脐带间充质干细胞(MSCS)抗衰老的临床实验

由于现代生活压力大，许多女孩二三十岁的就出现了类似更年期的症状，如困倦、易怒、阴道干涩、性欲下降、失眠多梦、月经紊乱等，有人以为这是工作太累引起的，不用过于在意，可实际上，女性在非更年期出现更年期症状，可能预示着卵巢早衰！卵巢功能早衰（POF）是指女性40岁之前由于多种病因出现卵巢萎功能衰竭，被认为是导致不孕的“不治之症”。

卵巢早衰对女性生殖健康的两大威胁主要是雌激素水平降低及生育能力丧失，雌激素水平降低增加了女性患骨质疏松和冠心病的危险。

而处于生育期的女性提早闭经、生育能力丧失，容易出现抑郁、焦虑等心理问题。

该病的诊断标准是指: 40岁以前出现至少4个月以上闭经, 并有2次或以上血FSH>40U/L (两次检查间隔1个月以上) , 雌二醇<73.2pmol/L。

这种疾病的发病率在育龄女性中超过１％，且近年来呈上升和年轻化趋势。

没有一种有效的治疗方法能够根治POF，间充质干细胞(MSCs)是属于中胚层的一类多能干细胞，具有强大的增殖能力和多向分化潜能、免疫调节功能、异体移植排异较轻、配型要求不严格、易于分离和培养等优势。

脐带间充质干细胞治疗POF的研究进展脐带间充质干细胞（UCMSCs）是目前干细胞研究领域最热的成员之一，具有取材容易，对母体创伤小，污染概率低，无免疫原性等优势特点。

朱少芳等人研究发现人脐带间充质干细胞可以在损伤的大鼠卵巢中存活，迁移，能部分改善建模后大鼠的性激素水平，减轻对卵泡的损伤，卵巢注射组和尾静脉注射组部分大鼠能生育幼鼠，其后代生长发育良好。

还有研究发现，将UCMSCs通过尾静脉注射到小鼠体内，可以提高卵泡的数量，改善卵巢的功能。

UCMSCs 是目前最有可能应用于临床治疗卵巢早衰的生物制剂。

骨髓间充质干细胞（BMSCs）治疗POF的研究进展骨髓间充质干细胞（BMSCs）是被广泛应用和研究的一类干细胞之一。

范雪等人研究发现BMSC可以维持血清中各种雌性相关激素的正常水平，消除由顺铂类物质对卵巢造成的早衰，促进卵泡的发育，改善并增强卵巢功能。

脐血干细胞的功能脐血干细胞即脐血中具有的能自和更新和分化能力的细胞，是脐血中的原始多能干细胞，具有分化成为人体各种细胞的潜能，有抗衰老的作用。

细胞是生命体结构和功能的基本单位，细胞更新换代和发育分化是生命发生发展的关键因素，因此，细胞是健康和衰老的重点。

衰老涉及细胞数量和功能的变化，从细胞角度来研究抗衰老的措施是最佳途径。

干细胞是各种组织细胞更新换代的种子细胞，从干细胞的角度进行抗衰老治疗和保健是最有效的办法。

干细胞抗衰老就是让单个核细胞（MNC）进入全身各组织，系统性提高全身细胞更新换代的能力和活性，全面改善组织器官功能，明显改善老年人的生活质量，从根本上延缓衰老，延长生命。

一、人体衰老的机制生命都经历过发育、成熟，逐渐走向衰老，这是由于体内干细胞不断增殖和分化，必然导致干细胞族群的老化和减少。

老化的干细胞虽然保留了增殖和分化的能力，但这时所分化出的细胞种类逐渐减少、形态结构和生理功能上都不如早期阶段所分化出的细胞。

于是在细胞衰老需要更新时，新生的细胞补充不足，衰老细胞不能及时被替代，体内细胞的稳态更新则受到破坏。

由于细胞动态失衡，体内衰老的细胞越积越多，细胞总体发生老化，各个组织器官得不到及时的修复，生理功能就会逐渐衰退，最终反映出人体的衰老。

干细胞老化导致人体衰老这一自然现象，靠我们自身是无法改变的。

二、移植脐血干细胞，抑制衰老，延长生命既然人体衰老的根本原因是干细胞数量减少和分化能力降低，那么只有通过体外移植干细胞，从而增加体内干细胞的数量、恢复干细胞的早期质量，才能从根本上抑制衰老，有效延长生命时间。

移植的脐血单个核细胞（MNC）进入人体后，将根据机体需求，增殖、分化出大量的年轻细胞，替换体内衰老的细胞，使机体重新获得细胞的动态平衡，各个组织和器官得以及时的修复，全身各系统的生理功能迅速提高。

年轻的细胞增多，衰老的细胞减少，那么人体也必然回归到年轻状态。

从分化功能上讲，移植越早期的单个核细胞（MNC），细胞分化能力就越强，更新速度就越快，因而从根本上改变人体内细胞的总体衰老。

临床研究用人间充质干细胞质量评价一、引言人间充质干细胞（MSCs）由于其多向分化潜能、免疫调节特性以及易于体外培养等特点，被广泛用于临床研究。

在众多疾病的治疗中，MSCs 都展现出了巨大的潜力。

然而，要确保其在临床研究中的有效性，首先需要对MSCs的质量进行严格控制和评价。

本文将探讨如何评价临床研究用MSCs的质量。

二、MSCs的质量评价标准1、细胞的纯度和活性：这是MSCs质量评价的核心指标。

纯度是指MSCs中目标细胞的比例，而活性则是指MSCs的增殖能力和分化能力。

2、细胞的遗传稳定性：通过基因测序等方法，可以检测MSCs是否存在基因突变，以及是否存在潜在的致癌风险。

3、细胞的免疫调节特性：MSCs具有免疫调节特性，可以通过抑制免疫反应来降低排斥反应的风险。

因此，评价MSCs的免疫调节特性也是非常重要的。

4、细胞的来源和生产过程：MSCs的来源和生产过程也会对其质量产生影响。

例如，来自患者的自身MSCs可能比来自捐献者的MSCs更适合用于治疗。

同时，生产过程中的质量控制，如无菌操作、细胞培养基的质量等，也会影响MSCs的质量。

三、MSCs质量评价的方法1、细胞形态观察：通过观察MSCs的形态，可以初步判断其是否具有正常的形态学特征。

2、生长曲线测定：通过绘制MSCs的生长曲线，可以评估其增殖能力。

3、细胞表面标志物检测：通过检测细胞表面标志物，可以确定MSCs 的纯度和活性。

4、染色体核型分析：通过染色体核型分析，可以评估MSCs的遗传稳定性。

5、免疫调节特性检测：通过检测MSCs对免疫反应的调节作用，可以评估其免疫调节特性。

6、生产过程质量控制：通过监控生产过程中的关键控制点，可以确保MSCs的生产过程符合质量标准。

四、结论人间充质干细胞（MSCs）在临床研究中的应用前景广阔，但其质量评价是关键环节。

通过对MSCs的纯度、活性、遗传稳定性、免疫调节特性以及生产过程的质量控制等多方面的评价，可以确保其满足临床研究的需求。

前持评件耐觅 Drug Evaluation Research 第43卷第12期2020年12月• 2385 ・脐带来源间充质干细胞的免疫抑制功能研究杨 莹，李政楠，王秀娟，李 伟，牟春琳，金 星，徐永胜•天津长和生物技术有限公司，天津301925摘 要：目的观察人源脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对异体总淋巴细胞和不同淋巴细胞亚群增殖能力的影响，以及对 细胞因子分泌的影响。

方法分离并培养hUC-MSCs 及健康成人外周血淋巴细胞，以淋巴细胞为阴性对照，MTT 法检测共 培养(淋巴细胞：hUC-MSCs 为1：0.5、1 ： 1、1 ： 5、1 ： 10) 3 d 后淋巴细胞的增殖情况；流式细胞仪检测共培养体系中 CD4 CD25 FOXP3\ CD3 CD16* C D56\ CD4 CD45RA CCR7*的细胞比例；ELISA 法检测白细胞介素(IL) -2、IL-4、IL-10、 Y-干扰素(INF-?)细胞因子分泌情况。

结果 与阴性对照组比较，hUC-MSCs 对淋巴细胞的增殖具有显著抑制作用(P< 0.05),抑制效果随数量增加而增强；hUC-MSCs 能够显著增加共培养体系中CD4CD25FOXP3*细胞比例(PV0.05),显著 降低CD4*C D45RA'CCR7‘细胞比例(PV0.05),对CD3 CD16 CD56*细胞比例无显著影响；hUC-MSCs 能够显著降低IL-2、 IL-4、INF-y 水平，显著增加IL-10的分泌水平(P<0.05)。

结论hUC-MSCs 具有免疫抑制功能。

收稿日期：2020-09-11基金项目：国家重点研发计划"干细胞及转化研究"重点专项(2019YFA0112100)；天津市科技计划项目(17ZXXYSY00020)*通信作者：徐永胜 E-mail :***********************关键词：脐带间充质干细胞；淋巴细胞；免疫反应；细胞因子中图分类号：R329 文献标志码：A 文章编号：1674-6376 (2020) 12-2385-05DOI ： 10.7501/j.issn.l674-6376.2020.12.005Research on immunosuppressive function of umbilical cord mesenchymal stem cellsYANG Ying, LI Zhengnan, WANG Xiujuan, LI Wei, MU Chunlin, JIN Xing, XU Yongsheng Ever Union Biotechnology Company Limited, Tianjin 301925, ChinaAbstract: Objective To observe the effects of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUC-MSCs) on the proliferation of allogeneic total lymphocytes and different lymphocyte subsets, as well as the secretion of cytokines. Methods hUC-MSCs and peripheral blood lymphocytes of healthy adults were isolated and cultured; MTT method was used to detect the proliferation of lymphocytes by after co-culture for 3 days; the proportion of CD4+CD25 FOXP3 ., CD3 CD16 CD56* and CD4 CD45RA CCR7 in the co-culture system was detected by flow cytometry; ELISA was used to detect the secretion of IL-2, IL-4, IL-10 and INF-y. Results hUC-MSCs could significant inhibit the proliferation of T lymphocytes, and the anti-proliferative effect was enhanced with the increase of the number of lymphocytes; the proportion of CD4 CD25 FOXP3 cells in co-culture system was increased by hUC- MSCs (P < 0.05); the proportion of CD4TD45RA +CCR7+ cells showed a downward tendency, and the difference was statistically significant (P < 0.05); however, there was no significant difference in CD3 CD16 CD56+ cells. hUC-MSCs could reduce the levels of IL-2, IL-4 and INF-y, but increase the secretion level of IL-10, and the difference was statistically significant (P < 0.05). Conclusion HUC-MSCs had immunosuppressive function.Key words: umbilical cord mesenchymal stem cells; lymphocytes; immune response; cytokines间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs) 来源于发育早期的中胚层和外胚层，属于多能干细 胞，因其具有多向分化潜能⑴、造血支持和促进干细 胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人 们的关注。

在人类历史长河中，医学也一直在不断的发展。

几个世纪前，人们认为人体是由四种体液组成的(血液、黄胆汁、粘液和黑胆汁)，如果你不幸生病了，你就会被大放血。

现代，我们拥有了抗生素，能够进行各种复杂的外科手术，但仍有很多疑难杂症是我们解决不了的。

生命科学研究发现，人类与其他的脊椎动物一样，都是由200多种不同的细胞构成，特定的细胞类型具有特定的功能。

例如：大脑中的神经细胞负责传递信息，红细胞负责运输氧气，皮肤细胞负责为机体提供保护，虽然所有细胞的遗传信息都是相同的，但各自的表达的模式有所不同，这便形成了各种具有不同功能的细胞。

当人出生之后，大多数细胞的表达模式就固定下来了，如果神经细胞受到了损伤，红细胞是绝对不会变为神经细胞，来对受损的组织进行修补。

干细胞潜能巨大一个完整人体的形成，是各细胞在特定基因编码的引导下发生的分化。

而这些细胞在分化之前便被称之为“干细胞”。

它就像树干，逐渐生长出树杈和树叶，最后长成一棵参天大树。

但是有一部分未分化的原始细胞依然停留在人的身体内，一旦生理需要，它们便会分化成身体所需的细胞。

若是能够想办法重新利用这些仍未分化的细胞。

那么受损的肌肉、皮肤甚至肢体，都可以结束漫长的痛苦而重获新生。

在1868年，干细胞的概念便出现于科学文献中，但直到20世纪60年代，加拿大多伦多大学的两位科学家才为我们开启了干细胞研究的大门。

人体的每一个细胞都有创建整个身体的完整的遗传密码，但当我们的细胞成熟后，它们就专门化了，很多基因都不再活动。

但干细胞例外，干细胞是所有细胞之母，作为机体的原始细胞，它能够自我复制、多向分化，在整个生命过程中保持重新生长成任何类型细胞的能力。

在特定条件下，它甚至还能分化成多种功能细胞或者组织器官。

在理论上，当人们把健康的干细胞移植到体内，就能达到修复病变细胞或重建功能正常的细胞和组织。

干细胞可以医治许多疾病，比如糖尿病、心脏病、帕金森综合症甚至癌症等——这足以让科学家们为之疯狂。

2021年干细胞治疗卵巢早衰研究进展（全文）摘要早发性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency，POI）也被称为卵巢早衰，作为女性不孕症的主要原因之一，受到广泛关注，主要表现为低雌激素水平和高促性腺激素水平。

POI的病因及机制复杂，目前无统一定论，在治疗上也主要采用补充雌激素等综合治疗。

随着干细胞研究的深入，干细胞治疗POI成为新的关注点，本文对POI 的病因及不同来源干细胞治疗POI的作用机制做一综述，为后续的研究提供参考。

【关键词】干细胞；间充质干细胞；早发性卵巢功能不全；卵巢早衰卵巢是女性重要的性腺器官，其主要功能为产生卵子并排卵，同时分泌女性激素。

早发性卵巢功能不全（premature ovarain insufficiency，POI）是一组由多种原因引起的以卵泡成熟障碍伴女性激素分泌减少为特征的临床综合征。

展现了从卵巢储备功能减退到卵巢早衰的全过程。

主要表现为40岁以前出现的闭经、雌激素水平降低和促性腺激素水平升高［卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，FSH）>40 IU/L］，并伴有不同程度的围绝经期表现（如潮热、情绪易激动等）。

POI发病率为1%~5%，且近年来有逐渐上升趋势［1］。

此外，POI患者增加了不孕症、性功能障碍、心血管疾病、骨质疏松等疾病的患病风险［2］。

POI患者承受着心理生理的双重打击。

由于其病因尚不明确，对于卵巢早衰的治疗，目前主要包括补充雌激素及对不孕症的治疗，缺乏从根本改善卵巢功能的治疗方法。

近年来，随着再生医学的发展，干细胞进入研究者的视线，其自我复制及多向分化的特性为恢复卵巢功能的治疗提供了新的思路。

本文对干细胞治疗卵巢早衰的研究进展做一综述。

一.卵巢早衰的病因1. 遗传因素：占病因的20%~25%，包括染色体异常和基因突变。

染色体异常多见于Turner综合征，又称先天性卵巢发育不全，临床最常见的典型染色体核型为45,XO，由于X染色体部分或者完全缺失，导致在胚胎时期生殖细胞就开始迅速退化和卵泡间质迅速纤维化，影响卵泡的正常发育，从而出现卵巢早衰。

233CARCINO GENESIS ，TERATO GENESIS &MUTA GENESIS脐带来源的华通氏胶间充质干细胞的分离、特性及应用前景丁赛，张红霞，朱海英*(海军军医大学基础医学院细胞生物学教研室，上海200433)收稿日期：2021-11-21；修订日期：2022-05-13基金项目：国家自然科学基金(32171387)作者信息：丁赛，E-mail ：。

*通信作者，朱海英，E-mail ：【摘要】间充质干细胞(MSCs)的来源非常广泛。

虽然各种组织来源的MSCs 生物学特性不尽相同，但在标准培养条件下该类细胞均可以贴壁生长；细胞群体中有95%以上的细胞表达典型的间充质标记分子，如CD73、CD90和CD105，但缺乏造血标记分子CD14、CD19、CD34、CD45和CD79a 的表达；特别是均具有分化为成脂细胞、成骨细胞和成软骨细胞的能力。

这些性质是国际细胞治疗协会给出的定义该类细胞的最低标准。

脐带间充质干细胞是指来源于新生儿脐带组织中的多能干细胞。

目前来看，从脐带不同解剖学部位(区室)获得的MSCs 的生物学性质也存在差异，其中从脐带华通氏胶中分离获得的华通氏胶间充质干细胞，在增殖能力、分化潜能、免疫调节能力等方面均明显优于其他区室来源的间充质干细胞，是用于组织器官损伤修复及免疫调节的一种理想的“种子”细胞，被认为具有更好的临床应用前景。

本文围绕近年来华通氏胶间充质干细胞的分离建系、增殖特性、分化潜能以及临床应用方面的研究进展进行了综述，其中重点介绍了化学诱导分化方案的建立和优化，认为与通过遗传改变诱导重编程方法相比，化学诱导分化方法具有更好的临床应用潜力。

【关键词】脐带；华通氏胶；间充质干细胞；分化潜能；分离；增殖特性中图分类号：R329.2+8文献标志码：A文章编号：1004-616X(2022)03-0233-04doi ：10.3969/j.issn.1004-616x.2022.03.011间充质干细胞最早在骨髓中被发现和鉴定，随后在人体胚胎及成体的多种组织中被陆续鉴定出来，这些组织主要包括成体骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉、肺、肝、胰腺等组织以及羊水、脐带和脐带血等。

《人脐带间充质干细胞抑制HepG2作用优化方法探索》篇一一、引言随着再生医学和细胞治疗领域的发展，干细胞因其独特的自我更新能力和多向分化潜能，在多种疾病的治疗中展现出巨大的应用潜力。

人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）作为干细胞家族的一员，因其来源广泛、免疫原性低、易于分离培养等优点，在临床前研究和临床试验中得到了广泛的应用。

近年来，hUC-MSCs在抑制肝癌细胞如HepG2的增殖和转移方面也显示出显著的效果。

然而，如何优化hUC-MSCs对HepG2的抑制作用，提高其治疗效果，仍需进一步探索。

本文旨在探索人脐带间充质干细胞抑制HepG2作用优化方法，以期为临床治疗提供新的思路和方法。

二、材料与方法1. 材料（1）细胞系：人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）、肝癌细胞系HepG2。

（2）试剂与仪器：细胞培养基、胰酶、血清、转染试剂、流式细胞仪、显微镜等。

2. 方法（1）hUC-MSCs的分离、培养与鉴定：采用适当的酶解法从脐带组织中分离hUC-MSCs，并进行培养和鉴定。

（2）HepG2细胞的培养与处理：将HepG2细胞培养至对数生长期，进行相应的实验处理。

（3）优化hUC-MSCs对HepG2的抑制作用：通过改变hUC-MSCs与HepG2的共培养条件、hUC-MSCs的预处理等方式，探索优化hUC-MSCs对HepG2的抑制作用的方法。

（4）检测指标：通过细胞增殖实验、细胞凋亡实验、Western blot等方法检测hUC-MSCs对HepG2的抑制效果。

三、实验结果1. hUC-MSCs的鉴定结果通过流式细胞仪和显微镜观察，成功分离、培养并鉴定了hUC-MSCs，确认其具有多向分化潜能和免疫调节功能。

2. hUC-MSCs对HepG2的抑制作用通过改变共培养条件、hUC-MSCs的预处理等方式，发现hUC-MSCs对HepG2的抑制作用有所增强。

具体表现为HepG2细胞的增殖受到抑制，凋亡率增加。

《人脐带间充质干细胞减缓阿霉素诱导FSGS小鼠纤维化及机制》一、引言肾小球疾病是常见的肾脏疾病之一，其中局灶节段性肾小球硬化（FSGS）是一种较为严重的病理类型。

阿霉素（Doxorubicin）是一种广泛用于临床的化疗药物，但长期使用可诱导FSGS等肾脏疾病的发生。

FSGS患者常常出现纤维化症状，这会导致肾功能进行性下降，最终可能导致肾衰竭。

目前，对于FSGS的治疗仍以药物治疗为主，但疗效并不理想。

近年来，干细胞治疗在肾脏疾病领域的应用逐渐受到关注，其中人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）因其独特的生物学特性和良好的治疗效果备受瞩目。

本研究旨在探讨hUC-MSCs对阿霉素诱导的FSGS小鼠纤维化的减缓作用及其机制。

二、材料与方法1. 实验材料本实验所使用的hUC-MSCs购自某生物公司；FSGS小鼠模型通过阿霉素注射建立；其他试剂和仪器见实验说明。

2. 实验方法（1）建立FSGS小鼠模型，并将其分为三组：对照组、阿霉素组（DOX组）、阿霉素加hUC-MSCs组（hUC-MSCs+DOX 组）。

（2）hUC-MSCs的分离、培养和鉴定。

（3）通过HE染色、免疫组化等方法观察各组小鼠肾脏的病理变化。

（4）检测各组小鼠肾脏中纤维化相关指标的表达情况。

（5）采用流式细胞术、Western Blot等方法研究hUC-MSCs 的抗纤维化机制。

三、实验结果1. 病理学观察HE染色结果显示，DOX组小鼠肾脏出现明显的纤维化改变，而hUC-MSCs+DOX组小鼠肾脏的纤维化程度明显减轻。

免疫组化结果显示，hUC-MSCs+DOX组小鼠肾脏中纤维化相关蛋白的表达也明显低于DOX组。

2. 纤维化相关指标检测与DOX组相比，hUC-MSCs+DOX组小鼠肾脏中纤维化相关指标（如Collagen I、Collagen III等）的表达明显降低。

3. hUC-MSCs的抗纤维化机制研究流式细胞术结果显示，hUC-MSCs在体内外均能促进肾脏细胞的增殖和迁移；Western Blot结果显示，hUC-MSCs能够上调肾脏组织中抗纤维化相关蛋白的表达，下调促纤维化相关蛋白的表达。

人脐带间充质干细胞促进B细胞增殖和终末分化共3篇人脐带间充质干细胞促进B细胞增殖和终末分化1人脐带间充质干细胞促进B细胞增殖和终末分化人类脐带间充质干细胞（umbilical cord mesenchymal stem cells，UC-MSCs）因其便于获取、高生存率、低免疫原性等特点，已经成为了干细胞治疗领域的一种重要选择。

近年来，研究者们发现，UC-MSCs不仅可以促进免疫系统调节，而且还可以促进B淋巴细胞的增殖和分化。

本文就重点探讨了UC-MSCs促进B细胞增殖和终末分化的作用机制及其应用前景。

一、 UC-MSCs促进B细胞增殖的作用机制1. 提供信号分子：UC-MSCs可以分泌多种活性因子和细胞因子，例如，IL-6、IL-8、SCF和SDF1等。

这些信号分子能够通过DC（dendritic cell）刺激B细胞的增殖和分化，从而增加抗体产生。

2. 生长因子释放：UC-MSCs可以同时释放多种生长因子，这些生长因子包括TGF-β、IL-10、IL-4、IL-13等，这些生长因子可以通过DC间接地激活B细胞。

例如，TGF-β可以增强B细胞在DC帮助下生产IgA，IL-10则可以改变B细胞的发育、调节B细胞的免疫反应。

3. 对抗原受体的调节：UC-MSCs可以直接或间接调节B细胞中的抗原受体（BCR），优化B细胞对抗原的反应。

例如，UC-MSCs可以通过细胞直接接触和分泌细胞因子等方式，调节B 细胞集成和处理评估结果。

二、 UC-MSCs促进B细胞终末分化1. 促进照光环节：研究表明，UC-MSCs可以通过对B细胞中光闪光酶（Syk）的抑制或光链远端区（Cλ）的激活，进一步促进B细胞的终末分化。

2. 细胞因子调控：UC-MSCs还可以通过细胞因子的调控来促进B细胞的终末分化。

例如，通过分泌IL-21、BAFF和IL-6等细胞因子，UC-MSCs可以促进B细胞的终末分化，从而促进免疫应答。

三、 UC-MSCs促进B细胞增殖和终末分化的应用前景1. 治疗自身免疫性疾病：UC-MSCs的免疫调节作用被广泛应用于自身免疫性疾病的治疗。