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胃癌血清肿瘤相关基因超甲基化检测及其意义

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ｍ ｅ ｃ ｈ ａ ｎ ｉ ｓ ｍ） 之 一 。在 人类 ， 甲基 化 只 发生 在 Ｃ ｐ Ｇ 二
沉默 、 途径 、 基 因印 记 、 环境 因素 、 健 康 和 营 养 因素 、
年 龄相 关变 化 和疾病 特异 性改 变联 系 在一起 ．具 有 广 阔 的临床 应用 前景 ，例 如 甲基转 移酶 抑制 剂用 于 肿瘤 治 疗 ，通过 检测 血清 中甲基化 标 志物用 于肿 瘤 早 期诊 断 、 患病 风 险评估 、 化疗 反 应监测 和 肿瘤 复发 监 测等 ］ 。 ２ ） 更 大样 本 的临床 研 究 。 ３ ） Ｄ Ｎ Ａ 甲基化
中可 同 时检测 到 多个基 因 的异常 甲基 化 ．血 清肿瘤
相关 基 因异常 甲基 化检 测具 有较 高 的灵敏 度 和特 异 性， 具 备一 定 的临 床应用 价 值 。 未来 可 以从 以下几个 方面 进行 进一 步 的探索 ： １ ） 通过 应用 微列 阵 、 质谱技 术、 Ｄ Ｎ Ａ测 序 等 技 术 不 断 发 现 新 的 甲 基 化 Ｃ ｐ Ｇ 位 点 ，在 表 观 基 因 组 水 平 精 确 研 究 正 常 和疾 病 组织 Ｄ Ｎ Ａ甲基 化模 式 的特 征 与差 异 ， 可 以揭 示 疾病 的表 观遗 传学 机制 ， 并将 Ｄ Ｎ Ａ 甲基 化模 式 的改变 与基 因
２ Ｓ ｏ ｂ ｉ ｎ Ｌ Ｈ， Ｗｉ ｔ ｔ ｅ ｋ ｉ ｎ ｄ Ｃ Ｈ（ ｅ ｄ ｓ ． ） ． ＴＮＭ Ｃｌ ａ ｓ ｓ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｄ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｍａ ｌ ｉ ｇ ｎ ｎｔ ａ
Ｔｕ ｍｏ ｕ ｒ ｓ ． Ｎｅ ｗ Ｙｏ ｒ ｋ ： Ｗ ｉ ｌ ｅ ｙ＿Ｉ ｊ ｓ Ｓ ， Ｉ ｎｃ ． ，１ ９ ９ ７ ：５ ９￣ ６ ２
癌 基 因突 变 ， 其 光 谱分 析与 原 发肿 瘤 相一 致 ． ９ ］ 。现
已证实 ，肿瘤 患 者血液 中 ，具有 肿 瘤生 物学 特征 的
Ｄ Ｎ Ａ主 要 来 源 于肿 瘤 细胞 坏 死 及 凋 亡后 自然 散 发
３ Ｈ ｅ ｒ ｍａ ｎ Ｊ Ｇ ， Ｇ ｒ ａ ｔＪ ｆ Ｒ， Ｍｙ ｏ ｈ ａ ｎ ｅ ｎ Ｓ ， ｅ ｔ ａ １ ． Ｍｅ ｈ ｔ ｙ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ － ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｉ ｆ ｃ
Ｍ Ｓ Ｐ厅法 首 ， 庀 在肺 癌 患 者 血 清 中检 测 到 ｐ １ ６基 因
的异 、 甲 ｆ ｛ 二 。 目前 ． 对 于血 清 中肿瘤 Ｄ Ｎ Ａ来 源的 确切 机制 仍然缺 乏深 入 了解 。 １ ９ ８ ９年 ． Ｗｏ ｎ ｇ等 ］ 对 肿 瘤 患者 血液游 离 Ｄ Ｎ Ａ进行 研究 ， 发 现具有 肿瘤 细
胞 Ｄ Ｎ Ａ 的一些 特 征 ，因而 提 出 肿瘤 患 者 血 液 游离 Ｄ Ｎ Ａ可 能源 自肿 瘤细 胞 。 这 一推 测 在 ５年 之后得 到
检 测手 段不 断更 新 ，高通 量 以及定 量 分析 可 以提供 更为 丰富 的信 息 。
参 考 文献
１ Ｌｅ ｏ ｎ Ｓ Ａ，Ｓ ｈ ａ ｐ ｉ ｒ ｏ Ｂ，Ｓ ｋ ｌ ａ ｒ ｏ ｌ ｆ ＤＭ ，ｅ ｔ ａ １ ．Ｆ ｒ ｅ ｅ ＤＮＡ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ Ｓ ￣ Ｉ Ｔ Ｉ
ｏ ｆ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ ｐ ａ ｉ ｔ ｅ ｎ ｔ ｓ ａ ｎ ｄ ｈｅ ｔ ｅ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ ｈ ｔ ｅ ｒ ａ ｐ ｙ 田． Ｃ ｎｃ ａ ｅ ｒ Ｒ ｅ ｓ ， １ ９ ７ ７ ，
３ ７ 【 ３ ） ： ６ ４ ６ ￣ ６ ５ ０
证实 ．研 究者 在肿 瘤患 者 的血浆 和 血清 中检测 到 了
Ｐ Ｃ Ｒ ： ａ ｎ ｏ ｖ ｅ ｌ Ｐ Ｃ Ｒ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ｆ ｏ ｒ ｍｅ ｈｙ ｔ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｔ ａ ｔ ｕ ｓ ｏ ｆ Ｃ ｐ Ｇ ｉ ｓ ｌ ｎｄ ａ ｓ ［ Ｊ ］ ．
Ｐ ｒ ｏ ｃ Ｎａ ｄ Ａｃ ａ ｄ Ｓ ｃ ｉ Ｕ Ｓ Ａ， １ ９ ９ ６ ， ９ ３ （ １ ８ ） ： ９ ８ ２ １ － ９ ８ ２ ６
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１ ２ ７ ８ ・
中 国 肿 瘤 临 床
２ ０ ０ ７ 年 第 ３ ４ 卷 第 ２ ２ 期
核苷 酸 的 鸟嘌 呤核 苷 ， Ｃ ｐ Ｇ 富集 区如 启 动 子 区域 的
Ｄ Ｎ Ａ异 常 甲基化与 基 因沉默 有关 。 一些 肿瘤 相关 基 尤其 是抑 癌基 因 ， 为 异常 甲基 化 而导致 功能 失
活， 可 能参 与肿 瘤 的发生 。 １ ９ ９ ８年 Ｂ ｅ ｌ ｉ ｎ ｓ ｋ ｙ等 ＿ ６ ］ 运 用
２ ０例 健 康体 检者 的血 清 未 检 测 到 任 何 基 因的
异常 甲基化 。 所 有血 清 中检测 到异 常 甲基化 的患者 ．
其忡 嘧组 织也 能检测 到 相应 基 因的异 常 甲基化 生的 关 系需 要结 合 临床 资料 ，综 合分 析更 多 的 胃癌 相关 肿瘤 基 因。 本 研究 显示 ， 胃癌患 者血 清
循 环 血 液 中游 离 Ｄ Ｎ Ａ最早 发 现于 １ ９ ４ ７年 ．
Ｍａ ｎ ｄ ｅ ｌ 和 Ｍｅ ｔ ａ ｌ ｓ采用 化 学 分 析 手 段 证 实 健 康 人 和 患者 循环 血液 内存 在游 离 核酸 ， １ ９ ７ ７年 Ｌ ｅ ｏ ｎ等 在 肿瘤 患者 血清 中检 测到 游离 的 Ｄ Ｎ Ａ 。 Ｄ Ｎ Ａ 甲基 化不 改变 Ｄ Ｎ Ａ序列 和 遗传 密码 ． 具 有 可 逆性 ． 被 认 为是 基 因转 录调 控 的 表 观 遗 传 机 制 （ ｅ ｐ ｉ ｇ ｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ

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DNA甲基化在肿瘤发生中的作用

DNA甲基化在肿瘤发生中的作用

DNA甲基化在肿瘤发生中的作用肿瘤是人类健康的头等大事，它是由基因突变和表观遗传学变化引起的遗传疾病。

DNA甲基化是一种常见的表观遗传学变化，它是指DNA分子在胞内繁殖时，通过在在五碳脱氧核糖核苷酸的C5位加上一个甲基基团而产生的一种修饰，它在正常组织中具有调控基因表达，维护基因稳定性，参与细胞分化和应答外源性刺激等多种功能。

但是，在肿瘤发生中，DNA甲基化的模式发生改变，造成癌基因的高度表达或肿瘤抑制基因的沉默，这种表观遗传学的改变往往会引起肿瘤的发生和发展。

因此，深入了解DNA甲基化在肿瘤发生中的作用，对于治疗肿瘤有着重要的意义。

DNA甲基化的机制DNA甲基化是一种简单的化学修饰，它是由甲基转移酶催化丙烷基单元(C1)从S-腺苷甲硫氨酸(AdoMet)转移到细胞内DNA链合成过程中的胞嘧啶(Cyt)的C5核苷酸上。

DNA甲基转移酶(DNMT)是DNA甲基化的关键酶，它包括DNMT1, DNMT3a和DNMT3b三个亚型。

DNMT1是在细胞分裂期间能够保证分子和细胞的遗传稳定性，通过识别和甲基化前一代细胞从父本获得的甲基化DNA，维持其在细胞分裂后的遗传稳定性。

DNMT3a/b通过识别新的DNA序列元素来甲基化胞苷。

然而，过度的DNA甲基化也可能触发继承性的表观遗传学改变，从而引起肿瘤的发生。

DNA甲基化对于肿瘤的发生和发展，具有重要的作用。

它可以通过多种方式参与调节肿瘤细胞的基因表达和功能。

首先，DNA甲基化可以引起癌的基因高度表达，包括促细胞分裂和生长的基因和转录激活因子。

例如，在结肠直肠癌和胃癌中，印迹基因CDKN2A的启动子区域的甲基化状态的改变被认为是这些肿瘤的重要驱动因素。

此外，在癌症中经常出现的促细胞分裂和生长信号通路基因的DNA甲基化也是引起癌症的重要机制之一。

其次，DNA甲基化还可压制肿瘤抑制基因的表达。

肿瘤抑制基因损失或其功能异常的情况下，细胞将失去对癌症的抵抗能力。

例如，在人类胃癌和乳腺癌中，肿瘤抑制基因BRCA1的基因沉默与BRCA1启动子区域的甲基化增加有关联。

胃癌中多基因甲基化状态及其表达的研究_胡世莲

胃癌中多基因甲基化状态及其表达的研究_胡世莲


胃癌组织和癌旁正常组织中甲基化阳性率见表 1 , 胃癌组织中 5 种基因的甲基化阳性率均高于相应的 癌旁正常组织 , 且 Runx3 基因甲基化率在癌组织和 癌旁 正 常 组 织 之 间 的 差 异 有 统 计 学 意 义 ( P < 0 . 05) 。 75 % 的胃癌组织中至少有一种基因发生异 常甲基化 , 显著高于相应的癌旁正常组织 25 % (P < 0 . 05) 。而正常对照的胃黏膜组 织中, 没有 发现任 何一种基因启动子区域存在甲基化改变。本实验采 用 M 和 U 引物扩增甲基化酶 SssI 修饰 ( 甲基化阳性 对照 )和未修饰 ( 非甲基化阳性对照 )的健康人外周 血 DNA 时, 分别只有 M 引物和 U 引物得到预期大小 的扩增片段, 而阴性对照未得到任何产物 (图 1) , 提 示实验技术及所用引物和试剂正确 , 实验结果可信。
证医学中心 )
1a 1a 1b 2 3 3 1a 1a 1a
(1 . 安徽医科大学附属省立医院、 安徽省立医院 , a 老年医学科 , b 肿瘤内科 合肥 230001; 2. 安徽省委 机关医院 ; 3 . 安徽省 循
[ 摘要 ]
目的
了解胃癌 中 p16、 E cadherin、 R unx3、 DA PK 和 CHFR 基 因启动 子 CpG 岛的甲 基化 状态 , 采用 甲基化 特异 性 PCR ( M SP ) 技术 检测 12
期研究多集中在孤立的单一基因上, 随着更多基因 异常甲基化不断被报道 , 提示胃癌中存在多种基因 甲 基 化 现 象。 因 此, 我 们 同 时 对 基 因 p16 、 E cadherin 、 Runx3 、 DAPK 和 CH FR 在胃癌中的甲基 化状态进行研究 , 以探讨多基因异常甲基化在胃癌 发病机制中的作用。同时采用 RT PCR 方法检测了 上述基因在胃癌中的表达状况 , 以期了解基因甲基 化与其 mRNA 表达的关系。 1 材料与方法 1 . 1 标本来源 收集安徽省立医院普外科、 干部病 房外科手术切除的 12 例经病理确诊的胃癌患者的 肿瘤组织、 相应的癌旁正常组织, 同时收集 12 例胃 镜活检的正常胃组织作为对照组。 12 例胃癌患者 术前均未经放疗和化疗 , 所有组织标本离体后立即 放于液氮罐速冻 , 然后存放于 - 80 冰箱内保存备 用。每例取材包括癌组织和相应的癌旁正常组织各 2 份 , 分别用于 MSP 和 RT PCR 研究。 1 . 2 实验方法 1 . 2 . 1 基因组 DNA 提取 取 - 80 低温保存的冷 冻组织标本 , 参照美国 OM EGA 公司的 E. Z. N. ATM T issue DNA K it说明书进行组织 DNA 的提取 , 提取 的基因组 DNA 由琼脂糖凝胶电泳鉴定 , 紫外分光光 度计定量后 , 放于 - 20 暂存。 1 . 2 . 2 基因组 DNA 修饰 取 1 g 上述所得 DNA, 按照 DNA 修饰试剂盒说明进行甲基化修饰, 主要步 [ 5] 骤按照 H em an 等 提出的方法, 并加以改进。修饰 后的 DNA 模板放于 - 40 冰箱保存或直接做 PCR。 冰上配制 PCR 1 . 2 . 3 甲基化特异性 PCR( M SP )
肿瘤相关检测项目介绍

肿瘤相关检测项目介绍


肺癌的检测方法
肺癌的分子靶向治疗
•一代靶向治疗药物，与靶点的结合并不牢 固，结合一段时间就分开了，因此被称为 可逆的靶向药物：吉非替尼Gifitinib/Iressa/ 易瑞沙、厄洛替尼Erlotinib/Tarceva/特罗凯
•二代靶向治疗药物会不可逆地与靶点结合， 永久地锁住靶点，不让它“作恶”，同时 二代相比一代作用靶点更加广泛，这是二 代靶向药物与一代靶向药物在作用机理上 最显著的区别：阿法替尼/Afatinib、埃克替 尼/国产易瑞沙
• 美国临床肿瘤学会（ASCO）在JCO上发表报告：EGFR-TKI是携带EGFR突变型的非小细胞肺 癌病人的一线治疗药物，有益于进展期非小细胞肺癌患者的个体化治疗。
• 欧洲EMEA指出：易瑞沙（吉非替尼）仅对携带EGFR突变型的非小细胞肺癌患者有效，平 均无进展生存期延长3.5月。
• 美国FDA（2013）批准对拟采用阿法替尼、厄洛替尼等EGFR-TKI治疗的患者进行EGFR突变 检测的试剂盒（therascreen EGFR RGQ PCR Kit和 cobas® EGFR Mutation Test）；
K-RAS蛋白是EGFR信号传 导中关键下游调节因子。
K-RAS基因突变使结直肠癌 患者对西妥昔单抗治疗产生 耐药性。
K-RAS阴性使用西妥昔单抗
靶向用药汇总
检测靶标/内容 相关疾病/药物
临床意义
非小细胞肺癌
EGFR基因
(外显子18、19、20、 21体细胞突变)
阿法替尼 厄洛替尼 吉非替尼
肿瘤相关检测项目介绍
市场部
中国癌症发病变化趋势
肺癌 胃癌 肝癌 食管癌 结直肠癌
膀胱癌
前列腺癌
胰腺癌
癌症的诊疗方式
血浆Septin9基因甲基化检测在胃肠道病变中的临床应用价值评价

血浆Septin9基因甲基化检测在胃肠道病变中的临床应用价值评价

ＤＯＩ：１０．１３６０２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｃｌｓ．２０２１．０３．０５·临床实验研究·血浆Ｓｅｐｔｉｎ９基因甲基化检测在胃肠道病变中的临床应用价值评价 作者简介：王炳龙，１９８２年生，男，主管技师，硕士，研究方向为免疫学及血液学实验诊断。

通信作者：欧启水，主任技师，教授，博士，博士研究生导师，Ｅ ｍａｉｌ：ｏｕｑｉｓｈｕｉ＠ｆｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ。

王炳龙，汤纪丰，俞子晴，江仁权，何毓珏，林锦骠，欧启水（福建医科大学附属第一医院检验科，福建医科大学基因诊断研究中心，福建省检验医学重点实验室，福州３５０００５）摘要：目的　探讨血浆Ｓｅｐｔｉｎ９基因甲基化在胃肠道病变进展过程中的临床应用价值。

方法　纳入２０１７年５月至２０２０年１１月在福建医科大学附属第一医院行血浆Ｓｅｐｔｉｎ９基因甲基化检测（ＰＣＲ荧光法）的受检者（包括结直肠癌和胃癌患者、消化系统良性病变患者及无疾病证据受检者）２１２８例，收集相关临床资料，并进行ＲＯＣ曲线分析。

结果　术前结直肠癌和胃癌患者、消化系统良性病变患者、无疾病证据受检者血浆Ｓｅｐｔｉｎ９基因甲基化的阳性率分别为５７．６７％、４３．７１％、１７．７２％和４．８８％。

与无疾病证据受检者组相比较，术前结直肠癌和胃癌患者Ｓｅｐｔｉｎ９基因甲基化检测的敏感性分别为５７．７１％和４３．７１％，特异性分别为９５．１２％和９５．１２％。

临床分期为Ⅲ～Ⅳ期的结直肠癌（６８．９２％）和胃癌（４８．８０％）患者的血浆Ｓｅｐｔｉｎ９基因甲基化的阳性率高于Ⅰ～Ⅱ期结直肠癌（５０．５１％）和胃癌（１８．８２％）患者，术前行该检测的结直肠癌（５７．７６％）和胃癌（４３．７１％）患者的阳性率亦高于术后行该检测的结直肠癌（３１．４５％）和胃癌（３３．７６％）患者，且有６３．３３％结直肠癌与６９．２３％胃癌患者在术后该指标由阳性转变为阴性。

ＲＯＣ曲线分析结果表明，单独血浆Ｓｅｐｔｉｎ９基因甲基化在筛查结直肠癌患者与结直肠良性病变患者或无疾病证据受检者组中ＲＯＣ曲线下面积（ＡＵＣＲＯＣ）分别为０．６８１和０．７６４，在筛查胃癌患者与胃良性病变患者或无疾病证据受检者组中的ＡＵＣＲＯＣ分别为０．６４９和０．６９４。