高考生物一轮复习课件：选修1第2讲微生物的培养和利用

基 长，促进所需要的微 以在培养基中加入青霉素)
生物的生长
鉴别不同种类的微生物，如
根据微生物的代谢特
鉴别
用伊红-美蓝培养基鉴别饮
用
点，在培养基中加入
培养
用水或乳制品中是否含有
途
某种指示剂或化学药
基
大肠杆菌(若有，则菌落呈
品
深紫色并带有金属光泽)
2.消毒和灭菌的比较
使用方法
结果
常用的方法
仅杀死物体表面
A．将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中 B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上 C．将转基因植物叶片接种到无菌培养基上 D．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上
解析：生产果酒和腐乳时对无菌的要求不是很高，接种不需要 进行严格的无菌操作；土壤浸出液中含有多种杂菌，所以利用选择 培养基筛选土壤浸出液中特定微生物时，不进行严格无菌操作也不 会影响实验结果；植物组织培养技术成功的关键是无菌条件，若接 种时不进行严格无菌操作将可能导致实验失败，故 C 项符合题意。
特殊营养特质的需求。
(√)
为什么在倒平板时，等平板冷却后要将平板倒置？ 提示： 将平板倒置的目的是防止培养皿盖上的水珠滴落到平 板上造成污染。
下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题：
涂布平板图甲是利用平板划线法进行微生物接种，图乙是利用稀释 法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是接种环和涂 布器；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是灼烧灭菌和 酒精消毒。
煮沸消毒法、巴
较为温和的 或内部一部分对
消
氏消毒法、化学
物理或化学 人体有害的微生
毒
药剂消毒法、紫
方法 物(不包括芽孢和
外线消毒法等

玻璃器皿、 金属工具
培养基及容 器的灭菌
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3.微生物的纯化培养－平板划线法与稀释涂布平板法
方法
平板划线法
稀释涂布平板法
注意 事项
(1)接种环的灼烧：①第一次划线 前：接种环上的微生物，避免污 染培养物②每次划线前：杀死残 留菌种，保证每次划线菌种来自 上次划线末端③划线结束后：杀 死残留菌种，避免污染环境和感 染操作者 (2)灼烧接种环之后，要冷却后再 进行操作，以免温度太高杀死菌 种 (3)划线时最后一区域不要与第一 区域相连 (4)划线用力要大小适当，防止用 力过大将培养基划破
④缺点：不能区分死菌与活菌。
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(2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一 个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的 菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②操作 a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性。将待测样 品经一系列10倍稀释，选择三个稀释度的菌液，分别取0.1 mL 接种到已制备好的平板上，用无菌涂布器将菌液涂布于整个平 板表面，放在适宜的温度下培养，计算菌落数。
10 mg/mL)→灭菌→按照 1 mL CR 溶液/200 mL 培
→加入 NaCl 溶液(物质的量浓度 养基比例混匀→倒平板→
为 1 mol/L)1―5―m→in倒掉 NaCl 溶液 培养→透明圈
→产生透明圈
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优 显示出的颜色反应基本上 操作简便，不存在菌落的 点 是纤维素分解菌的作用 混杂问题
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4．微生物纯化的三种途径 (1)单菌落挑取法：利用平板划线法或稀释涂布平板法接 种到固体平板培养基表面，直接根据微生物菌落的特征利用单 菌落挑取的方法获得目的微生物。 (2) 选 择 培 养 法 ： 利 用 选 择 培 养 基 对 微 生 物 进 行 选 择 培 养，直接获得目的微生物。 (3)鉴定培养法：利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现 特有的特征，然后筛选目的微生物。

解析 理想的凝固剂应具备以下条件：不被所培养的微生 物分解利用；在微生物生长的温度范围内保持固体状态，凝固 点不能太低，否则不利于微生物的生长(如琼脂凝固点为40 ℃)；对所培养的微生物，无毒害作用，且在灭菌时不会被破 坏；透明度好，凝固力强，配制方便，价格低廉。
答案 C
解题技巧：琼脂是一种从红藻中提取的多糖——半乳聚 糖，绝大多数微生物等培养物均不能利用此成分，在常规培养 条件下呈现固态。但多数微生物的生长温度约为20 ℃～40 ℃，植物组织培养时的温度为20 ℃左右，故作为凝固剂的材料 凝固点不能太低。本题的考查点是课本旁栏题和补充知识，这 也是选修1的课本编排特点，这要求考生在复习时对旁栏知识 也要重视。
2．实验设计与操作步骤 (1)实验流程设计：是实验总体思路的设计，与分解尿素的 细菌的分离和计数实验流程相同，都要经过土壤取样、梯度稀 释、涂布分离。分解尿素的细菌分离计数时只用选择培养基， 而分解纤维素的细菌的分离计数，除经选择培养以增加纤维素 分解菌的浓度和梯度稀释外，还需涂布到鉴别培养基上鉴别， 最后挑选菌落，其实验流程设计如下：
考点三 牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备过程 关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，下列叙述错误 的是( ) A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板和灭菌 B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C．将培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板 D．待平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置
解析 本题考查微生物培养时培养基制备的流程及注意事 项。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤中灭菌应在倒平板之 前；牛肉膏容易吸潮，故称量时动作要迅速，称好的牛肉膏要 连同称量纸一同放入烧杯，待牛肉膏溶化并与称量纸分离后， 用玻棒取出；灭菌用的方法是高压蒸汽灭菌，故灭菌后培养基 的温度较高，倒平板时需待培养基冷却至50 ℃左右时进行；为 使培养基表面的水分更好地挥发和防止培养皿盖上的水珠落入 培养基上，待平板冷却凝固约5～10 min后，需将平板倒过来放 臵，使皿盖在下，皿底在上。

用体积分数为 70%～75%的酒 精、碘酒涂抹， 来苏水喷洒等
用于皮肤、伤口、动 植物组织表面消毒、 手术器械、塑料或玻 璃器皿等
3.微生物的纯化原理 在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单 个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。 4．微生物接种方法 (1)平板划线法：平板划线法中细胞的分离和稀释过程发 生在接种环在固体平板表面上的划线和移动过程中。在线的 开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数 逐渐减少，最后可能形成纯种的单个菌落。(如下图)
接种环、接种针或其 他金属用具等，接种 过程中试管口或瓶口
等
内容 灭菌
种类 主要方法
应用范围
干热 灭 菌法
玻璃器皿(如吸管、培 干热灭菌
养皿等)、金属用具等 箱160～
凡不适合用其他方法 170 ℃加热
灭菌而又能耐高温的 1～2 h
物品
内容 灭菌
种类 主要方法
应用范围
高压
蒸汽 灭菌 法
121 ℃维持 培养基及多种器材、 15～30 min 物品
孢子
__________灭菌
3.纯化大肠杆菌以及菌种的保藏 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：计算→称量→
溶化→□8 __________→□9 __________。
(2)纯化大肠杆菌
①原理：在培养基上将细菌稀释或分散成
□10
__________，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化 的细菌菌落。
水
用量 5 g
10 g 5 g 20 g 1 000 mL
(1)培养基的类型有很多，但培养基中一般都含有水、碳 源、____________和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源 的成分是__________________________。培养基配制完成以 后，一般还要调节pH，并对培养基进行____________处理。 该培养基从物理性质上分类属于____________。