶的有机溶剂来提取游离的秋水仙碱,蒸去溶剂后可得浓缩的秋水仙碱粗制品。
水当然是最便宜的溶剂,安全是其优点。
但是以水作溶剂也存在一定的局限性。
例如,被水溶出的亲水性杂质太多,使后期处理困难,秋水仙碱不易被精制、提纯[1-2]。
2.1.2 有机溶剂提取法文献[1-15]研究了利用有机溶剂提取法在不同溶剂及用量、温度、压强、时间、微粒尺度等条件下对提取百合中秋水仙碱的影响,其中文献[10-12]研究了粒度、溶剂用量、提取温度、提取时间四个因素对秋水仙碱提取的影响,确定影响秋水仙碱提取率的主次顺序为:萃取温度>溶剂用量>提取时间>粒度。
中国药典挥发油提取方法中国药典是一部全面、系统、规范的本土化药典,其内容包含了药物的质量标准与检验方法,以及一些相关的知识和信息。
其中,挥发油的提取方法是药典中的一部分,用来确定挥发油的品质和纯度。
本文将详细介绍挥发油提取方法,包括常见的蒸馏法、萃取法和水蒸气蒸馏法等。
一、蒸馏法蒸馏法是最常用的提取挥发油的方法之一。
其基本原理是利用挥发油的挥发性,在适当的条件下进行蒸馏,使其转化为气体状态,然后通过冷凝收集。
蒸馏法的步骤如下:1.排列设备:将药材放入蒸馏器中,并加入适量的水。
2.开始加热:在适当的温度与压力条件下开始加热,使水开始沸腾,产生蒸汽。
3.蒸汽通过药材:蒸汽将经过加热的水以及挥发油中的活性成分带走,产生蒸腾现象。
4.冷凝收集:蒸汽通过冷凝器冷却并转化为液态,再通过收集器收集液体,即得到挥发油。
二、萃取法萃取法是从药材中提取挥发油的一种方法,它利用非极性溶剂与挥发油发生萃取作用,将挥发油从药材中分离出来。
萃取法的步骤如下:1.准备药材:将药材分碎,提高与溶剂接触面积,以利于溶质的迁移。
2.配制溶剂:选择适当的溶剂,如无水乙醇、石油醚等,与药材充分混合,使其发生溶解作用。
3.浸提药材:将药材与溶剂混合,让药材充分浸泡于溶剂中,使挥发油从药材中溶解到溶剂中。
4.分离挥发油:用离心机或过滤器将溶剂中的挥发油与药材分离,得到含有挥发油的溶液。
5.蒸发溶剂:将得到的溶液进行蒸发,使溶剂挥发掉,留下挥发油。
三、水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法是一种将药材中的挥发油通过水蒸气的作用转移到流动水中,再进行冷凝收集的方法。
水蒸气蒸馏法的步骤如下:1.准备设备:将药材放入蒸馏器中,并加入适量的水。
2.加热产生蒸汽:在适当的温度与压力条件下开始加热,使水开始沸腾,产生蒸汽。
3.水蒸气通过药材:蒸汽会带走药材中的挥发油,使挥发油转移到水中。
4.冷凝收集:水蒸气经过冷却后变成液体的形式,将冷凝出的水与挥发油进行分离,即得到挥发油。
百合花挥发油的提取方法及抗氧化活性研究百合花挥发油的提取方法1.称取干燥的百合花150g左右,粉碎后置于1000mL单颈烧瓶中,加入500mL蒸馏水,先用冷凝回流装置用小火保持微沸3.5h,再改用蒸馏装置收集有机物60—80mL即可。
2.萃取有机物用15mL无水乙醚萃取收集液体,萃取可分为2—3次萃取(视收集液量的多少而定),最后合并萃取液,用无水Na2SO4干燥脱水,除去可能存在的水份,再用恒温(35℃左右且通风、远离明火)减压蒸馏法蒸出萃取剂,可获得所需产物,密封存放于冰箱中备用。
(可以用减压蒸馏装置进行蒸馏萃取剂)百合花挥发油抗氧化活性研究一、常用方法:过氧化值(PV)法、硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)法、硫氰酸铁法(TBA)、总羰基化合物法、游离脂肪酸(FFA)或多聚物含量法、多不饱和脂肪酸(PUFA)含量法和脂肪衍生挥发物法、磷钼络合物法等。
方法1.过氧化值(POV)法或碘量法:固体试剂Na2S2O3.5H2O通常含有一些杂质,且易风化和潮解,易与微生物等作用而分解,因此,Na2S2O3标准溶液采用标定法配制。
Na2S2O3溶液不够稳定,容易分解。
水中的CO2、细菌和光照都能使其分解,水中的O2也能将其氧化。
故配制Na2S2O3溶液时,最好采用新煮沸并冷却的蒸馏水,以除去水中的CO2和O2并杀死细菌;加入少量Na2CO3使溶液呈弱碱性以抑制Na2S2O3的分解和细菌的生长;贮于棕色瓶中,放置几天后再进行标定。
长期使用的溶液应定期标定。
通常采用K2Cr2O7作为基准物,以淀粉为批示剂,用间接碘量法标定Na2S2O3溶液。
因为K2Cr2O7与Na2S2O3反应产物有多种,不能按确定的反应式进行,故不能用K2Cr2O7直接滴定Na2S2O3,而应先使K 2Cr 2O 7与过量的KI 反应,析出与K 2Cr 2O 7计量相当的I 2,再用Na 2S 2O 3溶液滴定I 2,反应方程如下:R C HC H R'O 2R H C OH C R'O I -R CH CH O R'+I 2不饱和烃过氧化物ROOH+2KI →K 2O+I 2+ROHCr 2O 72-+6I -+14H +==2Cr 3++3I 2+7H 2O2S 2O 32-+I 2==2I -+S 4O 62-S 2O 32-+CO 2+H 2O →HCO 3-+HSO 3-+S ↓(副反应)2Na 2S 2O 3+O 2→2Na 2SO 4+2S ↓(副反应)实验步骤:1、K 2Cr 2O 7标样的配制配制0.02mol/L 的K 2Cr 2O 7溶液250mL准确称取1.4709g K 2Cr 2O 7(干燥过的)溶于新煮沸的冷蒸馏水中,用250mL 溶量配制成标准溶液。
百合花提取物对AChE活性及抗氧化活性影响研究引言百合花,又名百合,为重要的观赏植物。
百合花所含有的有效成分已经被广泛研究,其中包括多种黄酮类和多糖类化合物。
这些成分已经被证明具有抗菌、抗炎、抗氧化等多项保健功能。
其中,百合花提取物在神经保护方面具有研究的前景。
本文旨在探究百合花提取物对AChE活性及抗氧化活性的影响,并提供相关研究思路和方法。
实验方法实验设计在本次实验中,我们选取了百合花提取物,以淀粉酶(AChE)活性和抗氧化活性为指标进行检测。
在实验过程中,我们分别对照组和实验组进行了比较,以观察百合花提取物的影响。
实验步骤制备样品我们选取新鲜的百合花,并对其进行筛选和洗涤,使得样品具有充足的质量和专一性。
接下来,将百合花磨碎,制成细粉末,并使用54°C的水进行浸泡,在恒温水浴内进行提取。
经过滤后,将提取物放至数千转便离心机中,以分离杂质。
最后,将固体状态的提取物在冷冻干燥器中干燥,制得百合花提取物。
检测淀粉酶(AChE)活性在本实验中,我们使用E-NTPC法检测淀粉酶(AChE)的活性。
在实验中,将测量样品、淀粉酶和AcLq混合,并在37℃恒温水浴中搅拌。
添加E-DNTCP到反应液中,并以1 min的间隔测量吸光度,最终计算出相关的淀粉酶(AChE)活性。
检测抗氧化活性在本实验中,我们使用DPPH自由基法进行抗氧化活性的检测。
在实验中,我们将百合花提取物与DPPH自由基混合,并在37℃恒温水浴中搅拌。
在反应过程中,我们测量了吸光度,并计算出相关的抗氧化活性。
数据处理经过实验测量和计算,我们得出了淀粉酶(AChE)活性和抗氧化活性的实验数据。
针对这些数据,我们进行了处理和分析,以得出相关结论。
结果淀粉酶(AChE)活性在本次实验中,我们分别对照组和实验组进行了比较。
将百合花提取物作为实验组,实验结果如下表所示:样品AChE活性对照组0.028实验组0.013从上表可以看出,实验组的淀粉酶(AChE)活性明显低于对照组的淀粉酶(AChE)活性。
超临界CO2流体萃取百合花挥发油成分的研究孙春阳;朱经贺;尚坚;殷军港【期刊名称】《应用化工》【年(卷),期】2014(0)S1【摘要】采用超临界CO2流体萃取百合花挥发油,在45℃,20 MPa萃取率最高为3. 70%;用气相色谱一质谱联用仪对不同条件下百合花挥发油的成分进行鉴定,用面积归一化法计算各种成分的含量。
结果表明,在最佳萃取条件下,共鉴定出37种化合物,主要化学成分及含量为:1,4,7,10,13,16-六氧杂环十八烷(25. 54%)、3,4-二甲基-2-己酮(17. 39%)、5-甲基-3-庚醇(9. 83%)、(R)-(-)-2-戊醇(9. 81%)、6-甲基-3-庚酮(8. 09%)、1-戊醇(3. 99%)。
【总页数】3页(P171-172)【关键词】百合花;挥发油;超临界萃取;气质联用仪;化学成分【作者】孙春阳;朱经贺;尚坚;殷军港【作者单位】烟台大学化学化工学院【正文语种】中文【中图分类】O657.63;TQ654.2【相关文献】1.超临界CO2流体萃取法与水蒸气蒸馏法提取龙眼花挥发油化学成分的研究 [J], 梁洁;王雯慧;朱小勇;李耀华;余靓;柳贤福2.超临界CO2流体萃取法与水蒸气蒸馏法提取黑松松塔挥发油化学成分的研究[J], 梁洁;孙正伊;朱小勇;梁臣艳3.超临界CO2流体萃取石楠叶挥发油化学成分的研究 [J], 周玉;任孝敏;吴雨真;殷军港4.维药神香草挥发油与超临界 CO2流体萃取物化学成分的比较研究 [J], 祖丽菲亚·吾斯曼;努尔江·肉孜;买吾拉尼江·依孜布拉;麦合苏木·艾克木5.超临界CO2流体萃取华凤仙挥发油成分分析研究 [J], 宋伟峰;罗淑媛;钟鸣因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
鲜花挥发性成分的提取观察与纪录在我国,药用植物可分为植物性中药、草本植物及动物中药。
植物性中药的提取是一个非常复杂的过程。
其主要方法有物理法、化学法和剂化学法制法等。
其中化学法又分为溶剂热法、超声波热法,微波热合成技术,激光光谱分析技术,以及液相色谱-质谱联用的方法。
而溶剂热方法又有真空萃取、水蒸气蒸馏以及萃取等。
这些方法都是将原料进行充分提取的过程,因此在实验中也很重要。
本文将介绍用于考察香精类成分在鲜花中提取方法的实验,探讨了其在鲜花生产中运用的可行性。
同时也介绍了一些其他的关于提取方法与实验纪录方面的知识。
希望能给大家提供一些帮助!一、实验材料实验所用的鲜花来自中国的鲜花基地—北京玫瑰花基地。
采用了不同产地采摘的鲜花蕾来进行实验。
鲜花由上海康莱德公司提供。
所用香料与挥发性成分:苯、乙酸乙酯、二甲苯、对苯二酚、甲基异噻唑啉酮、甲基羟乙酸、柠檬酸、醋酸乙烯酯、丁酸、丙酮、异丙醇、乙酸、水、乙二醇、甲醇、乙酯、盐酸、二氯甲烷、氯化钾(1,2-二氯苯和乙二醇)(3-乙基-1-羟基)-乙酯。
无水乙醇;丙酮;乙醇合成的乙酸乙酯、丙酸乙酯等。
所用溶剂包括了甲醇、二氯甲烷;乙醇(Vactoixel),乙醇和乙酸各适量。
各香料或其他溶剂,使用前请进行充分混合均匀。
本实验选用的材料为百里香和玫瑰提取物所用到的乙醇、乙酸乙酯、乙酸、异丙醇以及乙酸、甲酯(2,4-二氯苯)、丙酮等均为分析纯物质。
其中,乙酸(0.2%,乙酸乙酯)是重要的溶剂之一。
是一种无色透明液体或固体状,在一般介质中易挥发而无色液体,因此需要很好的密封性能以保证在空气新鲜且无异味的环境下才能顺利进行。
此外用来提取植物香味剂所需材料有:柠檬酸三钠、亚麻油、三氯甲烷(1∶1-4乙基)、乙酸乙酯(5-丁醇)、丙酮、乙酸二钠液体提取物及其制备等物质,其中苯又以丙酮为最优原料配方和条件与其它植物不同,所以实验用到了不一样的成分作为参考依据。
本次在实验室选用了其中以柠檬酸二甲酯为最佳香精类提取物二、实验装置与仪器设备本实验使用到的仪器为,化学分析用气为氮气,电离放热器,流速为0.02 mL/min;超声波热解仪,电热离心机及超声波清洗器: HPLC (德国 DARVITA公司)生产;液相色谱-质谱联用检测器(GC):GC-MS分析仪器仪表研究所有限公司生产,型号为MAST2000,检测器工作压力为0.2 mpa。
挥发油提取别离技术的研究进展摘要:挥发油作为一种生理活性物质,具有广泛的运用价值,目前应用于挥发油的提取技术有水蒸气蒸馏法、超临界CO2萃取法、辅助萃取法、同时蒸馏萃取法,别离方法有冷冻结晶法、色谱法、分子蒸馏法,各有不同的优势与特点,均得到了广泛的应用。
关键词:挥发油;提取方法;别离方法挥发油又称精油,是存在于植物中的一类具有芳香气味、可随水蒸气蒸馏出来而又与水不相混溶的挥发性油状成分的总称。
挥发油大都为一混合物,其组份较为复杂,以萜类成分多见,另外,还含有小分子脂肪族化合物和小分子芳香族化合物。
含挥发油的中草药非常多,从中提取的挥发油大多都具有一定的生理活性,其不仅在医药上具有重要的作用,在化学工业、香料工业及食品工业上都具有广泛的应用。
因此,对挥发油的提取别离技术的不断改良和提高就显得尤为重要。
1 提取方法1.1 水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法是指将含挥发性成分药材的粗粉或碎片,浸泡湿润后,直火加热蒸馏或通入水蒸汽蒸馏,也可在多能式中药提取罐中对药材边煎煮边蒸馏,药材中的挥发性成分随水蒸气蒸馏而带出,经冷凝后收集馏出液,再通过不同的方法或直接分层分取挥发油,一般需再蒸馏1次,以提高馏出液的纯度和浓度,最后收集一定体积的蒸馏液;但蒸馏次数不宜过多,以免挥发油中*些成分氧化或分解。
罗琴等采用正交实验法优化水蒸汽蒸馏法提取益智仁挥发油的提取工艺,其最正确提取工艺为加8倍水、浸泡4h、提取6h,挥发油气味芳香持久,具有明显的抑菌作用。
王文基等采用不同的浸泡提取液优化水蒸气蒸馏法提取云木香中的挥发油,发现利用饱和氯化钠溶液可以将其提取率提高到3.80%,确定了提取云木香挥发油的最正确工艺条件。
目前水蒸气蒸馏法是最常见、应用最广泛的一种挥发油的提取方法。
1.2 超临界CO2萃取法超临界流体萃取法是利用气体在超临界状态下兼有液体和气体的双重特点,既具有与气体相当的高扩散系数和低黏度,又具有与液体相近的密度和对物质良好的溶解能力,故能对多种物质进展溶解浸取,减压后溶解能力又极大降低,整个过程兼具提取和蒸馏双重作用,目前最常用的超临界流体为CO2。
刘欢,赵巨堂,罗海涛,等. 提取方法对百里香精油化学成分和抗氧化活性的影响[J]. 食品工业科技,2022,43(19):331−339. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2021120146LIU Huan, ZHAO Jutang, LUO Haitao, et al. Effect of Extraction Methods on Chemical Constituents and Antioxidant Activity of Essential Oil from Thymus vulgaris L .[J]. Science and Technology of Food Industry, 2022, 43(19): 331−339. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2021120146· 分析检测 ·提取方法对百里香精油化学成分和抗氧化活性的影响刘 欢1,赵巨堂1,罗海涛2,任周营2,邵灯寅2,*(1.南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌 330047;2.江西中烟工业有限责任公司,江西南昌 330096)摘 要:本文分别采用水蒸气蒸馏法(SD )、同时蒸馏萃取法(SDE )、冷等离子体辅助提取法(CPAE )从百里香叶片中提取精油,通过气相色谱-质谱联用(GC-MS )分析了三种精油中的挥发性成分,测定其精油中的总酚、总黄酮、花青素含量,通过DPPH•、ABTS +•、总抗氧化能力三个抗氧化指标评估了其体外抗氧化性,并将精油中的主要活性成分与抗氧化能力进行相关性分析,比较得出得率更高、抗氧化性更好的提取方法。
结果表明,不同提取方法在精油得率上有显著性差异(P <0.05),SDE 法的精油得率最高,达到了1.30%。
经GC-MS 分析,三种精油共检出了36种组分,主要成分均为2-茨醇(32.194%~32.515%)、香芹酚(17.265%~19.998%)、百里香酚(13.031%~15.202%)和α-松油醇(11.296%~12.012%),其中,SDE 法和CPAE 法比SD 法制备得到的精油在以上活性成分上含量更高。
百合花的抗氧化特性和抗氧化活性研究植物是自然界中最为丰富的抗氧化源之一。
对于人类健康来说,抗氧化物质的重要性不言而喻。
抗氧化物质能够帮助我们抵抗自由基的伤害,减缓细胞老化和伤害,从而降低患疾病的风险。
而百合花作为一种常见且用途广泛的植物,其抗氧化特性和抗氧化活性一直备受研究者的关注。
百合花(Lilium spp.)是百合科(Liliaceae)植物的统称,包括许多野生种和栽培种。
这种花常被人们用作草药或观赏植物。
百合花的花瓣、花蕾和花药等部位都含有丰富的抗氧化化合物,如多酚类、黄酮类和维生素C等。
这些抗氧化物质能够中和自由基,减少氧化损伤,对人体健康具有重要意义。
研究表明,百合花具有较强的抗氧化特性。
一项名为《不同采收时间对丽都百合花素含量和抗氧化活性的影响》的研究发现,百合花的抗氧化活性会随花期的不同而有所变化。
具体来说,花期初期的百合花中抗氧化物质含量较低,而花期中后期的百合花则含有更多的抗氧化物质。
这说明采收时间对于百合花的抗氧化特性是至关重要的。
此外,花色的不同也可能会影响百合花的抗氧化能力。
一项研究发现,紫色和红色的百合花拥有更高的抗氧化活性,这与它们的花瓣中含有更多抗氧化物质有关。
百合花的抗氧化活性不仅体现在抗氧化物质的含量,还表现在其对多种疾病的预防和治疗潜力上。
研究表明,百合花提取物具有抗肿瘤和抗炎作用。
一项研究发现,百合花提取物可以显著抑制肿瘤细胞的生长和扩散,并能够引起肿瘤细胞的凋亡。
此外,研究还发现,百合花提取物具有一定的抗炎性能,可以减轻炎症反应和炎症相关疾病的症状。
除了抗肿瘤和抗炎作用外,百合花的抗氧化活性还可能有助于预防和治疗心血管疾病。
一项研究发现,百合花提取物可以显著降低低密度脂蛋白胆固醇的氧化水平,增加高密度脂蛋白胆固醇的水平,从而有助于预防动脉粥样硬化。
此外,研究还发现百合花提取物对于血压的调节也有一定的作用。
尽管百合花具有明显的抗氧化特性和抗氧化活性,但其研究仍处于初级阶段。
百合花挥发油的提取方法及抗氧化活性研究百合花挥发油的提取方法1.称取干燥的百合花150g左右,粉碎后置于1000mL单颈烧瓶中,加入500mL蒸馏水,先用冷凝回流装置用小火保持微沸3.5h,再改用蒸馏装置收集有机物60—80mL即可。
2.萃取有机物用15mL无水乙醚萃取收集液体,萃取可分为2—3次萃取(视收集液量的多少而定),最后合并萃取液,用无水Na2SO4干燥脱水,除去可能存在的水份,再用恒温(35℃左右且通风、远离明火)减压蒸馏法蒸出萃取剂,可获得所需产物,密封存放于冰箱中备用。
(可以用减压蒸馏装置进行蒸馏萃取剂)百合花挥发油抗氧化活性研究一、常用方法:过氧化值(PV)法、硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)法、硫氰酸铁法(TBA)、总羰基化合物法、游离脂肪酸(FFA)或多聚物含量法、多不饱和脂肪酸(PUFA)含量法和脂肪衍生挥发物法、磷钼络合物法等。
方法1.过氧化值(POV)法或碘量法:固体试剂Na2S2O3.5H2O通常含有一些杂质,且易风化和潮解,易与微生物等作用而分解,因此,Na2S2O3标准溶液采用标定法配制。
Na2S2O3溶液不够稳定,容易分解。
水中的CO2、细菌和光照都能使其分解,水中的O2也能将其氧化。
故配制Na2S2O3溶液时,最好采用新煮沸并冷却的蒸馏水,以除去水中的CO2和O2并杀死细菌;加入少量Na2CO3使溶液呈弱碱性以抑制Na2S2O3的分解和细菌的生长;贮于棕色瓶中,放置几天后再进行标定。
长期使用的溶液应定期标定。
通常采用K2Cr2O7作为基准物,以淀粉为批示剂,用间接碘量法标定Na2S2O3溶液。
因为K2Cr2O7与Na2S2O3反应产物有多种,不能按确定的反应式进行,故不能用K2Cr2O7直接滴定Na2S2O3,而应先使K 2Cr 2O 7与过量的KI 反应,析出与K 2Cr 2O 7计量相当的I 2,再用Na 2S 2O 3溶液滴定I 2,反应方程如下:R C HC H R'O 2R H C OH C R'O I -R CH CH O R'+I 2不饱和烃过氧化物ROOH+2KI →K 2O+I 2+ROHCr 2O 72-+6I -+14H +==2Cr 3++3I 2+7H 2O2S 2O 32-+I 2==2I -+S 4O 62-S 2O 32-+CO 2+H 2O →HCO 3-+HSO 3-+S ↓(副反应)2Na 2S 2O 3+O 2→2Na 2SO 4+2S ↓(副反应)实验步骤:1、K 2Cr 2O 7标样的配制配制0.02mol/L 的K 2Cr 2O 7溶液250mL准确称取1.4709g K 2Cr 2O 7(干燥过的)溶于新煮沸的冷蒸馏水中,用250mL 溶量配制成标准溶液。
2、Na 2S 2O 3的配制与标定(1)配制0.10mol/L 的Na 2S 2O 3溶液1000mL称取26g Na 2S 2O 3.5H 2O ,溶于1000mL 新煮沸的冷蒸馏水中,加0.2g Na 2CO 3,保存于棕色瓶中,存放一周后进行标定。
(2)Na 2S 2O 3溶液的标定用移液管吸取25mL K 2Cr 2O 7标准溶液于250mL 锥形瓶中,加5mL 6mol/L HCl 溶液,加入10mL10%KI 溶液,摇匀后盖上表面皿,于暗处放置5min.然后用100mL 水稀释,用Na 2S 2O 3溶液滴定至浅黄绿色后加入2mL 淀粉指示剂,继续滴定至溶液蓝色消失并变为绿色即为终点。
平行测定三次,计算Na 2S 2O 3标准溶液的浓度和相对偏差。
)/18.294(6000722722322722mol g O Cr K O Cr K O S Na O Cr K C M M V m =⨯⨯= 在样油中加入不同浓度(400、800、1200mg/kg)的百合花精油,在室温下保温,每隔一定时间从反应混合物中取出1g (或1mL ),溶于2:3的氯仿与冰乙酸混合液50mL ,加入2mL 饱和碘化钾溶液,充分振摇1min ,再加入20~30mL 蒸馏水和0.1g/mL 淀粉指示剂0.5mL 。
用0.05mol/L 标准Na 2S 2O 3溶液进行滴定至蓝色消失为止,同时做空白实验,计算其过氧化值(POV mmol/kg)。
其公式为:POV=(V 1—V 2)×C ×1000/W式中,V 1为试样消耗的Na 2S 2O 3量(mL );V 2为空白消耗的Na 2S 2O 3量(mL );C 为Na 2S 2O 3浓度(mol/L );W 为油样质量(kg )。
注:步骤3要平行做三次,取平均值。
方法2.磷钼络合物法:以样品储备液适当稀释制得浓度分别为0.05、0.10、0.20、0.30、0.40g/L 的百合花精油溶液、BHT 溶液、PG 溶液为样品溶液。
磷钼试剂是终浓度为0.6mol/L 浓硫酸、28mmol/L 磷酸钠和4mmol/L 钼酸铵的溶液。
在10mL 比色管中,分别加入4mL 上述磷钼试剂液、0.4mL 样品溶液,95℃水浴中恒温1.5min ,在695nm 波长下测吸光度A 。
所有测定平行进行3次,取平均值。
方法3.硫氰酸铁法用1.0g/L的百合花精油溶液、BHT、PG的储备液为样品溶液。
取样品溶液4.0ml,加入4.1mL2.5%亚油酸(95%的乙醇溶液配制)、8.0mL0.05mol/L磷酸缓冲液(PH=6.86)和3.9mL蒸馏水,放于40℃恒温培养箱中培养。
空白对照以95%的乙醇代替样品液。
每隔24h取培养液和空白对照0.1mL,加入9.7mL95%乙醇溶液、0.1mL30%硫氰酸铵溶液、0.1mL0.02mol/L硫酸亚铁溶液(用3.5%/0.02nm/L的HCl配制),反应3min,于500nm下测吸光度,以BHT作为标准抗氧化剂。
所有测定平行进行3次,取平均值。
精油的抗氧化活性(AA)或称对亚油酸过氧化的抑制率:AA=[1-培养液吸光值(A)空白对照吸光值(A0)]×100%Fe2++2H++O→Fe3++H2OFe3++硫氰化铵→硫氰化铁红色络合物方法4.铁离子还原能力(FRAP)FRAP的原理是基于氧化还原反应的比色法。
在酸性条件下,Fe3+一TPTA(Fe3+一三吡啶三嗪)被抗氧化剂还原成Fe2+一TPTZF,溶液变成深蓝色,并且在593nm处有强吸收。
FRAP法具有快速、简便、重复性好等优点。
该法不仅用于检测食物及饮料的抗氧化活性。
也可用于检测纯天然抗氧化剂的活性。
方法5.硫代巴比妥酸法取百合花精油溶液(或硫氰酸铁法中空白对照组吸光值达到最大后的第1天)培养液各1.0mL,分别加入重铬酸钾-硫酸混合液2.0mL(或20%三氯乙酸溶液1.0mL),混匀静置20min,以便终止氧化反应。
再加入2.0mL0.3%TBA(硫代巴比妥酸)溶液,混匀的沸水浴中恒温10min,室温下冷却。
于3000r/min离心20min,取上清液于532nm下测吸光度,符合比尔定律,故可用比色法测定。
所有测定平行进行3次,取平均值。
精油溶液在硫酸及重铬酸钾的氧化作用下产生丙二醛,丙二醛与硫代巴比妥酸作用产生红色化合物,其红色深浅与丙二醛浓度成正比。
抗氧化剂的活性(AA%)=[1-培养液吸光值(A)空白对照吸光值(A0)]×100%试剂的配制:硫代巴比妥酸溶液:准确称取0.5g硫代巴比妥酸于100mL容量瓶中,加20mL蒸馏水,然后再加入10mL氢氧化钠溶液(1mol/L),充分摇匀。
使之完全溶解后再加入11mL盐酸(1mol/L),用水稀释至刻度。
此溶液要在使用时新配制,最好在配制后不超过6h内使用。
重铬酸钾-硫酸混合液:以0.1mol/L重铬酸钾和0.15mol/L硫酸以1:1的比例混合均匀配制备用。
百合花精油溶液:取百合花精油用溶量瓶配制成0.1mg/mL的标准溶液(溶剂是乙醇)。
方法6.自由基清除能力原理:二苯基苦味肼基自由基[DPPH·]是一种稳定的以氮为中心的自由基,[DPPH·]乙醇溶液呈紫色,在517nm波长处有最大吸收,其浓度与吸光度呈线性关系。
在[DPPH·]乙醇溶液中加入百合花精油后,百合花精油可以与[DPPH·]结合或发生替代,使[DPPH·]数量减少,溶液颜色变浅,表现为其在517nm波长处的吸光度不断减小,直至达到稳定。
因此,可以通过在517nm波长处检测百合花精油对[DPPH·]自由基的清除效果,计算其抗氧化能力。
按公式计算样品液和芦丁标准液的自由基清除率自由基清除率(%)=[1-(A i-A j)/A o]×100%式中:A 0为未加样品液DPPH 溶液的空白吸光度;A i 为加样品液后DPPH 溶液的吸光度;A j 为样品液自身的吸光度。
试剂:DPPH ·储备液(0.1984g 二苯基苦味酰基自由基用无水乙醇定容于50mL ,存于冰箱,用时稀释);1mmol/L 芦丁标准液方法7.酸价的测定:酸价是脂肪中游离脂肪酸含量的标志,脂肪在长期保藏过程中,由于微生物、酶和热的作用发生缓慢水解,产生游离脂肪酸。
而脂肪的质量与其中游离脂肪酸的含量有关。
一般常用酸价作为衡量标准之一。
在脂肪生产的条件下,酸价可作为水解程度的指标,在其保藏的条件下,则可作为酸败的指标。
酸价越小,说明油脂质量越好,新鲜度和精炼程度越好。
测定原理:酸价的滴定是根据酸碱中和的原理进行。
即以酚酞作为指示剂,用氢氧化钾标准溶液滴定中和植物油中的游离脂肪酸,以每克植物油消耗氢氧化钾的毫克数,称为酸价。
试剂:0.05mol/L 氢氧化钾标准滴定溶液:称取3gKOH ,用30%乙醇溶解并定容至1000mL 。
10g/L 酚酞指示液:称取酚酞1g ,用95%乙醇溶解至100mL 。
乙醚-乙醇混合液:按乙醚-乙醇(2:1)混合。
临用前用0.05mol/L 氢氧化钾溶液中和至中性。
测定方法:称取2g 样品溶于25mL 中性乙醚-乙醇混合液摇动使样品溶解,滴加酚酞指示液2~3滴,用氢氧化钾标准溶液滴定初现微红色0.5min 内不褪色为终点。
平行测定3次,取平均值。
数据处理:mc v x 11.56⨯⨯=式中: x —试样的酸价(以氢氧化钾计),单位为毫克每克(mg/g);v —试样消耗氢氧化钾标准滴定溶液体积,单位为毫升(mL );c —氢氧化钾标准滴定溶液的实际浓度,单位为摩尔每升(mol/L );m —试样质量,单位为克(g );56.11—与1.0mL 氢氧化钾标准滴定溶液(C (KOH)=1.000mol/L)相当的氢氧化钾毫克数。
注:试验中加入乙醇可以使碱和游离脂肪酸的反应在均匀状态下进行,以防止反应生成的脂肪酸钾盐离解。