营养琼脂培养基的配置
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琼脂培养基配制方法琼脂培养基是一种广泛应用于微生物学实验中的寒假料,简单易得,易于制备,价格也非常实惠。
在细菌、真菌等微生物的培养过程中,琼脂培养基可以提供细胞生长所需的营养物质,并且可以形成胶状物质,让微生物在其中生长繁殖。
配制方法:1. 准备琼脂首先,我们需要准备琼脂。
通常,琼脂可以在实验室和化学品供应商处购买到。
将适量的琼脂加入适量的去离子水中,使其充分溶解,然后稍微加热,搅拌均匀,使其变成均质的液体。
2. 加入营养物质接下来,我们需要向琼脂中加入适量的营养物质,以促进微生物的生长。
常见的营养物质包括葡萄糖、氨基酸、钾盐、磷酸盐等。
具体需要添加哪些营养物质,可以根据实验需要和研究对象来定制。
3. 调整pH值在加入营养物质之后,我们还需要调整琼脂的pH值,以使其更加适合微生物的生长。
通常,微生物的适宜生长pH值在6.0-8.0之间。
因此,我们需要在此范围内调整琼脂的pH值。
4. 灭菌处理最后,将琼脂培养基倒入可反复加热的试管或烧杯中,用高温的方法灭菌处理。
通常,我们可以将其放置在高温高压灭菌器中进行灭菌处理。
处理时间视试管大小而定,一般在15-20分钟左右。
总结:以上就是琼脂培养基的配制方法。
需要注意的是,琼脂培养基的配制过程中,除了添加适量的营养物质和调整pH值外,不要添加任何其他物质,以免对实验结果产生干扰。
另外,为保证实验结果的准确性,灭菌处理也是非常重要的一步,必须把握好灭菌时间和温度。
最后,希望我们在科学研究中,能够更好地运用琼脂培养基,为科学事业做出更大的贡献。
营养琼脂配制标准操作规程
1.目的
规范营养琼脂培养基配制的操作规程。
2.原理
培养基含有氮源、碳源和微量无机盐,适宜细菌生长繁殖。
3.用途
供细菌培养、菌株纯化及传种使用。
4.配方
营养琼脂干粉28g、蒸馏水1000ml
5.操作步骤
将28g营养琼脂干粉溶于1000 ml蒸馏水中,混匀至完全溶解,分装,经121℃灭菌15分钟,冷藏备用。
6.储存条件
2~8℃冰箱
7.有效期
实验室自行规定,确保培养基质量。
8.质量控制
8.1 质控频度每次新配制时做质控
8.2 质控方法及结果见表5-17。
表5-17 配制营养琼脂培养基质量控制方法及结果
试验方法结果
无菌试验<100块抽检5%,>100块
随机取10块,35℃培养24~
49h
无细菌生长
生长试验金黄色葡萄球菌
ATCC25923,35℃培养24~
49h
菌落浅黄色
铜绿假单胞菌ATCC27853 35℃培养24~48h 菌落无
色或浅绿色
直径>2.7mm
平行试验平行试验做质控时取新旧批号的
培养基同时做
9.注意事项
倾倒时温度不易过高,否则冷凝水过多易污染;若温度过低,琼脂易凝固。
参考文献
[1] 谢正旸主编。
现代微生物培养基和试剂手册。
福州:福建科学技术出版社,1994
[2] 王钦升,周正明,高屹主编。
实用医学培养基手册。
北京:人民军医出版社,1999
编写人:AAA、BBB 操作人:本室操作人员
批准人:。
几种培养基的配方培养基是用于培养和繁殖微生物的营养物质的混合物。
根据微生物的特性和应用需求,可以设计出不同成分和配方的培养基。
以下是几种常见的培养基配方:1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)的配方:-牛肉膏:5g-蛋白胨:5g-水解酵母膏:1.5g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将牛肉膏、蛋白胨和水解酵母膏溶解在蒸馏水中,添加纯化琼脂,混合并加热直至溶解,然后倒入培养皿中。
2. EMB(Eosin Methylene Blue)培养基的配方:-蛋白胨:17g-明胶胨:3g-乳糖:10g-酵母提取物:3g-果糖:1g- Eosin Y:0.4g-亚甲蓝:0.065g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将蛋白胨、明胶胨、乳糖、酵母提取物和果糖溶解在蒸馏水中,加热并搅拌至溶解,然后添加Eosin Y和亚甲蓝,最后加入纯化琼脂,混合并倒入培养皿中。
3. 铡锰培养基(Sabouraud Agar)的配方:-葡萄糖:40g-酵母膏粉:5g-水解麦粉:15g-纯化琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将葡萄糖、酵母膏粉和水解麦粉溶解在蒸馏水中,加热并搅拌至溶解,然后添加纯化琼脂,混合并倒入培养皿中。
4.胰蛋白酶-大豆酪蛋白肉汤培养基(TRYPTICASE™SOYBROTH)的配方:-胰蛋白酶胨:15g-大豆酪蛋白胨:5g-食盐:5g-葡萄糖:20g-蒸馏水:1000mL将胰蛋白酶胨、大豆酪蛋白胨、食盐和葡萄糖溶解在蒸馏水中,混合并加热至溶解,然后冷却至室温。
5. M9盐碱培养基(M9 minimal medium)的配方:-磷酸一氢二钾:3g-硫酸镁:0.5g-氯化钠:0.5g- 氨氯化铁:7.5mg-葡萄糖:4g-去离子水:1000mL将磷酸一氢二钾、硫酸镁、氯化钠和氨氯化铁溶解在去离子水中,混合并加热至溶解,然后冷却至室温后添加葡萄糖。
这只是几种常见的培养基配方,实际上还有很多不同成分和配方的培养基。
常用培养基配方汇总1. 营养琼脂培养基 (Nutrient Agar)- 夏洛特奥康纳 (Charlote A. O'Connor) 配方:-蛋白胨:5克-麦芽提取物:3克-胰蛋白酶胨:1.5克-硫酸镁:0.2克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
2. 肉蔗糖琼脂培养基 (Tryptic Soy Agar, TSA)- 条件反射琼脂 (孟德尔和赛尼·特鲁斯 ('Sneath and Tres') 配方):-牛肉蛋白胨:17克-大豆酪蛋白胨:3克-肉汤提取物:5克-葡萄糖:2.5克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
3. MAC琼脂培养基 (MacConkey Agar)- 麦康奈 (MacConkey) 配方:-紫胆杆菌胨:17克-葡萄糖:1.5克-硫酸盐:1.5克-中性红:0.03克-石蕊:0.3克-氯化钠:5克-地膜:10克-pH值调整到7.1-7.5-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
4. LB琼脂培养基 (Luria-Bertani Agar)- 古斯塔夫·诺维斯 ('Gustaf Novis') 配方:-研磨大豆饼粉:10克-酵母提取物:5克-部分脱脂酪蛋白:5克-氯化钠:1克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
5. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (Potato Dextrose Agar, PDA)- 林登麦卡蒂 ('Lindenmuth and McCarty') 配方:-马铃薯提取物:4克-葡萄糖:20克-地膜:15克-pH值调整到5.6-5.8-用1L水来溶解以上成分,加热煮沸后冷却并灭菌。
这些是一些常用的培养基配方,适用于细菌和真菌的培养。
一、实训目的1. 熟悉营养琼脂培养基的制备方法。
2. 掌握培养基高压灭菌的操作技能。
3. 学习观察和记录菌落生长情况。
4. 增强实验室操作规范和安全意识。
二、实训时间2023年11月15日三、实训地点微生物实验室四、实训材料1. 试剂与耗材:蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、琼脂、蒸馏水、高压蒸汽灭菌器、天平等。
2. 菌种:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
五、实训步骤1. 称量与溶解- 称取蛋白胨10g、牛肉膏3g、氯化钠5g、琼脂15g。
- 将上述试剂溶解于1000ml蒸馏水中。
2. 调节pH值- 使用pH计测定溶液的pH值,调节至7.4。
3. 分装与灭菌- 将溶液分装至三角瓶中,每瓶约100ml。
- 使用高压蒸汽灭菌器,121℃灭菌15分钟。
4. 冷却与倾注- 待培养基冷却至约50℃时,将培养基倾注至培养皿中。
- 待培养基凝固后,将培养皿翻转放置。
5. 接种与培养- 使用无菌接种环取适量菌种,接种于培养皿表面。
- 将培养皿置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
6. 观察与记录- 观察菌落生长情况,记录菌落特征。
六、实训结果与分析1. 菌落特征- 大肠杆菌:菌落圆形,光滑,湿润,半透明,边缘整齐。
- 金黄色葡萄球菌:菌落圆形,凸起,金黄色,边缘整齐。
2. 结果分析- 通过本次实训,成功制备了营养琼脂培养基,并成功培养了大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。
- 实验结果表明,营养琼脂培养基适用于一般细菌的培养,可用于观察和记录菌落生长情况。
七、实训体会1. 在本次实训中,我学习了营养琼脂培养基的制备方法,掌握了高压灭菌的操作技能,提高了实验室操作规范和安全意识。
2. 通过观察和记录菌落生长情况,我深入了解了细菌的生长特征,为后续的微生物实验打下了基础。
3. 本次实训使我认识到实验室操作的重要性,培养了我严谨细致的科研态度。
八、实训总结本次实训使我掌握了营养琼脂培养基的制备方法,提高了实验室操作技能,加深了对微生物生长特性的理解。
基本培养基配方基本培养基配方是微生物学研究中的重要基础工具,它提供了细菌、真菌、酵母等微生物生长所需的营养物质。
基本培养基配方的合理搭配可以促进微生物的生长和繁殖,为研究者提供了更多的机会来探索微生物的特性和功能。
本文将介绍几种常用的基本培养基配方,并对其组成成分进行详细的解析。
1. 营养琼脂培养基配方营养琼脂培养基是最常用的基本培养基之一。
其配方简单,包括蛋白质源、碳源、氮源、矿物质和水。
常见的蛋白质源包括胨、酵母提取物等,碳源可以是葡萄糖、蔗糖等,氮源可以是氨基酸、硝酸盐等。
矿物质的配方根据不同微生物的需求而有所差异。
营养琼脂培养基适用于细菌、真菌和酵母的培养。
2. 硝酸盐琼脂培养基配方硝酸盐琼脂培养基是一种特殊的培养基,主要用于细菌的培养和鉴定。
硝酸盐琼脂培养基的配方包括硝酸盐、碳源、氨基酸等。
硝酸盐是硝酸盐琼脂培养基的关键成分,它可以被某些细菌利用产生酸性代谢产物,从而改变培养基的颜色,用于鉴定细菌的特性。
3. 酸性琼脂培养基配方酸性琼脂培养基主要用于酸性条件下微生物的培养和筛选。
酸性琼脂培养基的配方包括有机酸、碳源、氮源等。
有机酸可以是柠檬酸、苹果酸等,碳源可以是葡萄糖、果糖等,氮源可以是氨基酸、硝酸盐等。
酸性琼脂培养基能够为酸性条件下的微生物提供适宜的生长环境,帮助研究人员开展相关研究。
4. 高盐琼脂培养基配方高盐琼脂培养基主要用于耐盐微生物的培养和筛选。
高盐琼脂培养基的配方中含有高浓度的盐类,如氯化钠、硫酸钠等。
这些盐类能够提供适宜的渗透压和离子浓度,满足耐盐微生物的生长需求。
以上是几种常用的基本培养基配方,它们在微生物学研究中起到了至关重要的作用。
通过合理搭配不同成分,基本培养基配方为微生物的生长和繁殖提供了良好的条件。
研究者可以根据不同微生物的需求选择合适的培养基,以便更好地开展相关研究工作。
总结起来,基本培养基配方是微生物学研究中不可或缺的工具。
它的合理搭配可以促进微生物的生长和繁殖,为研究者提供了更多的机会来探索微生物的特性和功能。
营养琼脂的成份和制作方法营养琼脂培养基配方蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15~20g蒸馏水1000mL营养琼脂培养基配制将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH 至7.2~7.4。
加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。
分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。
注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。
如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%。
琼脂粉Agar琼脂粉质量标准符合国标GB1975-80规定:干燥失重:≤15%烧灼残渣%(灰分):≤5 水不溶物%:≤1 砷(AS)%:≤0.0001 重金属(以Pb计)%:≤0.004 吸水力:75毫升(最高数)淀粉:合乎规定凝胶强度:>800g/cm2 产品优点凝胶强度:>800g/cm2琼脂粉Agar组培上的应用说明:培养基的配制,别名:Agar-agar;Gum agar 分子式:(C12H18O9)n 工作浓度: 3-4.5 g/L。
强度:1300g/ c㎡外观:类白色粉末储存条件:室温琼脂的用途琼脂又名卡拉胶系用一种稀有而珍贵的热带海洋红藻—麒麟菜为原料,经科学方法取制而成。
它属于关乳糖硫酸脂,含碳水化合物约75%,此外还含有人体不可缺少的无机物质—钙、碘、铁、钠等。
琼脂是一类从石花菜及其它红藻类植物提取出来的藻胶,在我国及日本已有三百多年的历史。
因其有特殊的凝胶性质,已被广泛使用于食品、医药、化工、纺织、国防、科研等领域,被国际上称为“新奇的东亚产品”。
琼脂卡拉胶不仅广泛应用于食品,具有清热凉肺、开胃健脾,增进食欲等功能,并可防治便秘和治疗高血压病。
由于琼脂、卡拉胶溶液的胶凝性的凝胶稳定性而使琼脂广泛应用在食品工业中,可作为食品食品的稳定剂。
琼脂、卡拉胶比其它胶类作出的食品味道好得多,口感更隹。
琼脂除了可作稳定剂外,还可以防止包装粘连。
琼脂的浓度达到0.5%至1.0%时,可作为油饼透明糖衣的稳定剂,同时提高了黏度和表面的黏着力,快速凝固并增加食品柔韧性,减少表面缺陷和裂纹。
实验名称:琼脂平板培养基制备及微生物分离实验一、实验目的1. 熟悉琼脂平板培养基的制备方法。
2. 掌握微生物分离和接种技术。
3. 了解微生物在不同培养基上的生长情况。
二、实验原理琼脂平板培养基是一种常用的微生物学实验室培养基,其主要成分为琼脂和营养物质。
琼脂是一种从海藻中提取出来的胶状物质,在高温下溶解,在冷却后形成固体。
通过制备琼脂平板培养基,可以为微生物提供适宜的生长环境,便于观察和分离微生物。
三、实验材料1. 培养基:蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、琼脂。
2. 蒸馏水。
3. 高压灭菌器。
4. 灭菌移液器。
5. 灭菌镊子。
6. 灭菌培养皿。
7. 灭菌接种环。
8. 待分离的微生物样品。
四、实验步骤1. 配制培养基:将蛋白胨、牛肉膏、氯化钠溶解于蒸馏水中,加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。
分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。
2. 制备平板:待培养基冷却至50℃左右,倒入灭菌培养皿中,待凝固后备用。
3. 分离微生物:用灭菌接种环取适量待分离的微生物样品,接种于平板上,用无菌涂布器均匀涂抹。
4. 培养观察:将接种好的平板置于37℃恒温培养箱中培养24h,观察菌落生长情况。
五、实验结果与分析1. 平板制备成功,凝固良好。
2. 微生物在平板上生长良好,形成了明显的菌落。
3. 根据菌落特征,可初步判断分离出的微生物种类。
六、实验总结通过本次实验,我们成功制备了琼脂平板培养基,并掌握了微生物分离和接种技术。
实验结果表明,琼脂平板培养基是微生物培养和分离的常用培养基,有助于我们观察和分离微生物。
在实验过程中,我们要注意无菌操作,避免污染。
常用培养基配方范文培养基是为了满足微生物的生长和繁殖需要而制备的特定组分的物质。
不同的微生物对培养基的组分有不同的要求,因此有一系列常用的培养基配方。
下面介绍几种常用的培养基配方。
1.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是最常用的培养基之一,可以满足大多数微生物的生长需求。
其基本配方如下:-蛋白胨:5g-酵母粉:2.5g-琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将蛋白胨、酵母粉和琼脂加入蒸馏水中,加热溶解,然后加热熔化琼脂,混合均匀后倒入培养皿中,待凝固后即可使用。
2.大肠杆菌富集培养基大肠杆菌是一种常见的肠道细菌,在微生物学实验中经常使用。
它具有良好的生长能力,但在培养基中易受到其他菌群的竞争。
因此,需要使用富集培养基来选择性地培养大肠杆菌。
其基本配方如下:-脱水牛肉粉:10g-酵母提取物:5g-氯化钠:5g-蒸馏水:1000mL将脱水牛肉粉、酵母提取物、氯化钠加入蒸馏水中,加热溶解后加入琼脂,混合均匀后倒入培养皿中,待凝固后即可使用。
3.血平板培养基血平板培养基用于检测细菌对血液的溶血能力以及细菌的形态特征。
其基本配方如下:-马肉膏:6g-鸡蛋膏:5g-硫酸镁:0.5g-酚红指示剂:0.025g-蒸馏水:1000mL将马肉膏、鸡蛋膏、硫酸镁加入蒸馏水中,加热溶解后加入酚红指示剂,混合均匀后倒入培养皿中,待凝固后用刀或针在培养基上划线,然后点菌于线上即可使用。
4. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基Sabouraud葡萄糖琼脂培养基是一种选择性培养基,常用于真菌的培养。
其基本配方如下:-葡萄糖:40g-氯化钠:10g-氯仿:0.1mL-青霉素:0.1g-琼脂:15g-蒸馏水:1000mL将葡萄糖、氯化钠、硫酸镁加入蒸馏水中,加热溶解后加入氯仿和青霉素,混合均匀后加热熔化琼脂,在冷却至40-45℃时倒入培养皿中,待凝固后即可使用。
以上是一些常用的培养基配方,不同微生物可能有不同的培养基要求,所以在实际应用中还需要根据具体情况进行调整和优化。
培养基的配制实验报告实验名称:培养基的配制实验报告实验目的:掌握微生物培养基的配制方法及影响因素,加深对微生物生长和培养的认识。
实验原理:微生物的生长和培养需要用到适宜的培养基。
培养基的成分和配制方法不同会对微生物生长和培养产生影响。
本实验选用普通营养琼脂培养基为例,以掌握培养基制备的基本方法和技术操作。
实验材料:普通营养琼脂培养基粉末、培养基配制器具(烧杯、量筒、过滤器、移液器等)、革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌。
实验步骤:1. 称取所需的琼脂粉末,按照要求的比例加入适量的蒸馏水中,溶解均匀。
2. 用不锈钢网过滤琼脂溶液,去除颗粒和杂质,减小后续培养的干扰。
3. 将琼脂溶液分装至烧杯中,加热至溶解,然后用自由落滴法测定琼脂的pH值。
4. 加入所需的营养成分,如碳源、氮源、矿物质等,调节培养基的成分。
同时,根据需求在培养基中加入相应抗生素或生长因子。
5. 将培养基配制至预定体积,混合均匀后用带滤芯的移液器过滤。
6. 将培养基分装至耐热培养皿中,约1/3满,放入高压灭菌锅中高压灭杀15-20分钟。
7. 取出被高压灭菌的培养皿,放置至室温下自然冷却或以水冷却。
8. 在无菌条件下将预先生长的细菌转移到已灭菌的琼脂培养基中,然后在适宜的环境下进行培养观察。
实验结果和分析:本实验制备的普通营养琼脂培养基满足生长条件,多种菌种都能够成功生长。
制备过程中,各个步骤都需要精确、细致地操作,如琼脂的过滤、配制和自由落滴pH值的测定、高压灭菌等。
这些步骤的误差可能会导致培养基的成分产生变化,进而影响培养效果。
结论:微生物的培养需要适宜的培养基,不同生物和实验需求需要不同的配方和配制方法。
掌握基础的培养基配制技术,能够快速、精准地制备适宜的培养基。
这对于微生物研究和应用有着重要的意义。
营养琼脂培养基的配置
营养琼脂培养基其实就是一种选择性较低的营养成分的固体培养基,主要用于细菌菌落计数,也可以用于细菌的传代和増菌,但是一般不用于细菌鉴定(除非该细菌菌落有比较特殊的形态)只适合营养要求不高的细菌生长。
营养琼脂
成分:
牛肉膏3g
氯化钠5g
蛋白胨10g
琼脂 15-20g
蒸馏水 1000ml
制备步骤:
检查所用物品级别和洁净程度合格.
戴上手套.
开启天平,放上一张称量纸,调零.
称取蛋白胨g,置一玻璃容器中.
称取牛肉浸出粉g,置同一玻璃容器中.
称取氯化钠g,置同一玻璃容器中.
称取琼脂g
关闭天平.
取1000ml蒸馏水倒入上述烧杯内,用玻璃棒搅拌.
放入水浴锅内微温溶解调节pH为弱碱性. 加入琼脂,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2. 分装,121℃高压灭菌15min.。