4T1小鼠乳腺癌细胞

CT26.WT小鼠结肠癌细胞形态: 成纤维细胞培养基和添加剂: RPMI-1640(GIBCO,货号添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%，1%的双抗（青霉素，链霉素）。

气相：空气，95%；二氧化碳，5%。

温度：37摄度。

4T1小鼠乳腺癌细胞形态：上皮细胞培养基和添加剂：RPMI-1640(GIBCO,货号添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%，1%的双抗。

（青霉素，链霉素）气相：空气，95%；二氧化碳，(三)坏补体(1、2、3、(四)／mL。

(五)(六)传代（或，晃动菌培养瓶内，加入完全培养基后继续培养或实验。

悬浮细胞:一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入完全培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入完全培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。

(七)冻存将贴壁细胞消化后离心收集，悬浮细胞直接离心收集，以完全培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml。

加入10%的DMSO。

以每管1～2ml分装至冻存管中。

用绝热材料包裹置-70摄氏度冰箱冷冻过夜。

次日保存到液氮中。

(八)注意事项玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上;无菌工作台先清洗后用75%酒精擦拭干净，紫外线照射40分钟以上;各种培养板照射3小时以上;培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内，用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取完全培养基5-10ml置培养箱内培养2-3天，肉眼见无浑浊或沉淀等异物。

分装后置4度保存;消化液(pH7.8)或其它加入液，应用高压蒸汽灭菌或一次性无菌滤器过滤除菌，分装成支置-20度保存;培养箱应先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外线的应照射1小时以上，如有高温灭菌的应按程序来菌)。

605欢迎关注本刊公众号·论　著·《中国癌症杂志》2021年第31卷第7期CHINA ONCOLOGY 2021 Vol.31 No.7基金资助：国家自然科学基金面上项目（81772833）。

通信作者：黄晓飞 E-mail: hxiaofei@萝卜硫素对小鼠乳腺癌4T1细胞上皮-间质 转化、增殖和迁移的影响研究谢金芳1,2，曹春雨1,2，任　雪1,2，田家俊1,2，吕亚丰1,2，黄晓飞1,21.三峡大学医学院生物化学与分子生物学系，湖北 宜昌 443002；2.三峡大学肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室，湖北 宜昌 443002［摘要］ 背景与目的：组蛋白去乙酰化酶5（histone deacetylase 5，HDAC5）在乳腺癌组织中异常高表达，其与赖氨酸特异性去甲基化酶1（lysine specific demethylase ，LSD1）协同促进乳腺癌细胞增殖和迁移。

通过萝卜硫素（sulforaphane ，SFN ）下调HDAC5表达，观察其对小鼠乳腺癌4T1细胞上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition ，EMT ）、增殖和迁移的影响。

方法：采用细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8，CCK-8）法分析SFN 对4T1细胞增殖的影响。

采用乳酸脱氢酶释放实验检测SFN 的细胞毒性。

采用pcDNA3.1(+)-FLAG-HDAC5质粒转染4T1细胞，通过G418筛选获得单个细胞克隆，再以蛋白质印迹法（Western blot ）鉴定HDAC5蛋白稳定高表达的单克隆细胞系。

采用划痕实验和transwell 法分析过表达HDAC5以及SFN 处理对4T1细胞迁移和侵袭的影响。

采用Western blot 检测SFN 处理对4T1细胞EMT 标志物上皮钙黏着蛋白（E-cadherin ）、神经钙黏着蛋白（N-cadherin ）、波形蛋白（vimentin ）和基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）表达的影响。

山东农业大学学报(自然科学版),2021,52(2):247-251VOL.52NO.22021 Journal of Shandong Agricultural University(Ntural Science Edition)doi:10.3969/j.issn.1000-2324.2021.02.015金纳米棒对小鼠乳腺癌细胞光热/光动力协同治疗的研究胡雅晴,武云云,李兵,李奚*长春工业大学化学与生命科学学院,吉林长春130012摘要:为研究金纳米棒（Au NRs）对小鼠乳腺癌细胞（4T1）光热/光动力协同治疗的影响。

首先，通过调节硝酸银溶液（AgNO3）的加入量，制备6种不同长径比、不同表面电荷的Au NRs1~6。

然后，通过光热升温实验和细胞内/外ROS生成实验对Au NRs的光热和光动力性质评估，并对光诱导细胞损伤分子机制探究。

结果表明，在NIR激光的照射下，Au NRs具有相似的温度升高水平，并显示出良好的光热性能。

关于光动力学性质，细胞毒性评估表明，Au NRs在不同表面电荷的影响下对4T1细胞具有不同的杀伤效果。

表面电荷的强度使Au NRs具有不同程度的细胞内在化和ROS生成能力，从而引起细胞损伤。

因此，Au NRs对癌细胞具有光热/光动力协同治疗的作用，在癌细胞的光治疗方面，显示出巨大的潜力。

关键词:金纳米棒;乳腺癌;协同治疗中图法分类号:Q599文献标识码:A文章编号:1000-2324(2021)02-0247-05Study on the Photothermal/Photodynamic Synergistic Therapy for Breast Cancer Cells from Mice by Gold NanorodsHU Ya-qing,WU Yun-yun,LI Bing,LI Xi*School of Chemistry and Life Science/Changchun University of Technology,Changchun130012,ChinaAbstract:To study the effect of gold nanorods(Au NRs)on the photothermal/photodynamic synergistic treatment of mouse breast cancer(4T1)cells.First,six Au NRs with different aspect ratios and surface charges were prepared by adjusting the amount of silver nitrate solution(AgNO3).Secondly,the photothermal and photodynamic properties of Au NRs were evaluated through the photothermal heating experiment and the intracellular/extracellular ROS generation experiment,and the molecular mechanism of light-induced cell damage was explored.The results show that under the irradiation of NIR laser, Au NRs have a similar temperature rise level and show good photothermal performance.Regarding the photodynamic properties,the cytotoxicity evaluations show that Au NRs have different killing effects on4T1cells under the influence of different surface charges.The strength of the surface charge makes Au NRs have varying degrees of cell internalization and ROS generation capabilities,which can cause cells prehensive analysis shows that Au NRs has a photothermal/photodynamic synergistic therapy effect on cancer cells,and shows great potential in the phototherapy of cancer cells.Keywords:Gold nanorods;breast cancer;synergistic therapy癌症已成为世界面临的最严重的公共卫生问题之一。

抗癌防移片对4T1小鼠乳腺癌影响的研究侯超;胡志希;曾柏荣;李琳;陈龙娇【摘要】目的观察抗癌防移片对4T1小鼠乳腺癌的影响.方法建立4T1乳腺癌小鼠模型,随机分为空白对照组、模型组、环磷酰胺组和抗癌防移片组,分别给予药物或生理盐水,动态观察给药期间小鼠生活状况.给药4周后处死小鼠,测定小鼠体质量增加百分数,测量剥离瘤体积,计算瘤体积抑制率以及计数肺转移瘤灶个数.结果与模型组比较,抗癌防移片组小鼠肿瘤生长缓慢,肺转移瘤灶数量明显减少(P＜0.05);与环磷酰胺组比较,抗癌防移片组药物毒副作用小(P＜0.05),生活质量高,但其抑瘤防转移作用不及环磷酰胺(P＜0.05).结论抗癌防移片能抑制4T1小鼠乳腺癌生长与转移,改善小鼠生存质量.【期刊名称】《湖南中医药大学学报》【年(卷),期】2014(034)004【总页数】4页(P6-9)【关键词】抗癌防移片;4T1小鼠乳腺癌;肿瘤体积;瘤体积抑制率;肺转移瘤灶数【作者】侯超;胡志希;曾柏荣;李琳;陈龙娇【作者单位】湖南中医药大学,湖南长沙410208;湖南中医药大学,湖南长沙410208;湖南中医药大学第一附属医院,湖南长沙410007;湖南中医药大学,湖南长沙410208;广州中医药大学,广东广州510000【正文语种】中文【中图分类】R285.5;R737.9乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，复发与转移是导致女性患者死亡的主要原因。

研究证实，25%以上的乳腺癌一开始即发生血行远处转移，而通过淋巴道转移途径的机会则更多[1]。

目前临床上防治乳腺癌复发与转移，主要采用化疗与内分泌治疗，但由于药物的毒副反应和耐药性，严重影响了治疗的效果。

而抗肿瘤中药由于作用的多靶向性、毒副作用低且价廉，越来越受到患者的欢迎。

抗癌防移片系曾柏荣教授有效验方，以扶正祛邪为基本治则，调补肝脾、行气活血、祛痰化湿为治疗大法，用于临床防治乳腺癌术后复发与转移，收效明显[2]。

为了证实该复方制剂的疗效并为其临床应用提供实验依据，我们观察了抗癌防移片对BALB/c小鼠4T1乳腺癌移植瘤模型的抑瘤防移效果及其毒副作用，现将方法与结果报道如下。

4t1细胞
4T1（4T1.2）细胞是一种一直被广泛研究的小鼠乳腺癌细胞株。

这种细胞株最
初来自Balb/c小鼠的乳腺实体瘤。

它具有高度的异质性不仅在细胞形态学上，在
生长速率、转移特性和抗药性等方面也表现出明显的异质性。

这使得4T1细胞成
为研究乳腺癌的良好模型。

1. 细胞特性
4T1细胞具有多种特性，包括但不限于： - 高度异质性 - 能够在小鼠体内形成
高度侵袭性的实体瘤 - 显示高转移性，可在体内形成肺转移 - 耐受药物治疗 - 能够
在体内复制多个人乳腺癌的特点，例如HER2过表达和雌激素受体阴性等
2. 应用领域
4T1细胞在乳腺癌研究领域有着广泛的应用。

研究人员通常利用这种模型来研
究乳腺癌的生长、转移机制，以及筛选抗癌药物等。

由于其高度转移性的特点，
4T1细胞也被广泛用于研究抗转移治疗方法。

此外，4T1细胞还被用于评估潜在
的免疫治疗策略，例如免疫检查点抑制剂的疗效评估。

3. 研究现状
目前，许多研究团队正在利用4T1细胞模型开展多项研究。

他们希望通过深入了解4T1细胞的特性和行为，探索乳腺癌生长和转移的机制，以及寻找更有效的
治疗方法。

一些最新的研究还试图通过基因编辑技术修改4T1细胞，以便更好地
模拟人类乳腺癌的特点，并推动相关治疗方法的发展。

4. 结语
总的来说，4T1细胞是一个重要的乳腺癌研究模型，具有高度转移性和异质性。

通过对这种细胞的研究，科学家们可以更好地理解乳腺癌的发展机制，并寻找更有效的治疗方法，为乳腺癌患者带来希望。

Decorin提升小鼠脾脏细胞对乳腺癌细胞系4T1的免疫响应性赵慧强; 刘超; 胡泽斌; 戴诗云; 王华【期刊名称】《《中国医药生物技术》》【年(卷),期】2019(014)006【总页数】6页(P481-486)【关键词】核心蛋白聚糖; 乳腺肿瘤; 基因;MHCII类; 脾细胞; 4T1细胞系【作者】赵慧强; 刘超; 胡泽斌; 戴诗云; 王华【作者单位】100850 北京军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所; 100048北京中国人民解放军总医院第六医学中心干部保健科; 264003 山东滨州医学院临床医学院; 100050 北京中国食品药品检定研究院体外诊断试剂所【正文语种】中文目的评价高表达核心蛋白聚糖（Decorin）的小鼠乳腺癌细胞系 4T1 对正常小鼠脾细胞的免疫激活效应，明确 Decorin 对抗肿瘤免疫的调节作用。

方法采用携带Decorin 基因的复制缺陷型重组腺病毒 Ad.DCN 感染小鼠乳腺癌细胞系 4T1。

与小鼠脾细胞共培养 3 d 后，通过流式细胞术检测小鼠脾细胞的CD4+T 细胞、CD8+T 细胞、T 记忆细胞（Tm）和T 调节细胞（Treg）的百分比；利用实时定量 PCR（qPCR）技术检测 Th1 类细胞因子IL-2、IL-12、TNF-α和IFN-γ 的表达，Th2 类细胞因子IL-4、IL-6、IL-10 和转化生长因子β（TGF-β）的表达，以及与杀伤相关基因穿孔素与颗粒酶 B 的表达。

结果与小鼠乳腺癌细胞系 4T1 共培养后，小鼠脾细胞 CD4+T 淋巴细胞、CD8+T 淋巴细胞、Treg 细胞比例无明显改变，但Tm 细胞比例显著升高；同时，细胞因子、穿孔素和颗粒酶 B 表达下调。

但是，病毒感染的 4T1 细胞，特别是Ad.DCN 感染的 4T1 细胞可显著抑制 Treg 细胞，并部分逆转细胞因子表达的下调。

结论 Decorin 高表达可增强正常小鼠脾脏细胞对乳腺癌细胞系 4T1 的免疫响应性，从而激活抗肿瘤免疫反应。

4T1炎性乳腺癌细胞接种联合皮质酮注射诱导乳腺癌并发抑郁症小鼠模型的研究杨蕙;孟盼;杨琴;韩远山;凌佳;杜青;赵洪庆;王宇红【摘要】目的研究4T1炎性乳腺癌细胞接种联合皮质酮注射所致BABL/c小鼠病理行为和核心标志物的变化.方法采用4T1炎性乳腺癌细胞接种的方法建立乳腺癌小鼠模型,并随机分为2组,乳腺癌组和乳腺癌皮质酮组;另将未接种乳腺癌细胞的小鼠也随机分为2组,正常对照组和抑郁症组.随后给予抑郁症组和乳腺癌皮质酮组21 d皮质酮注射(30 mg/kg).实验结束后,采用糖水消耗实验、旷场实验、新奇摄食实验观察各组小鼠的抑郁样行为.小鼠断头处死后,测量各组小鼠乳腺肿瘤瘤重和瘤体积,采用ELISA法检测小鼠肿瘤标志物肿瘤抗原CA153、糖类抗原CA125、癌胚抗原(CEA)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)的含量.结果乳腺癌皮质酮组小鼠瘤重和瘤体积明显增大,血浆CA153、CA125和CEA水平显著升高,糖水偏嗜度明显降低,对环境的好奇探索欲望减弱,体内5-HT、DA、NE含量显著降低.结论乳腺癌小鼠在接受慢性皮质酮注射后,可表现出明显的抑郁样行为、神经递质和乳腺癌标志物以及肿瘤瘤体变化,可为乳腺癌并发抑郁症动物实验提供模型参考.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2018(028)011【总页数】6页(P21-26)【关键词】乳腺癌并发抑郁症;肿瘤标志物;单胺神经递质;动物行为学;小鼠【作者】杨蕙;孟盼;杨琴;韩远山;凌佳;杜青;赵洪庆;王宇红【作者单位】湖南中医药大学第一附属医院中心实验室,长沙 410007;湖南中医药大学中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地,长沙 410208;湖南中医药大学中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地,长沙 410208;湖南中医药大学第一附属医院中心实验室,长沙 410007;湖南中医药大学中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地,长沙 410208;湖南省中医药研究院,长沙 410006;湖南中医药大学中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地,长沙 410208;湖南中医药大学中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地,长沙 410208【正文语种】中文【中图分类】R-33乳腺癌是世界范围内最常见的女性恶性肿瘤[1]，且比其他类型的癌症更加能影响患者的精神与情绪[2]。