1 三萜类化合物的提取分离
1.1 传统的三萜类成分提取分离方法
一般根据其溶解性采用不同的有机溶剂进行提取分离，如：将药材用乙醇浸提3次，提取液浓缩得到的浸膏溶于适量水中，然后用氯仿萃取3次，合并氯仿层，减压浓缩到原体积的1/3，用饱和NaHCO3溶液碱化，取氯仿层部分浓缩，得到棕色浸膏将所得浸膏用硅胶柱层析分离等。
该方法需要消耗大量的有机溶剂易造成医药污染，且提取的选择不高，使制得药物剂型单一，多为汤剂或者丸、散等剂型，服用量大且携带不便，不利于中药的现代化。
1.2 超临界流体萃取法(SFE)
由于SFE在萃取过程中几乎不用有机溶剂，萃取物中无有机溶剂残留，对环境无污染，且提取效率高，节约能耗等特点，在中药化学成分的萃取分离领域得到了蓬勃发展。
崔星明等［3］采用SFE得到的芦笋提取物，用甲醇溶解，采用液相色谱-质谱联用仪检测得到了56个组分。
发现有保留时间和熊果酸基本一致的峰，其质谱分子离子峰和特征碎片峰都与熊果酸的一致。
雒廷亮等［4］采用SFE对山茱萸中熊果酸提取方法的研究，结果表明，在熊果酸提取率基本相同的前提下，SFE不仅可以实现清洁生产，而且易于实现工业化。
1.3 半仿生提取
该法模拟口服给药，为经消化道给药的中药制剂设计了一种新的提取工艺，即将药材先用一定pH值的酸水提取，继以一定pH 值的碱水提取，提取液分别滤过、浓缩、制成制剂，据报道此种方法经济实用，可保证疗效［5］。
龚慕辛等［6］通过比较水、不同浓度的乙醇、半仿生法及碱水提取对齐墩果酸提出量的影响，结果显示，半仿生提取齐墩果酸，提出量远高于一般水提。
以pH=12的碱液提取女贞子可以使齐墩果酸提出量大于75%乙醇的提出量，并且齐墩果酸不是以游离的形式存在，吸收利用率将提高，提取成本也大大降低。
1.4 超声循环技术
黄书铭等［7］研究灵芝三萜类化合物的提取工艺时，在常规提取方法的基础上，增加超声循环的处理步骤，通过实验对比，超声循环提取所需各种溶剂用量减少，提取时间缩短，目的产物提取率提高了40%。
1.5 化学衍生法
化学衍生法chemical derivatizationmethod是色谱分析中用未处理样品的一种方法。
衍生化的目的是使那些本不能直接进样分析的物质经过衍生化反应后转变为可以很方便地进行色谱分析的物质。
仲兆金等［8］用重氮烷和卤代烃的化学衍生法使结构相近、难以分离的三萜酸酯化，不改变三萜骨架结构，利用其酯化物容易分离的特点，分离后再部分水解，分得茯苓三萜，确定其结构。
2 中药三萜类化合物的测定
中药总三萜类成分的的测定一般采用分光光度法。
该方法结果稳定、重现性好准确度高，可作为中药质量评估的一种检测手段。
如茯苓中总三萜类成分的含量测定［9］,灵芝样品中三萜类化合物的含量测定［10］,马桑叶中总三萜酸的含量测定［11］等。
3 中药三萜类单体成分的分析测定
目前用于中药三萜类单体成分的分析测定方法有光谱学、生物学及色谱学方法等，尤以色谱法应用最广泛。
色谱法包括薄层色谱法、气相色谱法、高效液相法，以及它们与质谱联用技术等。
其中薄层色谱法经济、简单、分离能力强，相当一部分三萜类化合物可以通过这种方法进行定量，但其重现性、选择性较差，直到高效薄层色谱法的出现才得以改善［12］。
气相色谱法在三萜类化合物的分析中占有一定比例［1314］。
由于该方法要求化合物具有一定的挥发性，许多挥发性较弱的三萜类化合物需要进行衍生化处理，因而在一定程度上限制了方法的应用。
目前，高效液相色谱法(HPLC)是三萜类化合物分析的最常见方法。
另外，
随着液质联用(LC MS)技术的日趋成熟，其在三萜类化合物的定量研究中日益引起重视。
【参考文献】
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［4］雒廷亮,张景伟,曹文豪,等.山茱萸中熊果酸提取工艺研究进展［J］.河南化工,2005,22(2):68.
［5］易中宏,郑一敏,胥秀英,等.分光光度法测定茯苓中总三萜类成分［J］.药,2005,16(4):847848.
［6］龚慕辛,贾富霞,王敏,等.不同提取方法对女贞子中齐墩果酸提出量的影响［J］.北京中医,1999,10(3):53.
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［14］张杰，张亚芝.野生龙胆的生态学调查［J］.长春中医药大学学报,2007,23(2):36.
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1.分段沉淀法：（适合于皂苷的分离）
①原理：利用皂苷难溶于乙醚、丙酮等溶剂。
②操作：将粗皂苷先溶于少量甲醇或乙醇中，然后逐滴加入乙醚、丙酮或乙醚-丙酮（1：1）的混合溶剂（加入量以能使皂苷从醇溶液中析出为限），边加边摇匀，皂苷即可析出。
③分段沉淀法，逐渐降低溶剂极性，极性不同的皂苷就可分批沉出，从而达到分离的目的。
分段沉淀法虽然简便，但难以分离完全。
2.胆甾醇沉淀法
①原理：皂苷可与胆甾醇生成难溶性的分子复合物（三萜皂苷与胆甾醇形成的复合物不如甾体皂苷与胆甾醇形成的复合物稳定）。
②操作：先将粗皂苷溶于少量乙醇中，再加入胆甾醇的饱和乙醇溶液，至不再析出沉淀为止（混合后需稍加热），滤过，取沉淀用水、醇、乙醚依次洗涤以除去糖类、色素、油脂和游离的胆甾醇，然后将此沉淀干燥后，用乙醚回流提取，胆甾醇被乙醚提出，使皂苷解脱下来，残留物即为较纯的皂苷。
但是，此法已经基本不被应用。
3.色谱分离法
色谱法是目前分离三萜类化合物最常用的方法，通常采用多种色谱法相组合的方法。
①吸附柱色谱法；②分配柱色谱法；③高效液相色谱法；④大孔树脂柱色谱；⑤凝胶色谱法。
（1）吸附柱色谱法：
①常用方法，可用于分离各类三萜化合物。
②依据所用的吸附剂性质的不同，分为正相吸附柱色谱和反相吸附柱色谱。
③正相吸附柱色谱的吸附剂常用硅胶。
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④反相柱色谱通常以键合相硅胶Rp-18、Rp-8或Rp-2等为填充剂。
（2）分配柱色谱法：多用于分离皂苷，常用硅胶等作为支持剂，固定相为3%草酸水溶液等，流动相为含水的混合有机溶剂：如氯仿-甲醇-水，正丁醇-水等。
（3）高效液相色谱法：是目前分离皂苷类化合物最常用的方法，分离效能较高。
用于皂苷的分离制备一般采用反相色谱柱，以甲醇-水、乙腈-水等系统为洗脱剂。
（4）大孔树脂柱色谱：适用于皂苷的精制和初步分离。
操作：将含有皂苷的水溶液通过大孔树脂柱后，先用水洗涤除去糖和其他水溶性杂质，
然后再用浓度由低到高的甲醇或乙醇依次进行梯度洗脱，极性大的皂苷可被l0%～30%的醇洗脱下来，极性小的皂苷则被50%以上的醇洗脱下来。
（5）凝胶色谱法：分子筛的原理来分离分子量不同的化合物，在用不同浓度的甲醇、乙醇或水等溶剂洗脱时，各成分按分子量递减顺序依次被洗脱下来。
即分子量大的皂苷先被洗脱下来，分子量小的皂苷后被洗脱下来。
应用较多的是在有机相中使用的Sephadex LH-20.。
