抗生素配置及工作浓度

常用抗生素：①以水为溶剂的抗生素贮存液应使用0.22 ^m滤器过滤除菌；②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌;
③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保存。

氨苄青霉素(ampicillin)( 100mg/ml)
溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水(最好是高压后的灭菌水)中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20 °C贮存。

常以25ug/ml〜50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

羧苄青霉素(carbenicillin) (50mg/ml)
溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20C贮存。

常以25ug/ml〜50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

卡那霉素(kanamycin) (10mg/ml)
溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20C贮存。

常以
10ug/ml〜50ug/ml的终浓度添加于生长培养基
链霉素( streptomycin)(50mg/ml)
溶解 0.5g 链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至
10ml。

分装成小份于-20 C贮存。

常以 10ug/ml〜50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。

①以水为溶剂的抗生素贮存液应用0.22卩山滤器过滤除菌；
②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌；
③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保存。

注意：镁离子是四环素的拮抗剂。

对于以四环素为筛选抗性的细菌，应使用不含镁离子的培养基，如LB 培养基。

下面是常用抗生素的贮液浓度及工作浓度
氨苄青霉素：贮液浓度50 mg/ml溶于水-20 C保存工作浓度20卩g/ml （严紧型质粒）60卩g/ml （松弛型质粒）
羧苄青霉素：贮液浓度50 mg/ml溶于水-20 C保存工作浓度20卩g/ml （严紧型质粒）60卩g/ml （松弛型质粒）
氯霉素：贮液浓度34 mg/ml溶于乙醇-20 C保存工作浓度25
卩g/ml （严紧型质粒）170卩g/ml （松弛型质粒）
卡那霉素：贮液浓度10 mg/ml溶于水-20 C保存工作浓度10
卩g/ml （严紧型质粒）50卩g/ml （松弛型质粒）
链霉素：贮液浓度50 mg/ml溶于水-20 C保存工作浓度10
卩g/ml （严紧型质粒）50卩g/ml （松弛型质粒）
四环素：贮液浓度5 mg/ml溶于乙醇-20 C保存工作浓度10
卩g/ml （严紧型质粒）50卩g/ml （松弛型质粒）质粒类型：。

常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml～50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。

羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。

卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以10ug/ml～50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。

氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

四环素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。

分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。

常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

抗生素
（一）溶剂存储浓度一般使用浓度保存条件Kana（卡那霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Amp（氨苄霉素）水50mg/ml50ug/ml-20℃Strp（链霉素）水10mg/ml50ug/ml-20℃Hyp（潮霉素）水50mg/ml-20℃Ca（头孢霉素）水50mg/ml-20℃Cm（氯霉素）乙醇34mg/ml50ug/ml-20℃
Rif（利福平）二甲基亚砜
（DMSO）
50mg/ml50ug/ml-20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22um水膜滤器过滤除菌。

以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22有机膜滤器过滤除菌。

以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，所有抗生素容易均应保存于不透光的容器中。

乙酰丁香酮（AS）的配置：200mM/L=39.24mgAS+1ml二甲基亚砜（DMSO）使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG）的配置：用水配置成50mg/ml，后使用水膜滤器过滤除菌；使用浓度：0.1mM/L-1mM/L
MES溶液：1mol/L，精确称量2.1320gMES，加入95ml的ddH2O，使用5M KOH调节PH至5.3后，定容至100ml，超净台内过滤除菌，-20℃冻存。

1/1。

溶剂存储浓度一般使用浓度保存条件Kana（卡那霉素）水10mg/ml 50ug/ml -20℃Amp（氨苄霉素）水50mg/ml 50ug/ml -20℃Strp（链霉素）水10mg/ml 50ug/ml -20℃Hyp（潮霉素）水50mg/ml -20℃Ca（头孢霉素）水50mg/ml -20℃Cm（氯霉素）乙醇34mg/ml 50ug/ml -20℃
Rif（利福平）二甲基亚砜
（DMSO）
50mg/ml 50ug/ml -20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22um水膜滤器过滤除菌。

以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22有机膜滤器过滤除菌。

以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理，所有抗生
素容易均应保存于不透光的容器中。

乙酰丁香酮（AS）的配置：200mM/L=39.24mgAS+1ml二甲基亚砜（DMSO）使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷（IPTG）的配置：用水配置成50mg/ml，后使用水膜滤
器过滤除菌；
使用浓度：0.1mM/L-1mM/L
MES溶液：1mol/L，精确称量2.1320gMES，加入95ml的ddH2O，使用5M KOH 调节PH至5.3后，定容至100ml，超净台内过滤除菌，-20℃冻存。

四.常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。

卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

四环素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。

分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。

常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

抗生素溶剂存储浓度一般使用浓度保存条件Kana卡那霉素水10mg/ml50ug/ml-20℃Amp氨苄霉素水50mg/ml50ug/ml-20℃Strp链霉素水10mg/ml50ug/ml-20℃Hyp潮霉素水50mg/ml-20℃Ca头孢霉素水50mg/ml-20℃Cm氯霉素乙醇34mg/ml50ug/ml-20℃
Rif利福平二甲基亚砜
DMSO
50mg/ml50ug/ml-20℃
以水为溶剂的抗生素贮存液应通过水膜滤器过滤除菌;以有机溶剂为溶剂的抗生素贮存液应通过有机膜滤器过滤除菌;以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理,所有抗生素容易均应保存于不透光的容器中;
乙酰丁香酮AS的配置：200mM/L=+1ml二甲基亚砜DMSO使用有机滤器过滤除菌；
使用浓度200ug/ml：2ul的200mM/L的配置好的AS
异丙基-b-D-硫代半乳糖苷IPTG的配置：用水配置成50mg/ml,后使用水膜滤器过滤除菌；
使用浓度：L-1mM/L
MES溶液：1mol/L,精确称量,加入95ml的ddH2O,使用5M KOH调节PH至后,定容至100ml,超净台内过滤除菌,-20℃冻存;。

普通使用的抗生素的贮液和工作液浓度下面的内容摘自《分子克隆》第三版附录2①以水为溶剂的抗生素贮存液应用0.22 μm滤器过滤除菌；②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌；③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保存。

注意：镁离子是四环素的拮抗剂。

对于以四环素为筛选抗性的细菌，应使用不含镁离子的培养基，如LB培养基。

下面是常用抗生素的贮液浓度及工作浓度氨苄青霉素贮液浓度 50 mg/ml 溶于水 -20℃保存工作浓度 20 μg/ml （严紧型质粒） 60 μg/ml （松弛型质粒）羧苄青霉素贮液浓度 50 mg/ml 溶于水 -20℃保存工作浓度 20 μg/ml （严紧型质粒） 60 μg/ml （松弛型质粒）氯霉素贮液浓度 34 mg/ml 溶于乙醇 -20℃保存工作浓度 25 μg/ml （严紧型质粒） 170 μg/ml （松弛型质粒）卡那霉素贮液浓度 10 mg/ml 溶于水 -20℃保存工作浓度 10 μg/ml （严紧型质粒） 50 μg/ml （松弛型质粒）链霉素贮液浓度 50 mg/ml 溶于水 -20℃保存工作浓度 10 μg/ml （严紧型质粒） 50 μg/ml （松弛型质粒）四环素贮液浓度 5 mg/ml 溶于乙醇 -20℃保存工作浓度 10 μg/ml （严紧型质粒） 50 μg/ml （松弛型质粒）利福平，Rifampicin (INN) 简写为Rif。

分子式：C43H58N4O12，相对分子质量为822.94022 [g/mol]。

化学名 3-[[(4-甲基-1-哌嗪基)亚氨基]甲基]-利福霉素利福平是一种半人工合成的抗生素，最初从地中海氏拟无枝菌酸菌（Amycolatopsis mediterranei）中获得。

利福平为利福霉素类半合成广谱抗菌药，对多种病原微生物均有抗菌活性。

该药对结核分枝杆菌和部分非结核分枝杆菌（包括麻风分枝杆菌等）在宿主细胞内外均有明显的杀菌作用。

常用抗生素溶液抗生素贮存液a工作浓度浓度保存条件严紧型质粒松弛型质粒氨苄青霉素50mg/ml(溶于水)-20℃20μg/ml60μg/ml 羧苄青霉素50mg/ml(溶于水)-20℃20μg/ml60μg/ml 氯霉素34mg/ml(溶于乙醇)-20℃25μg/ml170μg/ml 卡那霉素10mg/ml(溶于水)-20℃10μg/ml50μg/ml 链霉素10mg/ml(溶于水)-20℃10μg/ml50μg/ml四环素b5mg/ml(溶于乙醇)-20℃10μg/ml50μg/mla：以水为溶剂的抗生素贮存液通过μm滤器过滤除菌。

以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。

所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。

b：镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基（如LB培养基）。

常用抗生素？氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）？溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

？羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）？溶解羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

？甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）？溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。

？卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）？溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

？氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）？溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。

抗生素的配制1. 氨苄青霉素Amp（100mg/mL）取1g氨苄青霉素溶于100mL的ddH2O中溶解，分装于2mL离心管中，-20度保存。

用时每100mL加75μL，终浓度为50μg/mL。

2. 硫酸链霉素（400mg/mL）氨基糖苷类抗生素，氨苄青霉素主要用于抑制革兰氏阴性细菌的生长。

取4g硫酸链霉素溶于100mL的ddH2O中溶解，分装于2mL离心管中，-20度保存。

用时每100mL加75μL，终浓度为200μg/mL。

3. 乳酸（50%）大多数细菌不耐酸，而真菌偏好酸性。

将50mL的乳酸溶液与50mL的ddH2O混匀，分装于2mL离心管中，-20度保存。

用时每100mL加75μL，终浓度为0.35%。

4. 卡纳霉素Kanamycin是一种氨基糖酐类，从卡那霉素链霉菌(Streptomyceskanamyceticus)中分离得到。

能结合细菌核糖体的30S亚基上的16S rRNA，干扰formyl-methionyl-tRNA 与30SrRNA的连接，阻断细菌蛋白质的合成。

取1g卡纳霉素溶于100mL的ddH2O中溶解，分装于2mL离心管中，-20度保存。

用时每100mL加75μL，终浓度为50μg/mL。

1. 青霉素：β-内酰胺类抗生素,主要是抑制细菌的细胞壁生成,使之产生缺陷,细菌破裂死亡.2. 红霉素: 大环内酯类抗生素,阻碍细菌蛋白质的合成,起到抑制细菌繁殖的作用,但是不能杀菌.3. 四环素: 四环素类抗生素,抑制细菌DNA复制,阻碍蛋白质合成.起到抑制细菌生长作用,但大剂量也可杀菌.4. 链霉素: 氨基甙类抗生素,阻碍细菌蛋白质合成.杀菌作用.毒素和抗毒素是相对概念,某些物质进入体内会抑制我们正常的生理运转环境和途径,比如有机磷农药可以使神经肌肉接头的信号传递出现障碍.从而产生一系列的症状.而抗毒素用通俗的话来说就是解毒药.能逆转或者阻止毒素对正常生理的破坏.外毒素（exotoxin）: 细菌在生长过程中由细胞内分泌到细胞外的毒性物质。