化妆品微生物检验标准
一、菌落总数
菌落总数是指化妆品中可培养的微生物总数，包括细菌、霉菌和酵母菌等。这些微生物可能来自原料、生产过程、包装材料、运输和贮存等环节。菌落总数是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映化妆品受污染的程度。
二、霉菌和酵母菌总数
霉菌和酵母菌是常见的真菌，在化妆品中可能污染原料或生产过程中。霉菌和酵母菌大量繁殖会导致产品变质，对皮肤产生不良影响。因此，对霉菌和酵母菌总数的检测是化妆品卫生质量检测的重要内容之一。
三、耐热大肠菌群
耐热大肠菌群是指一群嗜热、不产气的革兰氏阴性杆菌，其中包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属等。在大肠杆菌中，有一种不耐热的“大肠菌群”是食品污染的指示菌。耐热大肠菌群可以反映肠道致病菌污染的可能性。
四、金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌是一种常见的革兰氏阳性球菌，是一种常见的细菌性病菌。耐热性较强，对食品和化妆品的污染具有一定危险性。因此，对金黄色葡萄球菌的检测也是化妆品卫生质量检测的重要内容之一。
五、铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌是一种常见的革兰氏阴性杆菌，是一种条件致病菌，可引起皮肤感染和败血症等。铜绿假单胞菌在化妆品中是一种常见的污染菌，对化妆品的卫生质量有一定影响。因此，对铜绿假单胞菌的检测也是化妆品卫生质量检测的重要内容之一。
六、细菌总数
细菌总数是指化妆品中可培养的细菌总数，包括革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌等。这些细菌可能来自原料、生产过程、包装材料、运输和贮存等环节。细菌总数可以反映化妆品受污染的程度。
七、粪大肠菌群
粪大肠菌群是指一群能够产气的肠杆菌科细菌，主要分布于动物粪便和自然界中。在化妆品中，粪大肠菌群的检出可能提示产品受到肠道致病菌的污染，具有潜在的危险性。因此，对粪大肠菌群的检测也是化妆品卫生质量检测的重要内容之一。
第七章 食品中真菌的检验
（酵母菌和霉菌的检验）
目的要求：掌握食品中霉菌、酵母菌总数的测定方法
重点难点：菌落计数
课时安排：2
教学过程：
一、检验程序
检样→处理→稀释→平板分离培养→菌落计数→报告
二、操作要点
（一）采样
1、粮食(包括粮库贮粮，粮店或家庭小量存粮)样品的采集，可根据粮囤或粮垛的大小
和类型，分层定点取样，一般可分三层五点，或分层随机采取不同点的样品，充分混合后，
取500g左右送检。小量存粮可使用金属小勺采取上、中、下各部位的混合样品。
2、海运进口粮的采样：每一船仓采取表层、上层、中层及下层四个样品，每层从五点
取样混合，如船仓盛粮超过10000t，则应加采一个样品。必要时采取有疑问的样品送检。
3、谷物加工制品(包括熟饭、糕点、面包等)、发酵食品、乳及乳制品以及其他液体食
品，用灭菌工具采集可疑霉变食品250g，装入灭菌容器内送检。
（二）样品处理（稀释）
1、以无菌操作称取检样25g(或25mL)，放人含有225mL灭菌水的玻塞三角瓶中，振摇
30min，即为1：10稀释液。
2、用灭菌吸管吸取1∶10稀释液10mL，注入试管中，另用带橡皮乳头的1mL灭菌吸管
反复吹吸50次，使霉菌孢子充分散开。
3、取1mL1∶10稀释液注入含有9mL灭菌水的试管中，另换一支1mL灭菌吸管吹吸5
次，此液为1∶100稀释液。
（三）培养
倒置于25～28℃温箱中，3d后开始观察，共培养观察5d。
（四）、计数报告
选取菌落数10～150之间的平板进行计数。（稀释度选择和菌落报告方式参考菌落总数
的测定）
小结： 主要介绍了食品中酵母菌和霉菌总数的测定方法
思考题：
列表说明霉菌、酵母菌数的测定与菌落总数的测定有什么相同的地方和不同的地方。
霉菌和酵母菌计数的注意事项
进行霉菌和酵母菌的计数是在微生物学、食品工业和制药等领域中常见的实验操作。以下是在进行这类计数时需要注意的事项：
1. 标本采集：
• 标本采集的过程需要注意采集的样本的代表性，以确保实验结果具有可靠性。采样器具和采样手法也应经过消毒，以防止外源微生物的污染。
2. 实验室环境控制：
• 实验室空气和工作台表面应该保持清洁，以防止实验样品受到外源污染。使用层流罩或生物安全柜可以降低空气中微生物的污染。
3. 消毒和灭菌：
• 所使用的培养基、培养器皿和仪器设备需要经过严格的消毒和灭菌处理，以防止实验中的交叉污染。
4. 菌种的选择：
• 选择适当的霉菌和酵母菌菌种用于实验。确保所选的菌种与实验目的一致，并且经过适当的质量控制。
5. 菌落计数方法：
• 使用适当的计数方法，如涂布法、滤膜法等，以确保准确可靠的计数结果。根据实验的需要，可以选择不同的计数方法。
6. 培养条件： • 控制培养条件，包括温度、湿度、pH等，以促进霉菌和酵母菌的生长。这可以通过使用恒温箱、培养箱等设备来实现。
7. 实验时间：
• 在培养过程中，确定合适的培养时间以确保菌落充分生长。同时，注意不要过度培养，以防止菌落过于密集。
8. 质量控制：
• 进行质量控制实验，包括使用标准菌株进行验证实验，以确保实验的可靠性和重复性。
9. 记录和分析：
• 记录实验的详细过程，包括样品信息、培养条件、计数结果等。进行统计学分析以获取可靠的数据。
通过严格控制这些因素，可以确保霉菌和酵母菌计数实验的可靠性和准确性，从而为相关领域的研究和应用提供可信赖的数据。
FSPYL027
饮料
霉菌和酵母菌含量的测定 平板计数法
F_SP
＿
YL
＿
027
饮料—霉菌和酵母菌含量的测定—平板计数法
1
范围
本方法采用平板计数法进行饮料中霉菌和酵母菌含量的测定。
本方法适用于饮料中霉菌和酵母菌含量的测定，以每克或每毫升饮料所含霉菌和酵母菌
的个数报告结果。
2
原理
饮料检样经处理，在适当的培养基和
25
～
28
℃条件下培养，通过平板计数报告结果。
3
试剂
3.1
马铃薯葡萄糖琼脂
(PDA)
3.1.1
成分
马铃薯
(
去皮切块
) 300g
葡萄糖
20g
琼脂
20g
蒸馏水
1000mL
3.2.2
制法
将马铃薯去皮切块，加
1000mL
蒸馏水，煮沸
10
～
20min
。用纱布过滤，补加蒸馏水至
1000mL
。加入葡萄糖和琼脂，加热溶化，分装，
121
℃高压灭菌
20min
。
3.2
孟加拉红培养基
3.2.1
成分
蛋白胨
5g
葡萄糖
10g
磷酸二氢钾
1g
硫酸镁
(MgSO
4・
7H
2O) 0.5g
琼脂
20g
1/3 000
孟加拉红溶液
100mL
蒸馏水
1000mL
氯霉素
0.1g
3.2.2
制法
上述各成分加入蒸馏水中溶解后，再加孟加拉红溶液。另用少量乙醇溶解氯霉素，加入
培养基中，分装后，
121
℃灭菌
20min
。
3.3
高盐察氏培养基
3.3.1
成分
硝酸钠
2g
磷酸二氢钾
1g
硫酸镁
(MgSO
4・
7H
2O)
0.5g
氯化钾
0.5g
硫酸亚铁
0.01g
氯化钠
60g
蔗糖
30g
琼脂
20g
蒸馏水
1000mL
3.3.2
制法
加热溶解，分装后，
115
℃高压灭菌
30min
。必要时，可酌量增加琼脂。
3.4
灭菌蒸馏水
3.5
乙醇
4
设备和材料
4.1
温箱，
25
～
28
℃
4.2
振荡器
4.3
平天
4.4
显微镜
4.5
玻塞三角瓶，
300 mL
4.6
试管，
15 mm
×
150 mm
4.7
平皿，直径
9 cm
4.8
吸管，
1 mL
及
10 mL
4.9
酒精灯
4.10
载物玻片
