人乳腺癌细胞;MCF7贴壁培养

人骨髓间充质干细胞促进乳腺癌细胞系MCF7上皮间质转化许峰;金晓霞;施民新【摘要】目的探讨在人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)与乳腺癌细胞系MCF-7共培养后,MCF-7细胞上皮间质转化(MET)能力是否受到影响,并检测共培养条件下上皮间质转化是否是通过旁分泌因素影响MCF-7细胞的增殖及迁移能力的.方法体外成功分离hBMSCs,利用Transwell小室共培养hBMSCs与乳腺癌细胞系MCF-7,光镜观察MCF-7细胞的形态结构,是否发生上皮间质转化的特征性改变.利用实时定量PCR、Western blot、免疫荧光检测上皮间质转化标志蛋白E-cadherin、vimentin、α-SMA及β-catenin的表达.收集共培养体系中的条件培养液,作用MCF-7细胞,Western blot鉴定MCF-7细胞上皮间质转化的分子标志物的水平;CCK8法检测MCF-7细胞的增殖活力;流式细胞计量术检测细胞增殖周期的变化;Transwell小室法检测MCF-7细胞侵袭及转移能力.结果与对照组相比,与hBMSCs共培养之后的MCF-7细胞表现出明显增强的上皮间质转化能力(P<0.05).培养体系中的条件培养液刺激MCF-7细胞,其上皮间质转化特征及增殖和迁移能力增强(P<0.01).结论人骨髓间充质干细胞可诱导乳腺癌细胞系发生上皮间质转化.骨髓间充质干细胞与乳腺癌细胞系可以通过旁分泌信号促进乳腺癌上皮间质转化,进一步增强其增殖及转移能力.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2018(038)009【总页数】7页(P1244-1250)【关键词】人骨髓间充质干细胞;乳腺癌;上皮间质转化;旁分泌机制【作者】许峰;金晓霞;施民新【作者单位】南通大学附属肿瘤医院南通市肿瘤医院胸外科,江苏南通226361;南通大学附属肿瘤医院南通市肿瘤医院病理科,江苏南通226361;南通大学附属肿瘤医院南通市肿瘤医院胸外科,江苏南通226361【正文语种】中文【中图分类】R394.2中国乳腺癌的发病率和致死率正逐年增加，是女性最常罹患的恶性肿瘤，癌细胞发生侵袭与转移影响是乳腺癌患者生存期的根本原因之一[1]。

乳腺癌细胞株整理（二）引言：乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，也是世界范围内死亡率最高的癌症之一。

研究乳腺癌细胞株对于深入了解乳腺癌的发生机制、预防和治疗具有重要意义。

在之前的文档《乳腺癌细胞株整理（一）》中，我们介绍了一部分常用的乳腺癌细胞株。

而本文将继续介绍一些其他有代表性的乳腺癌细胞株并对其特点进行概述。

正文：1. 非侵袭性乳腺癌细胞株：- MCF-7细胞株：MCF-7细胞株是一种常用的非侵袭性乳腺癌细胞系，其来源于人类乳腺癌的原发灶。

这种细胞株生长速度较慢，呈悬浮状态，对雌激素敏感，可用于乳腺癌治疗药物的筛选和雌激素受体相关研究。

- T47D细胞株：T47D细胞株也是一种常用的非侵袭性乳腺癌细胞系，它是从人类乳腺癌的转移灶中建立的。

这种细胞株对雌激素敏感，并且表达雌激素受体。

T47D细胞株可用于研究乳腺癌细胞的增殖、分化以及基因表达调控等。

2. 侵袭性乳腺癌细胞株：- MDA-MB-231细胞株：MDA-MB-231细胞株是一种高度侵袭性的乳腺癌细胞系，可模拟乳腺癌的转移和侵袭过程。

这种细胞株生长迅速，可以形成肿瘤，在体内可产生肺和骨转移。

MDA-MB-231细胞株广泛应用于研究乳腺癌的转移机制、肿瘤微环境以及疗效评估。

- BT-474细胞株：BT-474细胞株是一种来源于人类乳腺癌的转移灶中的细胞株。

这种细胞株表达人类表皮生长因子受体2（HER2）的过度表达。

BT-474细胞株对药物的敏感性较高，可用于研究HER2信号通路的调控及其在乳腺癌中的作用。

3. 耐药性乳腺癌细胞株：- MCF-7/ADR细胞株：MCF-7/ADR细胞株是已知的耐药性乳腺癌细胞株之一。

这种细胞株对化疗药物多药耐药性发生，可用于研究药物耐药机制以及开发新的治疗策略。

- MCF-7/TAM细胞株：MCF-7/TAM细胞株是一种对于抗雌激素药物铁曲红素（TAM）耐药的细胞系。

该细胞株经长期的体内暴露于TAM药物而产生耐药性，可用于研究抗雌激素治疗耐药机制。

《红花多糖抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖及对其转移能力的影响》一、引言乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一，其发生和发展与多种因素有关。

目前，对于乳腺癌的治疗主要依赖于手术切除、化疗和放疗等手段，但治疗效果并不理想，且易发生复发和转移。

因此，寻找有效的抗乳腺癌药物成为当前研究的热点。

红花多糖作为一种天然药物，具有多种生物活性，包括抗肿瘤、抗炎、抗氧化等作用。

本研究旨在探讨红花多糖对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及转移能力的影响，为红花多糖在乳腺癌治疗中的应用提供理论依据。

二、材料与方法1. 材料红花多糖购自某某生物科技有限公司；人乳腺癌细胞MCF-7购自某某细胞库；实验所用试剂和耗材均为进口或国产分析纯。

2. 方法（1）细胞培养：MCF-7细胞在含有10%胎牛血清的DMEM 培养基中培养，置于37℃、5%CO2的培养箱中。

（2）药物处理：将红花多糖以不同浓度梯度处理MCF-7细胞，分别设置对照组和实验组。

（3）细胞增殖检测：采用MTT法检测红花多糖对MCF-7细胞增殖的影响。

（4）细胞迁移和侵袭实验：通过划痕实验和Transwell小室实验检测红花多糖对MCF-7细胞迁移和侵袭能力的影响。

（5） Western blot检测：检测红花多糖处理后MCF-7细胞中相关蛋白的表达情况。

三、结果1. 红花多糖对MCF-7细胞增殖的抑制作用MTT法检测结果显示，随着红花多糖浓度的增加，MCF-7细胞的增殖率逐渐降低，表明红花多糖对MCF-7细胞的增殖具有抑制作用。

2. 红花多糖对MCF-7细胞迁移和侵袭能力的影响划痕实验和Transwell小室实验结果显示，红花多糖处理后，MCF-7细胞的迁移和侵袭能力明显降低，说明红花多糖对MCF-7细胞的转移能力具有抑制作用。

3. Western blot检测结果Western blot检测结果显示，红花多糖处理后，MCF-7细胞中与增殖和转移相关的蛋白表达水平发生变化，如MMP-2、MMP-9等表达降低，而p53等表达升高。

胰岛素通过Erk通路促进人乳腺癌细胞MCF—7增殖和迁移目的观察胰岛素对人乳腺癌细胞MCF-7中Erk信号通路的影响及其对MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移的影响。

方法分别采用0、50、100和200nM不同剂量的胰岛素处理MCF7细胞0、24、48和72h，采用Western blot方法检测MCF-7细胞中Erk信号通路的磷酸化活化情况，采用MTT方法检测MCF-7细胞的增殖情况。

通过伤口愈合实验和Boyden小室检测200nM胰岛素处理72h对MCF-7细胞侵袭和迁移能力的影响。

采用Erk信号通路抑制剂预处理MCF-7细胞，观察Erk信号通路在胰岛素促MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭能力中的作用。

结果同0nM胰岛素处理组相比，不同剂量的胰岛素均可显著上调Erk的磷酸化水平，加强MCF-7细胞的增殖能力（P＜0.05），且这种作用具有计量依赖性。

同对照组相比，200nM胰岛素处理72h后，MCF-7细胞侵袭和迁移能力均显著增强（f=188.000、95.640，P＜0.05）。

采用Erk信號通路阻断剂U0126阻断MCF-7细胞中的Erk信号通路后，胰岛素促MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭的能力显著降低（P＜0.05）。

结论胰岛素可通过激活MCF-7细胞中的Erk信号通路，增强肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

标签：胰岛素；乳腺癌；MCF-7；增殖；迁移[文献标识码]B胰岛素可与胰岛素样生长因子-1受体（insulin-like growth factor-1 receptor，IGF-1R）和胰岛素受体（insulin receptor，IR）及向下游传递活化信号，进而促进细胞的有丝分裂，胰岛素的这一作用促使研究者们猜想其与肿瘤的发生发展是密不可分的。

研究结果证实，高胰岛素血症、2型糖尿病以及肥胖等代谢相关性疾病可导致肿瘤的发病风险显著升高。

目前女性乳腺癌的发病率已成为女性恶性肿瘤中发病率最高的一种，而胰岛素作为一种生长因子，其在女性乳腺癌发病中的作用也得到相关文献的证实。

第1篇一、实验目的本研究旨在探究细胞转移机制，以期为癌症转移的预防和治疗提供理论依据。

通过建立细胞转移模型，观察细胞在不同环境下的迁移和侵袭能力，分析细胞转移的相关分子机制。

二、实验材料1. 细胞：人乳腺癌细胞系MCF-7、人结直肠癌细胞系HCT-116、人肺腺癌细胞系A549、人黑色素瘤细胞系SK-MEL-2。

2. 试剂：细胞培养试剂、细胞迁移实验试剂、细胞侵袭实验试剂、实时荧光定量PCR试剂、蛋白质提取试剂、Western blot试剂等。

3. 仪器：细胞培养箱、显微镜、细胞培养板、酶标仪、凝胶成像系统、Western blot成像系统等。

三、实验方法1. 细胞培养：将人乳腺癌细胞系MCF-7、人结直肠癌细胞系HCT-116、人肺腺癌细胞系A549、人黑色素瘤细胞系SK-MEL-2接种于细胞培养瓶中，置于细胞培养箱中培养。

2. 细胞迁移实验：采用Transwell小室进行细胞迁移实验。

将细胞悬液加入Transwell小室的上室，下室加入含有血清的培养基，培养一段时间后，用棉签刮除未迁移的细胞，固定、染色、观察细胞迁移情况。

3. 细胞侵袭实验：采用Transwell小室进行细胞侵袭实验。

将细胞悬液加入Transwell小室的上室，下室加入含有基质胶的培养基，培养一段时间后，用棉签刮除未侵袭的细胞，固定、染色、观察细胞侵袭情况。

4. 实时荧光定量PCR：提取细胞总RNA，反转录成cDNA，进行实时荧光定量PCR，检测相关基因的表达水平。

5. 蛋白质提取与Western blot：提取细胞总蛋白，进行SDS-PAGE电泳，转膜，用一抗和二抗进行Western blot，检测相关蛋白的表达水平。

四、实验结果1. 细胞迁移实验：结果显示，与正常细胞相比，癌细胞在迁移实验中的迁移距离明显增加，说明癌细胞具有较强的迁移能力。

2. 细胞侵袭实验：结果显示，与正常细胞相比，癌细胞在侵袭实验中的侵袭能力明显增强，说明癌细胞具有较强的侵袭能力。

mcf7分子分型
MCF7是一种乳腺癌细胞系，属于ER阳性乳腺癌。

MCF7细胞系是乳腺癌
细胞系中较为常见的一个，它是雌激素受体阳性（ER+）的细胞系，这意味着它对雌激素具有较高的亲和力和依赖性。

MCF7细胞系的分子分型有多种，常见的包括：
1. Luminal A型：这种类型的乳腺癌细胞通常表达高水平的ER和PR（孕
激素受体），但HER2基因扩增和蛋白表达较低。

这种类型的乳腺癌对激素治疗和内分泌治疗敏感，预后相对较好。

2. Luminal B型：这种类型的乳腺癌细胞也表达高水平的ER和PR，但HER2基因扩增和蛋白表达较高。

这种类型的乳腺癌对激素治疗和内分泌治疗有一定敏感性，但可能对化疗和靶向治疗更敏感。

3. HER2过表达型：这种类型的乳腺癌细胞HER2基因扩增和蛋白表达较高，ER和PR表达较低。

这种类型的乳腺癌对化疗、靶向治疗和曲妥珠单抗治疗敏感，但可能对激素治疗不敏感。

4. 三阴性乳腺癌：这种类型的乳腺癌细胞ER、PR和HER2基因表达均为阴性。

这种类型的乳腺癌对激素治疗、内分泌治疗和靶向治疗不敏感，通常需要采用化疗等治疗方案。

需要注意的是，MCF7细胞系的分子分型并不是绝对的，不同的实验条件和研究结果可能会有所不同。

因此，在实际的实验设计和研究中，需要根据具体情况进行分子分型分析和验证。

基础医学与临床Basic & Clinical MediciuvAp/i 2221VoX41 No 2221年 4月 第41卷第4期文章编号：l//16325(2/21 /4-0539-06研"论文低氧微环境促进人乳腺癌细胞系MCF-7的侵袭和增殖王海燕，黄明全，潘广锐，汪贵林，梁斌，权 毅**收稿日期：242/ 09-74 修回日期：2424- 09-81基金项目：西南医科大学应用基础研究计划项目(2//NRQNN1)* 通信作者(ccrresponding author ) ：yauchenhlll8@ (西南医科大学附属医院乳腺外科，四川泸州646004)摘要：目的探讨合并2型糖尿病乳腺癌组织中HIF-1a 、PARN 、VEGF 的表达及低氧微环境对人乳腺癌细胞系(MCF-7)侵袭和增殖的影响。

方法乳腺癌合并2型糖尿病手术切除送检的标本37份，免疫组化检测乳腺癌和癌旁组织中HIF-la 、PAR-1VEGF 表达，测定微血管密度(MVD )；将MCF-7细胞分为对照组(5. 6 mmol/L 葡萄糖)、高糖组(34 mmol/L 葡萄糖)、低氧组((％ O ),% CO ), 99% N ))高糖低氧组。

采用显微镜观察各组细胞形态；CCK-8法检测细胞增殖;Tmusweb 小室法检测细胞侵袭能力；RT-qPCR 和Western blvt 检测HIF-1a 、PAR-1、VEGF mRNA 和蛋白表达。

结果乳腺癌组织中HIF-1a 、PARN 、VEGF 表达及MVD 计数高于癌旁组织(P<//5)；高糖低氧组MCF-7穿过基膜的细胞数及细胞存活率明显升高(P<4. 41);低氧组、高糖低氧组HIF-1a 、PARN 、VEGFmRNA 及蛋白表达较空白组明显升高(P<4. 45)。

结论低氧高糖促进MCFN 细胞增殖和侵袭及HIF-1a 、PARN 、 VEGF 表达，可为临床2型糖尿病乳腺癌检测及治疗提供靶点。

论著【基金项目】武警总部科研项目(WKH2003007)【收稿日期】2007-10-13;【修回日期】2008-01-22【作者简介】龚海英(1972-),女,籍贯安徽巢湖,本科,实验师,主要从事新药开发研究。

【通讯作者】李灵芝,女,教授,博士,博士导师,武警医学院药物化学教研室。

邮箱:llzhx @ 。

蛇床子素对乳腺癌MCF 27细胞增殖的影响龚海英,张　丽,李建宇,郑忠志,李灵芝(武警医学院药物化学教研室,天津300162)摘　要:　【目的】观察蛇床子素对体外培养乳腺癌细胞MCF 27增殖的影响。

【方法】雌激素依赖性MCF 27细胞在DMEM 培养液中采用开放式单层贴壁培养,用3种不同浓度蛇床子素进行药物干预,采用活细胞计数法和M TT 法测定乳腺癌细胞的增殖情况。

【结果】MCF 27细胞经蛇床子素1×10-8mol ΠL 和雌酚酮处理后1、2d 和3d ,与空白对照组相比,增殖速度均加快(P <0105),3d 差异最为显著。

【结论】1×10-8mol ΠL 蛇床子素对MCF 27细胞有明显促增殖作用。

关键词:蛇床子素;MCF 27细胞;增殖【文章编号】　100825041(2008)0420281203　【中图分类号】　R963　【文献标识码】　A E ffects of osthole on the proliferation of breast carcinoma MCF 27cellsG ONG H ai 2ying ,ZHANGLi ,L I Jian 2yu,ZHENG Zhong 2zhi ,L I Ling 2zhi (Department of Pharm aceutical Chemis 2try ,Medical College of Chinese People ′s Armed Police Force ,Tianjin 300162,China)Abstract :【Objective 】To investigate the effects of osthole on the proliferation of cultured breast carcinoma (BC )MCF 27cells in vitro.【Methods 】Estrogen depending MCF 27were cells cultured in DMEM medium in an open monolayer ad 2herence way and were treated with three different concentrations of osthole.The BC cells proliferation was determined by viable cell counting and M TT assay.【R esults 】The MCF 27cells in intervention group of osthole and estron grew faster than those of blank group on the first ,second ,and third day (P <0105),especially on the third day.【Conclusions 】1×10-8mol ΠL osthole has obvious proliferation promoting effect on MCF 27cells.K ey w ords :Osthole ;MCF 27cells ;Proliferation 蛇床子系伞形科蛇床子属植物蛇床的果实,有温肾、壮阳、燥湿、祛风、杀虫之功效,具扶正祛邪双重益处。

一、实验目的本研究旨在通过体外实验，观察和探讨癌细胞在异种组织中的定植过程，为癌症转移的机制研究和治疗策略提供实验依据。

二、实验材料1. 细胞株：人乳腺癌细胞系MCF-7、人肺腺癌细胞系A549、人肝细胞癌细胞系HepG2、人黑色素瘤细胞系A375。

2. 培养基：DMEM培养基、RPMI-1640培养基。

3. 胶原酶：0.25%胰蛋白酶。

4. 细胞计数板。

5. 实验器材：显微镜、细胞培养箱、CO2培养箱、离心机、移液器、培养皿等。

三、实验方法1. 细胞培养：将人乳腺癌细胞系MCF-7、人肺腺癌细胞系A549、人肝细胞癌细胞系HepG2、人黑色素瘤细胞系A375分别接种于培养皿中，置于CO2培养箱中培养，待细胞生长至对数生长期时，收集细胞用于实验。

2. 细胞悬液制备：将收集的细胞用胰蛋白酶消化，制成细胞悬液，调整细胞浓度至1×10^6个/mL。

3. 定植实验：将实验细胞悬液分别接种于盖玻片上，每个细胞系设置3个复孔。

将盖玻片放入含有基质胶的培养皿中，37℃、5%CO2培养箱中培养24小时，观察细胞形态。

4. 悬浮培养：将细胞悬液接种于6孔板中，每组细胞设置3个复孔，加入适量培养基，置于CO2培养箱中培养。

5. 定植观察：培养24小时后，取出盖玻片，置于显微镜下观察细胞形态及定植情况。

6. 细胞计数：培养48小时后，用胰蛋白酶消化收集细胞，调整细胞浓度，采用细胞计数板进行计数。

四、实验结果1. 细胞形态观察：实验细胞在基质胶上培养24小时后，观察到细胞形态良好，呈梭形或圆形，与正常细胞形态相似。

2. 定植观察：培养24小时后，显微镜下观察到细胞在盖玻片上均匀分布，呈单层生长，无重叠现象。

3. 细胞计数：培养48小时后，细胞计数结果显示，实验细胞在基质胶上生长良好，细胞数量明显增多。

五、讨论本研究通过体外实验，观察了癌细胞在异种组织中的定植过程。

实验结果显示，实验细胞在基质胶上生长良好，且能形成单层细胞，说明癌细胞具有一定的定植能力。