营养琼脂对照培养基使用说明

(1）按照培养基标签，称取适量培养基干粉溶解于纯化水中，加热煮沸至琼脂完全溶解，分装试管或锥形瓶;
(2）将分装后的培养基置于规定的条件下进行灭菌处理〈加热灭菌的培养基可反复煮沸4-6次至培养基完全溶解，倾入平皿中制成平板使用）﹔
(3）灭菌结束后，待培养基冷却至50℃左右，可置于47-50℃水浴保温〈可根据实际培养基凝固温度适当提高水浴温度)，放置时间一般不应超过4小时;
(4〉临用前，加入相应的添加剂成分，摇匀后倾入平板，凝固后备用;或制成斜面、倾注使用等。

平板计数琼脂颗粒培养基使用说明
【货号、规格、产品形态及包装形式】
货号 规格 产品形态 包装形式
022070P1 250g/瓶 颗粒型 瓶装

【用途】
用于细菌总数测定。
【检验原理】
胰蛋白胨提供碳源和氮源;酵母膏粉提供B族维生素;葡萄糖提供能源;琼脂
是培养基的凝固剂。

【使用方法】
1、称取本品23.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，
分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

2、样品的稀释及处理，略。
3、根据商检的标准要求或对标本污染情况的估计，选择2—3个稀释度，分
别在10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿
内，每个稀释度做两个平皿。

4、稀释液移入平皿后，应及时将凉至45℃的琼脂培养基(可放置于45℃水
浴箱保温)注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀。同时将琼脂培养基倾入加
有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。

5、待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h。
6、观察结果并进行计数。25—250个菌落为合适范围。
【质量控制】
1. 外观方面
淡黄色颗粒，高压灭菌后呈淡黄色透明无沉淀，倾注平皿冷却后呈淡黄色固
体。

2. 生物学方面
下列质控菌株接种待测试培养基，36℃±1℃培养18~24h

实验一培养基的制备与灭菌实验步骤：（一）伊红美蓝培养基（EMB，用成品，分离大肠杆菌用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基。

按成品说明称量、放入搪瓷杯，加水，加热完全溶化，倒入三角瓶，塞棉花塞，牛皮纸封口，包扎，作标记（培养基名称、批次组别、日期，下同），灭菌。

（二）营养琼脂培养基（即牛肉膏蛋白胨培养基，用成品，分离芽孢杆菌用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基，方法同上，灭菌。

（三）PDA培养基（即马铃薯蔗糖培养基，分离酵母菌、根霉用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基。

培养基配方：马铃薯20%、蔗糖（白砂糖）2%、琼脂 2%，加水至所需体积，pH自然。

配制方法：马铃薯去皮，称量，切成小方块，放入搪瓷杯，加水适量，煮沸20 min，取汁液，补水至所需体积，加入蔗糖（白砂糖），加热溶化，最后加入琼脂（琼脂要预先单独用水浸泡，然后挤干再加入），加热至琼脂完全溶化，分装三角瓶，塞棉花塞，牛皮纸封口，包扎，灭菌。

培养基统一高压蒸汽灭菌（121℃25 min）。

（四）无菌平皿准备（下次实验倒平板用）每组10套，报纸包扎，高压蒸汽灭菌（121℃25 min）后，置干燥箱80℃烘干1 h。

（五）枯草样预处理及预培养（下次实验分离芽孢杆菌用）枯草样预处理：每组1瓶。

100 ml三角瓶＋自来水约50 ml，加5%可溶性淀粉，溶解。

枯草若干，剪短，浸入三角瓶水中，牛皮纸封口，包扎，置水浴中煮沸10 min，然后置培养箱30℃预培养3～7 d。

（六）葡萄样（或其它水果）酵母菌预培养（下次实验分离酵母菌用）每组1瓶。

葡萄（或其它水果）适量，捏碎，皮渣与汁液一起放入250 ml 三角瓶（装量1/2～2/3），封口，置培养箱25℃预培养3～7 d，观察自然发酵过程。

实验二微生物的分离与纯化实验步骤：（一）污水中大肠杆菌的分离（稀释倒平板法）1）用三角瓶取污水样适量。

营养琼脂的成份和制作方法营养琼脂培养基配方蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15～20g蒸馏水1000mL营养琼脂培养基配制将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2mL，校正pH 至7.2～7.4。

加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。

分装烧瓶，121℃高压灭菌15min。

注：此培养基可供一般细菌培养之用，可倾注平板或制成斜面。

如用于菌落计数，琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面，则应为2%。

琼脂粉Agar琼脂粉质量标准符合国标GB1975-80规定：干燥失重:≤15%烧灼残渣%(灰分)：≤5 水不溶物%：≤1 砷(AS)%：≤0.0001 重金属(以Pb计)%：≤0.004 吸水力：75毫升(最高数)淀粉：合乎规定凝胶强度：>800g/cm2 产品优点凝胶强度：>800g/cm2琼脂粉Agar组培上的应用说明：培养基的配制，别名：Agar-agar;Gum agar 分子式：(C12H18O9)n 工作浓度： 3-4.5 g/L。

强度：1300g/ c㎡外观：类白色粉末储存条件：室温琼脂的用途琼脂又名卡拉胶系用一种稀有而珍贵的热带海洋红藻—麒麟菜为原料，经科学方法取制而成。

它属于关乳糖硫酸脂，含碳水化合物约75%，此外还含有人体不可缺少的无机物质—钙、碘、铁、钠等。

琼脂是一类从石花菜及其它红藻类植物提取出来的藻胶，在我国及日本已有三百多年的历史。

因其有特殊的凝胶性质，已被广泛使用于食品、医药、化工、纺织、国防、科研等领域，被国际上称为“新奇的东亚产品”。

琼脂卡拉胶不仅广泛应用于食品，具有清热凉肺、开胃健脾，增进食欲等功能，并可防治便秘和治疗高血压病。

由于琼脂、卡拉胶溶液的胶凝性的凝胶稳定性而使琼脂广泛应用在食品工业中，可作为食品食品的稳定剂。

琼脂、卡拉胶比其它胶类作出的食品味道好得多，口感更隹。

琼脂除了可作稳定剂外，还可以防止包装粘连。

琼脂的浓度达到0.5%至1.0%时，可作为油饼透明糖衣的稳定剂，同时提高了黏度和表面的黏着力，快速凝固并增加食品柔韧性，减少表面缺陷和裂纹。

马铃薯葡萄糖琼脂培养基使用说明
编号：021050
中文名称：马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)
英文名称：Potato Dextrose Agar
用途：
供霉菌和酵母菌计数及分离培养(GB 4789.15-2010)。

原理：
马铃薯浸出粉有助于各种霉菌的生长;葡萄糖提供能源;琼脂是培养基的凝固剂;氯霉素可抑制细菌的生长。

图鉴：
配方(每升)：
马铃薯 300g(从中提取浸出粉)
葡萄糖 20g
琼脂15g
氯霉素0.1g
最终pH 6.0±0.2
使用方法：
1、称取本品40.1g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min，备用。

2、霉菌和酵母菌计数时，参照高盐察氏琼脂培养基使用方法。

3、用于霉菌分离鉴定，。

质量控制：
本品倾注平皿，下列菌株接种后25—28℃培养72h生长情况如下表。

菌名菌号生长状况菌落特征
黑曲霉 ATCC16404 良好菌丝白色孢子黑色
白色念珠菌 ATCC10231 良好菌落表面呈奶油色
大肠埃希氏菌ATCC25922 被抑制——
金黄色葡萄球菌ATCC6538被抑制——
贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。

贮存期三年。

规格：250g。

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LB 营养琼脂平板(含AMP00μg/ml 抗生素) 产品简介：
LuriaBertani 培养基是最经典的细菌培养基，简称LB 培养基, 可以用于各种细菌培养，是分子生物学常规试剂。

Leagene LB 营养琼脂平板(含AMP00μg/ml 抗生素)主要由%胰蛋白胨、0.5%酵母提取物、%氯化钠、琼脂组成，经5psi 高压灭菌20min ，呈胶冻状。

LB 营养琼脂平板(含AMP00μg/ml 抗生素)，可用于多种具有氨苄青霉素抗性的细菌的培养，LB 营养琼脂平板(含AMP00μg/ml 抗生素)仅用于科研领域，不用于临床诊断或治疗。

产品组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据实验具体要求操作。

2、取低温保存的菌接种于新鲜的LB 营养琼脂平板(含AMP00μg/ml 抗生素)，置于37℃过夜培养。

本卷须知：
1、 注意无菌操作，尽量防止污染。

2、 为了您的平安和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：3个月有效。

相关产品：
编号 名称 CM0082 Storage LB 营养琼脂平板(含AMP00μg/ml 抗生素) 0个/包 4℃
使用说明书 份 产品编号 产品名称 CA0005 氨苄青霉素溶液(Ampicillin,50mg/ml) CM0025 SOC 培养基(PH7.0) DH0006 苏木素伊红(HE)染色液 NR0003
Lezol(总RNA 提取试剂) PE008
SDSPAGE 凝胶配制试剂盒 TC67 尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)。

细菌用计数用培养基的适用性检查
1. 菌液制备
接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，培养18～24小时。

上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液。

2．适用性检查
取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌各50～100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾注营养琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置30～35℃培养48小时，计数。

同时，用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。

3、检查结果
细菌培养温度____℃ 3天培养时间：
70%，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致。

判该培养基的适用性检查符合规定。

4结论：
按《中华人民共和国药典2010年版（二部）》附录微生物限度检查法计数培养基的适用性检查，结果_______________。

检验人：复核人：。

普通营养琼脂的灭菌条件普通营养琼脂是一种常用的培养基，广泛应用于微生物学、生物学等领域的实验研究中。

在使用琼脂培养基进行实验前，必须进行灭菌处理，以确保培养基中不存在任何微生物。

本文将介绍普通营养琼脂的灭菌条件，以帮助读者在实验中正确使用琼脂培养基。

一、灭菌方法灭菌方法主要包括物理灭菌和化学灭菌两种。

物理灭菌包括高温灭菌和紫外线灭菌，化学灭菌则包括乙醛灭菌和过氧化氢灭菌。

在使用普通营养琼脂时，一般采用高温灭菌和乙醛灭菌两种方法。

1. 高温灭菌高温灭菌是指将琼脂培养基放入高压蒸汽灭菌器中进行灭菌处理。

一般情况下，灭菌时间为15-20分钟，温度为121℃。

在进行高温灭菌前，应先将琼脂培养基倒入试管或烧杯中，以免在高温下发生翻涌或爆炸。

2. 乙醛灭菌乙醛灭菌是指将琼脂培养基放入乙醛溶液中进行灭菌处理。

乙醛浓度一般为2%，灭菌时间为2-3小时。

在进行乙醛灭菌前，应先将琼脂培养基倒入试管或烧杯中，加入适量的乙醛溶液，然后用铝箔纸封好，放入灭菌箱内进行灭菌处理。

二、灭菌条件在进行灭菌处理时，应注意以下几点：1. 清洁环境在进行琼脂培养基灭菌前，应先清洁工作台和灭菌器，以保证灭菌环境的干净卫生。

2. 严格控制温度和时间在进行高温灭菌时，应严格控制温度和时间，以保证琼脂培养基完全灭菌。

在进行乙醛灭菌时，应严格控制乙醛浓度和时间，以避免对琼脂培养基产生影响。

3. 确保密封性在进行乙醛灭菌时，应使用铝箔纸封好琼脂培养基，以确保密封性。

在进行高温灭菌时，应使用密封的试管或烧杯，以避免在高温下发生翻涌或爆炸。

4. 避免污染在进行灭菌处理时，应避免琼脂培养基的污染。

在灭菌前，应先将琼脂培养基倒入试管或烧杯中，以避免在灭菌过程中受到污染。

三、总结普通营养琼脂是一种常用的培养基，灭菌处理是使用琼脂培养基的前提。

在灭菌处理时，应注意清洁环境，严格控制温度和时间，确保密封性，避免污染。

通过正确的灭菌处理，可以保证琼脂培养基中不存在任何微生物，为实验的顺利进行提供保障。

化学品安全技术说明书通用格式化学品安全技术说明书第一部分化学品及企业标识化学品中文名称：营养琼脂培养基化学品俗名或商品名：化学品英文名称：企业名称：地址：邮编：电子地址邮件：传真号码：（国家或地区代码）（区号）（电话号码）企业应急电话：（国家或地区代码）（区号）（电话号码）技术说明书编码：生效日期：年月日国家应急电话：第二部分成分/组成信息化学品名称：氯化钠有害物成分含量CAS No.培养基配方单位为:g/L, 蛋白陈 10.0g氯化钠 5.0g牛肉浸出粉 3.0g-5.0g琼脂 12.0g-14.0g第三部分危险性概述危险性类别：侵入途径：健康危害：环境危害：燃爆危险：第四部分急救措施皮肤接触：眼睛接触：吸入：食入：第五部分消防措施危险特性：有害燃烧产物：灭火方法及灭火剂：灭火注意事项：第六部分泄露应急处理应急处理：消除方法：第七部分操作处置与储存操作注意事项：储存注意事项：第八部分接触控制/个体防护最高容许浓度：监测方法：工程控制：呼吸系统防护：眼睛防护：身体防护：手防护：其他防护：第九部分理化特性外观与性状：应为均一的淡黄色粉末。

PH值：灭菌后，200C-25℃时，该培养基pH值应为7.2士0.2、熔点（℃）：相对密度（水=1）：沸点（℃）：相对蒸气密度（空气=1）：饱和蒸气压（kPa）: 燃烧热（kJ/mol）:临界温度（℃）：临界压力（MPa）:辛醇/水分配系数的对数值：闪点（℃）：爆炸上限%（V/V）：引燃温度（℃）：爆炸下限%（V/V）：溶解性：主要用途：其他理化性质：第十部分稳定性和反应活性稳定性：禁配物：避免接触的条件：聚合危害：分解产物：第十一部分毒理学资料急性毒性：亚急性和慢性毒性：刺激性：致敏性：致突变性：致畸性：致癌性：其他：第十二部分生态学资料生态毒性：生物降解性：非生物降解性：生物富集或生物积累性：空白对照平皿应无菌生长，大肠埃希菌的菌落为S型，为半透明;金黄色葡萄球菌的菌落为S型，产生明显的金黄色色素;铜绿假单胞菌的菌落为R型，产生明显的绿色色素。